Name: Mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Poznaj zmodyfikowaną technikę mankietową przeszczepu serca u myszy, która umożliwiła przeprowadzenie ponad tysiąca udanych transplantacji. Ta metoda stanowi niezawodny model do badań immunologicznych i mechanizmów urazu niedokrwiennego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy oświadczają, że nie mają żadnych konkurencyjnych interesów finansowych.

Zwierzęta są trzymane w obiekcie wolnym od patogenów barierowych. Wszystkie zwierzęta otrzymują opiekę człowieka zgodnie z "Zasadami opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi" sformułowanymi przez National Society for Medical Research" oraz "Przewodnikiem opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych" opracowanym przez Narodową Akademię Nauk i opublikowanym przez National Institutes of Health (publikacja NIH nr 86-23, Poprawiony w 1985 r.). Wszystkie eksperymenty są zatwierdzone przez austriackie Ministerstwo Edukacji, Nauki i Kultury.
1. Przygotowanie odbiorcy
<ol>
	<li>Znieczulić zwierzę biorcy za pomocą domięśniowego wstrzyknięcia ksylazyny (5 mg/kg masy ciała) i ketaminy (100 mg/kg masy ciała).</li>
	<li>Usuń wszystkie włosy z bocznej części szyjki macicy zwierzęcia i trzykrotnie wyszoruj pole operacyjne za pomocą chlorheksdyny.</li>
	<li>Umieść mysz w pozycji leżącej na plecach na polu operacyjnym.</li>
	<li>Następnie wykonaj nacięcie skóry od nacięcia szyjnego do prawej dolnej żuchwy.</li>
	<li>Następnie tępo zmobilizuj prawą żyłę szyjną zewnętrzną (EJV) i podziel gałęzie między ligatury.</li>
	<li>Następnie podziel EJV między ligatury, upewniając się, że pozostawiono wystarczającą długość, aby wyciąć bliższy kikut nad korpusem mankietu.</li>
	<li>Następnie usuń prawy płat gruczołu podżuchwowego.</li>
	<li>W przypadku zespolenia żylnego przełóż bliższy koniec EJV przez mankiet polietylenowy i przymocuj go do uchwytu mankietu za pomocą mikrozacisku.</li>
	<li>Usuń ligaturę na końcu naczynia, przeciągnij światło nad mankietem i przymocuj je za pomocą 8-0 jedwabna pętelka (rysunek 1a).</li>
	<li>Następnie przeciąć prawy mięsień mostkowo-obojczykowo-sutkowy za pomocą kauteryzacji dwubiegunowej, aby uzyskać dostęp do wspólnej tętnicy szyjnej.</li>
	<li>Następnie należy zmobilizować tętnicę szyjną wspólną i przeciąć naczynie między więzadłami.</li>
	<li>Następnie należy zmobilizować tętnicę szyjną wspólną i przeciąć naczynie między więzadłami.</li>
	<li>Przełóż dystalny koniec naczynia przez mankiet i przymocuj go za pomocą zacisku tętniczego.</li>
	<li>Usuń więzadło na końcu naczynia i rozciągnij światło za pomocą rozszerzaczy naczyń krwionośnych. Następnie, analogicznie do EJV, przełóż tętnicę przez mankiet i napraw ją za pomocą 8-0 jedwabna pętelka.</li>
</ol>
2. Zaopatrzenie w serce
<ol>
	<li>Znieczulić mysz dawcę wstrzyknięciem domięśniowym ksylazyny (5 mg/kg masy ciała) i ketaminy (100 mg/kg masy ciała). Następnie usuń wszystkie włosy z okolicy brzucha zwierzęcia. Trzykrotnie wyszoruj pole operacyjne za pomocą chlorheksdyny. Następnie umieść mysz w pozycji leżącej na polu operacyjnym, jak opisano wcześniej.</li>
