Mechaniczne uszkadzanie nerwów segmentowych larw Drosophila w celu wywołania neurodegeneracji
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:57 min. • July 8th, 2025
Weź larwy Drosophila w trzecim stadium rozwoju i znieczul je dwutlenkiem węgla.
Pod mikroskopem ustaw larwy z brzuszną powierzchnią skierowaną do góry, aby uwidocznić nerwy segmentowe.
Nerwy te zawierają neurony ruchowe, które unerwiają mięśnie ściany ciała i kontrolują ruch larw.
Zakończenia aksonów tych neuronów łączą się z włóknami mięśniowymi, tworząc połączenia nerwowo-mięśniowe lub NMJ.
Neurony uwalniają neuroprzekaźniki, które wiążą się z receptorami na włóknach mięśniowych, powodując napływ jonów i wyzwalając transmisję sygnału.
Za pomocą kleszczy uszczypnij naskórek brzuszny, aby uszkodzić nerwy segmentowe, hamując w ten sposób ruch.
Umieść zranione larwy na talerzu agarowym z pokarmem dla larw, aby zapewnić przeżycie.
Umieść talerz w naczyniu, przykryj go wilgotnym ręcznikiem papierowym, aby utrzymać wilgoć, i przechowuj go w pojemniku, aby umożliwić powrót larw do zdrowia.
Z czasem uraz prowadzi do śmierci neuronu ruchowego, znanej jako neurodegeneracja, która zaburza pracę NMJ.
Umieść każdą larwę na aparacie znieczulającym CO2 . Pod mikroskopem preparacyjnym ostrożnie przetocz każdą larwę na jej grzbietową stronę, aby uwidocznić nerwy segmentowe w całym naskórku.
Koniec
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych