Zarodki kurczaków są doskonałym modelem do badania wczesnego rozwoju kręgowców, częściowo dlatego, że są łatwe i niedrogie w utrzymaniu. W przeciwieństwie do większości organizmów modelowych, które są hodowane w laboratorium, zapłodnione jaja kurze są kupowane od zewnętrznego dostawcy. Dodatkowo utrzymanie i praca z jajami wymaga bardzo mało specjalistycznego sprzętu. Ten film dostarczy ogólnych informacji na temat pozyskiwania i utrzymywania jaj piskląt, technik niezbędnych do pracy z rozwijającymi się zarodkami oraz niektórych praktycznych zastosowań tych metod.
Zanim omówimy pracę z pisklętami w laboratorium, przyjrzyjmy się, jak kury dbają o swoje jaja w domu. Chociaż jaja są już zapłodnione w momencie ich złożenia, rozwój piskląt zatrzymuje się, gdy jaja są wystawione na działanie niższych temperatur zewnętrznych. Po złożeniu około 12 jaj kura siada na gnieździe, aby wznowić rozwój zarodka. Podczas inkubacji kura będzie obracać jaja, aby równomiernie je ogrzać i zapobiec przywieraniu zarodka do skorupki. Jeśli wszystko pójdzie dobrze, 21 dni później mama ma potomstwo piskląt.
Jak więc naukowcy zbierają wystarczającą ilość jaj do swoich eksperymentów? Hm... to może trochę potrwać. Ponieważ kurczaki są powszechnie udomowione, zapłodnione jaja można łatwo uzyskać z wylęgarni lub hodowli. Jaja można zamawiać nawet na określonych etapach rozwoju.
Po dostarczeniu jaj do laboratorium można je przechowywać w temperaturze 13 - 16 °C przez okres do 5 dni. Kiedy będziesz gotowy na ich rozwój, pozwól jajom ogrzać się do temperatury pokojowej, a następnie przenieś je do inkubatora na biegunach w temperaturze 37 °C i wilgotności 60%, aż osiągną pożądany etap.
Większość eksperymentów przeprowadzanych na pisklętach wymaga kilku kroków przygotowawczych, takich jak sprawdzenie, czy otrzymane jaja zostały zapłodnione. Łatwym podejściem jest użycie jasnego źródła światła lub świecznika do oświetlenia jajka. Za pomocą tej techniki, znanej jako prześwietlanie, można uwidocznić struktury wewnętrzne, takie jak naczynia krwionośne, aby potwierdzić, że zarodek jest obecny.
Pozostawienie jaja w stanie nienaruszonym poprawia przeżywalność piskląt, ale skorupka uniemożliwia dostęp do zarodka. Aby rozwiązać ten problem, naukowcy używają techniki zwanej okienkami.
Zacznij od złożenia jaj na boku i zaznaczenia góry, aby zidentyfikować stronę, na którą wzniesie się zarodek. Aby zapobiec uszkodzeniu żółtka podczas wycinania okna, usuwa się niewielką ilość albuminy lub białka jaja, aby obniżyć zarodek z dala od skorupy. Aby to zrobić, najpierw wysterylizuj skorupę, przecierając ją 70% etanolem. Po wyschnięciu skorupki wygładź kawałek taśmy na tępym końcu jajka. Następnie użyj sterylnej igły, aby przekłuć taśmę i skorupę. Wbić igłę w dół, aby uniknąć uszkodzenia żółtka i usunąć 5 ml albuminy. Na koniec, aby zapobiec wyciekowi albuminy, uszczelnij otwór innym kawałkiem taśmy.
Aby przeciąć skorupę, umieść kawałek taśmy na obszarze, który planujesz okno. Za pomocą nożyczek zrób mały otwór w skorupie i zacznij wycinać okrągły otwór. Podczas tego procesu taśma zapobiegnie upadkowi fragmentów skorupy na zarodek.
Nawet po oknieniu zarodki we wczesnym stadium mogą być trudne do wizualizacji ze względu na ich mały rozmiar i przezroczystość. Aby poprawić kontrast między zarodkiem a żółtkiem, można użyć rozcieńczonego, nietoksycznego tuszu indyjskiego. Atrament wstrzykuje się do żółtka pod zarodkiem i pozostawia do dyfuzji. Zarodek można teraz zobaczyć w większym kontraście na ciemnym tle. Po przeprowadzeniu eksperymentów okienko należy ponownie uszczelnić taśmą, a jajo umieścić z powrotem w inkubatorze.
