Wizualizacja mitochondriów w śródnaskórkowych włóknach nerwowych
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:37 min. • May 29th, 2025
Zacznij od skrawka tkanki skórnej naskórka zawierającego śródnaskórkowe włókna nerwowe lub IENF, cienkie zakończenia neuronów czuciowych.
IENF są bogate w mitochondria, dostarczając energię do przekazywania sygnałów neuronów.
Tkanka ma znakowane fluorescencyjnie IENF, mitochondria i jądra naskórka.
Za pomocą odwróconego mikroskopu konfokalnego sekwencyjnie pobierz dyskretne sygnały fluorescencyjne o odpowiednich długościach fal dla jąder, IENF i mitochondriów.
Aktywuj skanowanie na żywo, aby przechwycić sygnał IENF, obejmujący warstwę naskórka.
Następnie wykonaj skanowanie sekwencyjne dla każdego sygnału, aby wyeliminować przesłuch sygnału fluorescencji.
Na podstawie połączonego obrazu, za pomocą oprogramowania, przytnij i wyizoluj fluorescencyjne na niebiesko komórki naskórka.
Następnie przetwórz przycięty obszar, aby zwiększyć rozdzielczość zielonych sygnałów IENF i czerwonych sygnałów mitochondrialnych.
Następnie wygeneruj obraz powierzchni 3D, aby utworzyć maskę dla IENF, a następnie nałóż na obraz powierzchni mitochondriów, aby wyizolować mitochondria specyficzne dla nerwów.
W końcowym wyniku IENF pojawiają się w kolorze cyjanu, podczas gdy mitochondria pojawiają się jako maleńkie s
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych