JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:25 min. • July 8th, 2025
Weźmy komorę rejestracyjną zawierającą penetrujący układ mikroelektrod lub PMEA, który rejestruje sygnały elektryczne z tkanki nerwowej.
Podłączyć wlot do butelek zawierających natleniony aCSF i natleniony aCSF z 4-aminopirydyną lub 4-AP za pomocą złącza trójzaworowego.
Podłącz wylot do rury próżniowej.
Podgrzej rurociąg między wlotem a zaworem do temperatury fizjologicznej.
Przy zamkniętym wlocie i wylocie przenieś rozłożony hipokamp do komory.
Pod mikroskopem ustaw hipokamp na PMEA.
Wyjmij roztwór z komory.
Umieść kotwicę tkankową, aby przytrzymać tkankę na elektrodach PMEA.
Otwórz wlot i wylot, aby uruchomić przepływ CSF.
Inkubuj tkankę za pomocą aCSF, aby umożliwić aklimatyzację neuronów.
Następnie przepłyń w CSF z 4-AP. 4-AP blokuje neuronalne kanały potasowe, wydłużając czas trwania potencjału czynnościowego.
PMEA wychwytuje sygnały elektryczne proporcjonalne do wzmocnionego odpalania neuronów z neuronów hipokampa.
W tej procedurze należy napełnić jedną butelkę zwykłym aCSF, a drugą butelką 4-AP aCSF. Bąbelki roztworów z 95% tlenu i 5% dwutlenku węgla od początku eksperymentów. Użyj łącznika trójzaworowego, aby kontrolować, które rozwiązanie zostanie wybrane podczas eksperyme
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych