Name: Preferencja tłuszczowa: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Poznaj metodę oceny preferencji tłuszczowej u szczurów wykorzystującą manipulacje genetyczne i farmakologiczne. Model ten pozwala badać mechanizmy przejadania się i otyłości, oferując narzędzie do analizy wyborów pokarmowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy pragną podziękować za finansowanie z UL1TR000071 (NCATS), P30DK079638 (NIDDK), P30DA028821 (NIDA) i T32DA07287 (NIDA).

Wszystkie procedury eksperymentalne są zgodne z Przewodnikiem dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych (Institute of Laboratory Animal Resources (USA), 1996) oraz za zgodą Institutional Animal Care and Use Committee na University of Texas Medical Branch.
1. Tematy
<ol>
	<li>Pojedynczy samiec szczura Sprague-Dawley o wadze 225-250 g w temperaturze 21 °C i wilgotności względnej 30-50% z 12-godzinnym cyklem jasno-ciemnym (światła włączone 6:00-18:00).</li>
	<li>Utrzymuj szczury na pokarmie o niskiej zawartości tłuszczu (10% tłuszczu energetycznego). Przyzwyczaj szczury do jedzenia i pomieszczenia kolonijnego przez co najmniej 7 dni przed eksperymentami. Zwierzęta są przyzwyczajone do obchodzenia się z podłożem i dawkowania go przez trzy dni przed rozpoczęciem badań. Pierwszy dzień po habituacji jest dniem eksperymentalnym 1.</li>
</ol>
2. Preferencja linii bazowej
<ol>
	<li>Dzień 1 napełnij dwa czyste pojemniki na żywność, jeden oznaczony literą A, a drugi B, 10% tłustego pokarmu dla każdej klatki. Zważ pojemniki na żywność (z jedzeniem) i umieść je w klatce, upewniając się, że szczur ma dostęp do obu.</li>
	<li>Dzień 2, mniej więcej w tym samym czasie, w którym zbiorniki na żywność zostały umieszczone w klatce dzień wcześniej, zarejestruj wagę zasobnika na żywność i zamień pozycje leja A i zasobnika B. Zmniejsza to stronniczość pozycji. Zawsze sprawdzaj klatkę domową pod kątem wyjętej żywności z leja, zważ ją i rozlicz. Spożycie pokarmu mierzy się zmianą masy zbiornika między dniami.</li>
	<li>Dzień 3, zapisz wagę zbiornika na żywność jak poprzednio. Sprawdź ilość spożytej żywności w każdej pozycji pojemnika na żywność i identyfikację pojemnika na żywność (A i B). Dane te dają podstawowe zrozumienie odchylenia pozycji i określonych preferencji leja samowyładowczego, a wynik preferencji powinien wynosić około 50% co oznacza brak preferencji. Wyrzuć pozostałe jedzenie.</li>
</ol>
3. Preferencja tłuszczu
<ol>
	<li>Dzień 3, zaopatrz się w dwa czyste pojemniki na żywność dla każdej klatki. Ważne jest, aby używać czystych pojemników na żywność za każdym razem, gdy przełączasz się między różnymi produktami spożywczymi, aby zapobiec mylącym zapachom z poprzednich eksperymentów. Napełnij zbiornik A 12,5% tłuszczu i zbiornik B 15% tłuszczu (Tabela 1). Zapisz ciężar początkowy każdego zbiornika i umieść oba w klatce.</li>
	<li>Dzień 4 zapisz wagę każdego leja, zamieniając pozycje leja A i leja B po umieszczeniu ich z powrotem w klatce.</li>
	<li>Dzień 5 zapisz wagę każdego leja samowyładowczego. Po określeniu gramów każdego pokarmu spożywanego w oba dni można określić preferencje żywieniowe szczura.</li>
	<li>Powtórz kroki od 3.1 do 3.3 wiele razy z tymi samymi zwierzętami, używając pokarmu o zawartości tłuszczu 12,5% w porównaniu z pokarmami o zwiększonej zawartości tłuszczu (np. najpierw 15%, następnie 17,5%, następnie 20%, a na końcu 45% tłuszczu).</li>
</ol>
4. Obliczenia i analiza danych
<ol>
	<li>Oblicz dzienne spożycie pokarmu dla każdego zwierzęcia, odejmując końcową masę karmy + zbiornika od masy początkowej karmy + zbiornika. Ponieważ każdy pokarm jest mierzony przez 2 dni, suma 2 dni może być sumowana dla każdego % zawartości tłuszczu.</li>
	<li>Oblicz wynik preferencji tłuszczowej, dzieląc spożycie pokarmu o wyższej zawartości tłuszczu od całkowitego spożycia pokarmu w każdym okresie dwóch dni. Na przykład jeden szczur zjadł 8,9 g diety 12,5% tłuszczu i 27,5 g diety 17,5% w ciągu 2 dni. W związku z tym wynik preferencji dla tego konkretnego zwierzęcia wynosi 76% (27,5 podzielone przez 36,4).</li>
	<li>Uśrednij i wykreśl wynik preferencji dla każdej diety (15%, 17,5%, 20% i 45% tłuszczu) (Ryc. 3). Całkowite spożycie pokarmu jest również pouczające i można je łatwo wykreślić w gramach (ryc. 4).</li>
	<li>Wyraź wynik preferencji (Rysunek 5A) i całkowite spożycie pokarmu (Rysunek 5B) jako funkcję całkowitego spożycia energii (kilokalorie), korzystając z gęstości energii w Tabeli 1.</li>
	<li>W przypadku wykorzystania więcej niż jednej grupy zwierząt należy przeprowadzić dwukierunkową powtarzaną wartość pomiaru ANOVA, a następnie test końcowy Bonferroniego. Analiza mocy wskazuje, że n = 8 zwierząt w grupie jest odpowiednie do wykrycia różnicy wynoszącej 7% między grupami badanymi.</li>
</ol>

<ol><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Ogden, C. L., Curtin, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+trends+in+obesity+among+US+adults%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Prevalence and trends in obesity among US adults.</a> JAMA. 303 (3), 235-241 (1999).</li>
<li>Mokdad, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+obesity%2C+diabetes%2C+and+obesity-related+health+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Prevalence of obesity, diabetes, and obesity-related health risk factors.</a> JAMA. 289 (1), 76-79 (2003).</li>
<li>Abete, I., Astrup, A., Martínez, J. A., Thorsdottir, I., Zulet, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+the+metabolic+syndrome%3A+role+of+different+dietary+macronutrient+distribution+patterns+and+specific+nutritional+components+on+weight+loss+and+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Rev%22%5BJournal%5D)">Obesity and the metabolic syndrome: role of different dietary macronutrient distribution patterns and specific nutritional components on weight loss and maintenance.</a> Nutr. Rev. 68 (4), 214-231 (2010).</li>
<li>Berthoud, H. R., Münzberg, H., Richards, B. K., Morrison, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+and+metabolic+regulation+of+macronutrient+intake+and+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nutr.+Soc%22%5BJournal%5D)">Neural and metabolic regulation of macronutrient intake and selection.</a> Proc. Nutr. Soc. 71 (3), 390-400 (2012).</li>
<li>Warwick, Z. S., Schiffman, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+dietary+fat+in+calorie+intake+and+weight+gain%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Role of dietary fat in calorie intake and weight gain.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 16 (4), 585-596 (1992).</li>
<li>Kendall, A., Levitsky, D. A., Strupp, B. J., Lissner, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+loss+on+a+low-fat+diet%3A+consequence+of+the+imprecision+of+the+control+of+food+intake+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Weight loss on a low-fat diet: consequence of the imprecision of the control of food intake in humans.</a> Am. J. Clin. Nutr. 53 (5), 1124-1129 (1991).</li>
<li>Ackroff, K., Sclafani, A. Oral and Postoral Determinants of Dietary Fat Appetite. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAckroff%2C+K+%22Fat+Detection%3A+Taste%2C+Texture%2C+and+Post+Ingestive+Effects.+Chapter+12%22">Fat Detection: Taste, Texture, and Post Ingestive Effects. Chapter 12</a>. Montmayeur, J. P., leCoutre, J. , CRC Press. (2010).</li>
<li>West, D. B., York, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+fat%2C+genetic+predisposition%2C+and+obesity%3A+lessons+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Dietary fat, genetic predisposition, and obesity: lessons from animal models.</a> Am. J. Clin. Nutr. 67, 505-512 (1998).</li>
<li>Sclafani, A., Ackroff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+gut+nutrient+sensing+in+stimulating+appetite+and+conditioning+food+preferences%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Role of gut nutrient sensing in stimulating appetite and conditioning food preferences.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 302 (10), (2012).</li>
<li>Velloso, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+brain+is+the+conductor%3A+diet-induced+inflammation+overlapping+physiological+control+of+body+mass+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Arq.+Bras.+Endocrinol.+Metabol%22%5BJournal%5D)">The brain is the conductor: diet-induced inflammation overlapping physiological control of body mass and metabolism.</a> Arq. Bras. Endocrinol. Metabol. 53 (2), 151-158 (2009).</li>
<li>Vanzela, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+restores+insulin+secretion+from+pancreatic+islets+in+cafeteria+diet-induced+obese+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Pregnancy restores insulin secretion from pancreatic islets in cafeteria diet-induced obese rats.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 298 (2), (2010).</li>
<li>Johnson, S. L., McPhee, L., Birch, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditioned+preferences%3A+young+children+prefer+flavors+associated+with+high+dietary+fat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Conditioned preferences: young children prefer flavors associated with high dietary fat.</a> Physiol. Behav. 50 (6), 1245-1251 (1991).</li>
<li>Bolanos, C. A., Barrot, M., Berton, O., Wallace-Black, D., Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methylphenidate+treatment+during+pre-+and+periadolescence+alters+behavioral+responses+to+emotional+stimuli+at+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Methylphenidate treatment during pre- and periadolescence alters behavioral responses to emotional stimuli at adulthood.</a> Biol. Psychiatry. 54, 1317-1329 (2003).</li>
<li>Ignar, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+Ingestive+Behaviors+in+the+Rat+by+GSK1521498%2C+a+Novel+%7Bmicro%7D-Opioid+Receptor-Selective+Inverse+Agonist%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">Regulation of Ingestive Behaviors in the Rat by GSK1521498, a Novel {micro}-Opioid Receptor-Selective Inverse Agonist.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 339, 24-34 (2011).</li>
<li>Benzon, C. R., Johnson, S. B., McCue, D. L., Li, D., Green, T. A., Hommel, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromedin+U+receptor+2+knockdown+in+the+paraventricular+nucleus+modifies+behavioral+responses+to+obesogenic+high-fat+food+and+leads+to+increased+body+weight%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neuromedin U receptor 2 knockdown in the paraventricular nucleus modifies behavioral responses to obesogenic high-fat food and leads to increased body weight.</a> Neuroscience. , (2013).</li>
<li>Lucas, F., Ackroff, K., Sclafani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+fat-induced+hyperphagia+in+rats+as+a+function+of+fat+type+and+physical+form%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Dietary fat-induced hyperphagia in rats as a function of fat type and physical form.</a> Physiol Behav. 45 (5), 937-946 (1989).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Model preferencji tłuszczowej jest pouczającym i łatwym do wykonania testem zachowań żywieniowych. Test ten daje możliwość zidentyfikowania mechanizmów neuronalnych i molekularnych, które leżą u podstaw preferencji żywieniowych, co jest ważnym, ale niedostatecznie zbadanym obszarem badań nad otyłością. Zmiany w preferencjach dotyczących tłuszczu wynikające z różnic genetycznych lub manipulacji farmakologicznych można wizualizować jako przesunięcia w prawo lub w lewo na krzywej preferencji (Figura 3B). Wa...