	<li>Po nacięciu brzucha w linii środkowej cofnij wnętrzności za pomocą końcówek Q w lewo, aby odsłonić żyłę główną dolną (IVC).</li>
	<li>Wstrzyknąć 400 μl roztworu heparyny i sodu w stosunku 1:4 do IVC w celu heparynizacji.</li>
	<li>Wykonaj torakotomię i złóż przednią ścianę klatki piersiowej nad czaszką, aby uzyskać dostęp do serca.</li>
	<li>Następnie usuń grasicę i wykonaj nacięcia wentylacyjne w lewej i prawej żyle głównej górnej.</li>
	<li>Następnie należy wykonać perfuzję serca w sposób wsteczny roztworem HTK o temperaturze 4 ° Celsjusza poprzez kaniulację łuku aorty za pomocą strzykawki 27 G na poziomie gałęzi ramienno-głowowej.</li>
	<li>Podwiązaj żyłę główną dolną i górną z 8-0 jedwabiu i podzielić je dystalnie do ligatur.</li>
	<li>Następnie podziel łuk aorty na poziomie poprzedniej kaniulacji i wypreparuj pień płucny i podziel go jak najdalej dystalnie.</li>
	<li>Następnie zwiąż żyły płucne podwiązaniem zbiorczym i podziel je dystalnie do ligatur.</li>
	<li>Na koniec należy usunąć serce z miejsca dawczego i przechowywać je w roztworze HTK o temperaturze 4° Celsjusza (ryc. 1b).</li>
</ol>
3. Implantacja
<ol>
	<li>Umieść przeszczep serca w okolicy szyi biorcy w pozycji odwróconej do góry nogami (ryc. 1c).</li>
	<li>Następnie przeciągnij pień płucny serca nad konstrukcją mankietu żylnego biorcy i przymocuj go jedwabną pętlą (ryc. 1d).</li>
	<li>W ten sam sposób należy wykonać zespolenie między aortą przeszczepu a przerwaną tętnicą zwierzęcia biorcy (ryc. 1e).</li>
	<li>Następnie najpierw zdejmij zacisk żylny, a następnie zacisk tętniczy. Serce ulega reperfuzji i zaczyna bić w ciągu 1-2 minut. Podczas reperfuzji zwilżyć serce ciepłą (35° Celsjusza) solą fizjologiczną.</li>
	<li>Na koniec zamknij ranę chirurgiczną za pomocą szwów ciągłych 6-0 (ryc. 1e).</li>
</ol>
4. Opieka pooperacyjna, punkt końcowy
<ol>
	<li>Po operacji podać do 0,3 ml soli fizjologicznej w celu wymiany płynów.</li>
	<li>Umieść zwierzę pod lampą grzewczą do momentu wybudzenia się ze znieczulenia.</li>
	<li>Po przebudzeniu zwierzę należy odesłać do pomieszczenia socjalnego, gdzie otrzymuje ono pożywienie i wodę ad libitum.</li>
	<li>Aby zminimalizować ból w ciągu pierwszych 7 dni po operacji, należy podawać karprofen (4 mg/kg mc. co 12 godzin podskórnie (podskórnie). Ponadto buprenorfinę (0,1 mg/kg) należy podawać bezpośrednio po operacji co 12 godzin przez 5 dni.</li>
	<li>Uzyskiwać co tydzień masę ciała (g) każdego biorcy zwierzęcia, aby ocenić prawidłowe spożycie składników odżywczych. Jeśli istnieją dowody na utratę masy ciała o więcej niż 10-15% w porównaniu z masą ciała w dniu operacji, apatię, kalekę lub bardzo zgięte plecy, należy złożyć zwierzę w ofierze za pomocą końcowej inhalacji izofluranu przed osiągnięciem klinicznego punktu końcowego. Złóż również ofiarę ze zwierzęcia po tym, jak serce zostało odrzucone.</li>
</ol>

