JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:05 min. • July 8th, 2025
Weźmy unieruchomiony, transfekowany wycinek mózgu myszy w komorze rejestrującej elektrofizjologię wypełnioną natlenionym aCSF.
Ten wycinek zawiera zakończenia aksonów neuronów wzgórzowych wyrażające światłoczułe kanały jonowe połączone z białkiem fluorescencyjnym.
Wizualizuj fluorescencyjne aksony neuronów wzgórzowych i wybierz neuron piramidowy.
Przesuń pipetę rejestrującą zawierającą elektrodę w roztworze wewnątrzkomórkowym w kierunku wybranego neuronu z lekkim dodatnim ciśnieniem.
Dodatnie ciśnienie tworzy wgłębienie w błonie neuronalnej w kontakcie.
Zwolnij ciśnienie, aby utworzyć uszczelnienie o wysokiej wytrzymałości.
Ustaw potencjał membrany na stałą wartość ujemną.
Zastosuj impuls podciśnienia, aby rozerwać membranę, uzyskując konfigurację całej komórki.
Oświetl zakończenia aksonów, aktywując kanały wrażliwe na światło i depolaryzując błony neuronalne, wyzwalając potencjały czynnościowe.
Uwalniane są neuroprzekaźniki pobudzające, wiążące się z receptorami na zarejestrowanym neuronie, powodując napływ kationów.
Zapisz powstałe pobudzające prądy postsynaptyczne, wskazujące na bezpośrednie połączenie synaptyczne między neuronami.
Aby wykonać zapis z użyciem klamry kroskowej dl
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych