Name: Zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura wewnątrzświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 15 s
Description: Poznaj zoptymalizowany system monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura z zastosowaniem technologii laserowej dopplerowskiej. Ta metoda umożliwia wielopunktowe badanie hemodynamiki w warunkach niedokrwienia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dziękujemy Pani Caroline Robertson za podkład głosowy oraz Pani Elenie Pirovano za pomoc w produkcji wideo. Badanie to było wspierane przez Uniwersytet w Mediolanie Bicocca, "Fondo di Ateneo 2011".

1. Jak zrobić uchwyt sondy (pojedyncze miejsce lub wiele stron)
<ol>
 <li>Wymagane materiały to kauczuk naturalny, małe rurki z tworzywa sztucznego i metalowy sztylet. Uchwyt sondy można dostosować do wielkości zwierzęcia, liczby i wielkości laserowych sond dopplerowskich oraz obszaru naczyniowego mózgu, który należy monitorować. </li>
 <li>Wytnij kauczuk naturalny o wymaganym rozmiarze (około 10 mm x 10 mm dla szczura o wadze 300 g). </li>
 <li>Zaznaczyć położenie sondy (sond) i bregmy na kauczuku naturalnym, zgodnie z pożądanymi współrzędnymi stereotaktycznymi; dla niedrożności tętnicy środkowej mózgu typowe współrzędne dla rdzenia niedokrwiennego są oczekiwane przy bregma -1 mm, 5 mm w bok od linii środkowej; dla peryferyjnego terytorium niedokrwiennej strefy granicznej oczekiwane współrzędne mogą wynosić bregma +2 mm, 2 mm bocznie do linii środkowej. </li>
 <li>Zaznacz bardzo wyraźnie pozycję bregmy za pomocą X, jest to punkt orientacyjny do mocowania uchwytu sondy do czaszki. </li>
 <li>Włóż trzycik do małej plastikowej rurki (jego rozmiar musi być dopasowany do rozmiaru sondy).</li>
 <li>Włóż trzyt do kauczuku naturalnego w miejscu, w którym sonda ma być umieszczona; wepchnij trzpień w gumę, aż plastikowa rurka również zostanie włożona do gumy. </li>
 <li>Wyjmij stylik. </li>
 <li>Jeśli potrzebnych jest wiele sond, powtórz kroki 1.5-1.7 dla innych pozycji sondy. </li>
 <li>Opcjonalnie dla wielu sond: owiń taśmę wokół plastikowych rurek, aby zapewnić lepszą stabilizację sond.</li>
 <li>Opcjonalnie: przeprowadzić sterylizację chemiczną kilku uchwytów sondy do wykorzystania w przyszłości. </li>
</ol>
2. Przygotowanie przedoperacyjne
<ol>
 <li>Model udaru MCAO jest zwykle wykonywany jako operacja przeżycia. W tym przypadku, jak pokazano na naszym filmie (czas przeżycia 24 godziny po operacji), chirurg stosuje technikę aseptyczną ze sterylizowanymi narzędziami i materiałami. </li>
 <li>Znieczulić szczura izofluranem (3% faza indukcyjna, 1,5% utrzymanie).</li>
 <li>Umieść szczura w pozycji leżącej na stole operacyjnym. </li>
 <li>Delikatnie ogol głowę szczura. </li>
 <li>Nałóż roztwór antyseptyczny na gazik i zdezynfekuj skórę. </li>
 <li>Lidokainę podawać 2% 5 mg/kg podskórnie w okolice czaszki. </li>
</ol>
3. Ustawianie i zabezpieczanie sondy nad nienaruszoną czaszką
<ol>
 <li>Wykonaj prawe przyśrodkowe nacięcie skóry (dla prawego MCAO) i wypreparuj tkankę podskórną, aby dotrzeć do powięzi czaszkowej (galea aponeurotica).</li>
 <li>Wykonaj prawe nacięcie przyśrodkowe w powięzi czaszki i wykonaj rozwarstwienie, aby dotrzeć do kości czaszki; przygotuj obszar kości czaszki, który jest wystarczająco duży do zastosowania uchwytu sondy.</li>
 <li>Uwaga: nie ma potrzeby wiercenia ani przerzedzania kości. </li>
 <li>Zastosuj roztwór Merbromin, aby zdezynfekować i osuszyć powierzchnię czaszki. </li>
 <li>Użyj suszarki do włosów (ustawionej na zimne powietrze), aby przyspieszyć suszenie powierzchni czaszki. </li>
 <li>W tym momencie szwy czaszkowe i bregma są wyraźnie widoczne.</li>
 <li>Dostosuj uchwyt sondy, przycinając krawędzie sterylnymi nożyczkami. </li>
 <li>Nałóż niewielką ilość kleju chirurgicznego (cyjanoakryl, zatwierdzony przez lekarza weterynarii) na powierzchnię pod uchwytem sondy, ostrożnie unikając dolnego otworu plastikowych rurek (uwaga: jeśli znaczna ilość kleju pozostanie między powierzchnią optyczną sondy a czaszką, może to spowodować słaby sygnał i może uszkodzić sondę po wielokrotnym użyciu).</li>
 <li>Przyłóż uchwyt sondy do powierzchni czaszki, ostrożnie dopasowując bregmę do punktu orientacyjnego X. Delikatnie dociśnij uchwyt sondy. </li>
 <li>Użyj suszarki do włosów (ustawionej na zimne powietrze), aby przyspieszyć suszenie kleju chirurgicznego. </li>
 <li>Zabezpiecz uchwyt sondy, zawiązując nić chirurgiczną wokół uchwytu sondy i głowy zwierzęcia; należy uważać, aby umieścić nić chirurgiczną nad żuchwą, omijając obszar podżuchwowy i szyję. </li>
 <li>Opcjonalnie: napełnij plastikową rurkę (rurki) uchwytu sondy żelem optycznym (np. zwykłym żelem do ultrasonografii lub elektrokardiografii); poprawi to jakość sygnału LD.</li>
 <li>Umieść sondę(y) w uchwycie sondy i sprawdź rzeczywisty odczyt przepływomierza LD. Przepływomierza LD należy używać zgodnie z instrukcjami producenta. </li>
 <li>Zabezpiecz sondę (sondy) zawiązując je wokół głowy zwierzęcia; należy uważać, aby umieścić nić chirurgiczną nad żuchwą, omijając obszar podżuchwowy i szyję. </li>
</ol>
4. Monitorowanie perfuzji mózgowej podczas MCAO 
<ol>
 <li>Umieść szczura w pozycji leżącej, ostrożnie unikając sił trakcyjnych działających na sondę (sondy) lub uchwyt sondy. </li>
 <li>Rozpocznij monitorowanie perfuzji mózgowej podczas MCAO. </li>
</ol>
5. Demontaż sondy (sond) i uchwytu sondy
<ol>
 <li>Przeciąć szwy wokół sondy (sond), uchwytu sondy i głowy zwierzęcia.</li>
 <li>Delikatnie tępo wypreparuj tkanki miękkie czaszki i skórę wokół podstawy z naturalnej gumy uchwytu sondy. </li>
 <li>Zdejmij uchwyt sondy. </li>
 <li>Nałóż roztwór antyseptyczny na powierzchnię czaszki. </li>
 <li>Zszyj skórę czaszki. </li>
</ol>
6. Opieka pooperacyjna
<ol>
 <li>Podawać podskórnie 2,5 ml roztworu soli fizjologicznej, aby zapobiec odwodnieniu i utrzymywać zwierzę w cieple za pomocą poduszki grzewczej po przerwaniu znieczulenia gazowego. </li>
 <li>W przypadku operacji przeżycia: należy podać zapobiegawczo znieruchomy Ketoprofen 4 mg/kg podskórnie i powtórzyć tę samą dawkę po 12 godzinach od operacji </li>
 <li>W naszych warunkach eksperymentalnych eutanazja została przeprowadzona 24 godziny po operacji poprzez wdychanie CO2 . </li>
</ol>

<ol><li>Sutherland, B. A., Papadakis, M., Chen, R. L., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+blood+flow+alteration+in+neuroprotection+following+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cerebral blood flow alteration in neuroprotection following cerebral ischemia.</a> J. Physiol. 589, 4105-4114 (2011).</li>
<li>Prinz, V., Endres, M. Chapter 3 Modeling focal cerebral ischemia in rodents: Introduction and overview. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrinz%2C+V+%22Rodent+models+of+stroke%22">Rodent models of stroke</a>. Dirnagl, U. , Human Press. (2010).</li>
<li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia%3A+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li>
<li>Riva, M., Pappadà, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+monitoring+of+intracranial+collateral+flow+predicts+tissue+and+functional+outcome+in+experimental+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic monitoring of intracranial collateral flow predicts tissue and functional outcome in experimental ischemic stroke.</a> Exp. Neurol. 233, 815-820 (2012).</li>
<li>Menon, B. K., Smith, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+leptomeningeal+score+on+CT+angiography+predicts+clinical+and+imaging+outcomes+in+patients+with+acute+anterior+circulation+occlusions%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Neuroradiol%22%5BJournal%5D)">Regional leptomeningeal score on CT angiography predicts clinical and imaging outcomes in patients with acute anterior circulation occlusions.</a> Am. J. Neuroradiol. 32, 1640-1645 (2011).</li>
<li>Bang, O. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collateral+flow+predicts+response+to+endovascular+therapy+for+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Collateral flow predicts response to endovascular therapy for acute ischemic stroke.</a> Stroke. 42, 693-699 (2011).</li>
<li>Shuaib, A., Butcher, K., Mohammad, A. A., Saqqur, M., Liebeskind, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collateral+blood+vessels+in+acute+ischaemic+stroke%3A+a+potential+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Collateral blood vessels in acute ischaemic stroke: a potential therapeutic target.</a> Lancet Neurol. 10, 909-921 (2011).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Stroke+Model+Guidelines+for+preclinical+stroke+trials+%281st+edition%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Stroke+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Rodent Stroke Model Guidelines for preclinical stroke trials (1st edition).</a> J. Exp. Stroke Transl. Med. 2, 2-27 (2009).</li>
<li>Shepherd, A. P., Öberg, P. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aShepherd%2C+AP+%22Laser-Doppler+Blood+Flowmetry%22">Laser-Doppler Blood Flowmetry</a>. , Kluwer Academic Publishers. (1990).</li>
<li>Uluç, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Aktüre, E., Başkaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+Cerebral+Ischemia+Model+by+Endovascular+Suture+Occlusion+of+the+Middle+Cerebral+Artery+in+the+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978(2011).</li>
<li>Garcia, J. H., Wagner, S., Liu, K. F., Hu, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+deficit+and+extent+of+neuronal+necrosis+attributable+to+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.+Statistical+validation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Neurological deficit and extent of neuronal necrosis attributable to middle cerebral artery occlusion in rats. Statistical validation.</a> Stroke. 26, 627-634 (1995).</li>
</ol>

Fundusze na produkcję tego artykułu wideo zostały zapewnione przez firmę Moor Instruments Ltd (Axminster, Devon, Wielka Brytania), która produkuje laserowe instrumenty dopplerowskie pokazane w naszym eksperymentalnym badaniu.
Protokół eksperymentalny został zatwierdzony przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Milano Bicocca, zgodnie z krajowymi wytycznymi dotyczącymi wykorzystania zwierząt laboratoryjnych (D.L. 116/1992) oraz Dyrektywą Unii Europejskiej w sprawie doświadczeń na zwierzętach (2010/63/UE), na podstawie licencji projektowej (nr 219/2011-B) włoskiego Ministerstwa Zdrowia.

Opracowaliśmy we własnym zakresie prosty i tani system do bezpiecznego mocowania jednej lub wielu sond LD z podwójnymi włóknami (głęboka penetracja) do nienaruszonej czaszki szczurów podczas procedury MCAO. Chociaż wydaje się, że jest to błahy problem, uzyskanie niezawodnego mocowania sondy LD do czaszki jest w rzeczywistości poważnym problemem w tym eksperymentalnym otoczeniu, ponieważ jest to warunek wstępny płynnego wykrywania sygnału i skutecznego monitorowania perfuzji mózgowej. 
Zabiegi inwazyjne, takie jak otwory pod zadziory i kostne, zwykle wydłużają czas operacji i wprowadzają więcej zmiennych eksperymentalnych związanych z kraniotomią, a to może zniechęcić badaczy i powstrzymać ich od stosowania monitorowania LD. Z drugiej strony, użycie sond jednowłóknistych (o niskiej penetracji), które są cieńsze i stosunkowo łatwiejsze do przyklejenia bezpośrednio do powierzchni czaszki, daje sygnał niskiej jakości i nie może być niezawodnie stosowane u dorosłych szczurów bez wiercenia lub rozrzedzania czaszki.
Użyliśmy prostych i tanich materiałów, takich jak kauczuk naturalny, plastikowe rurki i metalowy stylik. Wykonany na zamówienie uchwyt sondy może zostać wyprodukowany w ciągu kilku minut i dostosowany do warunków eksperymentalnych. Te uchwyty sondy mogą pomieścić jedną lub więcej sond LD o głębokiej penetracji, do klasycznego monitorowania w jednym miejscu na rdzeniu niedokrwiennym lub do monitorowania w wielu miejscach w różnych obszarach tętniczych na tej samej półkuli lub na dwóch półkulach. Można wyprodukować wiele uchwytów na sondy, wysterylizować je chemicznie i przechowywać do wykorzystania w przyszłości. Zatwierdzony przez lekarza weterynarii klej chirurgiczny (cyjanoakryl), przyspieszany zimnym powietrzem, służy do mocowania uchwytu sondy do nienaruszonej powierzchni czaszki szczura, zgodnie z pożądanymi współrzędnymi czaszki. Wreszcie, konfiguracja sondy jest dodatkowo zabezpieczona na miejscu za pomocą zwykłych szwów. 
Całkowity czas ustawienia tej sondy LD, po opanowaniu tej techniki, wynosi około 10 minut. 
Jak pokazano w tym filmie, rutynowo monitorujemy perfuzję mózgową w centralnym obszarze MCA (sonda LD 1: rdzeń niedokrwienny) i na obwodowym terytorium MCA (sonda LD 2: głównie obszar półcienia). W naszym ostatnim badaniu wykazaliśmy, że zmienność zmian przepływu krwi w sondzie LD 2 (średnio 52% ± 16% SD w porównaniu z wartością wyjściową) jest wyższa w porównaniu z sondą LD 1 (średnio 31% ± 6% SD w porównaniu z wartością wyjściową) i może być wykorzystana do przewidywania wyniku udaru4.
Możemy udzielić kilku porad dotyczących rozwiązywania problemów dla badaczy, którzy chcieliby skorzystać z naszego opracowanego przez nas systemu. Na początku eksperymentu należy uważać, aby bardzo dobrze osuszyć powierzchnię czaszki (merbrominem i zimnym powietrzem) przed założeniem uchwytu sondy, aby zapobiec przedwczesnemu oderwaniu. Ponadto należy pamiętać o nałożeniu kleju na kauczuk naturalny, unikając kontaktu z otwartym końcem plastikowej rurki i powierzchnią optyczną sondy LD, aby zapobiec słabemu sygnałowi i potencjalnemu uszkodzeniu sondy. Podczas wiązania szwu wokół głowy zwierzęcia należy zachować ostrożność, aby uniknąć niedrożności dróg oddechowych (zapobiega się temu, umieszczając szew nad kością żuchwy). Po ustawieniu i zabezpieczeniu sond należy uważać, aby nie ciągnąć kabli sondy podczas obracania zwierzęcia w pozycji leżącej do operacji szyjki macicy; Ten krok zwykle wymaga dwóch osób, jednej osoby trzymającej zwierzę, a drugiej trzymającej kable sondy i delikatnie ustawiającej je w żądanej pozycji. Wreszcie, ewentualne zanieczyszczenie krwi sondy LD z podwójnym włóknem można łatwo opanować zgodnie z instrukcjami czyszczenia dostarczonymi przez producenta. 
Nasz zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej, jak pokazano na tym filmie, może stanowić łatwiejszą, szybszą i bardziej niezawodną alternatywę dla systemów konfiguracji sond, które są obecnie sprzedawane przez firmy komercyjne w tej dziedzinie. Co więcej, uważamy, że zastosowanie tego systemu przez innych badaczy może wzbogacić badania nad hemodynamiką mózgu w eksperymentalnej dziedzinie udaru mózgu, prowadząc do opracowania nowej generacji mózgowych terapii ubocznych.

Badania translacyjne nad czynnikami hemodynamicznymi wpływającymi na patofizjologię i terapię udaru muszą zostać wdrożone, ponieważ ta ważna kwestia jest często paradoksalnie zaniedbywana przez podstawowe badanianaukowe 1. 
Monitorowanie perfuzji mózgowej jest niezbędnym, ale niedostatecznie wykorzystywanym narzędziem do dokładnego modelowania udaru niedokrwiennego2. Oprócz potwierdzenia niedrożności naczyń tętniczych i wykluczenia krwotoku podpajęczynówkowego3, ciągłe monitorowanie perfuzji mózgowej może dostarczyć użytecznych danych na temat stopnia i konsystencji deficytu perfuzji, stanu funkcjonalnego wewnątrzczaszkowych naczyń pobocznych i hemodynamicznego efektu nowych podejść terapeutycznych. 
Ostatnie badanie naszej grupy wskazuje, że wielomiejscowe monitorowanie hemodynamiczne może być używane do oceny wewnątrzczaszkowego krążenia pobocznego i może przewidzieć rozmiar zawału i deficyt funkcjonalny4. Te wyniki eksperymentalne są zgodne z badaniami klinicznymi, które wykazały, że funkcjonalna wydajność krążenia pobocznego w mózgu jest predyktorem wyniku klinicznego u pacjentów z udarem niedokrwiennym 5, 6. Z tego powodu oboczne leczenie mózgu jest zalecane jako potencjalny cel terapeutyczny w ostrej fazie udaru niedokrwiennego7.
Laserowo-dopplerowskie (LD) instrumenty są najczęściej używanym narzędziem do pomiaru perfuzji mózgowej w eksperymentalnym udarze niedokrwiennym mózgu i ich użycie jest zalecane przez najnowsze wytyczne na ten temat8. Instrumenty LD mierzą perfuzję mikronaczyniową w małej objętości korowej, przy czym głębokość rejestrowanego sygnału zależy od szerokości separacji włókien, przy czym sondy LD z dwoma włóknami umożliwiają głębszą penetrację w porównaniu z sondami LD z pojedynczym włóknem9. Wartości przepływu krwi są wyrażone jako dowolne jednostki perfuzji (P.U.), które wskazują względny, a nie bezwzględny przepływ krwi w mózgu. Kalibracja P.U. jest zwykle wykonywana przy użyciu wzorców ruchliwości, zgodnie z instrukcjami producenta. Przepływometria LD umożliwia ciągłe dynamiczne monitorowanie i generowanie danych ilościowych w ramach tej samej sesji. 
Wśród problemów technicznych, które obecnie ograniczają użycie LD, głównym problemem jest uzyskanie bezpiecznego i długotrwałego mocowania sondy laserowej do czaszki zwierzęcia. Jest to niezbędne do długotrwałego monitorowania i jeśli stosuje się wiele sond dla różnych obszarów tętnic mózgowych, tak jak robimy to w naszym laboratorium. 
W szczególności, wymagany jest przedłużony czas operacji, jeśli sondy są przymocowane do czaszki za pomocą otworów lub czaszkowych, podczas gdy słaby sygnał i niepewne mocowanie występuje, jeśli pojedyncze włókniste (o niskiej penetracji) sondy LD są przymocowane do czaszki za pomocą prostego kleju chirurgicznego. Sondy LD z podwójnymi włóknami (o głębokiej penetracji) zapewniają wyższy i bardziej spójny sygnał, ale są większe niż sondy jednowłókniste i nie można ich przymocować do czaszki za pomocą samego kleju chirurgicznego.
W tym filmie pokazujemy nasz zoptymalizowany system monitorowania perfuzji mózgowej podczas przejściowego zamknięcia tętnicy środkowej mózgu przez włókno wewnątrzświetlne u szczura. Opisujemy prostą metodę uzyskania wydajnego, wykonanego na zamówienie, taniego uchwytu do pojedynczych lub wielu sond LD z podwójnymi włóknami (o głębokiej penetracji), który ma być używany do przedłużonego monitorowania perfuzji mózgowej nad nienaruszoną czaszką. 
Zabieg chirurgiczny przejściowego MCAO u szczura można było zobaczyć w artykule wideo autorstwa Uluç i współpracowników10 i nie jest pokazany w tym filmie.

<table><tbody><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Sprzęt&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>2-kanałowy monitor dopplerowski MoorVMS-LDF</td><td><a href="http://gb.moor.co.uk/product/moorvms-ldf-laser-doppler-monitor/1" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Moor Instruments</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td>sonda VP12</td><td><a href="http://gb.moor.co.uk/product/vp12-vp12/47" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Moor Instruments</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Odczynnik/Materiał&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>nić Doccol powlekana silikonem, rozmiar 4-0, średnica z powłoką 0,39 mm</td><td>Doccol Corporation</td><td>403956PK10</td><td></td></tr><tr><td>Kauczuk naturalny, &lt;em&gt;np.&lt;/em&gt; popularne smoczki dla noworodków</td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr><tr><td>Metalowy kaniulek, &lt;em&gt;np.&lt;/em&gt; z igły spinalnej 18 GA x 90 mm </td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr><tr><td>Probówki plastikowe, &lt;em&gt;np.&lt;/em&gt; z zestawu do infuzji dożylnej 25 GA x 20 mm</td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr><tr><td>Niewchłonną nić chirurgiczna, powlekana, plecionka jedwabna</td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr><tr><td>Chirurgiczny klej cyjanoakrylowy</td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr><tr><td>Izofluran (100% v/v) do stosowania w weterynarii</td><td></td><td></td><td>Wielu dostawców</td></tr></tbody></table>

zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura wewnątrzświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Potencjał translacyjny badań przedklinicznych nad udarem zależy od dokładności modelowania eksperymentalnego. Monitorowanie perfuzji mózgowej w modelach zwierzęcych ostrego udaru niedokrwiennego pozwala potwierdzić udaną niedrożność tętnic i wykluczyć krwotok podpajęczynówkowy. Monitorowanie perfuzji mózgowej może być również wykorzystywane do badania wewnątrzczaszkowego krążenia bocznego, które staje się potężnym wyznacznikiem wyniku udaru i możliwym celem terapeutycznym. Pomimo uznanej roli laserowego monitorowania perfuzji dopplerowskiej w ramach obecnych wytycznych dotyczących eksperymentalnego niedokrwienia mózgu, istnieje szereg trudności technicznych, które ograniczają jego powszechne stosowanie. Jednym z głównych problemów jest uzyskanie bezpiecznego i długotrwałego mocowania laserowej sondy dopplerowskiej o głębokiej penetracji do czaszki zwierzęcia. W tym filmie pokazujemy nasz zoptymalizowany system monitorowania perfuzji mózgowej podczas przejściowej niedrożności tętnicy środkowej mózgu za pomocą włókna śródświetlnego u szczura. Opracowaliśmy we własnym zakresie prostą metodę uzyskania niestandardowego uchwytu do dwuwłóknistych (głęboko penetrujących) laserowych sond dopplerowskich, które w razie potrzeby umożliwiają monitorowanie w wielu miejscach. Ciągłe i długotrwałe monitorowanie perfuzji mózgowej można było łatwo uzyskać nad nienaruszoną czaszką.

Przemijające MCAO (60 min) indukowano poprzez wprowadzenie filtru silikonowego do zewnętrznej tętnicy szyjnej. Filament przesuwano następnie przez końcowy odcinek wewnętrznej tętnicy szyjnej aż do odejścia MCA, pod kontrolą LD. Wspólna tętnica szyjna oraz tętnica skrzydłowopodniebna zostały przejściowo zamknięte podczas chirurgicznego wprowadzania filamentu. Schematyczne przedstawienie procedury chirurgicznej pokazano na Rysunku 1A.
Współrzędne czaszkowe służące do rozmieszczenia dwóch sond LD wybrano zgodnie z przebiegiem obszarów tętniczych. Wstępne eksperymenty z perfuzją atramentu żelatynowego (Rysunek 1B) wykazały, że rdzeń niedokrwienny spodziewany jest w centralnym obszarze tętnicy środkowej mózgu (MCA) (bregma -1 mm, 5 mm od linii środkowej; Sonda 1), natomiast przepływ oboczny spodziewany jest w obszarze strefy granicznej pomiędzy gałęziami korowymi tętnic środkowej i przedniej mózgu (bregma +2 mm, 2 mm od linii środkowej; Sonda 2).
Hemodynamikę mózgową badano przy użyciu wielomiejscowych sond Laser Doppler przez cały czas trwania procedury chirurgicznej, t.j. przed, w trakcie i po MCAO (Rysunek 2). Deficyt perfuzji mózgowej podczas MCAO był mniejszy i wykazywał wyższy stopień zmienności w Sondzie 2 w porównaniu z Sondą 1, co sugeruje różnice międzyosobnicze w sprawności funkcjonalnej wewnątrzczaszkowych krążenia obocznego w warunkach niedokrwiennych. Wielomiejscowe monitorowanie Laser Doppler pozwala również na badanie zmian hemodynamicznych w mózgu podczas okluzji proksymalnych pozaczaszkowych tętnic mózgowych (tętnicy szyjnej wspólnej, tętnicy szyjnej wewnętrznej, tętnicy skrzydłowopodniebiennej).
Wynik udaru oceniono 24 h po reperfuzji na podstawie objętości zawału, obliczonej na podstawie 19 kolejnych przekrojów barwionych fioletem krezylowym (Rysunek 3), oraz funkcjonalnej oceny neurologicznej według skali Garcia11. Przeprowadzono immunohistochemię w celu wykrycia specyficznych markerów związanych z niedokrwiennym uszkodzeniem mózgu, aby uzyskać topograficzny rozkład utraty neuronów (białko związane z mikrotubulami 2, MAP2) oraz penumbry niedokrwiennej (białko szoku cieplnego 70, Hsp70) w odniesieniu do wielopunktowego monitorowania hemodynamicznego krążenia wewnątrzczaszkowego (Rysunek 4). 
<img src="/files/ftp_upload/50214/50214fig1.jpg" alt="Schemat tętnic szyjnych z filamentem Doccol; ustawienie sondy w mózgu myszy z punktem odniesienia w bregma." fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50214/50214fig1highres.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1. Monitorowanie perfuzji mózgowej podczas wewnątrzlumenalnego MCAO u szczura. A. Schematyczna reprezentacja procedury chirurgicznej dla przejściowego MCAO. Do zamknięcia ujścia MCA użyto filamentu powlekanego silikonem, który wprowadzono do tętnicy szyjnej zewnętrznej i przesunięto przez tętnicę szyjną wewnętrzną. Podczas procedury proksymalne tętnice szyjne zostały albo podwiązane (tętnica szyjna zewnętrzna), albo przejściowo zamknięte (tętnica skrzydłowopodniebna i tętnica szyjna wspólna). B. Przedstawiono reprezentatywny mózg po barwieniu żelatynowym z atramentem. Perfuzja przezsercowa roztworem żelatyny z atramentem została przeprowadzona 60 min po wystąpieniu niedokrwienia, bez reperfuzji. Prawidłowo perfundowany mózg został zabarwiony żelatyną z atramentem i pojawił się jako szary z czarnymi naczyniami, podczas gdy obszar niedokrwienny (nieperfundowany) pozostał niezabarwiony (kolor różowy). Pokazano współrzędne czaszkowe dla rozmieszczenia dwóch sond LD. Sonda 1 = -1 mm od bregma, 5 mm od linii środkowej; Sonda 2 = +2 mm od bregma, 2 mm od linii środkowej. 
<img src="/files/ftp_upload/50214/50214fig2.jpg" alt="Wykres analizy przepływu; efekt okluzji tętnicy mózgowej na przepływ krwi z użyciem sond, czas vs. P.U." fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50214/50214fig2highres.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2. Rejestracja hemodynamiki mózgowej z użyciem wielomiejscowych sond Laser Doppler. Przedstawiono typowy wzorzec hemodynamiczny sugerujący funkcjonalnie czynne krążenie oboczne wewnątrzczaszkowe w warunkach niedokrwiennych. U tego zwierzęcia zapisy LD wykazały mniejszy deficyt perfuzji w kanale Sondy 2 w porównaniu z kanałem Sondy 1, zarówno podczas okluzji CCA, jak i okluzji MCA. MCA-O=okluzja tętnicy środkowej mózgu. CCA-O=okluzja wspólnej tętnicy szyjnej. P.U.= jednostki perfuzji. 
<img src="/files/ftp_upload/50214/50214fig3.jpg" alt="Porównanie histologicznych przekrojów mózgu, seria obrazów mikroskopowych z zaznaczonymi obszarami segmentacji do analizy." fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50214/50214fig3highres.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3. Reprezentatywne przekroje mózgu do obliczenia objętości zawału. Histologiczne przekroje wieńcowate (50 μm; n = 19 w odstępach 250 μm; bregma od +2,5 mm do −3,0 mm) utrwalono w 4% paraformaldehydzie i zabarwiono 0,1% fioletem krezylu. Objętość zawału obliczono za pomocą oprogramowania do przetwarzania obrazów ImageJ, z korektą o asymetrie międzyhemisferyczne wynikające z obrzęku mózgu, i wyrażono w mm3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50214/50214fig3large.jpg" target="_blank"> Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną rycinę</a>
<img src="/files/ftp_upload/50214/50214fig4.jpg" alt="Wyniki barwienia tkanki mózgowej: fiolet krezylowy, MAP-2, HSP-70; porównanie histologiczne, mikroskopia." fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50214/50214fig4highres.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 4"> 
Rysunek 4. Immunobarwienie molekularnych markerów utraty neuronów i penumbry. Przedstawiono reprezentatywne, następujące po sobie przekroje mózgu, które zostały zabarwione fioletem krezylowym 0,1% (A) lub poddane immunobarwieniu markerami utraty neuronów (białko związane z mikrotubulami 2, MAP2; B) oraz penumbry niedokrwiennej (białko szoku cieplnego 70, Hsp70; C).

Wykazano, że monitorowanie perfuzji mózgowej poprawia dokładność modeli udaru niedokrwiennego. Trudności techniczne często ograniczają wykorzystanie tego niezbędnego narzędzia do badań naczyń mózgowych. W tym filmie pokazano zoptymalizowany system do uzyskania jedno- lub wielomiejscowego monitorowania hemodynamicznego podczas śródświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu u szczurów.

Zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura wewnątrzświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Monitorowanie perfuzji mózgowej jest bardzo ważne dla zwiększenia dokładności i zmniejszenia zmienności w eksperymentalnych modelach udaru. Technologia laserowego Dopplera może z łatwością wykryć perfuzję mikronaczyniową mózgu przez nienaruszoną czaszkę myszy i szczurów, szczególnie jeśli używasz sondy o głębokiej penetracji. Kluczowym problemem jest tutaj znalezienie niezawodnego systemu mocowania laserowej sondy dopplerowskiej do współrzędnych czaszki podczas zabiegu chirurgicznego.W tym filmie pokażemy Ci nasz autorski system. Możemy być używane do jednomiejscowego i wieloośrodkowego monitorowania hemodynamiki mózgu. Model skoku zębatki pokazany na tym filmie uzyskuje się poprzez wprowadzenie żarnika międzyświetlnego do tętnicy szyjnej zewnętrznej.Włókno jest następnie przesuwane przez tętnicę szyjną wewnętrzną w celu zamknięcia początku tętnicy środkowej, powodując przejściowe ogniskowe niedokrwienie cewki. Więcej informacji na temat procedury można znaleźć pod poniższym linkiem. Współrzędne czaszki do monitorowania w jednym miejscu w wielu miejscach zostały wybrane po wstępnych eksperymentach z perfuzją tuszu żelatynowego, które wyraźnie wyznaczyły obszar hiperperfuzji podczas niedrożności tętnicy śródkomórkowej do monitorowania w jednym miejscu.Laserowa sonda dopplerowska pierwsza jest umieszczana w centralnym obszarze zaopatrywanym przez środkową tętnicę środkową w celu monitorowania w wielu miejscach. Laserowa sonda dopplerowska nr 2 umieszcza się na granicach obwodowych na terytorium między środkową a przednią tętnicą mózgową. Aby zbadać międzyczaszkowy przepływ poboczny, rozmieszczenie laserowych sond dopplerowskich może być zróżnicowane w zależności od potrzeb eksperymentalnych każdego badacza.Wymagane materiały to kauczuk naturalny, małe rurki z tworzywa sztucznego i metalowy stylik. Uchwyt na prope można dostosować do wielkości zwierzęcia, liczby i wielkości laserowych sond dopplerowskich oraz obszaru naczyniowego sobola, który należy monitorować. Zaznacz położenie sond i kopca hamulca.Kauczuk naturalny zgodnie z pożądanymi współrzędnymi stereotaktycznymi dla niedrożności tętnicy środkowej ceal, typowe współrzędne dla rdzenia niedokrwiennego są oczekiwane przy Bgma minus jeden milimetr, pięć milimetrów w bok od linii środkowej. W przypadku peryferyjnego terytorium niedokrwiennej strefy granicznej oczekiwane współrzędne można ustawić na bgma plus dwa milimetry, dwa milimetry w bok od linii środkowej. Zaznacz bardzo wyraźnie pozycję bgma za pomocą X.Jest to punkt orientacyjny do mocowania uchwytu rekwizytu do czaszki.Włóż sztyft do małej plastikowej rurki. Jego rozmiar musi być dopasowany do rozmiaru sondy. Włóż trzpień pomiarowy do kauczuku naturalnego w miejscu, w którym sonda ma być umieszczona.Wciśnij styl w gumę, aż plastikowa rurka również zostanie włożona do gumy. Wycofaj styl, jeśli potrzebnych jest wiele sond. Powtórz te same kroki dla innych pozycji sondy, aby upewnić się, że sondy pozostają stabilne.Szybka taśma wokół plastikowych rurek, pojedyncze uchwyty na podpory uzyskuje się zgodnie z tą samą procedurą tylko z jedną rurką. Sterylizacja chemiczna kilku uchwytów na rekwizyty może być przeprowadzona do wykorzystania w przyszłości. Delikatnie ogol głowę szczura, nałóż beta dziesięciocentówkę na gazik i zdezynfekuj skórę.Szczura należy umieścić w pozycji balu maturalnego na stole operacyjnym w znieczuleniu chlorowym ISO, podawać lidokainę 2% pięć miligramów na kilogram podskórnie w okolicy czaszki. Wykonaj prawe przyśrodkowe nacięcie skóry w celu niedrożności prawej tętnicy celowej i rozetnij tkankę podskórną, aby dotrzeć do powięzi czaszki. Wykonaj prawe nacięcie przyśrodkowe w powięzi czaszkowej i wykonaj rozwarstwienie.Aby dotrzeć do kości umiejętności, przygotuj obszar umiejętności, który jest wystarczająco duży, aby można było zastosować uchwyt sondy. Należy pamiętać, że nie ma potrzeby wiercenia ani rozrzedzania kości, stosując mi broman w celu dezynfekcji i osuszenia powierzchni czaszki. Użyj suszarki do włosów na zimne powietrze, aby przyspieszyć suszenie powierzchni czaszki.W tym momencie szwy czaszkowe i bgma są wyraźnie widoczne. Dostosuj uchwyt sondy, przycinając krawędzie sterylnymi nożyczkami. Nałóż niewielką ilość kleju chirurgicznego cyjanoakrylowego zatwierdzonego przez weterynarza na powierzchnię pod uchwytem sondy, ostrożnie, unikając dolnego otworu plastikowych rurek.Należy pamiętać, że jeśli między powierzchnią optyczną sondy a umiejętnością pozostanie znaczna ilość kleju, może to spowodować słaby sygnał i uszkodzenie sondy. Z wieloma zastosowaniami. Przyłóż uchwyt sondy do powierzchni umiejętności, ostrożnie dopasowując BMA do miny lądowej S.Delikatnie dociśnij uchwyt podpory. Użyj suszarki do włosów na zimne powietrze, aby przyspieszyć suszenie kleju chirurgicznego. Zabezpiecz uchwyt prope, zawiązując nić chirurgiczną wokół uchwytu prope i głowy zwierzęcia.Uważaj, aby umieścić nić chirurgiczną nad żuchwą, omijając obszar podżuchwowy i szyję. Napełnij plastikowe rurki uchwytu sondy żelem optycznym. Na przykład zwykły żel do ultradźwięków.Poprawi to jakość sygnału laserowego dopplera. Umieść podpory w uchwycie sondy i sprawdź rzeczywisty odczyt laserowego przepływomierza dopplerowskiego. Zabezpiecz sondy, zawiązując je wokół głowy zwierzęcia.Uważaj, aby umieścić nić chirurgiczną nad żuchwą, omijając obszar podżuchwowy i wielomiejscowy system do perfuzji CBR Monitorowanie jest teraz zakończone Umieść szczury w pozycji zasilającej, ostrożnie, unikając sił trakcyjnych działających na sondy lub uchwyt rekwizytu. Rozpocznij monitorowanie obfitości podczas zabiegu chirurgicznego w celu niedrożności tętnicy środkowej odcinka środkowego, gdy włókno wewnątrznaczyniowe dotrze do początku tętnicy środkowej cewki. Spadek perfuzji jelita jest widoczny podczas laserowego monitorowania dopplerowskiego.Jeśli stosuje się sondy wielorakie, można zaobserwować różne zmiany w obfitości cewów w zależności od ich terytorium tętniczego. Te reprezentatywne ślady perfuzji pokazują, w jaki sposób można badać hemodynamikę celebralną za pomocą wielomiejscowych laserowych sond dopplerowskich. Niewielki deficyt perfuzji występuje w sondzie dwukanałowej w porównaniu do sondy jednokanałowej zarówno podczas niedrożności tętnicy szyjnej zwykłej, jak i niedrożności tętnicy środkowej śliwki.Ten wzorzec hemodynamiczny sugeruje funkcjonalnie aktywne zabezpieczenia międzyczaszkowe w warunkach niedokrwiennych. Objętość zawału oblicza się na 19 kolejnych odcinkach koronalnych utrwalonych w 4% perfor, MAGA i wybarwionych pre violet oh 0,1% skorygowanych o asymetrie międzypółkulowe spowodowane obrzękiem mózgu i wyrażonych w milimetrach sześciennych. Barwienie immunologiczne molekularnych markerów utraty neuronów i niedokrwiennego półcienia, takich jak białko związane z mikrojajowodami dwa i białko szoku cieplnego 70, można badać w odniesieniu do wielomiejscowego monitorowania hemodynamicznego krążenia międzyczaszkowego.Zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji nadającej się do sprzedaży, pokazany w tym filmie, może zapewnić łatwy i skuteczny sposób badania nadających się do sprzedaży zmian hemodynamicznych w eksperymentalnym polu udaru, prowadząc do opracowania nowej generacji ubocznych środków terapeutycznych celebral. Dziękuję za uwagę i życzę powodzenia w eksperymentach.

optimized-system-for-cerebral-perfusion-monitoring-rat-stroke-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Zoptymalizowany system monitorowania perfuzji mózgu w szczurzym modelu udarów mózgu z okluzją intraluminalną środkowego tętnika mózgu

Chirurgiczne wywołanie niedokrwiennego uszkodzenia mózgu u szczura jest powszechnie stosowanym modelem w badaniach nad udarem. W niniejszej pracy demonstrujemy indukcję ogniskowego niedokrwienia mózgu poprzez zamknięcie tętnicy środkowej mózgu. Przedstawiono również wizualizację powstałego zawału za pomocą barwienia histologicznego oraz obrazowania rezonansem magnetycznym.

Model ogniskowego niedokrwienia mózgu poprzez endowaskularną okluzję tętnicy środkowej mózgu u szczura za pomocą szwu

Model intraluminalnego zamknięcia tętnicy środkowej mózgu (MCAO) jest najczęściej stosowanym modelem wśród eksperymentalnych modeli udaru niedokrwiennego. W niniejszym materiale szczegółowo zaprezentujemy cały model z wykorzystaniem laserowej flowmetrii dopplerowskiej oraz przedstawimy reprezentatywne wyniki.

Model wewnątrznaczyniowego zamknięcia tętnicy środkowej mózgu (MCAO) w udarze niedokrwiennym u myszy z prowadzeniem za pomocą laserowej dopplerometrii przepływu

Źródło: Larpthaveesarp, A., et. al. Przemijający model niedrożności tętnicy środkowej mózgu udaru noworodka u szczurów P10. J. Vis. Exp. (2017)Ten film pokazuje ustanowienie modelu niedrożności tętnicy środkowej mózgu u szczeniaka szczura. Tętnica szyjna wewnętrzna (ICA) jest odsłonięta, a ligatura jest zabezpieczona, aby ograniczyć napływ krwi. Okluda jest wprowadzana przez ICA, aby dotrzeć do tętnicy środkowej mózgu. Szczenię może następnie dojść do siebie przed dalszą analizą.

Generowanie niedrożności tętnicy środkowej mózgu u szczeniaka szczura w celu wywołania lokalnego niedokrwienia mózgu

Ogólnym celem tej procedury jest dostarczenie wysoce powtarzalnej techniki oceny in vivo naruszenia bariery krew-mózg w szczurzych modelach udaru niedokrwiennego.

Ocena in vivo przerwania bariery krew-mózg w szczurzym modelu udaru niedokrwiennego

Ten protokół opisuje nowatorską technikę pomiaru trzech najważniejszych parametrów niedokrwiennego uszkodzenia mózgu na tym samym zestawie próbek mózgu gryzoni. Wykorzystanie tylko jednej próbki mózgu jest bardzo korzystne pod względem kosztów etycznych i ekonomicznych.

Pomiar obrzęku mózgu po udarze, strefy zawału i uszkodzenia bariery krew-mózg w jednym zestawie próbek mózgu gryzoni

Ciągły zapis ciśnienia tętniczego krwi pozwala na badanie wpływu różnych parametrów hemodynamicznych. W niniejszym raporcie przedstawiono zastosowanie ciągłego monitorowania ciśnienia tętniczego krwi w dużym zwierzęcym modelu udaru niedokrwiennego w celu określenia patofizjologii udaru, wpływu różnych czynników hemodynamicznych oraz oceny nowych podejść do leczenia.

Monitorowanie i modulacja ciśnienia krwi w czasie rzeczywistym w króliczym modelu udaru niedokrwiennego

Ten protokół opisuje model przejściowego ogniskowego niedokrwienia mózgu u myszy poprzez śródświetlne zamknięcie środkowej tętnicy mózgowej. Dodatkowo przedstawiono przykłady oceny wyników z wykorzystaniem rezonansu magnetycznego i testów behawioralnych.

Przejściowy model niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Ten protokół przedstawia przewodnik krok po kroku dla badaczy, jak przeprowadzić procedurę zamknięcia tętnicy środkowej mózgu na myszach przy użyciu zmodyfikowanej metody Longa tętnicy szyjnej zewnętrznej. Modyfikacje przedstawione w artykule mają na celu zwiększenie dokładności niedrożności tętnicy środkowej mózgu i zapewnienie pełnej reperfuzji.

Optymalizacja metody zamykania tętnic środkowych Longa w celu uzyskania pełnej reperfuzji

Pokazano tutaj minimalnie inwazyjną procedurę chirurgiczną, która polega na umieszczeniu laserowej sondy dopplerowskiej na czaszce nad dystalnym obszarem środkowej tętnicy mózgowej (MCA), miejscem okołooczodołowym odpowiednim dla szczurów i myszy, w celu oceny przepływu krwi podczas przejściowej okluzji MCA.

Okołooczodołowe umieszczenie laserowej sondy dopplerowskiej do monitorowania przepływu krwi w mózgu przed niedrożnością tętnicy środkowej mózgu w modelach gryzoni

Ten protokół opisuje proces przygotowania do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu przez tętnicę szyjną wspólną.

Zmodyfikowany model preparatu do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Poznaj zoptymalizowany system monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura z zastosowaniem technologii laserowej dopplerowskiej. Ta metoda umożliwia wielopunktowe badanie hemodynamiki w warunkach niedokrwienia.

Zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura wewnątrzświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu (Wideo) | JoVE Journal

Zoptymalizowany system do monitorowania perfuzji mózgowej w modelu udaru szczura wewnątrzświetlnej niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Przeglądaj więcej filmów