Teraz, gdy znasz już podstawowe techniki pracy z jajami, zobaczmy, jak te metody są wykorzystywane do przeprowadzania eksperymentów na zarodkach kurczaka.
Na początek można zastosować prześwietlanie w celu określenia lokalizacji struktur embrionalnych w nienaruszonych jajach. Na przykład błony pozazarodkowe zarodka kurczaka są powszechnie wykorzystywane do namnażania wirusów. Aby zainfekować błonę, przeprowadza się prześwietlanie w celu zlokalizowania granicy faz między jamą omocznikową a workiem powietrznym, w celu wstrzyknięcia wirusa bezpośrednio do jamy omocznikowej bez uszkadzania zarodka. Po kilku dniach inkubacji z płynu omoczniowego można zebrać dużą liczbę cząstek wirusa.
Oknowiercenie jaj jest niezwykle przydatną praktyką, ponieważ umożliwia dostęp do zarodka w celu przeprowadzenia eksperymentów. Wiele eksperymentów rozpoczyna się od dostarczenia DNA do określonych tkanek za pomocą mikroiniekcji. Elektrody są następnie umieszczane wokół tkanki będącej przedmiotem zainteresowania i stosuje się pole elektryczne, aby tymczasowo przeniknąć przez błonę komórkową i wprowadzić kwasy nukleinowe do komórki.
Podczas przeprowadzania eksperymentów na wczesnych zarodkach, wstrzyknięcie atramentu indyjskiego jest szczególnie przydatne do wizualizacji przezroczystych tkanek. W tym przypadku ulepszony kontrast pozwala naukowcom na mikrowstrzyknięcie roztworu DNA do wyrafinowanych domen tkankowych. Ostatecznie technika ta może wytworzyć indywidualnie znakowane komórki, które mogą być monitorowane w czasie w celu śledzenia podziałów komórkowych.
Właśnie obejrzałeś film JoVE na temat opieki nad pisklętami. Prezentacja ta obejmowała podstawowe obchodzenie się z jajami kurzymi i ich konserwację, typowe techniki pracy z pisklętami oraz kilka przykładów zastosowania tych metod w badaniach biologicznych. Dzięki za oglądanie!
Pisklęta (Gallus gallus domesticus) są cennym narzędziem badawczym, nie tylko do badania ważnych pojęć w rozwoju kręgowców, neurobiologii i biologii nowotworów, ale także jako skuteczny system do rozmnażania wirusów. Chociaż jaja można kupić od dostawców zewnętrznych, a praca z pisklętami wymaga bardzo niewielkiego specjalistycznego sprzętu, do prawidłowego rozwoju zarodka wymagane jest zrozumienie prawidłowych procedur obchodzenia się z nimi.
Ten film zawiera przegląd zasad obchodzenia się z jajami, w tym wyjaśnienie parametrów inkubacji, które mogą mieć głęboki wpływ na rozwój: temperatura, wilgotność i rotacja jaj. Większość eksperymentów z użyciem jaj kurzych wymaga dostępu do zarodka w skorupce, co uzyskuje się poprzez wycięcie małego, zamykanego otworu lub "okna". Proces ten jest szczegółowo opisany krok po kroku, wraz z kilkoma innymi technikami niezbędnymi do pracy z pisklętami, takimi jak świecowanie i wstrzykiwanie atramentu indyjskiego. Na koniec film dokona przeglądu niektórych praktycznych zastosowań tych podstawowych technik w zaawansowanych badaniach naukowych.
Zarodki kurczaków są doskonałym modelem do badania wczesnego rozwoju kręgowców, częściowo dlatego, że są łatwe i niedrogie w utrzymaniu. W przeciwieństwie do większości organizmów modelowych, które są hodowane w laboratorium, zapłodnione jaja kurze są kupowane od zewnętrznego dostawcy. Dodatkowo utrzymanie i praca z jajami wymaga bardzo mało specjalistycznego sprzętu. Ten film dostarczy ogólnych informacji na temat pozyskiwania i utrzymywania jaj piskląt, technik niezbędnych do pracy z rozwijającymi się zarodkami oraz niektórych praktycznych zastosowań tych metod.
Zanim omówimy pracę z pisklętami w laboratorium, przyjrzyjmy się, jak kury dbają o swoje jaja w domu. Chociaż jaja są już zapłodnione w momencie ich złożenia, rozwój piskląt zatrzymuje się, gdy jaja są wystawione na działanie niższych temperatur zewnętrznych. Po złożeniu około 12 jaj kura siada na gnieździe, aby wznowić rozwój zarodka. Podczas inkubacji kura będzie obracać jaja, aby równomiernie je ogrzać i zapobiec przywieraniu zarodka do skorupki. Jeśli wszystko pójdzie dobrze, 21 dni później mama ma potomstwo piskląt.
Jak więc naukowcy zbierają wystarczającą ilość jaj do swoich eksperymentów? Hm... to może trochę potrwać. Ponieważ kurczaki są powszechnie udomowione, zapłodnione jaja można łatwo uzyskać z wylęgarni lub hodowli. Jaja można zamawiać nawet na określonych etapach rozwoju.
Po dostarczeniu jaj do laboratorium można je przechowywać w temperaturze 13 - 16 °C przez okres do 5 dni. Kiedy będziesz gotowy na ich rozwój, pozwól jajom ogrzać się do temperatury pokojowej, a następnie przenieś je do inkubatora na biegunach w temperaturze 37 °C i wilgotności 60%, aż osiągną pożądany etap.
Większość eksperymentów przeprowadzanych na pisklętach wymaga kilku kroków przygotowawczych, takich jak sprawdzenie, czy otrzymane jaja zostały zapłodnione. Łatwym podejściem jest użycie jasnego źródła światła lub świecznika do oświetlenia jajka. Za pomocą tej techniki, znanej jako prześwietlanie, można uwidocznić struktury wewnętrzne, takie jak naczynia krwionośne, aby potwierdzić, że zarodek jest obecny.
Pozostawienie jaja w stanie nienaruszonym poprawia przeżywalność piskląt, ale skorupka uniemożliwia dostęp do zarodka. Aby rozwiązać ten problem, naukowcy używają techniki zwanej okienkami.
Zacznij od złożenia jaj na boku i zaznaczenia góry, aby zidentyfikować stronę, na którą wzniesie się zarodek. Aby zapobiec uszkodzeniu żółtka podczas wycinania okna, usuwa się niewielką ilość albuminy lub białka jaja, aby obniżyć zarodek z dala od skorupy. Aby to zrobić, najpierw wysterylizuj skorupę, przecierając ją 70% etanolem. Po wyschnięciu skorupki wygładź kawałek taśmy na tępym końcu jajka. Następnie użyj sterylnej igły, aby przekłuć taśmę i skorupę. Wbić igłę w dół, aby uniknąć uszkodzenia żółtka i usunąć 5 ml albuminy. Na koniec, aby zapobiec wyciekowi albuminy, uszczelnij otwór innym kawałkiem taśmy.
Aby przeciąć skorupę, umieść kawałek taśmy na obszarze, który planujesz okno. Za pomocą nożyczek zrób mały otwór w skorupie i zacznij wycinać okrągły otwór. Podczas tego procesu taśma zapobiegnie upadkowi fragmentów skorupy na zarodek.
Nawet po oknieniu zarodki we wczesnym stadium mogą być trudne do wizualizacji ze względu na ich mały rozmiar i przezroczystość. Aby poprawić kontrast między zarodkiem a żółtkiem, można użyć rozcieńczonego, nietoksycznego tuszu indyjskiego. Atrament wstrzykuje się do żółtka pod zarodkiem i pozostawia do dyfuzji. Zarodek można teraz zobaczyć w większym kontraście na ciemnym tle. Po przeprowadzeniu eksperymentów okienko należy ponownie uszczelnić taśmą, a jajo umieścić z powrotem w inkubatorze.
Teraz, gdy znasz już podstawowe techniki pracy z jajami, zobaczmy, jak te metody są wykorzystywane do przeprowadzania eksperymentów na zarodkach kurczaka.
