Name: Adaptacja metod badania wideofluoroskopowego jaskółki u ludzi do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w modelach choroby myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Poznaj metodę wideofluoroskopowego badania połykania u myszy do wykrywania dysfagii w modelach chorób. Technika ta umożliwia analizę parametrów połykania i dostarcza biomarkerów do badań przedklinicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Uprzejmie dziękujemy dodatkowym członkom Lever Lab, którzy przyczynili się do zbierania danych (Andries Ferreira, Danarae Aleman, Alexis Mok, Kaitlin Flynn, Elizabeth Bearce i Matan Kadosh) oraz recenzji manuskryptów (Andries Ferreira, Rebecca Schneider i Kate Robbins). Dziękujemy również Rodericowi Schlotzhauerowi i Edwinowi Honse z MU Physics Machine Shop za ich wkład w projekt i wykonanie rurek do obserwacji gryzoni użytych w tym badaniu. Jesteśmy szczególnie wdzięczni Malei Jan Kunkel (kierownikowi radiologii na Wydziale Medycyny Weterynaryjnej i Chirurgii na Uniwersytecie Missouri - Kolegium Medycyny Weterynaryjnej) i Janowi Iveyowi (kierownikowi laboratorium cewnikowania zwierząt badawczych na Uniwersytecie Missouri - Szkole Medycznej) za wykazanie się nieustanną cierpliwością i motywacją podczas obsługi fluoroskopów wysokoenergetycznych podczas opracowywania mysiego protokołu VFSS. Źródła finansowania tego badania obejmowały NIH/NIDCD (TE Lever), NIH/NINDS (GK Pavlath), fundusze start-upowe Otolaryngology – Head and Neck Surgery (TE Lever), MU PRIME Fund (TE Lever), Mizzou Advantage (TE Lever) oraz MU Center on Aging (TE Lever).

<ol><li>Shigemitsu, H., Afshar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspiration+pneumonias%3A+under-diagnosed+and+under-treated%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">Aspiration pneumonias: under-diagnosed and under-treated.</a> Curr Opin Pulm Med. 13 (2), 192-198 (2007).</li>
<li>Gresham, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+assessment+and+management+of+swallowing+difficulties+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Med+J+Aust%22%5BJournal%5D)">Clinical assessment and management of swallowing difficulties after stroke.</a> Med J Aust. 153 (7), 397-399 (1990).</li>
<li>Marik, P. E., Kaplan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspiration+pneumonia+and+dysphagia+in+the+elderly%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Aspiration pneumonia and dysphagia in the elderly.</a> Chest. 124 (1), 328-336 (2003).</li>
<li>Marik, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+aspiration+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary aspiration syndromes.</a> Curr Opin Pulm Med. 17 (3), 148-154 (2011).</li>
<li>Logemann, J. A., Larsen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oropharyngeal+dysphagia%3A+pathophysiology+and+diagnosis+for+the+anniversary+issue+of%5BTitle%5D)+AND+%22Diseases+of+the+Esophagus.+Dis+Esophagus%22%5BJournal%5D)">Oropharyngeal dysphagia: pathophysiology and diagnosis for the anniversary issue of.</a> Diseases of the Esophagus. Dis Esophagus. 25 (4), 299-304 (2012).</li>
<li>Logemann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swallowing+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Best+practice+%26+research+Clinical+gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Swallowing disorders.</a> Best practice & research Clinical gastroenterology. 21 (4), 563-573 (2007).</li>
<li>Martin-Harris, B., Jones, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Videofluorographic+Swallowing+Study.+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%5BTitle%5D)+AND+%22Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">The Videofluorographic Swallowing Study. Physical Medicine and Rehabilitation.</a> Clinics of North America. 19 (4), 769-785 (2008).</li>
<li>Dietsch, A. M., Solomon, N. P., Steele, C. M., Pelletier, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+barium+on+perceptions+of+taste+intensity+and+palatability%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">The effect of barium on perceptions of taste intensity and palatability.</a> Dysphagia. 29 (1), 96-108 (2014).</li>
<li>Stokely, S. L., Molfenter, S. M., Steele, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+barium+concentration+on+oropharyngeal+swallow+timing+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Effects of barium concentration on oropharyngeal swallow timing measures.</a> Dysphagia. 29 (1), 78-82 (2014).</li>
<li>Harris, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Use+of+Low-Osmolar+Water-Soluble+Contrast+in+Videofluoroscopic+Swallowing+Exams%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">The Use of Low-Osmolar Water-Soluble Contrast in Videofluoroscopic Swallowing Exams.</a> Dysphagia. , (2013).</li>
<li>Hillel, A., Miller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bulbar+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%3A+Patterns+of+Progression+and+Clinical+Management%5BTitle%5D)+AND+%22Head+%26+Neck%22%5BJournal%5D)">Bulbar Amyotrophic Lateral Sclerosis: Patterns of Progression and Clinical Management.</a> Head & Neck. 11, 51-59 (1989).</li>
<li>Russell, J. A., Ciucci, M. R., Hammer, M. J., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Videofluorographic+assessment+of+deglutitive+behaviors+in+a+rat+model+of+aging+and+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Videofluorographic assessment of deglutitive behaviors in a rat model of aging and Parkinson disease.</a> Dysphagia. 28 (1), 95-104 (2013).</li>
<li>Lever, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+animal+model+of+oral+dysphagia+in+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">An animal model of oral dysphagia in amyotrophic lateral sclerosis.</a> Dysphagia. 24 (2), 180-195 (2009).</li>
<li>Lever, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+pharyngeal+dysphagia+in+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">A mouse model of pharyngeal dysphagia in amyotrophic lateral sclerosis.</a> Dysphagia. 25 (2), 112-126 (2010).</li>
<li>Ciucci, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tongue+force+and+timing+deficits+in+a+rat+model+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Tongue force and timing deficits in a rat model of Parkinson disease.</a> Behavioural Brain Research. 222 (2), 315-320 (2011).</li>
<li>Ciucci, M. R., Schaser, A. J., Russell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise-induced+rescue+of+tongue+function+without+striatal+dopamine+sparing+in+a+rat+neurotoxin+model+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Exercise-induced rescue of tongue function without striatal dopamine sparing in a rat neurotoxin model of Parkinson disease.</a> Behavioural Brain Research. 252, 239-245 (2013).</li>
<li>Plowman, E. K., Kleim, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+neurophysiological+correlates+of+striatal+dopamine+depletion%3A+A+rodent+model+of+Parkinson%E2%80%99s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Communication+Disorders%22%5BJournal%5D)">Behavioral and neurophysiological correlates of striatal dopamine depletion: A rodent model of Parkinson’s disease.</a> Journal of Communication Disorders. 44 (5), 549-556 (2011).</li>
<li>Sugiyama, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+animal+model+of+dysphagia+following+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">A novel animal model of dysphagia following stroke.</a> Dysphagia. 29 (1), 61-67 (2014).</li>
<li>Bachmanov, A. A., Reed, D. R., Li, X., Beauchamp, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+sweet+taste+preferences%5BTitle%5D)+AND+%22Pure+Appl+Chem%22%5BJournal%5D)">Genetics of sweet taste preferences.</a> Pure Appl Chem. 74 (7), 1135-1140 (2002).</li>
<li>Ishiwatari, Y., Bachmanov, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NaCl+taste+thresholds+in+13+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">NaCl taste thresholds in 13 inbred mouse strains.</a> Chem Senses. 37 (6), 497-508 (2012).</li>
<li>Pinhas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+differences+in+sucrose-+and+fructose-conditioned+flavor+preferences+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Strain differences in sucrose- and fructose-conditioned flavor preferences in mice.</a> Physiol Behav. 105 (2), 451-459 (2012).</li>
<li>Midkiff, E. E., Bernstein, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+age+and+experience+on+salt+preference+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The influence of age and experience on salt preference of the rat.</a> Dev Psychobiol. 16 (5), 385-394 (1983).</li>
<li>Niimi, K., Takahashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+saccharin+preference+and+genetic+alterations+of+the+Tas1r3+gene+among+senescence-accelerated+mouse+strains+and+their+parental+AKR%2FJ+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Differences in saccharin preference and genetic alterations of the Tas1r3 gene among senescence-accelerated mouse strains and their parental AKR/J strain.</a> Physiol Behav. , (2014).</li>
<li>Weijnen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Licking+behavior+in+the+rat%3A+measurement+and+situational+control+of+licking+frequency%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Licking behavior in the rat: measurement and situational control of licking frequency.</a> Neurosci Biobehav Rev. 22 (6), 751-760 (1998).</li>
<li>Weijnen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lick+sensors+as+tools+in+behavioral+and+neuroscience+research%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Lick sensors as tools in behavioral and neuroscience research.</a> Physiol Behav. 46 (6), 923-928 (1989).</li>
<li>Kobayashi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+analysis+of+rhythmic+jaw+movements+in+the+freely+moving+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological analysis of rhythmic jaw movements in the freely moving mouse.</a> Physiol Behav. 75 (3), 377-385 (2002).</li>
<li>Dantas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+swallowed+bolus+variables+on+oral+and+pharyngeal+phases+of+swallowing%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Effect of swallowed bolus variables on oral and pharyngeal phases of swallowing.</a> 258, G675-681 (1990).</li>
<li>Johnsson, F., Shaw, D., Gabb, M., Dent, J., Cook, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+gravity+and+body+position+on+normal+oropharyngeal+swallowing%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Influence of gravity and body position on normal oropharyngeal swallowing.</a> American Journal of Physiology. 35 (5), G653-G658 (1995).</li>
<li>Han, T. T., Paik, N. -J., Park, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+swallowing+function+after+stroke%3A+A+functional+dysphagia+scale+based+on+videofluoroscopic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Quantifying swallowing function after stroke: A functional dysphagia scale based on videofluoroscopic studies.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 82 (5), 677-682 (2001).</li>
<li>Molfenter, S. M., Steele, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinematic+and+temporal+factors+associated+with+penetration-aspiration+in+swallowing+liquids%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Kinematic and temporal factors associated with penetration-aspiration in swallowing liquids.</a> Dysphagia. 29 (2), 269-276 (2014).</li>
<li>Kendall, K. A., McKenzie, S., Leonard, R. J., Goncalves, M. I., Walker, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Timing+of+events+in+normal+swallowing%3A+A+videofluoroscopic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Timing of events in normal swallowing: A videofluoroscopic study.</a> Dysphagia. 15, 74-83 (2000).</li>
<li>Choi, K. H., Ryu, J. S., Kim, M. Y., Kang, J. Y., Yoo, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinematic+analysis+of+dysphagia%3A+Significant+parameters+of+aspiration+related+to+bolus+viscosity%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Kinematic analysis of dysphagia: Significant parameters of aspiration related to bolus viscosity.</a> Dysphagia. 26, 392-398 (2011).</li>
<li>Molfenter, S. M., Steele, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+temporal+measures+of+swallowing%3A+Sex+and+volume+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Variation in temporal measures of swallowing: Sex and volume effects.</a> Dysphagia. 28, 226-233 (2013).</li>
<li>Alves, L. M. T., Secaf, M., Dantas, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+a+bitter+bolus+on+oral%2C+pharyngeal%2C+and+esophageal+transit+of+healthy+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Arquivos+de+gastroenterologia%22%5BJournal%5D)">Effect of a bitter bolus on oral, pharyngeal, and esophageal transit of healthy subjects.</a> Arquivos de gastroenterologia. 50 (1), 31-34 (2013).</li>
<li>Dalmazo, J., Aprile, L. R. O., Dantas, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Esophageal+contractions%2C+bolus+transit+and+perception+of+transit+after+swallows+of+liquid+and+solid+boluses+in+normal+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Arquivos+de+gastroenterologia%22%5BJournal%5D)">Esophageal contractions, bolus transit and perception of transit after swallows of liquid and solid boluses in normal subjects.</a> Arquivos de gastroenterologia. 49 (4), 250-254 (2012).</li>
<li>Kahrilas, P. J., Dodds, W. J., Hogan, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+peristaltic+dysfunction+on+esophageal+volume+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Effect of peristaltic dysfunction on esophageal volume clearance.</a> Gastroenterology. 94 (1), 73-80 (1988).</li>
<li>German, R. Z., Crompton, A. W., Levitch, L. C., Thexton, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+suckling+in+two+species+of+infant+mammal%3A+Miniature+pigs+and+long-tailed+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">The mechanism of suckling in two species of infant mammal: Miniature pigs and long-tailed macaques.</a> Journal of Experimental Zoology. 261 (3), 322-330 (1992).</li>
<li>Herring, S. W., Scapino, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+feeding+in+miniature+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Morphology%22%5BJournal%5D)">Physiology of feeding in miniature pigs.</a> Journal of Morphology. 141 (4), 427-460 (1973).</li>
<li>Gordon, K. R., Herring, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+patterns+within+the+genioglossus+during+suckling+in+domestic+dogs+and+pigs%3A+Interspecific+and+intraspecific%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Activity patterns within the genioglossus during suckling in domestic dogs and pigs: Interspecific and intraspecific.</a> Brain, Behavior, and Evolution. 30 (5-6), (1987).</li>
<li>Hiiemae, K. M., Palmer, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+transport+and+bolus+formation+during+complete+feeding+sequences+on+foods+of+different+initial+consistency%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">Food transport and bolus formation during complete feeding sequences on foods of different initial consistency.</a> Dysphagia. 14 (1), 31-42 (1999).</li>
<li>Thexton, A. J., Crompton, A. W., German, R. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EMG+activity+in+the+hyoid+muscles+during+pig+suckling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">EMG activity in the hyoid muscles during pig suckling.</a> Journal of Applied Physiology. 112, 1512-1519 (2012).</li>
<li>Thexton, A. J., Crompton, A. W., German, R. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transition+from+suckling+to+drinking+at+weaning%3A+A+kinematic+and+electromyographic+study+in+miniature+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">Transition from suckling to drinking at weaning: A kinematic and electromyographic study in miniature pigs.</a> Journal of Experimental Zoology. 280 (5), 327-343 (1998).</li>
<li>Goldfield, E. C., Richardson, M. J., Lee, K. G., Margetts, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+sucking%2C+swallowing%2C+and+breathing+and+oxygen+saturation+during+early+infant+breast-feeding+and+bottle-feeding%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Research%22%5BJournal%5D)">Coordination of sucking, swallowing, and breathing and oxygen saturation during early infant breast-feeding and bottle-feeding.</a> Pediatric Research. 60 (4), 450-455 (2006).</li>
<li>Ottaviano, F. G., Linhares Filho, T. A., Andrade, H. M., Alves, P. C., Rocha, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiberoptic+endoscopy+evaluation+of+swallowing+in+patients+with+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Otorhinolaryngol%22%5BJournal%5D)">Fiberoptic endoscopy evaluation of swallowing in patients with amyotrophic lateral sclerosis.</a> Braz J Otorhinolaryngol. 79 (3), 349-353 (2013).</li>
<li>Inamoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+bolus+viscosity+on+laryngeal+closure+in+swallowing%3A+kinematic+analysis+using+320-row+area+detector+CT%5BTitle%5D)+AND+%22Dysphagia%22%5BJournal%5D)">The effect of bolus viscosity on laryngeal closure in swallowing: kinematic analysis using 320-row area detector CT.</a> Dysphagia. 28 (1), 33-42 (2013).</li>
<li>Spalding, J. F., Thomas, R. G., Tietjen, G. L. Los Alamos National Laboratory. Rein, S. erene , Los Alamos, N.M. (1982).</li>
<li>Palomba, S., Di Cello, A., Riccio, E., Manguso, F., La Sala, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+function+and+gastrointestinal+motor+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Ovarian function and gastrointestinal motor activity.</a> Minerva Endocrinol. 36 (4), 295-310 (2011).</li>
<li>Alves, L. M., Cassiani Rde,, Santos, A., M, C., Dantas, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+effect+on+the+clinical+measurement+of+swallowing%5BTitle%5D)+AND+%22Arq+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Gender effect on the clinical measurement of swallowing.</a> Arq Gastroenterol. 44 (3), 227-229 (2007).</li>
<li>Logemann, J. A., Pauloski, B. R., Rademaker, A. W., Kahrilas, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oropharyngeal+swallow+in+younger+and+older+women%3A+videofluoroscopic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Speech+Lang+Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Oropharyngeal swallow in younger and older women: videofluoroscopic analysis.</a> J Speech Lang Hear Res. 45 (3), 434-445 (2002).</li>
</ol>

Otwarty dostęp do tego artykułu jest sponsorowany przez Glenbrook.

Dysfagia (upośledzenie połykania) jest częstym objawem wielu schorzeń dotykających ludzi w każdym wieku. Przykłady obejmują udar, chorobę Parkinsona, chorobę Alzheimera, porażenie mózgowe, dystrofię mięśniową, stwardnienie zanikowe boczne (ALS), chorobę Battena, raka głowy i szyi, przedwczesny poród i zaawansowane starzenie się. Dysfagia jest silnie skorelowana ze śmiertelnością, zazwyczaj w wyniku ciężkiego niedożywienia lub zapalenia płuc, które rozwija się, gdy do płuc zasysany jest obciążony bakteriami pokarm/płyn/ślina1-4. Ten wyniszczający i zagrażający życiu stan chorobowy dotyka ponad 15 milionów ludzi każdego roku w samych Stanach Zjednoczonych3. Pomimo wysokiego rozpowszechnienia i związanych z tym negatywnych skutków, obecne opcje leczenia dysfagii ograniczają się do podejść paliatywnych (a nie leczniczych), takich jak modyfikacja diety (np. unikanie określonych konsystencji pokarmów/płynów), zmiany postawy (np. podwijanie podbródka podczas połykania), podejścia motoryczne (np. ćwiczenia ukierunkowane na mięśnie jamy ustnej, gardła i krtani), podejścia sensoryczne (np. wdrażanie stymulacji smakowej, temperatury i/lub mechanicznej) oraz karmienie przez zgłębnik (np. odżywianie i nawodnienie podawane przez zgłębnik nosowo-żołądkowy (NG) lub przezskórną endoskopową gastrostomię (PEG)). Terapie te służą jedynie jako terapia objawowa, a nie są ukierunkowane na podstawowe przyczyny problemu. Rzeczywiście, główną przeszkodą w odkrywaniu nowych, skutecznych metod leczenia dysfagii jest ograniczona wiedza naukowa na temat odpowiedzialnych za nią mechanizmów patologicznych, które prawdopodobnie są różne dla każdej choroby.
Diagnoza dysfagii jest głównie dokonywana za pomocą procedury radiograficznej zwanej wideofluoroskopowym badaniem połykania (VFSS), znanym również jako zmodyfikowane badanie połykania baru. W ciągu ostatnich ponad 30 lat ten test diagnostyczny został uznany za złoty standard w ocenie funkcji połykania5-7. Test ten polega na tym, że pacjent siedzi lub stoi w obrębie wiązki promieniowania rentgenowskiego urządzenia do fluoroskopii, dobrowolnie spożywając pokarmy i płyny zmieszane z doustnym środkiem kontrastowym, zwykle siarczanem baru8,9 lub joheksolem10. Gdy pacjent połyka, pokarm i płyn zawierający środek kontrastowy mogą być widoczne w czasie rzeczywistym na monitorze komputerowym podczas podróży z ust do żołądka. Struktury tkanek miękkich są również widoczne i można je ocenić w odniesieniu do struktury i funkcji. Pacjenci są proszeni o wykonanie kilku połknięć każdego pokarmu i konsystencji płynu, z których wszystkie są nagrywane na wideo w celu późniejszego oglądania i analizy klatka po klatce w celu ilościowego określenia obecności i stopnia dysfagii. Zazwyczaj analizowane są liczne fizjologiczne składniki połykania, takie jak anatomiczny punkt spustowy połykania gardłowego, czas przejścia bolusa przez gardło i przełyk, zakres i czas trwania uniesienia krtani, lokalizacja i ilość pozostałości po połknięciu oraz występowanie i fizjologiczna przyczyna aspiracji7,11.
Aspekty ludzkiego protokołu VFSS zostały niedawno dostosowane do badania swobodnie zachowujących się szczurów; jednak wyniki były ograniczone, ponieważ szczury nie pozostawały w polu widzenia wideofluoroskopowego podczas testowania12. VFSS nie był wcześniej próbowany na myszach. Udana adaptacja ludzkiego protokołu VFSS do użytku z myszami i szczurami dostarczyłaby nowej metody badawczej do zbadania setek obecnie istniejących mysich (mysich i szczurzych) modeli chorób, o których wiadomo, że powodują dysfagię u ludzi. Ta nowa metoda (odtąd nazywana mysim VFSS) przyspieszyłaby zatem identyfikację i walidację mysich modeli dysfagii, które są odpowiednie do badania podstawowych mechanizmów neurofizjologicznych w mięśniach, nerwach i tkance mózgowej, które są patologiczne i przyczyniają się do dysfagii u ludzi. Co więcej, mysi VFSS pozwoliłby na identyfikację obiektywnych miar (biomarkerów) funkcji/dysfunkcji połykania, które można by bezpośrednio porównać z ludźmi. Te międzygatunkowe biomarkery wideofluoroskopowe mogą następnie służyć jako nowe miary wyników do ilościowego określania skuteczności leczenia w badaniach przedklinicznych na myszach i szczurach, co lepiej przełożyłoby się na badania kliniczne z udziałem ludzi.
W tym celu ustanowiono mysi protokół VFSS przy użyciu ~100 myszy obu płci. Wszystkie myszy były albo szczepami C57, albo hybrydowymi szczepami C57/SJL. Myszy C57 nie były genetycznie zmienione, podczas gdy C57 / SJL był szczepem tła dla kolonii transgenicznych myszy SOD1-G93A (lub SOD1), najczęściej stosowanego modelu zwierzęcego ALS. Kolonia SOD1 była w przybliżeniu mieszanką 50-50 myszy transgenicznych (tj. dotkniętych ALS) i nietransgenicznych (tj. niedotkniętych chorobą) rodzeństwa z miotu.
Mysi protokół VFSS składa się z trzech komponentów:
<ol>
	<li>specjalnie zaprojektowane komory obserwacyjne, które umożliwiają dobrowolne karmienie i połykanie w pozycji stojącej bez skrępowania w zamkniętej przestrzeni wewnątrz urządzenia do fluoroskopii,</li>
	<li>receptury, które maskują awersyjny smak/zapach doustnych środków kontrastowych i wytwarzają wystarczającą gęstość promieniowania, aby umożliwić odpowiednią wizualizację połykania,</li>
	<li>Protokół testowy krok po kroku, który maksymalizuje przestrzeganie zaleceń przez zwierzęta, minimalizuje całkowity czas badania i narażenie na promieniowanie oraz umożliwia ilościowe określenie kilku parametrów połykania dla każdego etapu połykania (tj. ustnego, gardłowego i przełyku).</li>
</ol>
Połączony efekt tworzy komfortowe, mało stresujące, samodzielne środowisko do badania, które pozwala na ocenę typowych zachowań myszy podczas karmienia i połykania.

<table><tbody><tr><td>Rurki poliwęglanowe do komór obserwacyjnych</td><td>McMaster-Carr</td><td>3161T41</td><td>Korpus tub obserwacyjnych, średnica 2"X2", grubość ścianki 0,080"</td></tr><tr><td>Arkusz poliwęglanowy&nbsp; do komór obserwacyjnych</td><td>McMaster-Carr</td><td>9115K71</td><td>Zaślepki do tub obserwacyjnych, 2"x12"x3/4"</td></tr><tr><td>Arkusz poliwęglanowy&nbsp; do komór obserwacyjnych</td><td>McMaster-Carr</td><td>8574K281</td><td>Miski kołkowe do tub obserwacyjnych</td></tr><tr><td>O-ringi silikonowe&nbsp; do zaślepek komór obserwacyjnych</td><td>McMaster-Carr</td><td>9396K108</td><td>S1138 AS568-029, opakowanie 25 http://www.mcmaster.com/#o-rings/=t0wt5r&nbsp;</td></tr><tr><td>Korki silikonowe do komór obserwacyjnych</td><td>McMaster-Carr</td><td>2903K22</td><td>Zestaw 10 korków do zatykania owalnego otworu w górnej części komory obserwacyjnej przy użyciu miski kołkowej http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3803/=t0y5at</td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe do butelek z rurką sipper</td><td>Evergreen Scientific</td><td>222-3530-G80</td><td>Probówki wirówkowe wolnostojące o pojemności 30 ml, z nakrętkami, sterylne https://www.evergreensci.com/labware-catalog/tubes-and-vials/30-and-50-ml-centrifuge-tubes/&nbsp;</td></tr><tr><td>Korki silikonowe do butelek z rurką do łykania</td><td>Saint-Gobain Performance Plastics</td><td>DX263031-10&nbsp;</td><td>Numer 31D, rozmiar: 26 mm na dole, 32 mm na górze, 30 mm na wysokości; 10 sztuk; &nbsp; http://www.labpure.com/en/Products.asp?ID=179&PageBrand=STOPPERS</td></tr><tr><td>Wiertła korkowe do butelek z rurką do łykania Thomas</td><td>Scientific</td><td>3276G40</td><td>Zestaw świdrów korkowych o rozmiarach od 3/16-15/16 cala&nbsp; http://www.thomassci.com/Supplies/Corks/_/CORK-BORER-SET-316-1516-IN?q=Humboldt</td></tr><tr><td>Rurki do picia do butelek z rurką</td><td>Ancare</td><td>TD-100&nbsp;</td><td>Rurki do picia o długości 2 1/2" z otworem 5/16", prosta wylewka kulowa http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point&nbsp;</td></tr><tr><td>Iohexol do sporządzania doustnego roztworu środka kontrastowego</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td>350 mg jodu na ml http://www3.gehealthcare.com/en/products/categories/contrast_media/omnipaque&nbsp;</td></tr><tr><td>Syrop czekoladowy do aromatyzowania doustnego środka kontrastowego</td><td>Herseys</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 ml strzykawka do systemu podawania strzykawki</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>309604</td><td>Strzykawka z końcówką Luer lock bez igły, 100 sztuk w opakowaniu http://www.bd.com/hypodermic/products/syringeswithoutneedles.asp</td></tr><tr><td>Rurka cewnika do systemu podawania strzykawki</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427451</td><td>Rurka polietylenowa (niesterylna) (PE 240) 100' http://www.bd.com/ds/productCenter/427451.asp&nbsp;</td></tr><tr><td>Igła do systemu dostarczania strzykawki</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427560</td><td>Igła o rozmiarze 15, pasuje do rurki cewnika PE 240 http://www.bd.com/ds/productCenter/427560.asp&nbsp;</td></tr><tr><td>Pręt z żywicy acetalowej Delrin do systemu dostarczania strzykawki</td><td>McMaster-Carr</td><td>8576K15</td><td>o średnicy 1/2 cala, http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3609/=t0wvaf&nbsp;</td></tr><tr><td>Folia akrylowa do podnośnika nożycowego</td><td>Ponoko</td><td></td><td>Laser cut http://www.ponoko.com&nbsp;</td></tr><tr><td>Drukowana w 3D rama ABS</td><td>Engineering Rapid Prototyping Facility, University of Missouri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pręty mosiężne do podnośnika nożycowego</td><td>Amazon</td><td>TTRB-03-12-03</td><td>wykonane w osiach http://www.amazon.com/Brass-Seamless-Round-Tubing-Length/dp/B000FN898M</td></tr><tr><td>Prowadnica do szuflady do podnośnika nożycowego</td><td>Richelieu</td><td>10292G116</td><td>Mocowany do podstawy podnośnika nożycowego http://www.lowes.com/pd_380986-93052-T35072G16_0__?productId=50041754</td></tr><tr><td>28BYJ-48 silnik krokowy do podnośnika</td><td></td><td></td> nożycowego <td>po 2</td></tr><tr><td>ULN2003 Układ tranzystorów Darlington do podnośnika nożycowego</td><td>Toshiba</td><td>ULN2003APG</td><td>Używany jako sterowniki krokowe (po 2 szt</td></tr> <tr><td>ATTINY85 mikrokontroler do podnośnika nożycowego</td><td>Atmel</td><td>ATTINY85-20PU</td><td>2 każda http://www.taydaelectronics.com/attiny85-attiny85-20pu-8-bit-20mhz-microcontroller-ic.html</td></tr><tr><td>Nylonowa przekładnia czołowa</td><td>McMaster-Carr</td><td>57655K34</td><td>2 każda http://www.mcmaster.com/#57655k34/=t0yaqz</td></tr><tr><td>Nylonowa zębatka czołowa</td><td>McMaster-Carr</td><td>57655K62</td><td>2 każda http://www.mcmaster.com/#57655k62/=t0ybh9</td></tr><tr><td>4-40 nylonowe maszynowe</td><td>McMaster-Carr</td><td>95133A315</td><td>Zespół podnoszenia http://www.mcmaster.com/#95133a315/=t0yd8q</td></tr><tr><td>4-40 nylonowe nakrętki sześciokątne</td><td>McMaster-Carr</td><td>94812A200</td><td>Zespół podnośnika http://www.mcmaster.com/#94812a200/=t0ye29</td></tr><tr><td>O-ring Buna-N AS568A Deska rozdzielcza nr 104</td><td>McMaster-Carr</td><td>9452K318</td><td>Zespół podnośnika http://www.mcmaster.com/#9452k318/=t0yem7</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

adaptacja metod badania wideofluoroskopowego jaskółki u ludzi do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w modelach choroby myszy

Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models

To badanie zaadaptowało metody ludzkiego wideofluoroskopowego połykania (VFSS) do użycia z modelami choroby mysiej w celu ułatwienia badań nad dysfagią translacyjną. Pomyślne wyniki zależą od trzech krytycznych elementów: komór testowych, które umożliwiają samodzielne karmienie w pozycji stojącej bez ograniczeń w ograniczonej przestrzeni, przepisów, które maskują awersyjny smak/zapach dostępnych na rynku doustnych środków kontrastowych oraz protokołu testowego krok po kroku, który pozwala na ilościowe określenie fizjologii połykania. Wyeliminowanie jednego lub więcej z tych składników będzie miało szkodliwy wpływ na wyniki badania. Co więcej, poziom energii systemu fluoroskopowego określi, które parametry połykania mogą być badane. Większość ośrodków badawczych posiada fluoroskopy o wysokiej energii przeznaczone do użytku z ludźmi i większymi zwierzętami, co skutkuje wyjątkowo niską jakością obrazu podczas testowania myszy i innych małych gryzoni. Pomimo tego ograniczenia zidentyfikowaliśmy siedem parametrów VFSS, które są konsekwentnie kwantyfikowalne u myszy przy użyciu fluoroskopu o wysokiej energii w połączeniu z nowym mysim protokołem VFSS. Niedawno otrzymaliśmy niskoenergetyczny system fluoroskopii o wyjątkowo wysokiej rozdzielczości obrazowania i możliwościach powiększenia, który został zaprojektowany do użytku z myszami i innymi małymi gryzoniami. Wstępne prace z wykorzystaniem tego nowego systemu, w połączeniu z nowym mysim protokołem VFSS, zidentyfikowały 13 parametrów jaskółki, które są konsekwentnie kwantyfikowalne u myszy, co stanowi prawie dwukrotnie większą liczbę niż uzyskano przy użyciu konwencjonalnych (tj. wysokoenergetycznych) fluoroskopów. Identyfikacja dodatkowych parametrów jaskółki jest oczekiwana w miarę optymalizacji możliwości tego nowego systemu. Dotychczasowe wyniki wskazują na użyteczność stosowania systemu fluoroskopowego o niskiej energii do wykrywania i ilościowego określania subtelnych zmian w fizjologii jaskółki, które w przeciwnym razie mogłyby zostać przeoczone podczas korzystania z fluoroskopów o wysokiej energii do badania modeli chorób myszy.

Z sukcesem opracowaliśmy nowy i powtarzalny protokół VFSS specyficzny dla myszy, który obejmuje komory testowe umożliwiające samodzielne żywienie, przepisy na aromatyzowanie doustnych środków kontrastowych oraz szczegółowy protokół testowy pozwalający na ilościową ocenę fizjologii połykania. Zdolność systemu fluoroskopowego w zakresie poziomów energii określiła, które parametry połykania można zbadać u myszy. Początkowo korzystaliśmy z fluoroskopów wysokiej energii przeznaczonych dla ludzi i większych zwierząt (np. GE Advantx, GE OEC 9600 oraz Omega Cardiac Cath CS-25, każdy z częstotliwością 30 klatek na sekundę). Jednak systemy te posiadały niewystarczające możliwości powiększenia niezbędne do badania myszy, co skutkowało tym, że zwierzę zajmowało jedynie niewielką część pola widzenia (Rycina 9). W rezultacie jakość obrazu była wyjątkowo niska, co uniemożliwiało wizualizację większości struktur mechanizmu połykania. Pomimo tego ograniczenia zidentyfikowaliśmy 7 obiektywnych parametrów połykania w VFSS, które były konsekwentnie mierzalne u myszy przy użyciu konwencjonalnego (tj. wysokenergetycznego) fluoroskopu w połączeniu z nowym protokołem VFSS dla myszy (Tabela 3). Ponadto zidentyfikowaliśmy przestrzeń vallecularną jako anatomiczny punkt wyzwalający połykanie u zdrowych dorosłych myszy (w wieku 3-17 miesięcy), a także u myszy w wieku podeszłym (&gt;18 miesięcy) oraz w końcowym stadium ALS.
<img alt="Fluoroskopia połykania gryzonia; obrazy radiograficzne, badanie przełyku, badanie medyczne." src="/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" width="650" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 9"> 
Rycina 9: Systemy fluoroskopii wysokoenergetycznej. Po lewej: Reprezentacyjny obraz myszy uzyskany za pomocą systemów fluoroskopii wysokoenergetycznej (t.j. konwencjonalnej). Należy zauważyć, że mysz wypełnia tylko niewielką część pola widzenia fluoroskopu, co wykazuje niewystarczającą zdolność powiększenia konwencjonalnych fluoroskopów w obrazowaniu gryzoni. Po prawej: Ten sam obraz powiększony po przechwyceniu za pomocą programu do edycji wideo. Czarna strzałka: punkt wyzwalający połykanie (zatoki migdałkowe). Biała strzałka: bolus w końcowym odcinku przełyku, bezpośrednio przed przejściem przez przejście przełykowo-żołądkowe (biała gwiazdka). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PARAMETRY POŁYKANIA</td>
			<td style="width:140px">System wysokoenergetyczny</td>
			<td style="width:140px">System niskiej energii</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Odstęp między połyknięciami (ISI)</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Szybkość ruchu żuchwy (odpowiednik szybkości lizania)</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zakres wysunięcia żuchwy</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stosunek liczby lizaniami do liczby przełykań</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Częstość połykania </td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas przejścia przez gardło (PTT)</td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prędkość kęsa w gardle</td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas przejścia przez przełyk (ETT)</td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prędkość przesuwania bolusa przez przełyk</td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prędkość przemieszczania się kęsa przez gardło i przełyk</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Obszar bolusa </td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Obszar resztek gardłowych</td>
			<td></td>
			<td>X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objętość spożytej cieczy</td>
			<td>X</td>
			<td>X</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 3: Parametry połykania możliwe do ilościowego oznaczenia przy użyciu systemów fluoroskopowych o wysokiej i niskiej energii.
Niedawno nabyliśmy system fluoroskopii o niskiej energii i dużym powiększeniu o nazwie The LabScope (Glenbrook Technologies, Randolph, NJ), który został zaprojektowany specjalnie dla naszego laboratorium do pracy z myszami i innymi małymi gryzoniami (Rysunek 10). Jednak znaczne poziomy powiększenia tego systemu uniemożliwiły obserwację całego mechanizmu połykania myszy w jednym polu widzenia. Zamiast tego wymagane są dwie pozycje testowe, jak pokazano na Rysunku 11. Pozycja 1 umożliwia wizualizację całej głowy i proksymalnego regionu klatki piersiowej. Pozycja ta jest niezbędna do oceny jamowego i gardłowego etapu połykania. Pozycja 2 umożliwia wizualizację od punktu wyzwalającego połykanie (t.j. zatoki krtaniowe) do przejścia żołądkowo-przełykowego (GE). Pozycja ta jest niezbędna do oceny przełykowego etapu połykania. Wstępne prace z wykorzystaniem The LabScope w połączeniu z nowym protokołem VFSS dla myszy pozwoliły zidentyfikować 13 obiektywnych parametrów połykania, które są konsekwentnie mierzalne u myszy, co stanowi niemal dwukrotność liczby uzyskanej przy użyciu fluoroskopów wysokenergetycznych (t.j. konwencjonalnych) (Tabela 3). Wynik ten przypisuje się zaawansowanym możliwościom powiększania systemu The LabScope, który pozwala na wizualizację licznych struktur anatomicznych (Rysunek 12), które były w zasadzie niewidoczne przy użyciu konwencjonalnych systemów: np. kości hyoidalnej, tchawicy i kręgów szyjnych. W rezultacie mogliśmy również analizować nagrania wideo pod kątem dowodów na penetrację i aspirację krtaniową. Ani penetracji, ani aspiracji nie zaobserwowano u żadnej myszy w niniejszym badaniu, niezależnie od stanu zdrowia czy obecności choroby.
<img alt="Układ obrazowania rentgenowskiego z kamerą i źródłem na podnośniku nożycowym do obserwacji." src="/files/ftp_upload/52319/52319fig10highres.jpg" width="650" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 10"> 
Rysunek 10: Urządzenie LabScope. Po lewej: LabScope służy jako pulpitowy fluoroskop do małych zwierząt. Po prawej: Widok z bliska urządzenia LabScope z opisanymi komponentami. Podnośnik nożycowy pozycjonuje komorę obserwacyjną w polu widzenia fluoroskopu. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig10highres.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Porównanie rentgenowskie, pozycje szczęk zwierzęcia; analiza radiograficzna, struktura szkieletowa, badanie weterynaryjne." src="/files/ftp_upload/52319/52319fig11highres.jpg" width="650" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 11"> 
Rycina 11: System niskenergetycznej fluoroskopii. Obrazy myszy uzyskane przy użyciu systemu niskenergetycznej fluoroskopii. Należy zauważyć, że możliwość dużego powiększenia uniemożliwia wizualizację całego mechanizmu połykania w polu widzenia fluoroskopu. Lewo: Pozycja 1 – umożliwia wizualizację całej głowy i proksymalnego regionu klatki piersiowej. Punkt wyzwalający połykanie (czarna strzałka) znajduje się w centrum pola widzenia. Prawo: Pozycja 2 – umożliwia wizualizację od punktu wyzwalającego połykanie (czarna strzałka) do połączenia żołądkowo-przełykowego (biała gwiazdka). Zauważalny jest kęs przechodzący przez dystalną część przełyku (biała strzałka). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig11highres.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Diagramy rentgenowskie anatomii czaszki ptaka, podkreślające orientację żuchwy i kości gnykowej." src="/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" width="650" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 12"> 
Rycina 12: Struktury anatomiczne widoczne przy użyciu niskoenergetycznego systemu fluoroskopii. Nawet przy najniższym ustawieniu powiększenia (po lewej), struktury kostne głowy i szyi myszy są wyraźnie widoczne przy użyciu naszego niskoenergetycznego systemu fluoroskopii (t.j. The LabScope). Struktury anatomiczne znajdujące się w czarnym kwadracie są przedstawione (i opisane) przy większym powiększeniu po prawej stronie. Poprawiona wizualizacja struktur kostnych umożliwia kwantyfikację kilku dodatkowych parametrów połykania, których analiza była niemożliwa przy użyciu wysokoenergetycznych fluoroskopów. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
Częstość połykania oraz odstęp między połykaniami są reprezentatywnymi parametrami VFSS, które można określić ilościowo, wykorzystując systemy fluoroskopii o niskiej lub wysokiej energii w połączeniu z nowym protokołem VFSS dla myszy. Te dwa parametry połykania określono dla trzech grup myszy: transgenicznych myszy SOD1-G93A (SOD1) (tj. modelu ALS) w końcowym stadium choroby w wieku od 4 do 5 miesięcy, starych myszy C57 (w wieku 18–24 miesięcy) oraz grupy kontrolnej młodych, zdrowych myszy (w wieku 4–8 miesięcy) rasy C57 i nietransgenicznych osobników z miotu z kolonii SOD1. Wszystkie dane dotyczą wyłącznie picia z poidełka przy użyciu systemu fluoroskopii o niskiej lub wysokiej energii. Nie stwierdzono istotnych różnic między młodymi myszami C57 a młodymi nietransgenicznymi myszami (kontrolnymi) z kolonii SOD1 w odniesieniu do tych dwóch parametrów połykania; dlatego dane połączono w ogólną grupę „kontrolną” młodych, zdrowych myszy w celu porównania ich ze starymi myszami C57 i myszami SOD1 w stadium końcowym. Częstość połykania (tj. liczba połyknięć podczas 2 kolejnych sekund nieprzerwanego picia) była istotnie niższa u myszy SOD1 w porównaniu ze starymi myszami C57 i grupą kontrolną. Odstęp między połykaniami (tj. czas między dwoma kolejnymi połyknięciami) nie różnił się istotnie między grupami. Wyniki te wspierają tezę, że profile dysfagii są prawdopodobnie wyraźnie odmienne dla każdego stanu chorobowego (Rysunek 13).
<img alt="Wykresy słupkowe porównujące częstotliwość połykania i odstępy między połykaniami; grupy kontrolna, SOD1 oraz starsze C57." src="/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" width="650" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 13"> 
Rysunek 13: Wstępne wyniki. Na rysunku przedstawiono reprezentatywne wstępne wyniki dla dwóch parametrów połykania w badaniu VFSS, ilościowo określonych zgodnie z mysim protokołem VFSS: częstotliwości połykania (po lewej) oraz odstępu między połykaniami (po prawej). Częstotliwość połykania była znacząco niższa u myszy SOD1 w porównaniu do starszych myszy C57 i grupy kontrolnej. Nie stwierdzono istotnych różnic między grupami w zakresie odstępu między połykaniami. Linie nad słupkami wskazują statystycznie istotne różnice (p &lt; 0.05) między grupami, wyznaczone za pomocą parowych porównań Bonferroniego. Słupki błędów reprezentują ± 1 SEM. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>

To badanie z powodzeniem zaadaptowało metody ludzkiego wideofluoroskopowego badania połykania (VFSS) do użycia z modelami chorób mysich w celu ułatwienia badań nad dysfagią translacyjną.

Adaptacja metod badania wideofluoroskopowego jaskółki u ludzi do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w modelach choroby myszy

This study adapted human videofluoroscopic swallowing study (VFSS) methods for use with murine disease models for the purpose of facilitating ...

Ogólnym celem tej procedury jest zbadanie funkcji połykania u swobodnie zachowujących się gryzoni, określane najpierw jako wideo fluoroskopowe badanie połykania lub VFSS. Komora karmienia jest skonstruowana tak, aby podczas badania trzymać gryzonie na małej przestrzeni. Drugim krokiem jest przeprowadzenie warunkowania behawioralnego za pomocą rozwiązania testowego, aby zapewnić maksymalne uczestnictwo.Następnym krokiem jest przeprowadzenie testów VFSS na wstępnie kondycjonowanych myszach. Na koniec filmy są poddawane analizie klatka po klatce w celu ilościowego określenia parametrów jaskółki. Ostatecznie, to nowatorskie narzędzie oceny może być wykorzystane do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w lustrzanych modelach choroby oraz dostarczania funkcjonalnych biomarkerów do wykorzystania w badaniach przedklinicznych.Po raz pierwszy wpadliśmy na pomysł wykorzystania komór obserwacyjnych, ponieważ testowanie VFSS na ludziach jest dobrowolne i nieograniczone, a my chcieliśmy ściśle naśladować procedurę kliniczną u ludzi. Główną zaletą tej techniki w porównaniu z podobnymi istniejącymi metodami jest to, że szybko wywołuje ona dobrowolne zachowania żywieniowe u gryzoni, co umożliwia szybkie testowanie wszystkich etapów połykania. Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały problemy z analizą wideo, ponieważ małe i szybkie ruchy połykania i myszy są trudne do rozpoznania.Zacznij od zmontowania komór obserwacyjnych, a następnie zmontuj system dostarczania strzykawki, aby dostarczyć roztwór do misek kołkowych podczas testowania. Po zmontowaniu umieść komorę obserwacyjną na zmotoryzowanym podnośniku nożycowym w celu zdalnego pozycjonowania. Główną zaletą zdalnie sterowanego podnośnika nożycowego jest poprawa bezpieczeństwa radiologicznego dla badaczy przy jednoczesnym zachowaniu swobodnie zachowujących się gryzoni w polu widzenia fluoroskopii.Przygotuj myszy, przyzwyczajając je do komory obserwacyjnej i poddając je nocnemu okresowi regulacji wody. Gdy będziesz gotowy do testowania, wyjmij komorę z klatki i dokładnie ją wyczyść. Użyj markera suchościeralnego, aby oznaczyć każdą oczyszczoną tubkę przed umieszczeniem jej z powrotem w klatce domowej.Następnie przygotuj roztwór joheksolu o smaku czekoladowym, aby skonfigurować środowisko fluoroskopii. Użyj zapasowej komory obserwacyjnej i miski na kołki, aby określić optymalną wysokość i pozycję w wiązce fluoroskopu, która umożliwia wizualizację picia w płaszczyźnie bocznej. Ustaw liczbę klatek na sekundę fluoroskopii na 30 klatek na sekundę.Można użyć wyższej liczby klatek na sekundę, jeśli jest dostępna. Upewnij się, że znacznik kalibracyjny nieprzepuszczający promieni rentgenowskich jest odpowiednio umieszczony na kamerze fluoroskopowej, tak aby był widoczny na monitorze wyświetlacza podczas całego testu. Ten krok jest niezbędny, aby umożliwić kalibrację pomiarów długości w celu zmniejszenia naprężeń spowodowanych obsługą.Obserwuj klatkę, aż mysz swobodnie wejdzie do komory obserwacyjnej. Po wejściu wyjmij komorę z klatki i delikatnie załóż drugą zaślepkę. Dzięki wielokrotnym testom myszy można łatwo nakłonić do wejścia do komory, gdy jest ona umieszczona przed nimi w klatce lub gdy jest zawieszona za ogon nad otworem komory.Ustawić komorę obserwacyjną w maszynie do fluoroskopii, aby rozpocząć badanie VFSS w płaszczyźnie bocznej. Następnie użyj systemu dostarczania strzykawki, aby napełnić miskę kołka roztworem iohexolu o smaku czekoladowym. Rozpocznij nagrywanie wideo fluoroskopii.Gdy mysz zacznie pić podczas testu, użyj zdalnie sterowanego stołu podnośnego, aby wyregulować położenie komory obserwacyjnej tak, aby mechanizm połykania był widoczny w polu view. Wstrzymaj nagrywanie za każdym razem, gdy mysz odwróci się od miski na kołki, aby zminimalizować czas ekspozycji na promieniowanie. Wznów nagrywanie, gdy mysz powróci do miski na kołki, w razie potrzeby napełnij miskę na kołki.Celem jest zarejestrowanie kilku długich napadów ciągłego picia, co jest typowe dla większości myszy. W ciągu pierwszych dwóch minut testowania przerwij testowanie, jeśli mysz nie wypije w ciągu pięciu minut, zwróć myszy niespełniające wymagań do klatki domowej w celu ponownego przetestowania w późniejszym czasie tego samego dnia. Nie przekraczaj 24-godzinnej regulacji wody.Podczas testowania wielu myszy z tej samej klatki domowej. Wyczyść miskę na kołki i rurkę suchym ręcznikiem papierowym między myszami. W razie potrzeby przytnij końcówkę rurki PE.W przypadku żucia podczas badania, w razie potrzeby wyczyść komorę obserwacyjną, aby usunąć wszelkie rozpryskiwane joheksol ze ścianek komory. Opłucz komorę wodą z kranu i osusz ręcznikiem papierowym. Użyj oprogramowania do edycji wideo, które umożliwia analizę klatka po klatce nagrań fluoroskopowych wideo.Aby określić ilościowo interesujące parametry połykania, co najmniej dwóch przeszkolonych recenzentów powinno przeanalizować każdy film w sposób zaślepiony. Główny recenzent ogląda każdy film, aby zidentyfikować i przeanalizować od trzech do pięciu długich napadów picia. Kryterium to opiera się na opublikowanych badaniach połykania nieobjętych radiografią, które wykazały, że parametr ten jest wystarczający do analizy statystycznej.Następnie recenzent pomocniczy niezależnie analizuje od trzech do pięciu pomiarów na parametr połykania dla każdej myszy, które zostały wstępnie zidentyfikowane i przeanalizowane przez głównego recenzenta. Rozbieżności recenzentów są następnie identyfikowane dla każdej myszy i ponownie analizowane, aż do osiągnięcia 100% konsensusu. Niekwestionowane wartości dla każdego parametru swallow są następnie uśredniane w celu uzyskania średniej wartości dla każdej myszy.Jeżeli dla parametru jaskółki uzyskano mniej niż trzy miary, należy wprowadzić brakującą wartość w statystycznej bazie danych dla tej miary. Przykłady te uzyskano przy użyciu niskoenergetycznego systemu fluoroskopowego. Jeden z nich pozwala na wizualizację całej głowy i bliższego odcinka piersiowego.Punkt spustowy jaskółki jest wyśrodkowany w polu widzenia. Pozycja druga umożliwia wizualizację od punktu spustowego połykania do połączenia żołądkowo-przełykowego. Zwróć uwagę, że bolus przechodzi przez dystalny przełyk nawet przy najmniejszym ustawieniu powiększenia.Struktury kostne głowy i szyi są łatwo widoczne za pomocą systemu fluoroskopii niskoenergetycznej. Struktury anatomiczne są również badane w większym powiększeniu, aby umożliwić ilościowe określenie kilku dodatkowych parametrów połykania. Rysunek ten przedstawia reprezentatywne wstępne wyniki dla dwóch parametrów połykania VFSS, szybkości połykania i częstości połykania między połknięciami, które były znacznie wolniejsze dla myszy SOD one w porównaniu z myszami w wieku C 57.Interwał połykania między myszami i grupą kontrolną nie różnił się istotnie między grupami. Po opanowaniu przechwytywanie wideo można wykonać w niecałe dwie minuty na masę, jeśli zostanie wykonane prawidłowo. Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać, aby w ciągu kilku godzin od przygotowania użyć roztworu testowego o smaku czekoladowym, aby zapobiec zmianom lepkości i smakowitości, które mogą prowadzić do zachowań unikających.Ta nowa technika toruje drogę naukowcom w dziedzinie neurobiologii do zbadania naturalnych zachowań związanych z karmieniem i połykaniem u zdrowych gryzoni i modeli chorób. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak skutecznie przeprowadzać testy VFSS swobodnie zachowujących się gryzoni Aby określić ilościowo typowe zachowania żywieniowe i funkcję połykania, nie zapominaj, że praca ze sprzętem emitującym promieniowanie może być niezwykle niebezpieczna, a podczas wykonywania tej procedury należy zawsze przestrzegać środków ostrożności dotyczących promieniowania dotyczących czasu, odległości i ekranowania.

adapting-human-videofluoroscopic-swallow-study-methods-to-detect

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Dostosowywanie metod badań połykania człowieka za pomocą wideofluoroskopii do wykrywania i charakteryzacji dysfagii w murynowych modelach chorobowych

Źródło: Nielsen, T. B. i in., Model aspiracji orofaryngealnej myszy bakteryjnego zapalenia płuc związanego z respiratorem i nabytego w szpitalu. J. Vis. Exp. (2018)Ten film pokazuje procedurę dostarczania bakterii przez gardło do płuc znieczulonej myszy, aby wywołać infekcję płuc i wywołać odpowiedź immunologiczną.

Przygotowanie modelu aspiracji orofarygealnej u myszy w celu wykrycia bakteryjnych infekcji płuc

Ten film demonstruje technikę oceny infiltracji makrofagów jelitowych w mysim modelu zapalenia jelita grubego za pomocą tomografii fluorescencyjnej (FMT). Po wywołaniu zapalenia jelita grubego u myszy za pomocą siarczanu sodu dekstranu (DSS), zwierzęciu wstrzykuje się przeciwciała, które rozpoznają marker glikoproteiny F4 / 80 na infiltrowanych makrofagach w okrężnicy. Mysz jest następnie obrazowana w urządzeniu FMT, w którym sygnały fluorescencji i odbicia są rekonstruowane w trójwymiarowy...

Wykorzystanie tomografii fluorescencyjnej do oceny zapalenia jelit myszy

Techniki obrazowania małych zwierząt pozwalają na seryjne badania diagnostyczne i interwencje terapeutyczne in vivo. W ostatnim czasie zakres zastosowań znacznie się poszerzył i obecnie obejmuje ocenę rozwoju guza jelita grubego, gojenie się ran oraz monitorowanie stanu zapalnego. Protokół ten ilustruje te różnorodne potencjalne zastosowania endoskopii mysiej skóry.

Endoskopia mysia do multimodalnego obrazowania in vivo kancerogenezy i oceny gojenia się ran jelitowych i stanów zapalnych

Opisujemy metody długotrwałego monitorowania skuteczności terapii w leczeniu patologii jelita grubego u myszy za pomocą sztywnego endoskopu. Protokół ten może być z łatwością wykorzystany do scharakteryzowania odpowiedzi terapeutycznej pojedynczego guza u żywych myszy, a także do monitorowania potencjalnego nawrotu choroby.

Nieinwazyjna ocena skuteczności nowych terapii patologii jelitowych za pomocą seryjnego obrazowania endoskopowego żywych myszy

Sondy specyficzne dla celu stanowią innowacyjne narzędzie do analizy mechanizmów molekularnych, takich jak ekspresja białek w różnych typach chorób (np. zapaleniu, infekcji i nowotworzenia). W tym badaniu opisano ilościową trójwymiarową ocenę tomograficzną infiltracji makrofagów jelitowych w mysim modelu zapalenia jelita grubego przy użyciu tomografii fluorescencyjnej specyficznej dla F4 / 80.

Tomografia fluorescencyjna do wykrywania i ilościowego oznaczania mysiego zapalenia jelit związanego z makrofagami

Tutaj prezentujemy protokół obrazowania na żywo fuzji wtórnego podniebienia myszy za pomocą mikroskopii konfokalnej. Protokół ten może być stosowany w połączeniu z różnymi fluorescencyjnymi liniami myszy reporterowych oraz z inhibitorami szlaków w celu uzyskania wglądu mechanistycznego. Protokół ten może być zaadaptowany do obrazowania na żywo w innych systemach rozwojowych.

Obrazowanie na żywo fuzji wtórnego podniebienia myszy

Zakaźne zapalenie płuc jest jedną z najczęstszych infekcji u ludzi. Odpowiedni model in vivo ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia patogenezy choroby i testowania skuteczności nowych terapii. Dzięki temu mysiemu modelowi aspiracyjnego zapalenia płuc w jamie ustnej i gardle można zbadać patogenezę i nowe metody leczenia tych śmiertelnych infekcji.

Mysi model aspiracji jamy ustnej i gardła bakteryjnego zapalenia płuc związanego z respiratorem i nabytego w szpitalu

Artykuł przedstawia urządzenie μTongue (mikrofluidyka na języku) do funkcjonalnego obrazowania komórek smaku in vivo poprzez integrację mikrofluidyki z okienkiem obrazowania przyżyciowego na języku.

μTongue: oparta na mikrofluidyce funkcjonalna platforma obrazowania języka in vivo

Aby zbadać, jak jelito cienkie radzi sobie z cząstkami o różnych rozmiarach, zmodyfikowaliśmy ustaloną metodę in vivo, aby określić pasaż jelita cienkiego.

Badanie mechanowykrywania cząstek świetlnych w jesionym jelicie cienkim

Protokół ten opisuje seryjne podejście transoralnej laryngoskopii u myszy i szczurów, które umożliwia bliskie, niezakłócone obrazowanie krtani podczas oddychania i połykania, z wykorzystaniem zoptymalizowanego schematu znieczulenia oraz precyzyjnie dopracowanych technik manipulacji endoskopowej.

Małoinwazyjna laryngoskopia mysia do obrazowania z bliska ruchu krtani podczas oddychania i połykania

Tutaj opisujemy podawanie leków za pomocą mikropipet (MDA) jako alternatywną metodę do doustnego podawania leków, która zachęca zwierzę badawcze do łatwego przyjmowania leków przy minimalnym stresie i dyskomforcie.

Stosowanie podawania leków pod kontrolą mikropipet jako metody alternatywnej dla doustnego podawania przez zgłębnik w modelach gryzoni

Poznaj metodę wideofluoroskopowego badania połykania u myszy do wykrywania dysfagii w modelach chorób. Technika ta umożliwia analizę parametrów połykania i dostarcza biomarkerów do badań przedklinicznych.

Adaptacja metod badania wideofluoroskopowego jaskółki u ludzi do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w modelach choroby myszy (Wideo) | JoVE Journal

Adaptacja metod badania wideofluoroskopowego jaskółki u ludzi do wykrywania i charakteryzowania dysfagii w modelach choroby myszy

Przeglądaj więcej filmów