February 19th, 2012
Ten film demonstruje trzy rodzaje analiz morfometrycznych siatkówki, które obejmują pomiar grubości wewnętrznej warstwy jądrowej, ilościowe określenie liczby komórek zwojowych siatkówki (RGC) i pomiar rozmiarów RGC. Technika ta może stanowić prostą, ale naukową platformę do analiz morfometrycznych.
Cześć, jestem Regina i pracuję w laboratorium chorób neurodegeneracyjnych na Wydziale Anatomii Uniwersytetu w Hongkongu. Dzisiaj pokażę Ci, jak przeprowadzić analizę progresji sesji siatkówki. Zacznijmy Przed wykonaniem jakiejkolwiek analizy należy przeprowadzić recesję próbki siatkówki i cztery MyFitness i poddać się barwieniu h i e.
Następnie sesja siatkówki jest podzielona na cztery regiony. Są to górny region peryferyjny, górny region centralny, dolny region centralny i dolny region peryferyjny. Po zdefiniowaniu obszarów uzyskuje się obraz każdego obszaru w powiększeniu 10 razy 40 pod mikroskopem jasnej wiązki dekoracji.
Teraz jesteśmy gotowi do analizy informacji o morfie siatkówki. Ta sesja pokaże, jak zmierzyć grubość siatkówki wewnętrznej warstwy jądrowej. Otwórz oprogramowanie o nazwie exact investigator.
Wybierz 40 typów, a następnie z dwóch głównych pasków wybierz obraz otwarty. Pod zakładką plik wybierz obraz żądanego obszaru siatkówki, który chcesz przeanalizować. Wybierz typ linii konturu z listy rozwijanej dwóch głównych pasków.
Upewnij się, że automatyczne przenoszenie jest włączone. Możesz powiększyć obraz, klikając przycisk powiększania. Możesz użyć przycisku pomniejszania, aby zmniejszyć bok wyświetlanego obrazu.
Zarówno śledzenie, jak i próbka mogą być przesuwane w czterech różnych kierunkach, łamiąc przyciski ruchu przyczyny. Kliknij prawym przyciskiem myszy w oknie śledzenia i wybierz proste śledzenie pęknięć. Narysuj linię ciągłą wzdłuż wewnętrznej granicy warstwy wewnętrznej.
Jeśli zostanie popełniony błąd, przerwij go w oknie śledzenia i naciśnij przycisk i cofnij, aby usunąć ostatni punkt rysowania. Kontynuuj śledzenie aż do ostatniego punktu linii. Po zakończeniu rysowania przerwij go w oknie obrysowywania, wybierz otwarty kontur i uruchom obraz, klikając przycisk powiększenia.
Przycisk po lewej stronie Kliknij w oknie śledzenia. Aby powiększyć obraz, wybierz znacznik na drugim pasku znacznika w Marcus. W punkcie skrzyżowania.
Po dodaniu wszystkich znaczników wybierz ikonę znacznika w pozycji znacznika dwa paski i kursor. Na środku jednego ze znaczników wybierz szybkie kąty pomiaru pod zakładką dwójki, kliknij prawym przyciskiem myszy w oknie śledzenia i wybierz opcję ciągłą. Zmierz kąt, klikając najpierw środek znacznika, który przylega do wybranego znacznika.
W przypadku końca segmentu linii przesuń go maksymalnie do środka problemu. Marker i pęknięcie. Ponownie przedłuż linię gumki do zewnętrznej granicy warstwy inia, regulując kąt do 90 stopni.
Sięgnij po lewą szczelinę w pragnieniu. Ustaw okno dialogowe pokazujące pomiar kąta, które pojawi się zaraz po kliknięciu. Naciśnij Enter, trzymając mysz nadal po lewej stronie.
Kliknij okno obrysowywania, aby linia została narysowana od jednego końca do nowego wybranego końca. Przerwij go w oknie śledzenia i wybierz otwartą kontrolkę. Musimy wykonać cztery pomiary palców wewnętrznej warstwy jądrowej w każdym obszarze, gdzie zostaną narysowane cztery linie.
Prostopadle od bazy kontrolnej w nocy do zewnętrznej granicy indyjskiej warstwy nuklearnej I uruchom obraz, aby wyraźnie zobaczyć granicę. Jeśli końcówka linii nie znajduje się na zewnątrz wewnętrznej warstwy jądrowej, możemy je połączyć lub skrócić linię w trybie edycji. Wybierz tryb edycji i wskaż linię.
Bardzo kliknij okno śledzenia i wybierz w polu wyszukiwania punktu w sterowaniu elektrycznym, dodaj punkt na zewnętrznej krawędzi, podczas gdy edycja punktu powinna przebiegać wzdłuż tej samej linii. Usuń oryginalny punkt. Następnie można uzyskać wyrównanie z nową windą.
Zmniejsz bok obrazu, klikając przycisk pomniejszania. De wybierz tryb edycji i narysuj ostatni odcinek linii. Po narysowaniu linii kolejności wybierz tryb edycji.
Kliknij prawym przyciskiem myszy okno śledzenia, a my odpowiednio wylądujemy w czterech segmentach linii. Możemy teraz uzyskać cztery pomiary, naciskając przycisk pomiaru CONT. Wybierz te cztery pomiary i wklej je do specjalisty, klikając przycisk kopiuj.
Aby kliknąć piłkę, wybierz zapisz jako w zakładce plik. Dane śledzenia można zapisać jako plik danych. W tej części określimy ilościowo liczbę otwartych obrazów z czerwonego ogona gagana w komórce.
Pod zakładką plik wybierz obraz żądanego obszaru siatkówki, który chcesz przeanalizować. Przede wszystkim musimy zidentyfikować, które są komórkami stylu życia, a które komórkami śmierci. Komórki te w kształcie z grubsza biegnącym z subtelnymi i jądrem wyraźnie obserwowanymi jako komórki zwojowe siatkówki życia.
Te porównywalne są małe i skondensowane komórki są uważane za tę komórkę. Wybierz typ linii konturu z listy rozwijanej dwóch głównych pasków. Narysuj naszą linię wzdłuż granicy lewej warstwy włókien i śledzenia z opcją i otwartym konturem.
Dodaj każdy koniec, dodaj jeden znacznik na końcu linii, a drugi w miejscu w pobliżu zespołu. Wybierasz ikonę znacznika na pasku znacznika dwa. Umieść kursor na środku znaczników.
Na wskazówce wybierz szybkie kąty pomiaru pod zakładką. Dwójki kliknij prawym przyciskiem myszy w oknie śledzenia i wybierasz opcję ciągłą i tylko linie gumki i zmierz kąt 19 stopni. Naciśnij Enter zaraz po tym, jak pudełko z dolarem zostanie złapane.
Pamiętaj jednak, że mysz ma jeszcze w tym samym czasie w lewo. Przerwij okno trasowania, aby nowa linia mogła być szczególnie przedłużona od końcówki. Przerwij okno śledzenia i wybierz otwartą kontrolkę.
Narysuj kolejną nową linię dokładnie w taki sam sposób, jak inny koniec. Stworzyliśmy dwie granice, w obrębie których zliczana jest liczba komórek ratynowego gagana. Wybierz jeden typ znacznika i dołącz go do każdych pięciu komórek.
Wybierz jedną granicę jako linię wykluczenia, której dotyka komórka, nie jest bieżąca. Wybierz inny typ znacznika dla martwych komórek. Numer każdego rodzaju pola znacznika zostanie wyświetlony obok ikony znacznika. Odpowiednio.
Na drugim pasku znacznika wybierz tryb edycji i pobierz linię bazową konturu. Przerwij go w oknie śledzenia i ponownie zakończ linię. Nazwę linii bazowej konturu można uzyskać, naciskając przycisk pomiaru konturu.
Liczba komórek może być następnie wyrażona na milimetr nazwy. Zapiszmy więc jak w pliku zakładki. Dane trasowania i znacznika można zapisać jako plik danych.
W tej części pokażemy, jak zmierzyć stronę komórki siatkówki z gangingiem wybranym obrazem otwartym. Pod zakładką plik wybierz obraz żądanego obszaru siatkówki, który chcesz przeanalizować. Wybierz komórkę gangową żywego oddechu zgodnie z kryteriami opisanymi w poprzedniej części.
Tak więc w komórce życia wybierz typ linii konturu z miejsca zapiski dwóch głównych pasków. Narysuj linię konturu wzdłuż obwodu komórki mniej więcej na końcu, w prawo kopnij okno śledzenia i wybierz opcję Zakończ zamknij kontur. Obszar komórki zostanie wyświetlony pod elementem obszaru w oknie dialogowym pomiaru kontrolnego.
Ten film pokazał trzy proste metody, które mogą obiektywnie analizować siatkówkę. Mam nadzieję, że ten film jest.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
To wideo przedstawia trzy typy analiz morfometrycznych siatkówki, w tym pomiar grubości warstwy jądrowej wewnętrznej, ilościowe określenie liczby komórek zwojowych siatkówki (RGCs) oraz pomiar wielkości RGCs. Technika ta zapewnia naukową platformę dla tych analiz.
Objective morphometric analysis of retinal sections enables precise quantification of neuronal loss and structural changes, supporting target validation in neurodegenerative disease models. By reducing measurement variability and increasing sensitivity to minimal changes, this approach enhances predictive confidence in evaluating therapeutic efficacy. It provides a translatable platform for assessing retinal pathologies across drug discovery stages.
This method integrates into the discovery continuum from early target validation through lead identification to preclinical evaluation, providing structural readouts that complement functional assessments in retinal disease models.