Izolacja RNA z trzustki myszy: tkanka bogata w rybonukleazę

Ogólnym celem tej procedury jest wyizolowanie RNA o wysokiej integralności z trzustki myszy z grzbietem rybonukleazy. Osiąga się to poprzez szybkie usunięcie trzustki z tuszy myszy poddanej eutanazji. Następnie trzustka zanurza się w odczynniku do lizy, a tkanka jest homogenizowana.

Po odwirowaniu RNA izoluje się od supernatantu przy użyciu standardowych protokołów, a roztwór inhibitora RNA dodaje się do końcowego roztworu RNA. Ostatnim krokiem jest dokładne oczyszczenie łopatek homogenizatora poprzez usunięcie wszelkich kawałków tkanki uwięzionych w ostrzach, a następnie wykonanie serii płukań etanolem i wodą. Ostatecznie procedura ta pozwala na wyizolowanie RNA dla trzustki myszy o liczbie integralności RNA większej niż siedem, która ma być wykorzystana do rutynowej analizy ekspresji genów.