Otyłość jest powszechnym problemem w Stanach Zjednoczonych1, a Centra Kontroli i Prewencji Chorób szacują, że ponad jedna trzecia dorosłych Amerykanów jest otyła. Otyłość została również uznana za czynnik ryzyka wielu problemów zdrowotnych, w tym cukrzycy typu 2, wysokiego ciśnienia krwi i wysokiego poziomu cholesterolu2. Chociaż wykazano, że wiele czynników wpływa na wzrost wskaźników otyłości, istnieje ciągłe zainteresowanie i kontrowersje dotyczące roli, jaką makroskładniki odżywcze odgrywają w otyłości3,4.
Jednym z czynników przyczyniających się do otyłości jest wysokie spożycie tłuszczów w diecie5. Zwiększona ilość tłuszczu w diecie jest skorelowana ze zwiększonym spożyciem energii przez człowieka6 i znacznym wzrostem zawartości tkanki tłuszczowej7,8. Dodatkowo tłuszcz w diecie ma wartość nagrody zarówno w trakcie, jak i po spożyciu7,9. W związku z tym określenie, jakie czynniki wpływają na preferencję dla pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu, może zarówno kierować projektem farmakoterapeutycznym, jak i promować zrozumienie podstawowych wyborów żywieniowych, które mogą prowadzić do otyłości. Opisany tutaj model preferencji tłuszczowej testuje preferencje szczurów między pokarmami o różnej zawartości tłuszczu, ale o podobnej wartości odżywczej. W szczególności model ten daje szczurom wybór dwóch różnych pokarmów jednocześnie, umożliwiając w ten sposób ilościowe określenie preferencji na podstawie spożywanych gramów pokarmu o niższej zawartości tłuszczu w porównaniu z pokarmem o wyższej zawartości tłuszczu. Efekty farmakologiczne i genetyczne można mierzyć jako zmianę preferencji dla żywności o wyższej zawartości tłuszczu.
Model preferencji tłuszczu służy jako uzupełnienie powszechnie stosowanych modeli spożycia smacznych pokarmów10, ale oferuje również kilka zalet. Model ten pozwala eksperymentatorowi na specyficzną ocenę zachowań żywieniowych w kontrolowanym środowisku, w którym dostępne są dwie opcje żywieniowe. Tradycyjne modele żywienia o wysokiej zawartości tłuszczu oferują tylko jeden pokarm, co eliminuje zdolność do badania wyboru pokarmu, co jest ważnym aspektem przyjmowania pokarmu przez ludzi. Niektóre testy oferują wiele rodzajów żywności i są często określane jako badania żywieniowe typu "kafeteria"11. Badania te mają negatywną powtarzalność, ponieważ żywność dla ludzi jest często używana w teście i nie jest dobrze dostosowana do środowiska laboratoryjnego ze względu na zmienność składników odżywczych. Stosujemy zdefiniowane diety, które zawierają poszczególne oczyszczone składniki, co znacznie poprawia odtwarzalność i elastyczność w zakresie zmiany zawartości makroskładników, takich jak tłuszcz w diecie. Biorąc pod uwagę wyższe spożycie tłuszczu w diecie związane z otyłością u ludzi5 i naturalną preferencję człowieka do pokarmów o wyższej zawartości tłuszczu12, terapie, które zmieniają preferencje szczurów do pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu, mogą dostarczyć cennych informacji na temat otyłości.

