JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:11 min • July 8th, 2025
Weźmy genetycznie zmodyfikowaną mysz z chirurgicznie wszczepionym światłowodem i zespołem elektrod rejestrujących w hipokampie.
Przegroda przyśrodkowa myszy zawiera wrażliwe na światło neurony GABA-ergiczne wyrażające kanały jonowe, które rzutują na interneurony w hipokampie.
Podłącz przedwzmacniacz do wbudowanego złącza matrycy, aby wzmocnić nagrywane sygnały elektryczne.
Podłącz krosowy do wszczepionego światłowodu, aby dostarczyć światło.
Rejestruj wyjściową aktywność neuronalną bez stymulacji światłem.
Dostarczaj impulsy świetlne o pożądanej częstotliwości do hipokampa, który aktywuje światłoczułe kanały jonowe neuronów GABA-ergicznych, powodując napływ jonów dodatnich i wyzwalając potencjały czynnościowe.
To pobudzenie neuronów powoduje uwalnianie neuroprzekaźników hamujących do interneuronów hipokampa, hamując je.
Rytmiczne hamowanie interneuronów przez stymulację światłem równoważy bodźce pobudzające i hamujące, synchronizując wypalanie neuronów piramidowych i wytwarzając rytmiczną aktywność neuronalną w hipokampie, znaną jako oscylacje theta.
Sprawdź moc światła z krosowego. Jeśli szybkość transmisji wszczepionego włókna wynosiła 50%, upewnij się, że strumień świetlny na końcówce krosowego wynosi 20 mW. Podłącz przedwzmacniacz stopnia głównego do wszczepionego złącza i podłącz patchcord światłowodowy do wszczepionego włókna hipokampa w celu stymulacji optogenetycznej.
Rejestruj zachowanie linii bazowej przez czas odpowiedni dla mierzonych parametrów. Otwórz oprogramowanie, aby sterować generatorem bodźców. Kliknij Plik, Otwórz i wybierz plik protokołu. Kliknij Pobierz i Start, aby rozpocząć stymulację światłem. Obserwuj kontrolę rytmu theta za pomocą impulsów świetlnych.