JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:08 min. • July 8th, 2025
Zacznij od perfuzji napowietrzonego sztucznego płynu mózgowo-rdzeniowego lub aCSF przez siatkę w komorze perfuzyjnej.
Przenieś wycinek mózgu zawierający neurony wykazujące ekspresję białka fluorescencyjnego i zakotwicź go za pomocą urządzenia z platynowym przewodem.
Obróć siatkę siatki w celu wyrównania.
Opuść sondę wielokanałową w kierunku wycinka.
Dostosuj kostkę filtra do wizualizacji białek fluorescencyjnych.
Obróć plasterek, aby wyrównać sondę.
Dostosuj wysokość sondy poniżej powierzchni tkanki.
Teraz wykonaj perfuzję aCSF i skup się na fluorescencyjnie znakowanych neuronach.
Używając obiektywu o dużej mocy, skup się na tkance i wyreguluj światło wzbudzenia.
Użyj odpowiedniego filtra światła, aby zaobserwować fluorescencję w neuronach.
Wyreguluj soczewkę obiektywu, aby zrobić miejsce na pipetę z plastrem i zastosuj nadciśnienie.
Następnie umieść pipetę w pobliżu neuronu, aby utworzyć wgłębienie błony.
Na koniec zastosuj słabe ssanie, aby utworzyć uszczelnienie membrany, a następnie silne ssanie, aby przerwać membranę i uzyskać nagrania elektryczne z docelowego neuronu.
Aby umieścić sondę wielokanałową w szkiełku tkanki mózgowej ex vivo, perfuse eksperymentalny ACSF z pęcherzyk
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych