$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Zacznij od znieczulonej myszy z odsłoniętą czaszką na stereotaktycznej ramie i przykryj ją serwetą chirurgiczną.
Wywierć otwory w czaszce, aby uzyskać dostęp do mózgu i przymocuj podłoże zaciskowe.
Zamontuj igłę kapilarną podłączoną do pompy strzykawkowej na ramie.
Igła zawiera bufor z siatkową sondą elektroniczną, elastyczną strukturą składającą się z obszaru urządzenia siatkowego połączonego z padami wejściowymi / wyjściowymi.
Umieść igłę wewnątrz mózgu. Wstrzyknąć, aby umieścić obszar urządzenia siatkowego w tkance, jednocześnie chowając igłę, aż wyjdzie ona z czaszki.
Umieść igłę nad podłożem zaciskowym i wysuń podkładki wejściowe/wyjściowe.
Zegnij pady, aby przymocować je do płytki obwodu elektronicznego.
Sprawdź ukończony obwód i zaizoluj połączenia. Pozwól neuronom połączyć się przez porowatą siatkę.
Podłącz obwód do systemu akwizycji danych. Pozwól myszy zachowywać się swobodnie, aby zbierać stabilne nagrania pojedynczego neuronu.
Aby wstrzyknąć siatkę elektroniczną do mózgu myszy, użyj wiertła dentystycznego i ramy stereotaktycznej, aby otworzyć kraniotomię w pożądanych współrzędnych czaszki. Otworzyć drugą kraniotomię z dala od miejsca wstrzyknięcia w celu wprowadzenia uziemiającej lub drutu ze stali nierdzewnej.
Następnie przymocuj podłoże zaciskowe do czaszki za pomocą cementu dentystycznego. Nacięcie w podłożu o szerokości około 1 milimetra poprawia niezawodność etapu składania w dalszej części procedury. Następnie zamontuj uchwyt pipety z igłą zawierającą elektronikę siatkową w ramie stereotaktycznej za pomocą zacisku końcowego pod kątem prostym. Podłącz boczny wylot uchwytu pipety do 5-mililitrowej strzykawki zamocowanej w pompie strzykawkowej z rurką kapilarną o długości od 0,5 do 1 metra.
Następnie użyj ramy stereotaktycznej, aby ustawić końcówkę igły w pożądanym miejscu początkowym w mózgu. Ustaw kamerę tak, aby wyświetlić górną część sondy elektronicznej siatki w szklanej igle. Zainicjuj przepływ, ustawiając pompę strzykawkową na niską prędkość i naciskając przycisk Start.
Powoli zwiększaj natężenie przepływu, jeśli sonda elektroniczna siatki nie porusza się w obrębie igły. Gdy sonda elektroniczna siatki zaczyna poruszać się w obrębie igły, użyj ramki stereotaktycznej, aby cofnąć igłę z taką samą szybkością, w jaką wstrzykiwana jest sonda elektroniczna siatki, używając zaznaczonej pierwotnej pozycji elektroniki siatki jako prowadnicy.
Kontynuuj przepływ soli fizjologicznej i cofanie igły, aż igła opuści czaszkę. Następnie zatrzymaj przepływ z pompy strzykawkowej. W tej procedurze należy użyć ramy stereotaktycznej, aby ostrożnie poprowadzić igłę do płaskiego, elastycznego podłoża do zaciskania i w poprzek szczeliny, przepływając roztwór za pomocą pompy strzykawkowej, aby wytworzyć luz w połączeniach elektroniki siatkowej.
Gdy igła znajdzie się nad podłożem zaciskowym i w poprzek szczeliny, wznowij przepływ z większą prędkością, aby wysunąć elektromechaniczne podkładki wejściowe / wyjściowe siatki na podłoże zaciskowe. Używając pęsety w pipecie z wodą dejonizowaną, zegnij podkładki wejściowe/wyjściowe pod kątem 90 stopni jak najbliżej pierwszej podkładki wejściowej/wyjściowej.
Po wyrównaniu, rozłożeniu i ustawieniu padów wejściowych / wyjściowych pod kątem 90 stopni do trzpienia siatki, wysusz je na miejscu delikatnie przepływającym sprężonym powietrzem. Przyciąć podłoże zaciskowe na prostej krawędzi około 0.5 do 1 milimetra od krawędzi padów wejściowych/wyjściowych.
Należy również odciąć obce części podłoża zaciskowego, które będą utrudniać włożenie do 32-kanałowego złącza ZIF montowanego na płytce drukowanej. Następnie włóż pady wejścia/wyjścia do złącza ZIF na płytce drukowanej i zamknij zatrzask. Użyj elektroniki pomiarowej, aby zmierzyć impedancję między kanałami a śrubą uziemiającą, aby potwierdzić pomyślne połączenie.
Jeśli wartości impedancji są zbyt wysokie, odblokuj złącze ZIF, wyreguluj włożenie i przetestuj ponownie, aż zostanie potwierdzone pomyślne połączenie. Następnie zakryj złącze ZIF i odsłonięte połączenia elektroniczne siatki cementem dentystycznym w celu ochrony. Odwróć płytkę drukowaną w szczelinie w podłożu i przymocuj płytkę drukowaną za pomocą cementu do czaszki myszy.
W przypadku swobodnie poruszających się nagrań, zwolnij mysz z ogranicznika po włożeniu płytki PCB przedwzmacniacza i uziemieniu odniesienia. Nagrywaj przez żądany czas za pomocą systemu akwizycji danych, podczas gdy mysz zachowuje się swobodnie.