Badanie uszkodzenia mózgu u larw danio pręgowanego za pomocą wielkoskalowej skaningowej transmisyjnej mikroskopii elektronowej
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:22 min. • July 8th, 2025
Weź osadzone w żywicy, chemicznie utrwalone ultracienkie sekcje mózgu od zdrowych i uszkodzonych w mózgu larw danio pręgowanego zamontowanych na siatce z jednym otworem.
Wycinki są barwione metalami ciężkimi w celu zwiększenia kontrastu obrazu podczas obrazowania mikroskopowego.
Umieścić siatkę w uchwycie na próbkę i przenieść ją do komory mikroskopowej.
Wyrównaj siatkę pod działem elektronowym, które generuje wiązkę elektronów.
Układ soczewek i cewek elektromagnetycznych skupia wiązkę elektronów na sekcjach.
Przesuń uchwyt próbki, aby zeskanować sekcje we wzorze rastrowym.
Gdy wiązka elektronów przechodzi przez skrawki tkanki, barwione obszary o dużej gęstości elektronów rozpraszają więcej elektronów, podczas gdy niebarwione obszary przenoszą elektrony.
Detektor zbiera te sygnały elektronowe, tworząc obrazy mózgu o wysokiej rozdzielczości.
W porównaniu z grupą kontrolną, uszkodzony mózg wykazuje mikroglej fagocytarny zawierający liczne inkluzje wewnątrzkomórkowe, co jest charakterystyczną cechą neurodegeneracji wywołanej urazem.
Aby zamontować próbkę w skaningowym mikroskopie elektronowym lub SEM, umieść siatkę ze skrzynki rozdzielczej z sekcją w uchwycie na próbkę z wieloma siatk
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych