JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:46 min • July 8th, 2025
Zacznij od ludzkiego mózgu pośmiertnego w pozycji brzusznej.
Następnie przetnij pień mózgu poprzecznie w górnej części mostu, blisko podstawy mózgu.
Sprawdź istotę czarną, strukturę śródmózgowia i sąsiednie struktury pod kątem jakichkolwiek nieprawidłowości.
Wypreparuj opuszki węchowe wraz z ich drogami.
Teraz ustaw mózg grzbietowo i przetnij ciało modzelowate przez przyśrodkową podłużną szczelinę, aby oddzielić półkule.
Dokładnie zbadaj każdą półkulę pod kątem anomalii.
Następnie ustaw półkule płasko z ich przyśrodkowymi powierzchniami skierowanymi w dół.
Przeciąć półkule mózgowe od bieguna czołowego do potylicznego, aby uzyskać grube odcinki.
Następnie ułóż sekcje w porządku anatomicznym, tak aby ich powierzchnie czołowe były skierowane do góry w celu kontroli. Poszukaj wszelkich nieprawidłowości.
Wypreparuj prostokątne bloki tkanek z różnych obszarów mózgu.
Umieść te bloki tkanek w oznakowanych histokassetach w celu dalszej analizy.
Stojąc twarzą do podstawy mózgu i używając skalpela, przeciąć pień mózgu poprzecznie w górnej części mostu, jak najbliżej podstawy mózgu. Dokładnie sprawdź istotę czarną pod kątem bladość i sprawdź inne sąsiednie struktury. Korzystając z urządzenia do nagrywania dźwięku, zwróć uwagę na nietypowy wygląd mózgu w porównaniu z normalnym mózgiem. Tutaj preparowana jest opuszka węchowa i przewód lewej, a następnie prawej półkuli.
Odwróć mózg z powrotem i za pomocą ostrego noża podążaj w kierunku potylicznym, aby oddzielić dwie półkule, przecinając ciało modzelowate centralnie przez przyśrodkową szczelinę podłużną. Sprawdź każdą stronę każdej półkuli pod kątem możliwych anomalii. Po zrobieniu tylu zdjęć, ile to konieczne, w tym prostopadle do mózgu, aby uchwycić całą powierzchnię kory mózgowej, umieść dwie półkule płasko leżące na ich środkowych aspektach, z płatami czołowymi skierowanymi od badacza i stykającymi się ich środkami.
Za pomocą ostrego noża ręcznie przetnij obie półkule mózgowe, zaczynając od biegunów czołowych i przesuwając się w kierunku biegunów potylicznych na całej długości półkul, aby uzyskać dwie serie płyt tkanki mózgowej o grubości jednego centymetra. Umieść płyty mózgowe w anatomicznie zorganizowanej i symetrycznej sekwencji na płaskiej białej powierzchni z wydrukowaną na niej linijką do fotografowania. Upewnij się, że powierzchnie czołowe płyt są widoczne do bezpośredniej kontroli wzroku i fotografii cyfrowej.
Używaj powierzchni tnących z nadrukowanymi siatkami milimetrowymi po obu stronach, aby dokładniej zlokalizować struktury mózgu, rozmiary i możliwe nieprawidłowości. Rób notatki na temat każdego nietypowego aspektu mózgu w porównaniu z normalnym mózgiem. Następnie, za pomocą ostrego skalpela, ręcznie wypreparuj mniejsze, prostokątne bloki tkanki mózgowej. Dla każdego ustalonego regionu mózgu. Postępuj zgodnie z proponowanym schematem zbierania regionów mózgowych opisanym w tej tabeli. Utwórz kody deidentyfikujące, aby oznaczyć histokassety, generując losowe lub półlosowe liczby dla każdego przypadku, gdzie AD oznacza badanie choroby Alzheimera, 16 oznacza rok, w którym przeprowadzana jest autopsja, a 0001 to progresywny numer próbki akcesyjnej. Umieść każdy blok tkanki w osobnych histokassetach.
W niniejszym artykule szczegółowo opisano metodę sekcji tkanki mózgu człowieka pobranej po śmierci, koncentrując się na badaniu różnych struktur mózgowych pod kątem nieprawidłowości. Proces obejmuje staranne cięcie i inspekcję mózgu, ze szczególnym uwzględnieniem substantia nigra oraz opławek węchowych.
Standaryzowana sekcja mózgu po śmierci umożliwia powtarzalne pobieranie próbek tkanek w celu walidacji celów neuropatologicznych oraz odkrywania biomarkerów. Symetryczne przekroje obu półkul wspierają analizę porównawczą w różnych stanach chorobowych, zwiększając pewność prognostyczną w modelach przedklinicznych. Ten schemat postępowania ułatwia późniejsze analizy histologiczne i molekularne, które są kluczowe dla minimalizacji ryzyka weryfikacji hipotez terapeutycznych dotyczących ośrodkowego układu nerwowego.
Metoda ta wpisuje się w proces badawczy – od walidacji celu po ocenę przedkliniczną – poprzez dostarczanie standaryzowanej tkanki ludzkiego mózgu do dalszych analiz.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026