<ol><li>Brandacher, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tetrahydrobiopterin+compounds+prolong+allograft+survival+independently+of+their+effect+on+nitric+oxide+synthase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity.</a> Transplantation. 81, 583-589 (2006).</li>
<li>Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+secretory+leukocyte+protease+inhibitor+%28SLPI%29+on+ischemia%2Freperfusion+injury+in+cardiac+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation.</a> Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IDO+and+regulatory+T+cell+support+are+critical+for+cytotoxic+T+lymphocyte-associated+Ag-4+Ig-mediated+long-term+solid+organ+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22JImmunol%22%5BJournal%5D)">IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival.</a> JImmunol. 188, 37-46 (2012).</li>
<li>Yamashita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heme+oxygenase-1+is+essential+for+and+promotes+tolerance+to+transplanted+organs%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs.</a> FASEB J. 20, 776-778 (2006).</li>
<li>Kienzl, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+profiling+of+acute+cardiac+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection.</a> Transplantation. 88, 553-560 (2009).</li>
<li>Aurora, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation%3A+tenth+official+pediatric+lung+and+heart%2Flung+transplantation+report--2007%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report--2007.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).</li>
<li>Häyry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+allograft+vasculopathy+new+strategies+for+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development.</a> Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).</li>
<li>Hosenpud, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+mechanisms+of+cardiac+allograft+vasculopathy+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update.</a> Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).</li>
<li>Libby, P., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection.</a> Immunity. 14, 387-397 (2001).</li>
<li>Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+graft+dysfunction+after+prolonged+cold+ischemia+of+the+donor+kidney+inhibition+by+cyclosporine%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine.</a> Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).</li>
<li>Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Etiology+and+pathophysiology+of+chronic+transplant+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction.</a> Transpl Int. 13, 385-401 (2000).</li>
<li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).</li>
<li>Huang, X., Chen, D., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5BA+modified+model+of+cervical+heterotopic+cardiac+transplantation+for+chronic+rejection+research%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Xiu+Fu+Chong+Jian+Wai+Ke+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">[A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research].</a> Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).</li>
<li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).</li>
<li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105, 1609-1614 (2002).</li>
<li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51, 896-898 (1991).</li>
<li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).</li>
<li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D%2C+H-2K%2C+and+non-H-2+antigens+in+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li>
<li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).</li>
<li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+pretreatment+with+tetrahydrobiopterin+saves+pancreatic+isografts+from+ischemia+reperfusion+injury+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model.</a> Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).</li>
<li>Heron, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+accessory+cervical+heart+transplantation+in+rabbits+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Actapathologica+et+microbiologica+Scandinavica+Section+A%2C+Pathology%22%5BJournal%5D)">A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats.</a> Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).</li>
</ol>

Badanie to zostało wsparte grantem #207 "Medizinischer Forschungsfond Tirol", grantem #2010022010 "MUI-START Förderungsprogramm" Uniwersytetu Medycznego w Innsbrucku.

Odrzucenie unaczynionych przeszczepów allogenicznych pociąga za sobą mnóstwo różnych etapów, które można jedynie niewystarczająco ocenić za pomocą modeli in vitro . Zjawiska takie jak uwrażliwienie biorców, przetwarzanie antygenu w wtórnych narządach limfatycznych, ale także różnicowanie i proliferacja komórek kompetentnych immunologicznie są lepiej scharakteryzowane in vivo. Modele zwierzęce są zatem idealnym narzędziem do badań translacyjnych16. Modele mysie nadal stanowią złoty standard w ...

