Wywoływanie urazu urazowego w wycinku mózgu za pomocą urządzenia z rurką uderzeniową

Rozpocznij od konfiguracji rurki uderzeniowej składającej się z proksymalnej sekcji sterownika, zespołu zamka membrany i dystalnej sekcji napędzanej z czujnikami ciśnienia i uchwytem na próbkę.

Urządzenie jest podłączone do butli z gazem pod ciśnieniem za pośrednictwem jednostki sterującej.

Włóż pręt zaślepiający przez uchwyt próbki, aby wyrównać go z wylotem rurki uderzeniowej.

Podłącz czujniki ciśnienia do urządzenia rejestrującego.

Trzymaj rurkę uderzeniową blisko i otwórz wylot butli z gazem, aby wytworzyć ciśnienie w jednostce sterującej.

Zamocuj membranę z arkusza poliestru w zespole zamka.

Umieścić worek zawierający błonę z plastrami mózgu w pożywce doświadczalnej w uchwycie na próbkę.

Otwórz pokrętło regulacji gazu rurki amortyzatora, pozwalając gazowi dostać się do sekcji kierowcy i zwiększyć ciśnienie powietrza.

Powoduje to pęknięcie membrany, uwalniając wysokie ciśnienie, które generuje falę uderzeniową.

Ta fala uderzeniowa przemieszcza się i uderza w wycinki mózgu, wywołując urazowe uszkodzenie tkanki.

Użyj pręta zaślepiającego, aby przykręcić sterylną ramę uchwytu worka do dystalnego kołnierza rurki amortyzującej, upewniając się, że środkowy otwór jest wyrównany z wylotem rurki amortyzującej. Czujnik 1, przetwornik ciśnienia znajduje się w środkowej części sekcji napędzanej, a czujnik 2 znajduje się w dystalnym kołnierzu rury uderzeniowej.

Podłącz te przetworniki ciśnienia do oscyloskopu za pomocą zasilacza źródła prądu i włącz oscyloskop. Upewnij się, że zawór elektromagnetyczny rurki uderzeniowej i regulator przepływu są zamknięte, a następnie otwórz zewnętrzny przewód sprężonego powietrza i naładuj zawór elektromagnetyczny do 2.5 bara. Otwórz zawór bezpieczeństwa butli ze sprężonym powietrzem i powoli otwórz regulator ciśnienia, aby zwiększyć ciśnienie do około 5 barów.

Następnie przygotuj membrany, tnąc arkusze poliestru o grubości 23 mikronów na kwadraty o wymiarach 10 na 10 centymetrów. Przygotuj uchwyty z taśmy autoklawu i przyklej je do góry i dołu każdej membrany. Umieść jedną membranę w wyłomie i upewnij się, że są wyśrodkowane.

Następnie zaciśnij membranę za pomocą czterech i nakrętek M24. Zamocuj je sekwencyjnie w ukośnie symetryczny sposób, upewniając się, że membrany są wolne od zmarszczek. Zacisnąć sterylną torbę w pozycji pionowej na ramie uchwytu, upewniając się, że powierzchnia wkładki do hodowli tkankowej z organotypowymi wycinkami hipokampa jest skierowana w stronę wylotu rurki szokowej, a wkładka do hodowli tkankowej jest wyśrodkowana wewnątrz sterylnej torby.

W przypadku konfiguracji z podwójną membraną ciśnienie rozrywające zależy od różnicy ciśnień gazu między sterownikiem a podwójną komorą zamkową. Dlatego, aby membrany pękały w kontrolowany sposób, podwójny zawór bezpieczeństwa jest otwierany ręcznie po osiągnięciu docelowych ciśnień.

Załóż ochronniki słuchu i okulary ochronne, jeśli nie były jeszcze noszone. Zamknij zawór elektromagnetyczny. Włącz prąd źródłowy zasilacza, aby uzyskać dane o fali uderzeniowej.

Manipuluj pokrętłem regulacji przepływu na panelu sterowania rurki amortyzatora, aby powoli zwiększać ciśnienie w sekcji głośności przetwornika rurki amortyzatora w konfiguracji z pojedynczą membraną zarówno dla sekcji głośności przetwornika, jak i podwójnej sekcji zamka rury amortyzującej w konfiguracji z podwójną membraną. Gdy tylko membrana pęknie, szybko zamknij przepływ sprężonego powietrza za pomocą pokrętła przepływu i otwórz zawór elektromagnetyczny.

Idealna kombinacja parametrów fali uderzeniowej powinna wystarczyć do spowodowania uszkodzenia tkanki, ale nie na tyle wysoka, aby spowodować zniekształcenie lub pęknięcie wkładki do hodowli tkankowej lub sterylnego worka.