Obrazowanie potencjału błonowego barwnika brzuszno-przyśrodkowego neuronów podwzgórza od dorosłych myszy w celu zbadania wykrywania glukozy

Ogólnym celem tej procedury jest ocena wyczuwania glukozy w brzusznych przyśrodkowych neuronach podwzgórza lub VMH u starszych myszy, przy użyciu barwnika wrażliwego na potencjał błonowy jako wskaźnika aktywności neuronalnej. Osiąga się to poprzez wykonanie najpierw perfuzji serca w celu wypłukania krwi z mózgu znieczulonej myszy przed usunięciem mózgu. Drugim krokiem jest stworzenie koronalnych wycinków mózgu i wypreparowanie VMH.

Następnie neurony VMH są dysocjowane i hodowane na szkiełkach nakrywkowych. Ostatnim krokiem jest pomiar fluorescencji neuronów, ponieważ glukoza jest zmniejszana w obecności barwnika potencjału błonowego. Ostatecznie każda zmiana neuronu we fluorescencji jest wykorzystywana do ilościowego określenia odpowiedzi tego neuronu hamowanego przez glukozę na zmiany glukozy.