JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:10 min. • July 8th, 2025
Zacznij od komory rejestrującej zachowanie zawierającej znieczuloną, transgeniczną larwę danio pręgowanego unieruchomioną w niskotopliwej agarozie.
Obszar przedtectum śródmózgowia larwy i dolny płat podwzgórza zawierają zmodyfikowane neurony wyrażające fluorescencyjne wskaźniki wapnia.
Usuń agarozę wokół głowy larwy i umyj wodą, aby usunąć resztki agarozy.
Umieść pantofelek jako zdobycz w pobliżu larwy.
Przenieść komorę zapisu pod mikroskop fluorescencyjny.
Gdy ofiara pływa, oko larwy wykrywa ją i wysyła sygnał do obszarów pretectum i podwzgórza zaangażowanych w wykrywanie zdobyczy.
Otwiera to kanały wapniowe w tych neuronach, umożliwiając jonom wapnia wnikanie i wiązanie się ze wskaźnikami wapnia, co prowadzi do emisji fluorescencji.
Nagraj obrazowanie poklatkowe, aby wykryć intensywność fluorescencji neuronów wzdłuż ścieżki pływania ofiary i wygeneruj kolorową mapę.
Na tej mapie groty strzałek reprezentują trajektorie ofiary: czarne strzałki nie pokazują pobudzenia neuronalnego, podczas gdy kolorowe strzałki wskazują zwiększone pobudzenie neuronów wywołane ruchem ofiary.
Po wyhodowaniu pantofelka i znieczuleniu larwy danio pręgowanego zgodnie z protokołem tekstowym, umieść larwę
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych