Diagnostyczne obrazowanie ultrasonograficzne funkcji membrany myszy

Ogólnym celem tej procedury jest pokazanie, jak dokładnie ocenić kurczliwość przepony w modelu mysim. Za pomocą obrazowania ultradźwiękowego pierwszym krokiem jest znieczulenie myszy i usunięcie włosów na brzuchu. Kolejnym krokiem jest nałożenie żelu do ultradźwięków i rozpatrzenie obrazu przepony za pomocą sond ultradźwiękowych.

Ostatecznie wyniki mogą pokazać przemieszczenie przepony i częstość oddechów dzięki wykorzystaniu elektronicznych suwmiarek oprogramowania. Główną przewagą tej techniki nad istniejącymi metodami, takimi jak miografia inwazyjna, jest to, że nie jest ona inwazyjna i zmniejsza liczbę uśmiercanych zwierząt. Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku diagnozy i potencjalnej terapii dysfunkcji mięśni oddechowych.

Chociaż metoda ta może zapewnić wgląd w kurczliwość przepony w modelu mysim, może być również stosowana do innych systemów, takich jak modele kliniczne, do oceny postępu choroby i skuteczności terapii. Ustaw czysty stół zabiegowy z podgrzewaną podkładką izotermiczną owiniętą ręcznikiem chirurgicznym. Podgrzewana podkładka powinna być używana do stabilizacji temperatury ciała zwierzęcia, jednocześnie zmniejszając potencjalny stres zwierzęcia.

Mysz należy umieścić w komorze indukcyjnej anestezjologii z natężeniem przepływu tlenu ustawionym na 1,5 litra na minutę i z 3,5% odparowanym fluorem Sedacja zwykle następuje w ciągu dwóch minut i jest odnotowywana przez utratę dobrowolnych funkcji motorycznych. Następnie utrzymuj stan znieczulenia poprzez dostarczanie gazu ze stożka nosowego. Po znieczuleniu zwierzę należy nałożyć niewielką ilość maści okulistycznej bezpośrednio na rogówkę, aby zmniejszyć suchość oczu podczas znieczulenia.

Mysz nigdy nie powinna pokazywać odruchu wycofania pedału. Błony śluzowe powinny zawsze mieć różowy kolor, a zwierzę powinno oddychać równomiernie. Umocuj każdą nogę znieczulonej myszy na podgrzewanym stole zabiegowym za pomocą usuwalnego kleju, takiego jak taśma chirurgiczna.

Za pomocą elektrycznej maszynki do golenia usuń większość włosów z brzusznej powierzchni ciała między brzuchem a połową klatki piersiowej. Następnie nałóż krem do depilacji, aby usunąć pozostałe włosy. Po dwóch do trzech minutach zetrzyj krem wilgotnym gazikiem.

Usuń również nadmiar włosów wodą i gazą. Następnie oczyść ogolony obszar czterema peelingami z 70% alkoholem lub równoważnym środkiem antyseptycznym, włącz urządzenie ultradźwiękowe. Przetwornik z mikro wypukłą matrycą lub liniowym układem fazowanym jest idealny ze względu na te sondy, niewielkie rozmiary i doskonałą rozdzielczość osiową.

Dostosuj częstotliwość ultradźwięków w zakresie od 6,5 do 12 megaherców. Teraz ustaw razem tryb maszyny, tryby jasności i ruchu, aby zapewnić najlepsze obrazowanie skurczu membrany. Następnie nałóż niewielką ilość żelu ultradźwiękowego na górną część brzucha i wmasuj żel w kierunku klatki piersiowej.

Umieść przetwornik ultradźwiękowy na żelu i skieruj go do góry w kierunku serca. Wyreguluj sondę, aby zoptymalizować rozdzielczość obrazu. Jest to trudne, ale wraz z praktyką stanie się łatwiejsze.

Bardzo ważne jest, aby pamiętać o monitorowaniu oddechu zwierzęcia pod narkozą, aby upewnić się, że wyniki badania nie są zagrożone. Naciśnij przycisk zamrażania, aby tymczasowo zapisać obrazy przysłony i view wybrane skurcze. Zapisz nagranie jako pętlę cylindryczną, która pozwala na późniejsze pomiary przemieszczenia przepony i częstości oddechów.

Po obrazowaniu mysz powinna całkowicie wyzdrowieć ze znieczulenia w ciągu 30 minut. Nie pozostawiaj zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyska wystarczającej przytomności, aby utrzymać mostek w pozycji leżącej. Aby przeanalizować dane w trybie M, zmierz głębokość i szybkość ruchu przepony od relaksacji do skurczu za pomocą suwmiarki elektronicznej, która jest częścią oprogramowania ultrasonograficznego.

Alternatywnie, w trybie B, przekonwertuj plik pętli CINA na plik MP four i określ częstość oddechów, zliczając liczbę skurczów przepony w okresie nagrywania, suwmiarki elektroniczne mogą być również używane w trybie B do określenia głębokości ruchu membrany. Rejestrowano przysłonę myszy, maksymalne przemieszczenie pionowe, a następnie obliczano odległość zgodnie z protokołem za pomocą suwmiarki elektronicznej. Takie pomiary wykonano na trzech różnych myszach.

Aby to zilustrować, jest to po przekonwertowaniu pliku pętli CIL na plik MP four. Częstość oddechów określono poprzez zliczenie liczby skurczów przepony podczas sześciosekundowego okresu rejestracji. Analiza ta została przeprowadzona w trybie B.

Alternatywnie, tryb M zapewniał wizualizację pionowego ruchu przepony, a także częstości oddechów. Istnieją pewne potencjalne artefakty obrazowania, które mogą wystąpić podczas wykonywania diagnostycznego obrazowania ultrasonograficznego, takie jak pogłos. Innym artefaktem, z którym można się spotkać, jest obecność opowieści o kometach Po opanowaniu ta technika może zająć od 20 do 30 minut, jeśli zostanie wykonana prawidłowo.

Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak dokładnie ocenić kurczliwość przepony w modelu myszy przy użyciu techniki diagnostycznego obrazowania ultrasonograficznego.