Name: Testowanie węchu Drosophila za pomocą testu Y-maze (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: Poznaj prosty test Y-maze do badania węchu u Drosophila melanogaster. Metoda pozwala ocenić preferencje wobec odorantów i zachowania węchowe w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy 4 anonimowym recenzentom za ich pracę nad ulepszeniem manuskryptu. Dziękujemy Centre National de la Recherche Scientifique za wsparcie finansowe dla MBG i YG, a także Université de Bourgogne i francuskiemu Ministerstwu Badań Naukowych dla MMS. Badania w laboratorium YG są finansowane przez Europejską Radę ds. Badań Naukowych (ERC Starting Grant, GliSFCo-311403), Agence Nationale de la Recherche (ANR-JCJC, GGCB-2010), Conseil Régional de Bourgogne (Faber) oraz CNRS.

1. Przed rozpoczęciem
<ol>
	<li>Użyj izogenicznego stado referencyjnego o stabilnych i solidnych fenotypach behawioralnych. Nie ma ogólnej zasady wyboru tego stada, ponieważ wszystkie potencjalne grupy kontrolne mogą zawierać heterogeniczne allele tła.</li>
	<li>Użyj tego szczepu kontrolnego, aby skrzyżować wstecznie wszystkie inne stado niezbędne do późniejszych kroków. Ten etap krzyżowania wstecznego jest zwykle reprezentowany przez co najmniej 5 kolejnych krzyżówek pojedynczej dziewiczej samicy (aby umożliwić możliwe skrzyżowanie między chromosomami homologicznymi) do 2-3 izogenicznych samców referencyjnych5. Ten krok jest ważny dla ujednolicenia tła genetycznego między różnymi stadami much.</li>
	<li>Utrzymuj zapasy Drosophila na standardowej mące kukurydzianej (9%), drożdżach (10%) i podłożu agarowym (1,5%) uzupełnionym antybiotykiem (0,4% para-hydroksybenzoesanu metylu) w 12-godzinnym cyklu światło/ciemność w temperaturze 25 °C.</li>
	<li>Przeprowadzanie eksperymentów chemosensorycznych w pomieszczeniu o kontrolowanej temperaturze (25 °C) w dalekim czerwonym świetle (w celu wyeliminowania wpływu sygnałów wizualnych i skupienia się na sygnałach chemosensorycznych). Regularnie wymieniaj powietrze w pomieszczeniu, aby przewietrzyć obszar między każdym eksperymentem.</li>
</ol>
2. Reakcja węchowa przy użyciu testu Y-labirynt
<ol>
	<li>Przed badaniem należy zagłodzić muchy przez 16–18 godzin w temperaturze 25 °C w szklanych probówkach zawierających mokry ręcznik papierowy.</li>
	<li>Połączyć łącznik w kształcie litery Y z dwiema szklanymi fiolkami i z mniejszą fiolką z tworzywa sztucznego (fiolką ładującą). Za pomocą końcówek do pipet o pojemności 1 ml przechodzących przez korki piankowe należy połączyć łącznik z trzema fiolkami i uzyskać szczelnie zamknięty labirynt Y. Odetnij wąskie końce dwóch końcówek pipet (o średnicy ~2 mm, aby uniknąć powrotu muchy po podjęciu decyzji), aby utworzyć dwie fiolki "pułapki" i duży koniec jednej końcówki pipety, aby utworzyć rurkę "ładującą" (Rysunek 1A).</li>
	<li>Tuż przed podłączeniem fiolek z "pułapką" (Rysunek 1B) należy umieścić jedną bibułę filtracyjną o średnicy ~6 mm w każdej fiolce. Dodać 40 μl roztworu nawaniacza na jedną bibułę filtracyjną i 40 μl odpowiedniego rozpuszczalnika na drugą bibułę filtracyjną.</li>
	<li>Wprowadź dziesięć much w wieku od 4 do 9 dni do fiolki "ładującej". Nie należy stosować znieczulenia CO2 podczas tego transferu, ponieważ ma on silny wpływ na zachowanie10. Raczej użyj krótkiego chłodzenia na lodzie. Właściwa manipulacja znieczulonymi muchami jest ważna, aby w jak największym stopniu ograniczyć stres u badanych.
	<ol>
		<li>Wykonaj serię testów labiryntu Y w temperaturze 25 °C w dalekim świetle czerwonym (przy użyciu żarówek LED w celu ograniczenia możliwego źródła ciepła), aby w jak największym stopniu uniknąć bodźców wizualnych. Uważaj, aby zmienić orientację labiryntów Y (rurka zawierająca nazapach po lewej lub po prawej stronie i rurka ładująca z przodu lub z tyłu; Rysunek 1C).</li>
		<li>Odczekać kilka godzin, aby muchy dostały się do fiolki pułapki zawierającej środek zapachowy lub rozpuszczalnik. Liczenie leci po 24 godzinach, aby zwiększyć udział do ponad 80% i zapewnić maksymalną wartość indeksu węchowego (Simonnet, komunikacja osobista).</li>
		<li>Obliczyć wynikowy indeks węchowy, korzystając z następującego wzoru: (liczba w rurki zapachowej - liczba w probówce z rozpuszczalnikiem)/całkowita liczba załadowanych much.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Umyj zestaw Y-maze w następujący sposób: zdemontowany zestaw namocz w RBS 35 MD na noc. Dokładnie spłucz wodą z kranu. Na koniec spłucz wodą dejonizowaną i pozostaw do wyschnięcia.</li>
</ol>
3. Analiza statystyczna danych
<ol>
	<li>Wykonaj test t, jednoczynnikową lub dwukierunkową wartość ANOVA, w zależności od danych i zmiennych.</li>
</ol>

<ol><li>Mombaerts, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genes+and+ligands+for+odorant%2C+vomeronasal+and+taste+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Genes and ligands for odorant, vomeronasal and taste receptors.</a> Nat. Rev. Neurosci. 5, 263-278 (2004).</li>
<li>Silbering, A. F., Benton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionotropic+and+metabotropic+mechanisms+in+chemoreception%3A+%27chance+or+design%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Rep%22%5BJournal%5D)">Ionotropic and metabotropic mechanisms in chemoreception: 'chance or design.</a> EMBO Rep. 11, 173-179 (2010).</li>
<li>Ziegler, A. B., Berthelot-Grosjean, M., Grosjean, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+smell+of+love+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The smell of love in Drosophila.</a> Front. Physiol. 4, (2013).</li>
<li>Silbering, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complementary+function+and+integrated+wiring+of+the+evolutionarily+distinct+Drosophila+olfactory+subsystems%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Complementary function and integrated wiring of the evolutionarily distinct Drosophila olfactory subsystems.</a> J. Neurosci. 31, 13357-13375 (2011).</li>
<li>Grosjean, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+olfactory+receptor+for+food-derived+odours+promotes+male+courtship+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An olfactory receptor for food-derived odours promotes male courtship in Drosophila.</a> Nature. 478, 236-240 (2011).</li>
<li>Woodard, C., Huang, T., Sun, H., Helfand, S. L., Carlson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+olfactory+behavior+in+Drosophila%3A+a+new+screen+yields+the+ota+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of olfactory behavior in Drosophila: a new screen yields the ota mutants.</a> Genetics. 123, 315-326 (1989).</li>
<li>Semmelhack, J. L., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Select+Drosophila+glomeruli+mediate+innate+olfactory+attraction+and+aversion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Select Drosophila glomeruli mediate innate olfactory attraction and aversion.</a> Nature. 459, 218-223 (2009).</li>
<li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> The Journal of Experimental Biology. 209, 3001-3017 (2006).</li>
<li>Martin, F., Charro, M. J., Alcorta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+affecting+the+cAMP+transduction+pathway+modify+olfaction+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Mutations affecting the cAMP transduction pathway modify olfaction in Drosophila.</a> J. Comp. Physiol. A. 187, 359-370 (2001).</li>
<li>Barron, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthetising+Drosophila+for+behavioural+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anaesthetising Drosophila for behavioural studies.</a> Journal of Insect Physiology. 46, 439-442 (2000).</li>
<li>Ai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acid+sensing+by+the+Drosophila+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Acid sensing by the Drosophila olfactory system.</a> Nature. 468, 691-695 (2010).</li>
<li>Becher, P. G., Bengtsson, M., Hansson, B. S., Witzgall, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flying+the+fly%3A+long-range+flight+behavior+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Ecol%22%5BJournal%5D)">Flying the fly: long-range flight behavior of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Chem. Ecol. 36, 599-607 (2010).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Nasz protokół Y-maze jest oparty na wcześniej opisanym protokole9. Wprowadzamy jednak dwie zasadnicze różnice. Po pierwsze, używamy wąskich końcówek pipet, aby zapobiec powrotowi much, gdy zdecydują się dostać do fiolki zawierającej rozpuszczalnik lub rozpuszczalnik i środek zapachowy. Te wąskie końcówki są również przydatne do ograniczania dyfuzji zapachów w labiryncie Y. Po drugie, używamy mniejszej fiolki ładującej, aby zmusić muchy do wejścia do labiryntu Y. Ważne jest, aby mieć wysoki udział tych much (80...