Transplantacja serca stanowi terapię z wyboru dla pacjentów cierpiących na różne schyłkowe choroby serca. Postęp w technikach chirurgicznych, skuteczniejsza profilaktyka zakażeń i nowatorskie schematy immunosupresyjne doprowadziły do znacznej poprawy wyników przeszczepiania narządów6. Jednak długoterminowa przeżywalność przeszczepów nie poprawiła się rygorystycznie w ciągu ostatnich lat7. Przewlekłe odrzucenie, charakteryzujące się miażdżycą tętnic po przeszczepie, nadal stanowi główną przeszkodę w długoterminowym przeżyciu przeszczepu8-11.
Model heterotopowego przeszczepu serca u myszy dostarcza ważnego i ważnego narzędzia do analizy mechanizmu immunologicznego zarówno podczas ostrego, jak i przewlekłego odrzucenia12-15.
Do tej pory najczęstszym modelem przeszczepu jest nadal przeszczep serca myszy w jamie brzusznej przy użyciu techniki szwów. Aorta wstępująca serca dawcy jest zespolena z aortą brzuszną, a tętnica płucna jest zespolena z żyłą główną dolną biorcy. Duża część trudności mikrochirurgicznych modelu szwu opiera się na małym rozmiarze naczyń, które są zszywane16,17.
W przeciwieństwie do modelu szwów, serce jest umieszczane w okolicy szyi biorcy, gdzie zewnętrzna żyła szyjna jest zespolena z tętnicą płucną, a tętnica szyjna wspólna z aortą dawcy.
Uzasadnieniem rozwoju modelu przeszczepu szyjki macicy za pomocą techniki mankietowej było posiadanie modelu zwierzęcego, co pozwala na osiągnięcie wysokich wskaźników sukcesu z podstawowymi umiejętnościami mikrochirurgicznymi, które pozwolą na szerokie zastosowanie tego modelu. Głównymi zaletami tej metody jest znacznie mniej występujących powikłań związanych ze zespoleniem, takich jak krwotoki i zakrzepica, w porównaniu z modelem szewu18.

<table><tbody><tr><td>Yasargil Clip Mini Permanent 7 mm</td><td>Aesculap</td><td>FE720K</td><td></td></tr><tr><td>Mikroklips do naczyń</td><td>S & T</td><td>B1 00396 V</td><td></td></tr><tr><td>Mikronożyczki</td><td>FST</td><td>14075-11</td><td></td></tr><tr><td>Rozszerzacz naczyń</td><td>S & T</td><td>D-5a.2 00125</td><td></td></tr><tr><td>Mikrokleszcze</td><td>FST</td><td>Dumont 11271- 30</td><td></td></tr><tr><td>Clipapplicator</td><td>S & T</td><td>CAF-4 00072</td><td></td></tr><tr><td>Klips do mikronaczyń</td><td>S & T</td><td>B1 00396 V</td><td></td></tr></tbody></table>

mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Modele mysie są szczególnie interesujące w badaniach, ponieważ dostępna jest szeroka gama przeciwciał monoklonalnych oraz komercyjnie zdefiniowanych szczepów wsobnych i nokautujących do przeprowadzania mechanistycznych badań in vivo. Podczas gdy modele przeszczepu serca wykorzystujące technikę szwów zostały po raz pierwszy z powodzeniem opracowane na szczurach, translacja na równie rozpowszechniony mysi odpowiednik nigdy nie została osiągnięta ze względu na techniczną złożoność procedury mikrochirurgicznej. W przeciwieństwie do tego, techniki mankietów bez szwów, również opracowane początkowo u szczurów, zostały z powodzeniem przystosowane do stosowania u myszy1-3. Ta technika rewaskularyzacji obejmuje dwa główne etapy: I) naczynie biorcze nad mankietem z polietylenu; II) naciągnięcie naczynia dawczego na naczynie dawcze i przytrzymanie go w miejscu za pomocą opaski obwodowej. Zapewnia to ciągłość warstwy śródbłonka, krótki czas działania i bardzo wysoką drożność4.
Korzystając z tej techniki do zespolenia naczyniowego, przeprowadziliśmy ponad 1000 przeszczepów szyjki macicy z ogólnym wskaźnikiem sukcesu wynoszącym 95%. W przypadku dopływu tętniczego tętnicę szyjną wspólną i proksymalny łuk aorty zespolono w wyniku perfuzji wstecznej przeszczepionego serca. W celu drenażu żylnego tętnicę płucną przeszczepu zespolono z żyłą szyjną zewnętrzną biorcy5.
Niniejszym podajemy dodatkowe szczegóły tej techniki, aby uzupełnić film.

