JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:09 min. • July 8th, 2025
Zacznij od unieruchomionego, znieczulonego szczura z mikroelektrodą z węglem aktywnym wszczepioną w jądro półleżące lub region NAc i przewodem odniesienia w lewej półkuli.
Elektrody te są podłączone do potencjostatu, który mierzy sygnały elektryczne generowane przez dopaminę.
Elektroda stymulująca z kaniulą prowadzącą jest wszczepiana w brzuszny obszar nakrywki lub VTA, celując w neurony dopaminergiczne, które wystają do regionu NAc.
Zastosuj impulsy elektryczne za pośrednictwem elektrody stymulującej, która aktywuje neurony VTA, uwalniając dopaminę, przekaźnik chemiczny, do regionu NAc.
W regionie NAc dopamina oddziałuje z elektrodą węglową i ulega utlenianiu i redukcji, generując podstawowe sygnały elektryczne.
Wprowadź kaniulę wewnętrzną do kaniuli prowadzącej, aby podać aktywator lub inhibitor.
Lek aktywujący stymuluje neurony VTA, zwiększając uwalnianie dopaminy i podnosząc sygnały elektryczne.
W przeciwieństwie do tego, lek hamujący zmniejsza sygnał elektryczny, zapobiegając uwalnianiu dopaminy.
Stymuluj zwierzę co trzy minuty przez 20 do 30 minut. Po osiągnięciu stabilnej linii bazowej delikatnie opuść kaniulę wewnętrzną ręcznie do kaniuli prowadzącej, wstępnie dopasowanej do stymulatora bipolarnego i uzyskaj dodatkowe dwa do trzech zapisów linii podstawowej, aby potwierdzić, że wprowadzenie kaniuli nie spowodowało zmiany w wywołanym sygnale.
Po ustaleniu odpowiedzi wyjściowej należy użyć pompy strzykawkowej w mikrostrzykawce, aby wprowadzić 0,5 mikrolitra roztworu leku będącego przedmiotem zainteresowania do VTA w ciągu dwóch minut. Po infuzji pozostaw wewnętrzną kaniulę na miejscu na co najmniej jedną minutę przed usunięciem, kontynuując rejestrowanie odpowiedzi co trzy minuty, aby zmierzyć efekty po infuzji.