Chemorecepcja poprzez smak lub węch jest kluczowym sposobem sensorycznym dla przetrwania zwierząt. Daje istotne wskazówki niezbędne do wykrycia zagrożenia lub źródeł pożywienia, a także do interakcji społecznych. Pomaga również zwierzętom znaleźć partnera seksualnego niezbędnego do ich reprodukcji. Przez ponad 20 lat prowadzone były intensywne badania, w tym nagrodzona Nagrodą Nobla praca Richarda Axela i Lindy Buck w 2004 r. "za odkrycia receptorów zapachowych i organizacji układu węchowego", mające na celu ujawnienie molekularnych i komórkowych podstaw węchu1,2.
Jednym z ulubionych modeli zwierzęcych dla naukowców do analizy percepcji węchowej jest D. melanogaster. Owad ten ma podobną komórkową i molekularną strategię kodowania zapachu ze ssakami. Społeczność naukowa wykorzystuje różne paradygmaty behawioralne do badania roli substancji zapachowych w tej muszce owocowej. Testy te obejmują testy multimodalne, takie jak testy zalotów, w których różne modalności sensoryczne, w tym węch, są ważne dla wywołania męskich zalotów3. Opracowano również inne testy, aby dokładniej przyjrzeć się roli substancji zapachowych; Należą do nich labirynty T, labirynty Y, testy pułapek, areny czteropolowe i tunele aerodynamiczne4,5,6,7,8.
W tym artykule prezentujemy prosty, zmodyfikowany test labiryntu Y, który zapewnia silne reakcje węchowe przy użyciu D. melanogaster. Nasza konfiguracja wykorzystuje końcówki w przeciwieństwie do wcześniej opisanej metody9. Tak więc nasz labirynt Y ma dwie zalety. Po pierwsze, unika powrotu do systemu, gdy mucha dokona wyboru. Po drugie, ogranicza wymianę substancji zapachowych we wszystkich obszarach labiryntu Y. Ta ostatnia zaleta jest ważna, ponieważ Drosophila są bardzo wrażliwe na przepływ powietrza, który jest często używany w celu uniknięcia nasycenia nazapachami. Dostosowanie konfiguracji eksperymentalnej do przepływu powietrza byłoby czasochłonne i kosztowne. Dlatego nasz test Y-maze stanowi skuteczny i szybki sposób na zbadanie wydajności węchowej Drosophila.

<table><tbody><tr><td>Rurka polistyrenowa Drosophila</td><td>VWR europe</td><td>734-2255</td><td>30 x 25 mm&nbsp; Y-maze</td></tr><tr><td>Rurka borokrzemianowa Drosophila</td><td>Dijon verre</td><td></td><td>95 X 25 mm Y-maze</td></tr><tr><td>Korek piankowy</td><td>Dutscher</td><td>999038</td><td> Łącznik</td></tr> w <tr><td>kształcie litery</td> Y <td>Y-maze Europrix</td><td>11020605</td><td> Y-maze</td></tr><tr><td>100-1,000 &micro; l końcówki do pipet</td><td>Corning</td><td>4868</td><td>Podłącz następujące końcówki do pipet do złącza w kształcie litery Y. Odetnij 2 końcówki pipet w odległości 65 mm od szerokiego końca i połącz wąski koniec (za pomocą &sim; Otwór 2 mm) do 2 fiolek testowych. Otwory te ograniczą zawracanie, gdy muchy dostaną się do rur zawierających zapachy. Wytnij 1 końcówkę pipety w odległości 35 mm od szerokiego końca i podłącz ją do fiolki ładującej. </td></tr><tr><td>Żarówka LED Y-maze Far-Red</td><td>Rubin-Lacaque</td><td>0RB180238</td><td>625-630 nm</td></tr><tr><td>Kwas octowy</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>45725</td><td></td></tr><tr><td>Kwas fenylooctowy</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P16621</td><td></td></tr><tr><td>Drożdże</td><td>Sensient Flavors Strasburg</td><td>1018880464</td><td></td></tr><tr><td>Mąka</td> <td>kukurydzianaeurogerm</td><td>Farine de ma&iuml; s</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Kalys</td><td>HP-697-25</td><td></td></tr><tr><td>Hydroksy-4 benzoesan metylu</td><td>VWR międzynarodowa</td><td>25605293</td><td></td></tr></tbody></table>

testowanie węchu drosophila za pomocą testu y-maze

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Wykrywanie sygnałów z otoczenia jest niezbędne dla zwierząt, aby zapewnić im przetrwanie. W tym celu wykorzystują sygnały środowiskowe, takie jak wzrok, mechanorecepcja, słuch i chemopercepcja poprzez smak, bezpośredni kontakt lub węch, który reprezentuje reakcję na lotną cząsteczkę działającą na większą odległość. Lotne cząsteczki chemiczne są dla większości zwierząt bardzo ważnymi sygnałami w wykrywaniu niebezpieczeństwa, źródle pożywienia lub komunikowaniu się między osobnikami. Drosophila melanogaster jest jednym z najczęstszych modeli biologicznych, z których naukowcy mogą badać komórkowe i molekularne podstawy węchu. Aby podkreślić zdolności węchowe tego małego owada, opisujemy zmodyfikowany protokół wyboru oparty na teście labiryntu Y, klasycznie stosowanym u myszy. Dane uzyskane za pomocą labiryntów Y dostarczają cennych informacji, które pozwalają lepiej zrozumieć, w jaki sposób zwierzęta radzą sobie z ciągle zmieniającym się środowiskiem. Wprowadzamy protokół krok po kroku do badania wpływu odorantów na reakcję eksploracyjną much za pomocą tego testu Y-labirynt.

Rysunek 1D przedstawia dwie reprezentatywne odpowiedzi w tym teście z labiryntem w kształcie litery Y. Samce szczepu Canton-S silnie unikają 10% kwasu octowego rozcieńczonego w wodzie destylowanej, podczas gdy nie unikają w stopniu znaczącym 10% kwasu fenylooctowego. Testy te opierają się na 10 samcach na powtórzenie, umieszczonych razem w fiolkach załadowczych. Protokół ten może czasami prowadzić do dużego błędu standardowego średniej. W razie potrzeby można ograniczyć tę wadę, stosując 20 samców na pow...

Przedstawiamy test wyboru, który ma na celu ujawnienie wpływu odorantów na zachowanie Drosophila za pomocą testu Y-labirynt.

Testowanie węchu Drosophila za pomocą testu Y-maze

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest przedstawienie prostego testu z wykorzystaniem labiryntu w kształcie litery Y w celu zbadania zmysłu węchu u Drosophila melanogaster. Osiąga się to poprzez najpierw poddanie much głodówce przez 16 do 18 godzin, aby zmotywować je do eksploracji nowych środowisk z bodźcami lotnymi. Drugim krokiem procedury jest przygotowanie układu labiryntu Y zawierającego źródła zapachów na papierze filtracyjnym, takie jak kwas octowy w rozpuszczalniku w porównaniu z samym rozpuszczalnikiem.Trzecim krokiem jest szybkie i delikatne wprowadzenie much do probówki startowej. Po kilku godzinach ostatnim etapem jest ocena lokalizacji much w labiryncie. Ostatecznie, na podstawie danych uzyskanych z labiryntu w kształcie litery Y, wyniki mogą wykazać reakcję na substancję zapachową.Pomysł na tę metodę pojawił się, gdy postanowiliśmy opracować prosty i niedrogi sposób testowania odpowiedzi węchowej u muszek. Przewagą tej techniki nad innymi opcjami jest to, że pozwala ona muchom podjąć decyzję, czy poziom stresu jest zbyt wysoki. Procedurę zaprezentuje Megan Simon, doktorantka z mojego laboratorium. Do realizacji tego protokołu należy przygotować izogeniczną linię muszek o stabilnych i wyraźnych fenotypach behawioralnych. Każde takie stado będzie służyć jako kontrola referencyjna w teście węchowym; w przypadku każdego szczepu genetycznego wykorzystywanego w eksperymencie, należy przeprowadzić krzyżowanie wsteczne ze szczepem referencyjnym przez pięć pokoleń.W każdym krzyżowaniu wstecznym sparuj pojedyncze samice szczepu eksperymentalnego z kilkoma izogenicznymi samcami. W przypadku eksperymentów węchowych utrzymuj muszki owocówki na standardowej pożywce kukurydzianej z antybiotykiem w cyklu świetlnym 12:12 i w temperaturze 25°C.Doświadczenia powinny być zawsze przeprowadzane w temperaturze 25 °C i przy oświetleniu w dalekiej czerwieni widma, niewidocznej dla drosophila. Między eksperymentami, przed przeprowadzeniem analizy następnego ranka, musi być również możliwa pełna wentylacja pomieszczenia. Na koniec dnia należy przenieść kohorty od 10 do 20 linii eksperymentalnych do szklanych fiolek, w których wilgoć zapewniony zostanie za pomocą wilgotnego ręcznika.Muchy należy przetestować w ciągu 16 do 18 godzin, w przeciwnym razie mogą one zginąć następnego dnia z powodu odwodnienia lub głodu. Zmontuj labirynt w kształcie litery Y. Rozpocznij od połączenia łącznika w kształcie litery Y z dwiema szklanymi fiolkami za pomocą łączników piankowych z przyciętymi końcówkami pipet, które tworzą kanały; ich zwężający się kształt sprawia, że są to przejścia jednokierunkowe.Trzecie ramię litery Y jest połączone z rurką załadowczą wykonaną z szerokiej części końcówki pipety, która umożliwia przejście z fiolki załadowczej do punktu wyboru labiryntu. Za każdym zwężającym się tunelem znajduje się szklana fiolka, z których jedna musi zostać załadowana substancją zapachową. Są to bolusy o objętości 40 µL nasączone w kwadratach papieru tkankowego o boku 28 mm.To, która z dwóch probówek zawiera substancję zapachową, powinno być zmieniane losowo przed każdym testem. Krótko schłodź muchy na lodzie, aby spowolnić ich ruchy. Czynność tę należy przeprowadzić pod daleką czerwienią z żarówek LED; następnie w temperaturze 25 °C delikatnie przenieś grupę much do probówki ładunkowej i wprowadź muchy testowe do labiryntu w kształcie litery Y.Nie należy stosować anestezji gazowej. Bardzo ważne jest, aby przenieść muchy do fiolki ładunkowej w sposób szybki i delikatny. Jest to w rzeczywistości najtrudniejszy etap eksperymentu, ponieważ muchy muszą szybko się obudzić przed rozprzestrzenieniem się pozostałych osobników w masie Y.Należy pozwolić muchom na eksplorację labiryntu przez 24 godziny, aby maksymalna liczba osobników przedostała się do jednej z dwóch szklanych probówek. Liczba much obecnych w poszczególnych probówkach służy do obliczenia indeksu olfaktorycznego. Do wartości uzyskanych na podstawie zachowania do 10 much należy zastosować standardowe metody statystyczne.Jeśli 10 kohort much nie daje spójnych wyników, badania można przeprowadzić z użyciem 20 kohort much. Aby wyczyścić elementy labiryntu, należy namoczyć je w rozmontowanym stanie w RBS 35 MD przez noc. Następnie należy przepłukać je wodą z kranu, a na koniec wodą DI przed suszeniem na powietrzu.Standardowe reakcje na substancję zapachową z wykorzystaniem labiryntu w kształcie litery Y obejmują przyciąganie, obojętność lub unikanie. Na przykład muchy z kantonu silnie unikają 10% kwasu octowego, podczas gdy nie unikają 10% kwasu fenylooctowego.Podczas przeprowadzania tej procedury należy pamiętać, że ten test zapachowy odzwierciedla sztuczne środowisko dla much. Po wykonaniu tej procedury można zastosować inne metody, takie jak testy w arenie lub testy wewnętrzne, aby potwierdzić reakcje węchowe much w różnych warunkach. Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo mieć dobrą wiedzę na temat tego, jak w prosty sposób testować reakcje węchowe Drosophila melanogaster przy użyciu testu SW.

testing-drosophila-olfaction-with-a-y-maze-assay

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Testowanie węchu Drosophila z zastosowaniem testu labiryntu w kształcie Y

W niniejszym artykule wideo opisujemy nową metodę umożliwiającą tworzenie gradientów substancji zapachowych o stabilnych i kontrolowalnych geometriach. Krótko ilustrujemy, w jaki sposób gradienty te mogą być wykorzystane do wykrywania wad węchu (całkowitej i częściowej anosmii) oraz do badania bardziej subtelnych cech zachowań chemotaktycznych.