Rycina 2 przedstawia reprezentatywne dane dotyczące przeżywalności allograftów serca od dawców BALB/c po transplantacji do w pełni niezgodnych pod względem MHC biorców C57BL/6. Serca są odrzucane w 7 ± 1 dniu po transplantacji. Palpacyjne badanie przeszczepionego allograftu jest czułą metodą wykrywania zależnego od czasu przebiegu odrzucania allograftu. Wszystkie syngeniczne przeszczepy serca wykonane w naszej serii przeżyły bezterminowo (&gt;150 dni).
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-...

Model przeszczepu mysiego serca szyjnego doskonale nadaje się do badań immunologicznych i niedokrwiennych uszkodzeń reperfuzyjnych. Zmodyfikowaliśmy procedurę przy użyciu techniki mankietu bez szwów i przeprowadziliśmy ponad 1000 udanych przeszczepów przy użyciu tego podejścia.
Niniejszym podajemy dodatkowe szczegóły tej techniki, aby uzupełnić film.

Mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Jestem UBA z Laboratorium Badawczego Daniela KY w Katedrze Transplantologii Trzewnej i Chirurgii Klatki Piersiowej Uniwersytetu Medycznego w Ensbergu. Dzisiaj zaprezentujemy model heterotopowego przeszczepu serca u myszy. Wykorzystamy zmodyfikowaną technikę mankietową. Zwierzę biorcy zostaje poddane znieczuleniu poprzez domięśniowy zastrzyk z INE i ketaminy.Następnie usuwa się całą sierść z bocznego regionu szyjnego i trzykrotnie przemywa się pole operacyjne chloreksydyną. Po przygotowaniu pola chirurgicznego zwierzę kładzie się w pozycji na plecach na polu operacyjnym; mysz dawcy poddaje się znieczuleniu poprzez domięśniowy zastrzyk z ksylazyny i ketaminy. Następnie usuwa się całą sierść z regionu brzusznego biorców i trzykrotnie przemywa się pole operacyjne chloreksydyną.Następnie przygotowano pole operacyjne i ułożono zwierzę w pozycji odpowiadającej leżeniu na plecach na polu zabiegowym. Jak pokazano w tej sekwencji, przeszczepy serca Carlo od dawców biopsyjnych są odrzucane w ciągu siedmiu dni po transplantacji do biorców C 57 black six z całkowitą niezgodnością MHC. Przeszczepy serca syngeneiczne wykonane w naszej serii przeżyły bezterminowo.Pomimo że heterotopowe przeszczepienie serca u myszy jest technicznie wymagające, pozostaje ono złotym standardem w badaniach mechanistycznych in vivo dotyczących immunologii przeszczepów. Nasze zmodyfikowane podejście pozwala na osiągnięcie wysokiego odsetka sukcesów przy zastosowaniu podstawowych umiejętności mikrochirurgicznych, co umożliwi szerokie zastosowanie tego modelu. Celem niniejszego filmu jest pomoc i przeprowadzenie innych badaczy przez proces wdrażania tego modelu w ich własnych laboratoriach.

murine-cervical-heart-transplantation-model-using-modified-cuff

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Model przeszczepu serca szyjnego u myszy z wykorzystaniem zmodyfikowanej techniki mankietu

Technika mankietowa skraca i ułatwia model heterotopowego przeszczepu szyjki macicy u myszy, unikając technicznie trudnych zespoleń szwów w małych naczyniach. Szczegóły techniczne przedstawione w tym artykule wideo powinny pozwolić naukowcom na ustalenie tego modelu w swoich laboratoriach.

Heterotopowy przeszczep szyjki macicy u myszy

Tutaj prezentujemy protokół heterotopowego przeszczepu aorty u myszy przy użyciu techniki mankietu bez szwów w mysim modelu szyjki macicy. Model ten może być wykorzystany do badania patologii leżącej u podstaw przewlekłej waskulopatii przeszczepu allogenicznego (CAV) i może pomóc w ocenie nowych środków terapeutycznych w celu zapobiegania jej powstawaniu.

Mysi model przeszczepu aorty szyjnej przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietu bez szwów

Wprowadzamy podejście z rurką wewnętrzną do techniki mankietu do heterotopowego przeszczepu szyjki macicy u myszy, aby pomóc w przeprowadzeniu naczynia nad mankietem. Odkryliśmy, że współpraca dwóch doświadczonych chirurgów znacznie skraca czas operacji.

Optymalizacja techniki mankietowej do przeszczepu serca u myszy

W obecnym protokole, model przeszczepu serca myszy jest używany do badania mechanizmu odrzucania przeszczepu alloprzeszczepu serca. W tym heterotopowym modelu przeszczepu serca poprawia się efektywność operacji, a przeżycie przeszczepów serca jest zapewnione dzięki zespoleniu implantacji serca w szyjce macicy od końca do końca przy użyciu zmodyfikowanej techniki Cuff.

Zmodyfikowana technika mankietowa dla heterotopowego modelu przeszczepu szyjki macicy serca u myszy

Modele transplantacji serca u myszy stanowią cenne narzędzia badawcze do badania immunologii transplantacyjnej. Niniejszy protokół szczegółowo opisuje heterotopowy przeszczep serca szyjki macicy u myszy, który polega na umieszczeniu mankietów na wspólnej tętnicy szyjnej biorcy i pniu tętnicy płucnej dawcy, aby umożliwić laminarny przepływ krwi.

Heterotopowy przeszczep szyjki macicy u myszy z wykorzystaniem mankietów naczyniowych

Protokół ten przedstawia bezmankietową, opartą na szwach heterotopową technikę przeszczepu serca szyjnego u myszy, zaprojektowaną tak, aby umożliwić niezawodne umieszczenie drugiego heterotopowego przeszczepu serca w celu oceny specyficznej dla dawcy tolerancji immunologicznej w warunkach fizjologicznych przy minimalnej interferencji ze strony obcego materiału.

Model szyjny bez mankietów oparty na przeszczepie szyjki macicy dla wtórnego heterotopowego przeszczepu serca w celu oceny specyficznej dla dawcy tolerancji immunologicznej u myszy

Ten protokół przedstawia uproszczoną technikę anastomozy szwu końcowo-bocznego do przeszczepu serca szyjnego u myszy, zapewniając solidny i możliwy do powtórzenia model do badania immunologii przeszczepów.

Przeszczepienie heterotopowe serca mysiego w okolicy szyjnej z zastosowaniem techniki anastomozy końca z boku w celu badania immunologii przeszczepów

Mysi model gojenia się ran skórnych, który może być używany do oceny związków terapeutycznych w warunkach fizjologicznych i patofizjologicznych.

Mysi model gojenia się ran

W manuskrypcie opisano kroki wymagane do przeprowadzenia heterotopowego przeszczepu serca u myszy.

Mysia heterotopowa technika przeszczepu serca

Aby zrozumieć komórkowe i molekularne mechanizmy leżące u podstaw powstawania nowotworów i rozwoju zwężeń w zastawkach serca z inżynierii tkankowej, opracowano mysi model heterotopowego przeszczepu zastawki serca. Zastawkę płucną serca przeszczepiono biorcy przy użyciu techniki heterotopowego przeszczepiania serca.

Przeszczepienie zastawki płucnej z wykorzystaniem mysiego modelu heterotopowego przeszczepienia serca

Poznaj zmodyfikowaną technikę mankietową przeszczepu serca u myszy, która umożliwiła przeprowadzenie ponad tysiąca udanych transplantacji. Ta metoda stanowi niezawodny model do badań immunologicznych i mechanizmów urazu niedokrwiennego.

Mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej

Przeglądaj więcej filmów