Transdukcja adenowirusowa naiwnych limfocytów T CD4 w celu zbadania różnicowania limfocytów Treg

Protokół ten zapewnia przepływ pracy do produkcji zakaźnych cząstek adenowirusowych, które są wykorzystywane do transdukcji interesującego genu do naiwnych limfocytów T, które po atopowej ekspresji transgenu lub różnicują się w regulatorowe limfocyty T lub tregi. Najpierw gen będący przedmiotem zainteresowania jest klonowany do wektora docelowego adenowirusa. Wektor jest następnie przenoszony do linii komórkowej producenta adenowirusa, generowany jest HC 2 93 A i generowane są zakaźne cząstki adenowirusa.

Powstałe wirusy są wykorzystywane do infekowania naiwnych limfocytów T myszy transgenem receptora adenowirusa po zakażeniu. Komórki są następnie odpoczywane, aby zapewnić ekspresję interesującego genu. W naiwnych limfocytach T limfocyty T są aktywowane w warunkach polaryzacyjnych w celu indukowania różnicowania limfocytów Treg.