JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:38 min. • July 8th, 2025
Unieruchomij znieczulone szczenię szczura w piankowej formie.
Umieść szczeniaka na stole antywibracyjnym w dźwiękoszczelnym pomieszczeniu, aby zminimalizować artefakty związane z wibracjami i hałasem. Umieść pod spodem poduszkę grzewczą, aby utrzymać temperaturę ciała.
Wysterylizuj głowę.
Wykonaj nacięcia w pobliżu uszu zewnętrznych, aby umieścić elektrody odniesienia i uziemiające.
Następnie włóż elektrodę rejestrującą pod skórę w wierzchołku czaszki.
Za pomocą głośnika podłączonego do generatora dźwięku dostarczaj impulsy dźwiękowe o różnych częstotliwościach i intensywnościach.
Mechaniczne drgania wywołane impulsami dźwiękowymi odchylają wypustki komórek rzęsatych w uchu wewnętrznym szczura.
To odchylenie otwiera mechanicznie bramkowane kanały jonowe, indukując napływ jonów dodatnich i depolaryzację komórek rzęsatych.
Zdepolaryzowane komórki rzęsate uwalniają neuroprzekaźniki, które wiążą się z receptorami neuronalnymi ucha wewnętrznego, generując potencjały czynnościowe.
Potencjały czynnościowe rozchodzą się przez nerw słuchowy do pnia mózgu.
Elektroda rejestrująca wykrywa sygnał, który procesor przekształca w słuchową odpowiedź pnia mózgu.
Aby rozpocząć tę procedurę, umieść znieczulone zwierzę w formie z pianki polietylenowej, aby unieruchomić ciało zwierzęcia. Następnie umieść zwierzę na stole antywibracyjnym w pomieszczeniu tłumiącym dźwięk. Utrzymuj temperaturę ciała zwierzęcia na poziomie 37,5 stopnia Celsjusza za pomocą poduszki grzewczej.
Następnie przetrzyj obszar głowy 70% etanolem. Wykonaj 1 do 2 milimetrowe nacięcie brzuszno-bocznie do zewnętrznej małżowiny usznej, aby umieścić elektrodę odniesienia lub elektrodę uziemiającą. Następnie umieść podskórną elektrodę rejestrującą na wierzchołku czaszki.
Za pomocą generatora funkcyjnego można generować skalibrowane impulsy tonów o różnych częstotliwościach i intensywnościach. Dostarczaj bodźce dźwiękowe przez głośnik elektrostatyczny znajdujący się w odległości 10 centymetrów od głowy zwierzęcia.
Aby uzyskać odpowiedzi słuchowe pnia mózgu, potencjały wywołane dźwiękiem są filtrowane, wzmacniane i uśredniane za pomocą procesora wielofunkcyjnego. 40-minutowe nagranie ABR jest monitorowane online i przechowywane do analizy w trybie offline.