<table><tbody><tr><td>Dieta dla gryzoni z 10 kcal% tłuszczu</td><td>Diety badawcze</td><td>D12450B</td><td>10% tłuszczu Karma</td></tr> dla <tr><td>szczurów Dieta dla gryzoni z 12,5 kcal%</td><td>tłuszczu Diety badawcze</td><td>D07040501</td><td>12,5% tłuszczu Karma dla</td></tr><tr><td>szczurów Dieta dla gryzoni z 15 kcal% tłuszczu</td><td>Diety badawcze</td><td>D07040502</td><td>15% tłuszczu Karma</td>dla</tr><tr><td>szczurów Dieta dla gryzoni z 17,5 kcal% tłuszczu</td><td>Diety badawcze</td><td>D07040503</td><td>17,5% tłuszczu Karma</td></tr> <tr><td>dla szczurówDieta dla gryzoni z 20 kcal%</td><td>tłuszczu Research Diet</td><td>D07040504</td><td>20% tłuszczu Karma</td>dla</tr><tr><td>szczurów Dieta dla gryzoni z 45 kcal% tłuszczu</td><td>Research Diet</td><td>D12451</td><td>45% tłuszczu Karma</td></tr><tr><td>dla szczurów Karmniki dla szczurów (3,75 "szer. x 2,875" gł. x 5,25 "wys.)</td><td>Labex z MA</td><td>2528</td><td>Zbiorniki na żywność</td></tr></tbody></table>

preferencja tłuszczowa: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Otyłość jest rosnącym problemem w Stanach Zjednoczonych Ameryki, gdzie ponad jedna trzecia populacji jest klasyfikowana jako otyła. Jednym z czynników przyczyniających się do tego wieloczynnikowego zaburzenia jest spożywanie diety wysokotłuszczowej, zachowanie, które, jak wykazano, zwiększa zarówno spożycie kalorii, jak i zawartość tkanki tłuszczowej. Jednak elementy regulujące preferencję dla żywności o wysokiej zawartości tłuszczu w stosunku do innych pokarmów pozostają niedostatecznie zbadane.
Aby przezwyciężyć ten deficyt, opracowano model do szybkiego i łatwego testowania zmian w preferencjach dotyczących tłuszczu w diecie. Model preferencji tłuszczowej daje szczurom szereg wyborów między pokarmami o różnej zawartości tłuszczu. Podobnie jak ludzie, szczury mają naturalną skłonność do spożywania pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu, co czyni model szczura idealnym do badań translacyjnych. Zmiany w preferencjach można przypisać efektowi różnic genetycznych lub interwencji farmakologicznych. Model ten pozwala na badanie determinantów preferencji tłuszczowej i badania przesiewowe środków farmakoterapeutycznych, które wpływają na nabywanie otyłości.

Szczury miały jednoczesny fizyczny dostęp do obu podajników z pokarmem (Rysunek 1), aby wykazać preferencje w wyborze dostępnych pokarmów o różnej zawartości tłuszczu (Tabela 1). Pokarm dla szczurów był ważony codziennie, a wszelkie rozsypane ilości pokarmu były łatwo lokalizowane i uwzględniane (Rysunek 2). Stwierdzono, że rozsypanie drobnych cząstek pokarmu było minimalne i nie wpływa znacząco na dane. Korzystając z modelu preferencji tłuszczu, można zaobserwować wyraź...

Zawartość tłuszczu w diecie wpływa zarówno na spożycie energii, jak i skład tkanki tłuszczowej u ssaków. Badając preferencje szczurów do pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu w serii eksperymentów z wyboru, możliwe jest przetestowanie różnic genetycznych i interwencji farmakologicznych dotyczących ich preferencji dla pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu.

Preferencja tłuszczowa: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest ocena wpływu manipulacji genetycznych i farmakologicznych na preferencje dotyczące tłuszczów w diecie, co stanowi kluczowy czynnik warunkujący nadmierne spożycie pokarmów oraz otyłość. W tym celu najpierw napełnia się zasobniki A i B pokarmem zawierającym 10% tłuszczu, a po 24 godzinach mierzy się stopień jego spożycia. W drugim kroku zamienia się położenie zasobników A i B, a następnego dnia ponownie je ważone, aby określić bazowe preferencje co do miejsca karmienia.Następnie preferencję tłuszczu można określić, powtarzając powyższe kroki wielokrotnie z pożywieniem zawierającym 12% tłuszczu oraz pożywieniem o wyższej zawartości tłuszczu. Ostatnim krokiem jest obliczenie wyniku preferencji poprzez podzielenie gramów spożytej diety o wyższej zawartości tłuszczu przez całkowitą ilość pożywienia spożytego z obu diet. Ostatecznie model preferencji tłuszczu służy do wykazania, w jaki sposób manipulacje eksperymentalne mogą zmienić preferencje szczurów względem pożywienia wysokotłuszczowego.Ta metoda może pomóc w odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie otyłości, takie jak to, jakie szlaki w mózgu pośredniczą w zachowaniach związanych z konsumpcją pokarmów wysokotłuszczowych. Technikę tę można rozszerzyć na opracowywanie terapii leczących otyłość i w szczególności zaburzenia odżywiania, ponieważ pozwala ona na selektywne ograniczanie spożycia produktów bogatych w tłuszcze i cukry. W poniższym protokole samce szczurów linii Sprague-Dawley są utrzymywane w pojedynczych klatkach w 12-godzinnym cyklu światło-ciemność.Napełnij dozownik paszy niskotłuszczową karmą i poddaj szczury habituacji do pożywienia oraz pomieszczenia kolonijnego przez co najmniej siedem dni przed rozpoczęciem eksperymentu, w tym przez trzy dni poprzedzające pomiary bazowe. Manipuluj każdym zwierzęciem testowym w celu redukcji stresu i w razie potrzeby podaj im nośnik, aby oswoić je z procesem dawkowania. Aby rozpocząć badanie w pierwszym dniu, napełnij dwa czyste dozowniki karmą zawierającą 10% tłuszczu i oznacz je jako dozowniki A i B. Zważ napełnione dozowniki i umieść je w klatce, upewniając się, że szczur ma dostęp do obu.Następnego dnia pozwól szczurowi na swobodne jedzenie z obu zasobników przez 24 godziny. Około tej samej godziny zapisz wagę obu zasobników z pokarmem. Zawsze sprawdzaj klatkę macierzystą w poszukiwaniu jedzenia usuniętego z zasobnika.W przypadku znalezienia rozsypanego pokarmu, należy zważyć go wraz z pozostałą ilością jedzenia. Wrócić zasobniki do klatki, zamieniając miejscami zasobnik A i B, aby zniwelować błąd wynikający z położenia. Trzeciego dnia zapisać masę pokarmu w zasobnikach w taki sam sposób jak poprzednio.Zbadaj ilość pokarmu spożytego z każdej pozycji zasobnika, aby uzyskać podstawową wiedzę na temat preferencji położenia. Po zebraniu pomiarów bazowych przygotuj dwa czyste zasobniki na pokarm; zasobnik A napełnij pokarmem zawierającym 12,5% tłuszczu, a zasobnik B pokarmem z zawartością 15% tłuszczu. Po zarejestrowaniu wag początkowych każdego zasobnika, umieść oba w klatce następnego dnia.Zapisz wagę każdego podajnika zgodnie z wcześniejszą instrukcją i zamień je miejscami podczas ponownego umieszczania w klatce. Piątego dnia zapisz wagę każdego podajnika, aby obliczyć liczbę gramów spożytego pokarmu i określić preferencje żywieniowe szczura.Powyższe kroki można powtórzyć wielokrotnie u tych samych zwierząt, stosując pasze o coraz wyższej zawartości tłuszczu. Aby obliczyć dzienną ilość spożytej paszy dla każdego zwierzęcia, należy odjąć końcową masę paszy wraz z podajnikiem od masy początkowej. Ponieważ każda pasza jest odmierzana przez dwa dni, całkowitą ilość z tych dwóch dni można zsumować dla każdej grupy.Następnie oblicza się wskaźnik preferencji tłuszczu, dzieląc spożycie pokarmu o wyższej zawartości tłuszczu przez całkowitą ilość spożytego pokarmu w każdym dwudniowym okresie. Aby przedstawić wskaźnik preferencji oraz całkowite spożycie pokarmu jako funkcję całkowitego spożycia energii i gęstości energetycznej, stosuje się tabelę; szczury wykazują rosnącą preferencję dla pokarmów o wyższej zawartości tłuszczu, przy czym preferencja dla pokarmów zawierających 15%, 17,5%, 20% i 45% tłuszczu jest istotnie większa w porównaniu do pokarmu z 12,5% zawartością tłuszczu. Metoda preferencji tłuszczu pozwala na uzyskanie krzywej efektu dawka-odpowiedź, w której preferencja zmienia się wraz z zawartością tłuszczu w stosunku do pokarmu z 12,5% zawartością tłuszczu. W tym przypadku preferencja dla pokarmu o wyższej zawartości tłuszczu jest wyrażona w gramach spożytego pokarmu, co dostarcza dodatkowych informacji o zmianach całkowitego spożycia pokarmu w trakcie trwania eksperymentu.Podczas badania poziomu spożycia energii dane wykazują, że szczury w trakcie testów preferencji przyjmują więcej kalorii z pokarmów o wyższej zawartości tłuszczu, zależnie od procentowej zawartości tłuszczu w oferowanych produktach. Metoda ta otwiera badaczom zajmującym się chorobami metabolicznymi drogę do zgłębienia złożonego zjawiska behawioralnego, które wyjaśnia, dlaczego preferujemy określone rodzaje pokarmów bogatych w tłuszcze i cukry, takich jak frytki, hamburgery i ciasteczka. Po opanowaniu techniki ta może być wykonywana przez 40 minut dziennie przez 10 dni.

fat-preference-a-novel-model-of-eating-behavior-in-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Preferencja tłuszczu: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów

Niniejszy raport szczegółowo opisuje protokół wykorzystany do pomiaru efektów nagradzających wysokotłuszczowej diety u myszy z wykorzystaniem zadania warunkowania sprawczego o stosunku progresywnym.

Reagowanie w schemacie progresywnego stosunku wzmocnień dla smakołyków o wysokiej zawartości tłuszczów i cukrów u myszy

Obecne badanie ocenia nowatorską procedurę oceny wzmacniających efektów smacznych roztworów u szczurów laboratoryjnych: samodzielne podawanie wewnątrzustne. W tym celu mierzono reakcję instrumentalną (tj. naciskanie dźwignią) na wewnątrzustne wlewy słodkich roztworów o różnych stężeniach na podstawie ciągłych i progresywnych harmonogramów współczynników wzmocnienia.

Nowatorska procedura oceny wzmacniających właściwości degustatorów u szczurów laboratoryjnych: instrumentalne samodzielne podawanie wewnątrzustne

Tutaj prezentujemy protokół indukowania anoreksji opartej na aktywności (ABA) u samic dorastających myszy. ABA to stan nadpobudliwości wywołany przez nałożenie ograniczenia pokarmowego na gryzonie mające dostęp do koła do biegania. Zjawisko to jest wykorzystywane jako model do badania neurobiologii leżącej u podstaw jadłowstrętu psychicznego.

Wykorzystanie modelu gryzoni anoreksji opartej na aktywności do badania neurobiologicznych podstaw jadłowstrętu psychicznego

Celem tego badania jest zidentyfikowanie rozproszonych sieci mózgowych związanych z nagrodą poprzez nakreślenie niezawodnej techniki immunohistologicznej wykorzystującej komórkową aktywację c-fos do pomiaru jednoczesnych zmian w szlakach dopaminy i miejscach końcowych po nowym spożyciu tłuszczu i cukru u szczurów.

Jednoczesne wykrywanie aktywacji c-FOS z mezolimbicznych i mezokortykalnych miejsc nagrody dopaminy po naiwnym spożyciu cukru i tłuszczu u szczurów

Ten protokół opisuje użycie analizatora składu ciała i systemu monitorowania metabolizmu zwierząt do charakteryzowania składu ciała i parametrów metabolicznych u myszy. Jako przykład zastosowania tych technik podaje się model otyłości wywołanej przez żywienie wysokotłuszczowe.

Analiza składu ciała i metabolicznego umieszczania w klatkach u myszy karmionych wysokotłuszczowo

Tutaj prezentujemy protokół wprowadzający szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM).

Szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej

Ten protokół opisuje użycie bardzo smacznej diety stołówkowej w stylu zachodnim do modelowania przejadania się i otyłości u gryzoni. W tym miejscu przedstawiamy szczegółowy zarys selekcji, przygotowania i pomiaru żywności oraz wyjaśniamy czynniki metodologiczne, które pomagają w generowaniu solidnego i powtarzalnego fenotypu.

Smaczna dieta stołówkowa w stylu zachodnim jako niezawodna metoda modelowania otyłości wywołanej dietą u gryzoni

Prezentowany tutaj jest protokół do badania zachowań podobnych do depresji i anhedonów u szczurów. Łączy dwie dobrze znane metody behawioralne, preferencję sacharozy i testy hipofagii wywołanej nowością, z automatycznym systemem monitorowania spożycia żywności i płynów, aby pośrednio badać zachowanie gryzoni przy użyciu parametrów zastępczych.

Testy preferencji sacharozy i hipofagii wywołanej nowością u szczurów przy użyciu zautomatyzowanego systemu monitorowania spożycia pokarmu

Ten artykuł przedstawia reakcje morfometryczne i wyniki treningu według protokołu treningu interwałowego o wysokiej intensywności (HIIT) w szczurzym modelu otyłości wywołanej dietą metodą Sprague'a-Dawleya. Celem tego protokołu była maksymalizacja intensywności ćwiczeń i określenie fizjologicznych reakcji na HIIT u szczupłych i otyłych szczurów.

Przewlekły trening interwałowy o wysokiej intensywności i model otyłości wywołanej dietą w celu maksymalizacji wysiłku fizycznego i wywołania zmian fizjologicznych u szczurów

Model objadania się został ustalony u myszy korzystających z przerywanego dostępu do M&amp;M's (bardzo smacznego pokarmu składającego się z tłuszczu i cukru). Myszy z przerywanym dostępem do tego wysokotłuszczowego i bogatego w cukier pokarmu wykazywały zachowania podobne do stresu, zwiększone spożycie kalorii i preferencję dla tego pokarmu w stosunku do standardowej karmy w porównaniu z myszami z ciągłym dostępem do pokarmu lub bez niego.

Model przerywanego napadowego spożycia u myszy

Badanie to oferuje powtarzalną i standaryzowaną metodę mająca na celu ustalenie modeli otyłych szczurów wykazujących prostą otyłość, często charakteryzującą się stłuszczeniem trzustki. Zawiera również szczegółowe protokoły pobierania próbek tkanki trzustki oraz immunohistochemii.

Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Poznaj metodę oceny preferencji tłuszczowej u szczurów wykorzystującą manipulacje genetyczne i farmakologiczne. Model ten pozwala badać mechanizmy przejadania się i otyłości, oferując narzędzie do analizy wyborów pokarmowych.

Preferencja tłuszczowa: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów

Przeglądaj więcej filmów