JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:34 min. • July 8th, 2025
Weź koronalny wycinek chemosensorycznego narządu lemieszowo-nosowego od transgenicznej myszy wykazującej ekspresję fluorescencyjnie znakowanych neuronów czuciowych.
Nabłonek czuciowy zawiera te znakowane neurony, które są wystawione na działanie światła połączonego z jamą nosową w celu wyczuwania sygnałów chemicznych.
Zabezpiecz plasterek w komorze obrazowania za pomocą kotwy do plastrów.
Przenieś komorę do zestawu rejestrującego i przepływnij natleniony roztwór zewnątrzkomórkowy, aby utrzymać żywotność tkanek.
Umieść pipetę perfuzyjną w pobliżu plastra, aby wprowadzić bodźce chemiczne, a pipetę rejestrującą na neurony czuciowe.
Za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego zidentyfikuj znakowane neurony.
Zastosuj nadciśnienie, aby zapobiec zatkaniu pipety, i zbliż się do neuronu, aż na błonie utworzy się wgłębienie.
Przełącz na podciśnienie, wciągając membranę do pipety.
Zastosuj ssanie, aby rozerwać błonę i ustanowić ciągłość z cytoplazmą, zwaną klamrą łatową całej komórki, umożliwiając wprowadzenie bodźców chemicznych i zarejestrowanie powstałych sygnałów elektrofizjologicznych.
Przenieś plasterek VNO do komory obrazowania i ustal pozycję plastra za pomocą kotwy ze stali nierdzewnej ok
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych