Name: Mysi model przewlekłego nadciśnienia ocznego indukowany laserem w celu scharakteryzowania wad wzroku (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Poznaj metodę indukcji przewlekłego nadciśnienia ocznego u myszy za pomocą fotokoagulacji laserowej. Monitoruj ciśnienie wewnątrzgałkowe i ostrość wzroku w czasie, aby badać wpływ nadciśnienia na funkcje wzrokowe.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Praca zawarta w tym artykule została wsparta przez Dr. Douglas H. Johnson Award for Glaucoma Research od American Health Assistance Foundation (XL), William & Mary Greve Special Scholar Award od Research to Prevent Blindness (XL), Illinois Society for the Prevention of Blindness (HC) oraz grant NIH R01EY019034 (XL).

Procedury
myszy C57BL/6J (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) są hodowane w Ośrodku Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Northwestern. Wszystkie zwierzęta są wykorzystywane zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Northwestern University Institutional Animal Care and Use Committee i są zgodne z wytycznymi NIH dotyczącymi wykorzystywania zwierząt w badaniach neurologicznych.
1. Fotokoagulacja laserowa
Procedura fotokoagulacji laserowej jest zmodyfikowana w stosunku do wcześniej opublikowanych protokołów 5-7.
<ol>
	<li>Znieczulenie 40-60-dniowej myszy przez dootrzewnowe wstrzyknięcie ketaminy (100 mg / kg, Butler Schein Animal Health, OH) i ksylazyny (10 mg / kg, Lloyd Inc. z Iowa, Shenandoah, IA).</li>
	<li>Rozszerz źrenicę prawego oka zwierzęcia doświadczalnego poprzez miejscowe leczenie jedną lub dwiema kroplami 1% roztworu siarczanu atropiny (Alcon Labs, Inc., Fort Worth, TX).</li>
	<li>Po rozszerzeniu źrenic spłaszcz przednią komorę, aby zwiększyć indukcję lasera 6. Włóż szklaną mikropipetę z ostrą końcówką (World Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) do przedniej przestrzeni pod lampą szczelinową (SL-3E, Topcon, Oakland, NJ), aby spuścić płyn z przedniej komory.</li>
	<li>Utrzymaj mysz w plastikowym uchwycie na stożek (Braintree Sci Inc., MA) i przywiąż do domowej roboty platformy (patrz rysunek 1A). Trzymaj mysz z ogranicznikiem i wystawia prawe oko myszy na źródło światła za lampą szczelinową. Ustaw prawe oko znieczulonej myszy pod lampą szczelinową.</li>
	<li>Trzymając obiema rękami ogranicznik myszy, nałóż oświetlenie laserowe na rąbek rogówki za pomocą lasera argonowego (Ultima 2000SE, Coherent, Santa Clara, CA). Dostarczyć około 80-100 plamek laserowych (514 nm, 100 mW, impuls 50 ms i plamka 200 μm) prostopadle do obwodu siatki beleczkowej. Myszy C57BL/6 mają pigmentowaną tęczówkę, która służy jako bariera dla potencjalnej zabłąkanej energii 7.</li>
	<li>Wkraplanie miejscowe 0,5% moksyfloksacyny (Alcon Labs, Inc., Fort Worth, TX) na powierzchnię oka w celu dezynfekcji obszaru poddanego zabiegowi laserowemu oraz 0,5% proparakainy (Bausch & Lomb, Rochester, NY) w celu złagodzenia bólu.</li>
	<li>Trzymaj zwierzę na poduszce grzewczej (Sunbeam Products Inc, Boca Raton, FL) w celu regeneracji przez około godzinę, aż w pełni się obudzi.</li>
	<li>Lewe oko nie jest traktowane jako kontrola.</li>
</ol>
2. Pomiary IOP
<ol>
	<li>Umieść obudzoną mysz w tubie, aby załadować ją do plastikowego uchwytu stożka, a następnie przymocuj ją do platformy (patrz Rysunek 2A).</li>
	<li>Odczekaj od pięciu do dziesięciu minut, aby mysz przystosowała się do pozycji uchwytu. Zbliż tonometr odbicia (TonoLab, Colonial Medical Supply, Franconia, NH) do oka myszy, aż końcówka sondy znajdzie się w odległości 2-3 mm od powierzchni rogówki 14.</li>
	<li>Naciśnij przycisk pomiaru, aby końcówka sondy delikatnie uderzyła w środkową powierzchnię rogówki. Trzy kolejne zestawy sześciu pomiarów ciśnienia wewnątrzgałkowego tego samego oka są uzyskiwane i uśredniane jako ciśnienie wewnątrzgałkowe oka. Nieleczone oko kontrolne jest zawsze mierzone jako pierwsze, aby uzyskać odczyt wyjściowy dla oka leczonego laserowo, które jest mierzone jako następne.</li>
</ol>
3. Test optomotoryczny
Ostrość wzroku i wrażliwość na kontrast są testowane 14,15 . Dwoje oczu poszczególnych myszy jest badanych oddzielnie poprzez odwrócenie kierunku dryfującej siatki; tj. krata dryfująca zgodnie z ruchem wskazówek zegara służy do identyfikacji funkcji wzrokowej lewego oka, a krata dryfująca w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara dla prawego oka 16. Każdy test trwa około 15 minut i jest powtarzany przez dwóch obserwatorów niezależnie.
<ol>
	<li>Umieść mysz i pozwól jej swobodnie poruszać się po podwyższonej platformie otoczonej czterema monitorami komputerowymi (Rysunek 3A-B).</li>
	<li>Ustaw monitory tak, aby wyświetlały poziomo dryfujące siatki sinusoidalne jako bodźce wizualne o średniej luminancji 39 cd/m2. Kierunek ruchu kraty powinien zmieniać się kolejno zgodnie z ruchem wskazówek zegara i przeciwnie do ruchu wskazówek zegara.</li>
	<li>Analizuj ruchy zwierzęcia. Ruchy zwierzęcia w zgodzie z dryfującymi kratami są uważane za "pozytywne" w ciągu 15 sekund po włączeniu bodźca wzrokowego, a następnie stopniowo zwiększane. Najwyższy bodziec wzrokowy wywołujący reakcję definiuje się jako ostrość wzroku zwierzęcia 17.</li>
	<li>Zbadaj czułość kontrastu przy trzech wstępnie wybranych częstotliwościach przestrzennych: 0,075, 0,16 i 0,3 cykli na stopień (cpd). Próg kontrastu dla każdego oka jest definiowany jako najniższy kontrast, który wywołuje reakcje wzrokowe przy wcześniej ustalonej częstotliwości. Czułość kontrastu jest odwrotnością progu 17.</li>
</ol>

<ol><li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glaucoma+as+a+neurodegenerative+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Glaucoma as a neurodegenerative disease.</a> Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).</li>
<li>Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+death+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Neuronal death in glaucoma.</a> Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).</li>
<li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88, 816-824 (2009).</li>
<li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Glaucoma%22%5BJournal%5D)">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> J. Glaucoma. 16, 483-505 (2007).</li>
<li>Levkovitch-Verbin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translimbal+laser+photocoagulation+to+the+trabecular+meshwork+as+a+model+of+glaucoma+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Translimbal laser photocoagulation to the trabecular meshwork as a model of glaucoma in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43, 402-410 (2002).</li>
<li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+mouse+ocular+hypertension%3A+establishment+of+the+model%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Experimental mouse ocular hypertension: establishment of the model.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44, 4314-4320 (2003).</li>
<li>Grozdanic, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 44, 4337-4346 (2003).</li>
<li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+microbead+occlusion+model%3A+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 51, 207-216 (2010).</li>
<li>Ding, C., Wang, P., Tian, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+general+anesthetics+on+IOP+in+elevated+IOP+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of general anesthetics on IOP in elevated IOP mouse model.</a> Experimental Eye Research. 92, 512-520 (2011).</li>
<li>Kalesnykas, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+morphology+after+optic+nerve+crush+and+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell morphology after optic nerve crush and experimental glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53, 3847-3857 (2012).</li>
<li>Shareef, S. R., Garcia-Valenzuela, E., Salierno, A., Walsh, J., Sharma, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+ocular+hypertension+following+episcleral+venous+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Chronic ocular hypertension following episcleral venous occlusion in rats.</a> Experimental Eye Research. 61, 379-382 (1995).</li>
<li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> J. Vis. Exp. (10), e549(2007).</li>
<li>Fu, C. T., Sretavan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+ocular+hypertension+in+albino+CD-1+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Laser-induced ocular hypertension in albino CD-1 mice.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51, 980-990 (2010).</li>
<li>Rangarajan, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+visual+deficits+in+aging+DBA%2F2J+mice+by+two+behavioral+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Detection of visual deficits in aging DBA/2J mice by two behavioral assays.</a> Curr. Eye Res. 36, 481-491 (2011).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direction-specific+disruption+of+subcortical+visual+behavior+and+receptive+fields+in+mice+lacking+the+beta2+subunit+of+nicotinic+acetylcholine+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Direction-specific disruption of subcortical visual behavior and receptive fields in mice lacking the beta2 subunit of nicotinic acetylcholine receptor.</a> J. Neurosci. 29, 12909-12918 (2009).</li>
<li>Douglas, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+visual+threshold+measurements+in+the+two+eyes+of+freely+moving+rats+and+mice+using+a+virtual-reality+optokinetic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Independent visual threshold measurements in the two eyes of freely moving rats and mice using a virtual-reality optokinetic system.</a> Visual Neuroscience. 22, 677-684 (2005).</li>
<li>Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+quantification+of+adult+and+developing+mouse+spatial+vision+using+a+virtual+optomotor+system%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45, 4611-4616 (2004).</li>
<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64, 85-96 (1997).</li>
<li>Cone, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+anesthesia%2C+mouse+strain+and+age+on+intraocular+pressure+and+an+improved+murine+model+of+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of anesthesia, mouse strain and age on intraocular pressure and an improved murine model of experimental glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 99, 27-35 (2012).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain-derived+neurotrophic+factor+and+TrkB+modulate+visual+experience-dependent+refinement+of+neuronal+pathways+in+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Brain-derived neurotrophic factor and TrkB modulate visual experience-dependent refinement of neuronal pathways in retina.</a> J. Neurosci. 27, 7256-7267 (2007).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+neonatal+development+of+retinal+ganglion+cell+dendrites+by+neurotrophin-3+overexpression%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Regulation of neonatal development of retinal ganglion cell dendrites by neurotrophin-3 overexpression.</a> The Journal of Comparative Neurology. 514, 449-458 (2009).</li>
<li>Sun, W., Li, N., He, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+morphological+survey+of+mouse+retinal+ganglion+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells.</a> The Journal of Comparative Neurology. 451, 115-126 (2002).</li>
<li>Feng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+Ocular+Hypertension+Induces+Dendritic+Degeneration+of+Mouse+Retinal+Ganglion+Cells+that+Depends+on+Cell-type+and+Location%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Sustained Ocular Hypertension Induces Dendritic Degeneration of Mouse Retinal Ganglion Cells that Depends on Cell-type and Location.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. , (2013).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.
	Autorzy są pełnoetatowymi pracownikami Northwestern University.
	Autorzy NIE otrzymali ŻADNEGO dofinansowania, które zostało udzielone przez firmy produkujące odczynniki i przyrządy użyte w tym artykule.

Poinformowaliśmy powyżej, że utrzymujące się nadciśnienie oczne może być wywołane przez oświetlenie laserowe w oczach myszy. W porównaniu z modelem wstrzykiwania soli fizjologicznej 18 i kauteryzacją żył model 11 , które wymagają rozległych umiejętności mikrochirurgicznych, oświetlenie laserowe jest stosunkowo proste i łatwe do wykonania. Zazwyczaj możemy wykonać oświetlenie laserowe dla 4-6 myszy w ciągu 2-3 godzin. Krytycznymi krokami do osiągnięcia trwałego podniesienia ciśnienia wewnątrzgałkoweg...

<table><tbody><tr><td colspan="4"><silny>odczynnik</td></tr><tr><td>moksyfloksacyna</td><td>Alcon Labs, Inc.</td><td>NDC 0065-4013-03</td><td>0,5 %, tylko Rx</td></tr><tr><td>Chlorowodorek proparakainy</td><td>Bausch Lomb</td><td>NDC 24208-730-06</td><td>0,5 %, tylko Rx</td></tr><tr><td>Roztwór okulistyczny USP</td><td>Bausch Lomb</td><td>NDC 24208-730-06,5</td>%, tylko <td></td></tr><tr><td>Rx ketamina</td><td>Butler Schein Animal Health</td><td>NDC 11695-0550-1</td><td>100 mg / kg </td></tr><tr><td>ksylazyna</td><td>LLOYD Inc. z Iowa</td><td>NADA 139-236</td><td>10 mg / kg </td></tr><tr><td>roztwór siarczanu atropiny</td><td>Alcon Labs, Inc.</td><td>NDC 61314-303-02</td><td>1 %, tylko</td></tr><tr> Rx<td colspan="4">Equipment </td></tr><tr><td>Slit Lamp, TOPCON </td><td>Visual Systems Inc</td><td>SL-3E</td><td>powered by PS-30A</td></tr><tr><td>OptoMotry 1.8.0 virtual</td><td>CerebralMechanics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>opto-kinetyczny system testowania</td><td>CerebralMechanics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tonometr, TonoLab, dla myszy</td><td>Colonial Medical Supply</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Poduszka grzewcza</td><td>Sunbeam Products Inc</td><td>722-810</td><td></td></tr><tr><td>Laser argonowy </td><td>Coherent Inc</td><td>Ultima 2000SE</td><td></td></tr><tr><td>DECAPICONE Plastikowy uchwyt stożka </td><td>Braintree Sci Inc.</td><td>MDC-200</td><td>do myszy</td></tr></tbody></table>

mysi model przewlekłego nadciśnienia ocznego indukowany laserem w celu scharakteryzowania wad wzroku

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Jaskra, często związana z podwyższonym ciśnieniem wewnątrzgałkowym (IOP), jest jedną z głównych przyczyn ślepoty. Staraliśmy się ustalić mysi model nadciśnienia ocznego, aby naśladować ludzką jaskrę wysokiego ciśnienia. W tym przypadku oświetlenie laserowe jest stosowane do rąbka rogówki w celu fotokoagulacji odpływu wodnego, wywołując zamknięcie kąta. Zmiany ciśnienia wewnątrzgałkowego są monitorowane za pomocą tonometru odbicia przed i po zabiegu laserowym. Optomotoryczny test behawioralny służy do pomiaru odpowiednich zmian w zdolności widzenia. Pokazano reprezentatywny wynik dla jednej myszy, u której rozwinął się trwały wzrost ciśnienia wewnątrzgałkowego po oświetleniu laserowym. U tej myszy z nadciśnieniem ocznym obserwuje się obniżoną ostrość wzroku i wrażliwość na kontrast. Razem nasze badanie wprowadza cenny system modelowy do badania zwyrodnienia neuronów i leżących u jego podstaw mechanizmów molekularnych u myszy z jaskrą.

Zgodnie z opisem w procedurach, iluminacja laserowa jest skierowana na siateczkę pręgowatą w obszarze limbalnym w celu fotokoagulacji odpływu cieczy wodnistej, co indukuje zamknięcie kąta oka (Rysunek 1). W większości oczu poddanych laseroterapii nie stwierdzono istotnych uszkodzeń fizycznych, odwarstwienia pigmentu ani infekcji, co jest zgodne z wcześniejszymi ustaleniami 6. W przypadku niewielkiej grupy myszy (mniej niż 5% wszystkich zwierząt poddanych laseroterapii), u których wystąpiły fiz...

Przewlekłe nadciśnienie oczne jest wywoływane za pomocą laserowej fotokoagulacji siatki beleczkowej w oczach myszy. Ciśnienie wewnątrzgałkowe (IOP) utrzymuje się podwyższone przez kilka miesięcy po leczeniu laserowym. Spadek ostrości wzroku i wrażliwości na kontrast u zwierząt doświadczalnych monitoruje się za pomocą testu optomotorycznego.

Mysi model przewlekłego nadciśnienia ocznego indukowany laserem w celu scharakteryzowania wad wzroku

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Ogólnym celem tej procedury jest wywołanie przewlekłego nadciśnienia wewnątrzgałkowego u myszy za pomocą fotokoagulacji laserowej siateczki beleczkowej. Po znieczuleniu myszy rozszerza się źrenicę w docelowych oczach, a następnie spłaszcza przednią komorę. Drugim krokiem jest wywołanie nadciśnienia wewnątrzgałkowego poprzez skierowanie wiązki lasera prostopadle do powierzchni, wzdłuż obwodu siateczki beleczkowej.Następnie, za pomocą tonometru monitorowane jest ciśnienie wewnątrzgałkowe u myszy w czasie. Ostatnim krokiem jest przeprowadzenie testów automatycznych w celu wykazania zmian w ostrości widzenia. W rezultacie można monitorować w czasie wady wzroku spowodowane nadciśnieniem.Po uzyskaniu zatwierdzonego protokołu I-A-C-U-C, znieczuli mysz szczepu C 57 black six w wieku od 40 do 60 dni poprzez podanie dootrzewnowe ketaminy i ksylazyny. Następnie ostrożnie nanieście maść do oczu na lewe oko kontrolne, a następnie rozszerzcie źrenicę prawego oka poprzez miejscowe podanie jednej lub dwóch kropli 1% roztworu siarczanu atropiny. Po pełnym rozszerzeniu źrenicy wprowadźcie ostrą szklaną mikropipetę do przestrzeni przedniej oka, aby odprowadzić płyn z komory przedniej.Doprowadzi to do

a-laser-induced-mouse-model-chronic-ocular-hypertension-to

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Model myszy z przewlekłym nadciśnieniem oka indukowany laserem do scharakteryzowania wad wzroku

Jaskra jest jedną z głównych przyczyn ślepoty na świecie. Podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe stanowi główny czynnik ryzyka. Hipertonia oczna indukowana laserową fotokoagulacją jest jednym z dobrze ugruntowanych modeli zwierzęcych. Niniejszy film demonstruje, jak indukować hipertonię oczną za pomocą fotokoagulacji laserem argonowym u szczura.

Model przewlekłego nadciśnienia wewnątrzgałkowego indukowanego laserem u szczurów SD

Źródło: Lani-Louzada, R.,  i wsp., Kauteryzacja pełnego koła rąbkowego splotu naczyniowego w przypadku chirurgicznie wywołanej jaskry u gryzoni. J. Vis. Exp. (2022)Ten film pokazuje indukcję i monitorowanie podwyższonego ciśnienia wewnątrzgałkowego (IOP) w modelu szczurzym. Proces ten polega na kauteryzacji rąbkowych naczyń krwionośnych, co skutkuje niedrożnością naczyń i podwyższonym ciśnieniem wewnątrzgałkowym. Szczur może następnie wyzdrowieć, a ciśnienie wewnątrzgałkowe jest regularnie...

 Indukcja podwyższonego ciśnienia wewnątrzgałkowego w modelu szczurzym

Tutaj prezentujemy protokół neowaskularyzacji naczyniówki indukowanej laserem myszy (CNV), eksperymentalny model, który odtwarza naczyniowe cechy neowaskularnego zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem (AMD). Po opanowaniu może niezawodnie i skutecznie indukować CNV jako system modelowy do testowania różnych środków eksperymentalnych.

Mysi model do neowaskularyzacji naczyniówkowej indukowanej laserem

Tutaj prezentujemy protokół indukcji nadciśnienia ocznego w mysim oku, który powoduje utratę komórek zwojowych siatkówki, co obserwuje się w jaskrze. Mikrogranulki magnetyczne są wstrzykiwane do przedniej komory i przyciągane do kąta tęczówkowo-rogówkowego za pomocą magnesu, aby zablokować odpływ cieczy wodnistej.

Magnetyczny model okluzji mikrokulek do wywoływania jaskry zależnej od nadciśnienia ocznego u myszy

Tutaj prezentujemy przydatność podłużnego obrazowania in vivo w obserwacji zmian morfologicznych wywołanej laserem neowaskularyzacji naczyniówkowej u myszy.

In vivo (in vivo) Multimodalne obrazowanie i analiza mysiego modelu neowaskularyzacji naczyniówki indukowanej laserem

Przewlekłe nadciśnienie oczne jest wywoływane przez zastosowanie szwu okołokończynowego u szczurów i myszy, co prowadzi do funkcjonalnego i strukturalnego pogorszenia komórek zwojowych siatkówki zgodnego z jaskrą.

Model jaskry indukowanej szwem okołolimbowym u szczurów i myszy

Tutaj opisujemy użycie optycznej koherentnej tomografii spektralnej (SD-OCT) do wizualizacji struktur siatkówki i oka in vivo w modelach zwyrodnienia siatkówki, jaskry, retinopatii cukrzycowej i krótkowzroczności.

Strukturalne oceny in vivo chorób oczu w modelach gryzoni przy użyciu optycznej koherentnej tomografii

Tutaj opisujemy zoptymalizowany protokół do zamykania żył siatkówki za pomocą róży bengalskiej i sterowanego laserowo systemu obrazowania siatkówki z zaleceniami maksymalizacji jego odtwarzalności w genetycznie modyfikowanych szczepach.

Optymalizacja mysiego modelu niedrożności żyły siatkówki w celu ograniczenia zmienności

Tutaj opisujemy technikę obrazowania in vivo wykorzystującą optyczną koherentną tomografię ułatwiającą diagnozę i ilościowy pomiar retinopatii u myszy.

Zastosowanie optycznej koherentnej tomografii do mysiego modelu retinopatii

Celem tego protokołu jest scharakteryzowanie nowego modelu neurodegeneracji jaskry opartej na 360° termicznej kauteryzacji rąbkowego splotu naczyniowego, wywołującej podostre nadciśnienie oczne.

Kauteryzacja pełnego koła rąbka splotu naczyniowego w przypadku jaskry wywołanej chirurgicznie u gryzoni

Poznaj metodę indukcji przewlekłego nadciśnienia ocznego u myszy za pomocą fotokoagulacji laserowej. Monitoruj ciśnienie wewnątrzgałkowe i ostrość wzroku w czasie, aby badać wpływ nadciśnienia na funkcje wzrokowe.

Mysi model przewlekłego nadciśnienia ocznego indukowany laserem w celu scharakteryzowania wad wzroku

Przeglądaj więcej filmów