Optyczny zapis aktywności neuronalnej w wycinkach mózgu barwionych barwnikiem wrażliwym na napięcie
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:10 min. • July 8th, 2025
Weźmy unieruchomiony wycinek mózgu myszy wybarwiony barwnikiem wrażliwym na napięcie lub VSD, cząsteczkami fluorescencyjnymi, które integrują się z błoną neuronalną i reagują na zmiany potencjału błonowego.
Umieść plasterek w komorze nagrywającej.
Zamontuj elektrodę uziemiającą dla napięcia odniesienia do linii bazowej.
Następnie umieść elektrody stymulujące i rejestrujące na plastrze.
Zastosuj impuls elektryczny.
Impuls stymuluje neurony, wywołując bramkowane napięciem otwarcie kanału sodowego i napływ jonów sodu, co prowadzi do zmiany potencjału błonowego.
Powoduje to indukcję potencjału czynnościowego, mierzonego przez elektrodę rejestrującą, i zmienia właściwości fluorescencyjne VSD.
Wystaw wycinek mózgu na działanie określonej długości fali, aby wzbudzić VSD i wywołać emisję fluorescencji.
Po stymulacji kanały sodowe zamykają się, podczas gdy kanały potasowe bramkowane napięciem otwierają się, sprzyjając odpływowi jonów potasu.
To ponownie zmienia potencjał błony, a w konsekwencji zmienia fluorescencję VSD.
Rejestruj fluorescencję w czasie rzeczywistym, aby wizualnie reprezentować aktywność neuronalną.
Aby rozpocząć tę procedurę, włącz amplifier, komputer i system kamer oraz o
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych