Ocena funkcji mitochondriów w komórkach śródbłonka naczyń mózgowych

0 views • 2:43 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od komórek śródbłonka naczyń mózgowych lub komórek CVE w pożywkach hodowlanych.

Komórki CVE to komórki o wysokim zapotrzebowaniu na energię, które wyściełają naczynia krwionośne mózgu i są niezbędne dla fizjologii mózgu.

Umieść komórki na płytce do hodowli komórek strumienia zewnątrzkomórkowego. Inkubować w celu przyłączenia komórek.

Zastąp pożywkę hodowlaną pożywką do oznaczania strumienia zewnątrzkomórkowego o pożądanym pH.

Inkubować bez dwutlenku węgla, aby utrzymać pH.

Następnie weź wkład czujnika strumienia zewnątrzkomórkowego, który zawiera czujniki i dolną płytkę.

Dodaj roztwór kalibracyjny do płytki i inkubuj bez dwutlenku węgla, aby uwodnić czujniki.

Czujniki te mogą mierzyć zmiany stężenia tlenu w środowisku zewnątrzkomórkowym, wskazujące na aktywność mitochondriów.

Następnie załaduj wkład do bioanalizatora i skalibruj czujniki.

Zastąp dolną płytkę płytką zawierającą komórki.

Zmierz funkcję mitochondriów komórek CVE.

Po odpowiedniej liczbie subkultur wysiewać 1,6 x 104 komórki w 80 mikrolitrach kompletnej pożywki na dołek na 96-dołkową płytkę do hodowli komórek strumienia zewnątrzkomórkowego i umieścić płytkę w inkubatorze o temperaturze 37 stopni Celsjusza z 5% dwutlenkiem węgla.

Dzień przed testem oceny funkcjonalnej mitochondriów należy nawodnić wkład czujnika strumienia zewnątrzkomórkowego 150 mikrolitrami roztworu kalibru strumienia zewnątrzkomórkowego i inkubować płytkę przez noc w temperaturze 37 stopni Celsjusza bez dwutlenku węgla.

Następnego ranka użyj myjki do płytek, aby zmienić pożywkę do hodowli komórkowych na pożywkę do oznaczania strumienia zewnątrzkomórkowego pH 7,0, a następnie inkubuj komórki w temperaturze 37 stopni Celsjusza bez dwutlenku węgla przez 30 do 60 minut. Gdy komórki osiągną równowagę, załaduj uwodniony wkład do bioanalizatora i kliknij przycisk Start, aby rozpocząć kalibrację.

Pod koniec kalibracji kliknij monit Odblokuj wkład, aby wyjąć dolną płytkę wkładu i załaduj płytkę ogniwa, a następnie otwórz plik danych, aby uzyskać wartości szybkości z bioanalizatora w celu wyeksportowania do pliku arkusza kalkulacyjnego.

09:53

Respirometria o wysokiej rozdzielczości do oceny bioenergetyki w komórkach i tkankach za pomocą respirometrów komorowych i płytkowych

Related Videos

0 Views

09:43

Wykorzystanie analizatora strumienia metabolicznego komórek w czasie rzeczywistym do monitorowania bioenergetyki osteoblastów

Related Videos

0 Views

09:39

Pomiar w czasie rzeczywistym mitochondrialnego profilu bioenergetycznego neutrofili

Related Videos

0 Views

09:56

Oznaczanie potencjału błony mitochondrialnej i reaktywnych form tlenu w żywych neuronach korowych szczurów

Related Videos

0 Views

15:43

Ocena funkcji mitochondriów i żywotności komórek w izoenzymach kinazy białkowej C z nadekspresją komórek nerkowych

Related Videos

0 Views

09:33

Metodologiczne podejście do nieinwazyjnej oceny funkcji i morfologii naczyń krwionośnych

Related Videos

0 Views

07:47

Analiza mitochondriów mózgu za pomocą seryjnej skaningowej mikroskopii elektronowej

Related Videos

0 Views

06:15

Ocena funkcji bioenergetycznych w komórkach śródbłonka naczyń mózgowych

Related Videos

0 Views

09:45

Jednoczesne pomiary wewnątrzkomórkowego potencjału wapnia i błony w świeżo wyizolowanym i nienaruszonym śródbłonku mózgowym myszy

Related Videos

0 Views

06:20

Obrazowanie na żywo układu mitochondrialnego w hodowanych astrocytach

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026