Wysokorozdzielczy pomiar zachowań sterowanych węchem u larw Drosophila

Testy behawioralne służące do pomiaru funkcji lokomocyjnych, zdolności uczenia się i pamięci u Drosophila.

Ocena deficytów motorycznych, uczenia się i pamięci w modelach neurodegeneracji u Drosophila

Drosophila melanogaster to genetycznie i behawioralnie podatny system modelowy, który od ponad wieku jest wykorzystywany do zrozumienia molekularnych i komórkowych podstaw wielu ważnych procesów biologicznych 1. Drosophila została szeroko wykorzystana w celu uzyskania wglądu w genetyczne podstawy zachowania much.

Metody oceny zachowania Drosophila

Muszki owocowe mają złożony system węchowy, potrafią rozróżniać setki substancji zapachowych i używać swojego węchu do kierowania decyzjami behawioralnymi. Ten film opisuje czterokierunkowy test olfaktometryczny, metodę badania węchowych reakcji behawioralnych u much. Prezentowany klip protokołu pokazuje, jak radzić sobie z muchami testowymi i jakie są krytyczne kroki podczas wykonywania testu.

Czterokierunkowy test olfaktometryczny: metoda oceny reakcji zapachowych u Drosophila

Ten film opisuje metodę testowania węchowych zachowań eksploracyjnych u muszki owocowej, zwaną labiryntem Y. Prezentowany klip z protokołem pokazuje, jak skonfigurować i przeprowadzić test.

Drosophila Test labiryntu Y: metoda oceny reakcji węchowych u much

Opisano metodę pomiaru pamięci asocjacyjnej dorosłego Drosophila. Test opiera się na zdolności muchy do kojarzenia prezentowanego zapachu z negatywnym wzmacniaczem (porażeniem prądem), a następnie przywoływania tych informacji w późniejszym czasie, co pozwala na pomiar pamięci.

Drosophila Uczenie się szoku węchowego u dorosłych

Pionowy olfaktometr labiryntu w kształcie litery T jest opisany do badania reakcji behawioralnej stawonogów. Olfaktometr pozwala eksperymentatorowi zmierzyć wybory dokonywane przez osoby badane pod wpływem dwóch potencjalnych pól zapachowych. Za pomocą tego urządzenia można zmierzyć zarówno przyciąganie, jak i odpychanie od substancji zapachowych.

Pionowy test wyboru labiryntu w kształcie litery T dla reakcji stawonogów na substancje zapachowe

W tym artykule wideo opisujemy zautomatyzowany test do pomiaru wpływu głodu lub sytości na zależne od węchu zachowanie związane z poszukiwaniem pokarmu u dorosłej muszki owocowej Drosophila melanogaster.

Test pojedynczej muchy na zachowania żerowe u Drosophila

Tutaj prezentujemy protokół do ilościowego określenia unikania osób zestresowanych. Ten paradygmat jest potężny, ale przyjazny dla użytkownika i może być wykorzystany do oceny wpływu genów i środowiska na jeden rodzaj interakcji społecznych u Drosophila melanogaster.

Prosty test do ilościowego oznaczania unikania społecznego u Drosophila melanogaster

Opisujemy tutaj konfigurację behawioralną i metodę analizy danych do oceny reakcji węchowych do 100 muszek octowych (Drosophila melanogaster). System ten może być stosowany z pojedynczymi lub wieloma bodźcami węchowymi i może być przystosowany do optogenetycznej aktywacji lub wyciszania podzbiorów neuronów.

Zachowania węchowe oceniane za pomocą komputerowego śledzenia Drosophila w czterokwadrantowym olfaktometrze

Zaburzenie ze spektrum autyzmu (ASD) wiąże się z zaburzeniami zachowań społecznych i komunikacyjnych oraz pojawieniem się powtarzających się zachowań. W celu zbadania wzajemnych relacji między genami ASD a deficytami behawioralnymi w modelu Drosophila, w tym artykule opisano pięć paradygmatów behawioralnych do oceny odstępów społecznych, agresji, zalotów, pielęgnacji i zachowań habituacyjnych.

Paradygmaty oceny behawioralnej w modelu zaburzenia ze spektrum autyzmu Drosophila

Poznaj prosty test Y-maze do badania węchu u Drosophila melanogaster. Metoda pozwala ocenić preferencje wobec odorantów i zachowania węchowe w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych.

Testowanie węchu Drosophila za pomocą testu Y-maze

Przeglądaj więcej filmów