JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:42 min. • July 8th, 2025
Umieścić żywy preparat nerwowo-mięśniowy larw Drosophila w komorze rejestracyjnej zawierającej sól fizjologiczną bez wapnia.
Neurony larwalne wyrażają światłoczuły kanał kationowy.
Przełącz się na sól fizjologiczną z dodatkiem wapnia zawierającą barwnik fluorescencyjny.
Barwnik słabo fluoryzuje w stanie niezinternalizowanym, ale silnie, gdy jest internalizowany przez neurony.
Oświetl larwę niebieskim światłem.
To aktywuje kanał, indukując napływ kationów i depolaryzację neuronów, inicjując potencjał czynnościowy.
Potencjał czynnościowy dociera do zakończenia synaptycznego w połączeniu nerwowo-mięśniowym, umożliwiając napływ wapnia i egzocytozę pęcherzyków.
Następnie membrana związana z barwnikiem jest internalizowana podczas recyklingu pęcherzyków.
Przemyć solą fizjologiczną bez wapnia, aby zatrzymać recykling pęcherzyków i usunąć wszelkie niezinternalizowane barwniki.
Wizualizacja sygnału fluorescencji.
Następnie wprowadź bezbarwną sól fizjologiczną z dodatkiem wapnia i ponownie rozświetl.
To indukuje inny potencjał czynnościowy, napływ wapnia i egzocytozę pęcherzyków zawierających barwnik.
Ponownie zwizualizuj sygnał.
Uwalnianie barwnika w wyniku egzocytozy pęcherzyków zmniejsza
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych