Szybkie oznaczanie termicznego progu nocyceptywnego u szczurów z cukrzycą

Ogólnym celem tej procedury jest określenie termicznego progu nocyceptywnego szczurów kontrolnych i chorych na cukrzycę. Pierwszym krokiem jest umieszczenie zwierzęcia na przyrostowej płycie grzejnej i mierniku przeciwbólowym. Następnie temperatura płyty grzejnej jest stopniowo zwiększana, podczas gdy powierzchnia się nagrzewa.

Zwierzę nie jest obserwowane pod kątem żadnych obraźliwych zachowań. Gdy zaobserwuje się takie zachowanie, ogrzewanie zostaje zatrzymane i rejestrowana jest temperatura płyty w tym momencie. Ostatecznie można uzyskać wyniki, które wskazują na zmiany w termicznym progu nocyceptywnym u zwierząt leczonych lekami przeciwbólowymi lub cierpiących na bolesną neuropatię cukrzycową.

Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak płyta grzejna, która jest zwykle ustawiana jako temperatura super progowa, jest to, że nasze metody stopniowo zwiększają temperaturę płyty, co pozwala na dokładne określenie progu nocyceptywnego termicznego. Próg nocyceptywny termiczny lub TNT określa się za pomocą przyrostowego znieczulenia na płycie grzejnej, miernika lub pam IH. Elementy składowe tego systemu obejmują komorę obserwacyjną z pleksi, aluminiową płytę z regulacją temperatury, klawiaturę służącą do programowania oraz przełącznik nożny do zdalnego sterowania urządzeniem.

Dane są zbierane za pomocą dostosowanego oprogramowania na pobliskim komputerze. Alternatywnie, kopie papierowe można drukować za pomocą portu szeregowego znajdującego się w urządzeniu. Umieść lustro za komorą z pleksi, aby zwiększyć widoczność zachowania zwierzęcia.

Następnie ustaw żądane szybkości ogrzewania, a także początkową temperaturę czuwania i końcową wartość odcięcia. Naciśnij przełącznik nożny, aby uruchomić i zatrzymać system. Upewnij się, że zarejestrowano początkową temperaturę czuwania i końcową temperaturę odcięcia, a także czas potrzebny do osiągnięcia temperatury końcowej.

W razie potrzeby eksperymentator może przetestować system na sobie. Wycofanie ręki z metalowej płytki w momencie bólu. Percepcja nie może ani szkodzić skórze, ani powodować późniejszego dyskomfortu.

Rozpocznij aklimatyzację poprzedniego wieczoru, umieszczając klatki na stole, na którym będą odbywać się testy. Dwie godziny przed badaniem. Włącz patelnię IH, aby zapoznać zwierzęta z hałasem tła urządzenia.

W tym momencie system można skonfigurować i przetestować, jak pokazano wcześniej. Po tym, jak zwierzęta zaaklimatyzują się w środowisku, delikatnie umieść szczura w komorze z pleksiglasu na ciepłej powierzchni. Pozwól zwierzęciu eksplorować komorę przez kilka minut.

Rozpocznij testowanie. Gdy zwierzę wydaje się wygodne, aby rozpocząć próbę, naciśnij przełącznik nożny, aby rozpocząć podgrzewanie płytki. Obserwuj zachowanie zwierzęcia, gdy talerz się nagrzewa.

Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które są nowe w tej metodzie, będą miały trudności, ponieważ identyfikacja masowych zachowań ofensywnych nie zawsze jest prosta i wymaga praktyki. Żadne obraźliwe zachowania nie charakteryzują się lizaniem, potrząsaniem lub podnoszeniem tylnych porów. Warto zauważyć, że pierwszym obserwowanym zachowaniem może być lizanie czterech porów, po którym następuje reakcja tylnych porów.

W przypadku zaobserwowania najbardziej obraźliwego zachowania naciśnij przełącznik nożny, aby zakończyć próbę i zabrać zwierzę z powrotem do klatki domowej. Temperatura, która wywołuje to zachowanie, jest uważana za termiczny próg nocyceptywny lub TNT zwierzęcia kontrolnego. Urządzenie jest czyszczone, a test jest powtarzany dla następnego obserwowanego zwierzęcia.

Oto termiczne progi nocyceptywne normalnych młodych dorosłych szczurów i myszy. Przedstawione tutaj dane pokazują, że TNT szczurów nie zmieniał się, gdy były testowane przez okres czterech dni. Podobnie, TNT myszy był spójny w różnym wieku.

W tym przykładzie wielokrotnie mierzono TN TS młodych dorosłych szczurów z cukrzycą STZ. Stały spadek progów nocyceptywnej termicznej można zaobserwować już od dwóch tygodni po indukcji cukrzycy. W tym przypadku IH pam został użyty do zbadania ostrych właściwości antynocyceptywnych związku przeciwbólowego.

A, związek ten wywoływał łagodne działanie przeciwbólowe u zwierząt kontrolnych w porównaniu z tymi, które otrzymywały nośniki. Jednak analgezja była bardziej wyraźna u zwierząt z cukrzycą otrzymujących ten związek w porównaniu z grupą kontrolną na nośniku. Podejmując się tej procedury, bardzo ważne jest, aby pamiętać o ciągłym monitorowaniu zachowania zwierzęcia, szczególnie tych, które występują w pobliżu punktu widzenia zwierzęcia.