JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:43 min. • July 8th, 2025
Zacznij od komórek śródbłonka naczyń mózgowych lub komórek CVE w pożywkach hodowlanych.
Komórki CVE to komórki o wysokim zapotrzebowaniu na energię, które wyściełają naczynia krwionośne mózgu i są niezbędne dla fizjologii mózgu.
Umieść komórki na płytce do hodowli komórek strumienia zewnątrzkomórkowego. Inkubować w celu przyłączenia komórek.
Zastąp pożywkę hodowlaną pożywką do oznaczania strumienia zewnątrzkomórkowego o pożądanym pH.
Inkubować bez dwutlenku węgla, aby utrzymać pH.
Następnie weź wkład czujnika strumienia zewnątrzkomórkowego, który zawiera czujniki i dolną płytkę.
Dodaj roztwór kalibracyjny do płytki i inkubuj bez dwutlenku węgla, aby uwodnić czujniki.
Czujniki te mogą mierzyć zmiany stężenia tlenu w środowisku zewnątrzkomórkowym, wskazujące na aktywność mitochondriów.
Następnie załaduj wkład do bioanalizatora i skalibruj czujniki.
Zastąp dolną płytkę płytką zawierającą komórki.
Zmierz funkcję mitochondriów komórek CVE.
Po odpowiedniej liczbie subkultur wysiewać 1,6 x 104 komórki w 80 mikrolitrach kompletnej pożywki na dołek na 96-dołkową płytkę do hodowli komórek strumienia zewnątrzkomórkowego i umieścić płytkę w inkubatorze o temperaturze 37 stopni Celsjusza z 5% d
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych