Wykorzystanie reflektometrii spektralnej do określenia zmielinizowanych średnic aksonów w nieruchomym wycinku mózgu myszy

Weźmy hiperspektralny mikroskop konfokalny ze stabilizowanym źródłem laserowym skonfigurowanym dla szerokiego zakresu spektralnego, aby odkodować nanostrukturę osłonki mielinowej tkanki mózgowej.

Użyj lustra referencyjnego, aby uchwycić podstawowe widmo odbicia. Usuń lustro i uzyskaj ciemne widmo przesunięcia w celu korekcji szumów detektora.

Przenieś komorę z ustalonym wycinkiem tkanki mózgowej na scenę mikroskopu.

Dopasuj płaszczyznę ogniskową do obszaru tkanki będącego przedmiotem zainteresowania, zapewniając wystarczającą głębokość, aby zminimalizować zakłócenia z interfejsu szkło-tkanka.

Światło lasera jest kierowane na wielowarstwową osłonkę mielinową aksonów.

Gdy światło oddziałuje z mieliną, na stykach warstw pojawiają się częściowe odbicia, powodując wzory interferencyjne spowodowane różnymi grubościami warstw i współczynnikami załamania światła.

Uzyskaj obrazy spektralne tych wzorców interferencyjnych.

Po korekcie linii podstawowej i analizie sygnału, widmo odbicia ujawnia okresowość liczby falowej, co pozwala na określenie średnic mielinizowanych aksonów.

Zamontuj lustro referencyjne na stoliku mikroskopu, powierzchnią skierowaną w stronę soczewki obiektywu. Jeśli nie jest łatw