Na początek można zastosować prześwietlanie w celu określenia lokalizacji struktur embrionalnych w nienaruszonych jajach. Na przykład błony pozazarodkowe zarodka kurczaka są powszechnie wykorzystywane do namnażania wirusów. Aby zainfekować błonę, przeprowadza się prześwietlanie w celu zlokalizowania granicy faz między jamą omocznikową a workiem powietrznym, w celu wstrzyknięcia wirusa bezpośrednio do jamy omocznikowej bez uszkadzania zarodka. Po kilku dniach inkubacji z płynu omoczniowego można zebrać dużą liczbę cząstek wirusa.
Oknowiercenie jaj jest niezwykle przydatną praktyką, ponieważ umożliwia dostęp do zarodka w celu przeprowadzenia eksperymentów. Wiele eksperymentów rozpoczyna się od dostarczenia DNA do określonych tkanek za pomocą mikroiniekcji. Elektrody są następnie umieszczane wokół tkanki będącej przedmiotem zainteresowania i stosuje się pole elektryczne, aby tymczasowo przeniknąć przez błonę komórkową i wprowadzić kwasy nukleinowe do komórki.
Podczas przeprowadzania eksperymentów na wczesnych zarodkach, wstrzyknięcie atramentu indyjskiego jest szczególnie przydatne do wizualizacji przezroczystych tkanek. W tym przypadku ulepszony kontrast pozwala naukowcom na mikrowstrzyknięcie roztworu DNA do wyrafinowanych domen tkankowych. Ostatecznie technika ta może wytworzyć indywidualnie znakowane komórki, które mogą być monitorowane w czasie w celu śledzenia podziałów komórkowych.
Właśnie obejrzałeś film JoVE na temat opieki nad pisklętami. Prezentacja ta obejmowała podstawowe obchodzenie się z jajami kurzymi i ich konserwację, typowe techniki pracy z pisklętami oraz kilka przykładów zastosowania tych metod w badaniach biologicznych. Dzięki za oglądanie!
Zarodki kurczaków są doskonałym modelem do badania wczesnego rozwoju kręgowców, częściowo dlatego, że są łatwe i niedrogie w utrzymaniu. W przeciwieństwie do większości organizmów modelowych, które są hodowane w laboratorium, zapłodnione jaja kurze są kupowane od zewnętrznego dostawcy. Dodatkowo utrzymanie i praca z jajami wymaga bardzo mało specjalistycznego sprzętu. Ten film dostarczy ogólnych informacji na temat pozyskiwania i utrzymywania jaj piskląt, technik niezbędnych do pracy z rozwijającymi się zarodkami oraz niektórych praktycznych zastosowań tych metod.
Zanim omówimy pracę z pisklętami w laboratorium, przyjrzyjmy się, jak kury dbają o swoje jaja w domu. Chociaż jaja są już zapłodnione w momencie ich złożenia, rozwój piskląt zatrzymuje się, gdy jaja są wystawione na działanie niższych temperatur zewnętrznych. Po złożeniu około 12 jaj kura siada na gnieździe, aby wznowić rozwój zarodka. Podczas inkubacji kura będzie obracać jaja, aby równomiernie je ogrzać i zapobiec przywieraniu zarodka do skorupki. Jeśli wszystko pójdzie dobrze, 21 dni później mama ma potomstwo piskląt.
Jak więc naukowcy zbierają wystarczającą ilość jaj do swoich eksperymentów? Hm... to może trochę potrwać. Ponieważ kurczaki są powszechnie udomowione, zapłodnione jaja można łatwo uzyskać z wylęgarni lub hodowli. Jaja można zamawiać nawet na określonych etapach rozwoju.
Po dostarczeniu jaj do laboratorium można je przechowywać w temperaturze 13 - 16 °C przez okres do 5 dni. Kiedy będziesz gotowy na ich rozwój, pozwól jajom ogrzać się do temperatury pokojowej, a następnie przenieś je do inkubatora na biegunach w temperaturze 37 °C i wilgotności 60%, aż osiągną pożądany etap.
Większość eksperymentów przeprowadzanych na pisklętach wymaga kilku kroków przygotowawczych, takich jak sprawdzenie, czy otrzymane jaja zostały zapłodnione. Łatwym podejściem jest użycie jasnego źródła światła lub świecznika do oświetlenia jajka. Za pomocą tej techniki, znanej jako prześwietlanie, można uwidocznić struktury wewnętrzne, takie jak naczynia krwionośne, aby potwierdzić, że zarodek jest obecny.
Pozostawienie jaja w stanie nienaruszonym poprawia przeżywalność piskląt, ale skorupka uniemożliwia dostęp do zarodka. Aby rozwiązać ten problem, naukowcy używają techniki zwanej okienkami.
Zacznij od złożenia jaj na boku i zaznaczenia góry, aby zidentyfikować stronę, na którą wzniesie się zarodek. Aby zapobiec uszkodzeniu żółtka podczas wycinania okna, usuwa się niewielką ilość albuminy lub białka jaja, aby obniżyć zarodek z dala od skorupy. Aby to zrobić, najpierw wysterylizuj skorupę, przecierając ją 70% etanolem. Po wyschnięciu skorupki wygładź kawałek taśmy na tępym końcu jajka. Następnie użyj sterylnej igły, aby przekłuć taśmę i skorupę. Wbić igłę w dół, aby uniknąć uszkodzenia żółtka i usunąć 5 ml albuminy. Na koniec, aby zapobiec wyciekowi albuminy, uszczelnij otwór innym kawałkiem taśmy.
Aby przeciąć skorupę, umieść kawałek taśmy na obszarze, który planujesz okno. Za pomocą nożyczek zrób mały otwór w skorupie i zacznij wycinać okrągły otwór. Podczas tego procesu taśma zapobiegnie upadkowi fragmentów skorupy na zarodek.
Nawet po oknieniu zarodki we wczesnym stadium mogą być trudne do wizualizacji ze względu na ich mały rozmiar i przezroczystość. Aby poprawić kontrast między zarodkiem a żółtkiem, można użyć rozcieńczonego, nietoksycznego tuszu indyjskiego. Atrament wstrzykuje się do żółtka pod zarodkiem i pozostawia do dyfuzji. Zarodek można teraz zobaczyć w większym kontraście na ciemnym tle. Po przeprowadzeniu eksperymentów okienko należy ponownie uszczelnić taśmą, a jajo umieścić z powrotem w inkubatorze.
Teraz, gdy znasz już podstawowe techniki pracy z jajami, zobaczmy, jak te metody są wykorzystywane do przeprowadzania eksperymentów na zarodkach kurczaka.
Na początek można zastosować prześwietlanie w celu określenia lokalizacji struktur embrionalnych w nienaruszonych jajach. Na przykład błony pozazarodkowe zarodka kurczaka są powszechnie wykorzystywane do namnażania wirusów. Aby zainfekować błonę, przeprowadza się prześwietlanie w celu zlokalizowania granicy faz między jamą omocznikową a workiem powietrznym, w celu wstrzyknięcia wirusa bezpośrednio do jamy omocznikowej bez uszkadzania zarodka. Po kilku dniach inkubacji z płynu omoczniowego można zebrać dużą liczbę cząstek wirusa.
Oknowiercenie jaj jest niezwykle przydatną praktyką, ponieważ umożliwia dostęp do zarodka w celu przeprowadzenia eksperymentów. Wiele eksperymentów rozpoczyna się od dostarczenia DNA do określonych tkanek za pomocą mikroiniekcji. Elektrody są następnie umieszczane wokół tkanki będącej przedmiotem zainteresowania i stosuje się pole elektryczne, aby tymczasowo przeniknąć przez błonę komórkową i wprowadzić kwasy nukleinowe do komórki.
Podczas przeprowadzania eksperymentów na wczesnych zarodkach, wstrzyknięcie atramentu indyjskiego jest szczególnie przydatne do wizualizacji przezroczystych tkanek. W tym przypadku ulepszony kontrast pozwala naukowcom na mikrowstrzyknięcie roztworu DNA do wyrafinowanych domen tkankowych. Ostatecznie technika ta może wytworzyć indywidualnie znakowane komórki, które mogą być monitorowane w czasie w celu śledzenia podziałów komórkowych.
Właśnie obejrzałeś film JoVE na temat opieki nad pisklętami. Prezentacja ta obejmowała podstawowe obchodzenie się z jajami kurzymi i ich konserwację, typowe techniki pracy z pisklętami oraz kilka przykładów zastosowania tych metod w badaniach biologicznych. Dzięki za oglądanie!
Chapters in this video
0:00
Overview
0:44
Egg Handling and Maintenance
2:08
Preparing Eggs for Experiments
4:31
Applications
6:14
Summary
Videos from this collection: