Name: Eksperymentalne strategie wypełniania dużych luk tkankowych w uszkodzonym rdzeniu kręgowym po ostrym i przewlekłym uszkodzeniu (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Poznaj metodę ADOR do syntezy nowych zeolitów poprzez demontaż i ponowne złożenie materiału UTL. Technika ta umożliwia precyzyjną kontrolę porowatości materiałów katalizatorowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Niemieckie Prawne Ubezpieczenie od Następstw Nieszczęśliwych Wypadków (DGUV), Komisja Badawcza Wydziału Medycznego Uniwersytetu Heinricha Heinego

Przestrzegano wytycznych instytucjonalnych dotyczących bezpieczeństwa i komfortu zwierząt, a wszystkie interwencje chirurgiczne oraz opieka nad zwierzętami przed i po operacji były prowadzone zgodnie z niemiecką ustawą o ochronie zwierząt (Krajowy Urząd ds. Ochrony Środowiska i Konsumentów Nadrenii Północnej-Westfalii, LANUV NRW).
1. Całkowite przecięcie rdzenia kręgowego klatki piersiowej samic szczura rasy Wistar (220 - 250 g)
<ol>
	<li>Przygotowanie rdzenia kręgowego
	<ol>
		<li>Stosować znieczulenie wziewne izofluranem (2 - 3% izofluranu wO2/NO2 w stosunku 1:2) i wstrzyknięcie karprofenu w bolusie (podskórnie [podskórnie] 5 mg/kg). Zaleca się skojarzenie karprofenu z opioidem buprenorfiną (0,02 mg/kg s.c.). Operację należy wprowadzić, gdy nie obserwuje się już odruchu powiek na lekki dotyk patyczkiem kosmetycznym i odruch wycofania łapy na szczypanie bodźca kleszczami.</li>
		<li>Umieść zwierzę na kocu grzewczym w temperaturze 37 °C, aby utrzymać temperaturę ciała podczas zabiegu i nałóż maść na oczy, aby uniknąć wysuszenia w znieczuleniu.</li>
		<li>Ogol grzbiet zwierzęcia i przygotuj skórę za pomocą środka dezynfekującego skórę.</li>
		<li>Przeciąć skórę na linii środkowej wzdłuż kręgów piersiowych na 4 cm za pomocą ostrza chirurgicznego i otwórz ją. Od tego kroku do wszystkich zabiegów należy używać wysterylizowanych narzędzi chirurgicznych (sterylizowanych w autoklawie lub sterylizowanych zanurzeniowo).</li>
		<li>Wycofaj mięśnie powyżej kręgów piersiowych za pomocą małego zacisku mięśniowego.</li>
		<li>Usuń wyrostki kolczyste na poziomie klatki piersiowej 8 (Th8) i Th9 za pomocą rongeura kostnego, ostrożnie przycinając małe kawałki kości, aż kości kręgowe będą płaskie.</li>
		<li>Użyj kleszczy anatomicznych, aby podnieść kręgosłup w wyrostku kolczystym Th7 i użyj rongeur, aby przyciąć małe kawałki kości kręgowej od ogona do rostralu, aż do wykonania laminektomii w Th8 i Th9. Odsłoń oponę twardą, nie uszkadzając jej, ostrożnie usuwając jednorazowo tylko kilka i bardzo małych kawałków kości kręgowej.</li>
		<li>Zaciśnij kręgosłup za pomocą 2 zacisków stabilizacyjnych w wyrostkach kolczystych Th7 i Th10, podnieś zwierzę, aby odłączyć ruchy oddechowe od kręgów.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Całkowite przecięcie rdzenia kręgowego na poziomie klatki piersiowej 8/9
	<ol>
		<li>Podnieś oponę twardą za pomocą cienkich kleszczy, przetnij oponę twardą cienkimi nożyczkami do oczu w kierunku poprzecznym.</li>
		<li>Przytrzymaj boczny odcięty koniec opony twardej za pomocą cienkich kleszczy i włóż hak rdzeniowy do przestrzeni podpajęczynówkowej między oponą twardą a pajęczynówką. Unikaj uszkodzenia opon mózgowych, nie nakłuwając opony mózgowej ani pia lub opony twardej ani kleszczami, ani haczykiem rdzenia kręgowego.</li>
		<li>Powoli obracaj haczyk, aby umieścić go wzdłuż tkanki rdzenia kręgowego, uważając, aby nie wbić się w oponę twardą (pia jest nadal nienaruszona).</li>
		<li>Podnieś rdzeń kręgowy na około 1 - 2 mm w górę, aż po stronie brzusznej pojawi się szczelina między tkanką rdzenia kręgowego a oponą twardą.</li>
		<li>Włóż cienkie nożyczki do oczu w przestrzeń między oponą twardą a pia i przetnij rdzeń kręgowy, pozostawiając hak rdzeniowy na miejscu.</li>
		<li>Podnieś dwa kikuty rdzenia kręgowego za pomocą dwóch kleszczy i wizualnie zapewnij całkowite przecięcie.</li>
		<li>W przypadku zwierząt z uszkodzeniami kontrolnymi i zwierząt z przewlekłym urazem należy zamknąć oponę twardą za pomocą przerywanych szwów za pomocą nieadsorbowalnych nici 9,0 z monofilamentu.</li>
		<li>W przypadku zmian przewlekłych należy zapoznać się z częścią 1.6.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Implantacja mMS
	<ol>
		<li>Umieść mMS powyżej miejsca urazu z dwiema rurkami leżącymi po każdej bocznej stronie kręgu i opuść go do jamy uszkodzenia.</li>
		<li>Rurki do szwów do mięśni z boku kręgu za pomocą niewchłanialnej nici 4-0, aby zapewnić stabilizację mSM. Na tym etapie upewnij się, że mMS jest unieruchomiony za pomocą kleszczy.</li>
		<li>Usuń pin złącza mMS, przecinając go cienkimi nożyczkami.</li>
		<li>Zamknij oponę twardą nad mMS i zszyj ją niciami 9,0.</li>
		<li>Podłącz jedną rurkę do pompy próżniowej, a drugą uszczelnij, zaciskając.</li>
		<li>Zastosuj delikatne podciśnienie do mMS za pomocą pompy próżniowej przez otwartą rurkę, zasysając kikuty rdzenia kręgowego do światła mMS. Stosować podciśnienie przez kilka minut (maksymalnie przez 10 minut) i monitorować za pomocą czujników (250 - 350 mbar).</li>
		<li>Przeciąć rurki blisko mMS i usunąć rurki. Przejdź do kroku 1.6.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Resekcja tkanki rdzenia kręgowego, w tym blizny po przewlekłej zmianie chorobowej, w 5. tygodniu po początkowym urazie
	<ol>
		<li>Wykonaj kroki 1.1.1 - 1.1.5.</li>
		<li>Zidentyfikuj tkankę bliznowatą po brązowo-żółtym wyglądzie i sztywnej tkance na szczycie rdzenia kręgowego. Delikatnie usuń powierzchowne warstwy tkanki bliznowatej, przytrzymując cienkimi kleszczami i tnąc cienkimi nożyczkami. Dzięki tej metodzie należy ponownie otworzyć miejsce laminektomii, aby odsłonić tkankę zawierającą obszar urazu rdzenia kręgowego. Należy przerwać przygotowanie, gdy szew opony twardej zostanie wizualnie zidentyfikowany.</li>
		<li>Zaciśnij kręgosłup za pomocą 2 zacisków stabilizacyjnych na wyrostkach kolczystych Th7 i Th10, a następnie podnieś zwierzę, aby odłączyć ruchy oddechowe od kręgów.</li>
		<li>Za pomocą małej tekturowej linijki zmierz obszar rdzenia kręgowego, który ma zostać wycięty (długość: 4 mm) i zaznacz krawędzie tego odpowiedniego obszaru tkanki poprzecznymi nacięciami, aby umożliwić późniejsze usunięcie tkanki.</li>
		<li>Usuń tkankę bliznowatą poprzez kombinację cięcia i aspiracji. Usuń tkankę, która została oddzielona od rdzenia kręgowego za pomocą nacięć poprzecznych. Stosować delikatne aspiracje, gdy jest to wystarczające, aby umożliwić usunięcie tkanki. Ponadto, gdy sztywna tekstura tkanki bliznowatej sprawia, że aspiracja tkanki jest zbyt trudna, użyj cienkich nożyczek, aby przeciąć i usunąć tę tkankę.</li>
		<li>Włóż kawałek (około 5 mm x 5 mm x 5 mm sześcian) hemostatycznej gąbki żelatynowej do szczeliny tkanki, aż krwawienie ustąpi. Gąbka żelatynowa zmniejszy się, gdy tylko zostanie nasączona płynem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Implantacja PEG 600
	<ol>
		<li>Przygotować 1 ml czystego, nierozcieńczonego PEG 600 do wstrzykiwań, ogrzewając go do temperatury 37 °C.</li>
		<li>Usuń gąbkę żelatynową.</li>
		<li>Wprowadzić odpowiednią ilość (około 5 - 7 μl) PEG do szczeliny za pomocą strzykawki o pojemności 10 μl lub pipety o pojemności 10 μl.</li>
		<li>Ostrożnie przykryj obszar kawałkiem (około 5 mm x 4 mm) zamiennika szczeliwa/opony twardej.</li>
		<li>Przymocuj uszczelniacz do otaczającej tkanki mięśniowej za pomocą kilku kropli kleju do tkanek. Umieść szczeliwo na wierzchu wypełnionej PEG szczeliny resekcyjnej. Aby zapobiec ślizganiu się szczeliwa, użyj małych kropli kleju tkankowego, aby przymocować rogi szczeliwa do otaczającej tkanki mięśniowej. Uwaga: Unikaj wycieku kleju tkankowego na tkankę rdzenia kręgowego!</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zamykanie tkanek i opieka pooperacyjna
	<ol>
		<li>Zszyj mięśnie i skórę warstwa po warstwie z przerywanymi szwami z plecionymi adsorbowalnymi nićmi 4-0</li>
		<li>Wstrzyknąć 2 × 2,5 ml chlorku sodu (NaCl [0,9%]) w temperaturze 36 °C s.c. w celu nawodnienia po zabiegu. Pojedyncze wstrzyknięcie 5 ml NaCl rozciągnęłoby skórę zwierzęcia i mogłoby spowodować niepotrzebne szkody dla zwierzęcia. Nie pozostawiaj zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyskasz pełnej świadomości.</li>
		<li>Karprofen należy wstrzykiwać codziennie (s.c. 5 mg/kg) przez co najmniej 2 dni po zabiegu. Zwierzę domowe w pojedynczej klatce przez pierwsze 2 dni, następnie w grupach po 2 - 3 osoby.</li>
		<li>Zastosuj antybiotykoterapię (codzienne doustne podawanie enrofloksacyny) przez pierwszy tydzień po operacji.</li>
		<li>Wykonuj ręczne opróżnianie pęcherza dwa do trzech razy dziennie, delikatnie głaszcząc brzuch zwierzęcia od rostralnego do ogonowego. Należy uważać, aby nie poruszać kręgosłupem zwierzęcia i nie podnosić zwierzęcia za ogon. Ręcznie opróżniaj pęcherz zwierzęcia z całkowicie uszkodzonym kręgosłupem codziennie przez cały czas przeżycia. Należy zwrócić uwagę, aby granulki pokarmu i butelki z wodą umieścić na wysokości, do której zwierzęta mogą sięgnąć bez stania na tylnych łapach. Chociaż funkcja tylnej ćwiartki jest upośledzona, zwierzęta poruszają się i aktywnie eksplorują klatki natychmiast po operacji. Zaleca się trzymanie szczurów w grupach towarzyskich.</li>
		<li>W przypadku zmian przewlekłych należy pozostawić czas przeżycia zwierząt wynoszący pięć tygodni przed resekcją blizny. Wykonaj kroki 1.4.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Ramer, L. M., Ramer, M. S., Bradbury, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoring+function+after+spinal+cord+injury%3A+towards+clinical+translation+of+experimental+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet.+Neurology%22%5BJournal%5D)">Restoring function after spinal cord injury: towards clinical translation of experimental strategies.</a> The Lancet. Neurology. 13 (12), 1241-1256 (2014).</li>
<li>McDonald, J. W., Howard, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repairing+the+damaged+spinal+cord%3A+a+summary+of+our+early+success+with+embryonic+stem+cell+transplantation+and+remyelination%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Repairing the damaged spinal cord: a summary of our early success with embryonic stem cell transplantation and remyelination.</a> Prog. Brain Res. 137, 299-309 (2002).</li>
<li>Yoon, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complete+spinal+cord+injury+treatment+using+autologous+bone+marrow+cell+transplantation+and+bone+marrow+stimulation+with+granulocyte+macrophage-colony+stimulating+factor%3A+Phase+I%2FII+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Complete spinal cord injury treatment using autologous bone marrow cell transplantation and bone marrow stimulation with granulocyte macrophage-colony stimulating factor: Phase I/II clinical trial.</a> Stem Cells. 25 (8), 2066-2073 (2007).</li>
<li>Brotchi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+spinal+cord+tumor+resection%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intrinsic spinal cord tumor resection.</a> Neurosurgery. 50 (5), 1059-1063 (2002).</li>
<li>Estrada, V., Tekinay, A., Muller, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+ECM+mimetics%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Neural ECM mimetics.</a> Prog. Brain Res. 214, Chapter 16 391-413 (2014).</li>
<li>Tetzlaff, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Systematic+Review+of+Cellular+Transplantation+Therapies+for+Spinal+Cord+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A Systematic Review of Cellular Transplantation Therapies for Spinal Cord Injury.</a> J.Neurotrauma. 28 (8), 1611-1682 (2010).</li>
<li>Brazda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mechanical+microconnector+system+for+restoration+of+tissue+continuity+and+long-term+drug+application+into+the+injured+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A mechanical microconnector system for restoration of tissue continuity and long-term drug application into the injured spinal cord.</a> Biomaterials. 34 (38), 10056-10064 (2013).</li>
<li>Estrada, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-lasting+significant+functional+improvement+in+chronic+severe+spinal+cord+injury+following+scar+resection+and+polyethylene+glycol+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Dis%22%5BJournal%5D)">Long-lasting significant functional improvement in chronic severe spinal cord injury following scar resection and polyethylene glycol implantation.</a> Neurobiol. Dis. 67, 165-179 (2014).</li>
<li>Rasouli, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resection+of+glial+scar+following+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.Orthop.Res%22%5BJournal%5D)">Resection of glial scar following spinal cord injury.</a> J.Orthop.Res. 27 (7), 931-936 (2009).</li>
<li>Schira, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Significant+clinical%2C+neuropathological+and+behavioural+recovery+from+acute+spinal+cord+trauma+by+transplantation+of+a+well-defined+somatic+stem+cell+from+human+umbilical+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Significant clinical, neuropathological and behavioural recovery from acute spinal cord trauma by transplantation of a well-defined somatic stem cell from human umbilical cord blood.</a> Brain. 135, Pt 2 431-446 (2011).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W tym miejscu przedstawiono dwa różne podejścia chirurgiczne w celu wypełnienia luk tkankowych w rdzeniu kręgowym po (1) ostrym całkowitym przecięciu i implantacji mMS oraz (2) przewlekłym uszkodzeniu rdzenia kręgowego i usunięciu blizn włóknistych oraz implantacji macierzy PEG. Obie strategie prowadzą do zachowania tkanek i regeneracji aksonów, a także do znacznej poprawy funkcjonowania lokomotoryki leczonych zwierząt. W przypadku implantacji mSM odpowiednim unieruchomieniem mSM w rdzeniu kręgowym za pomocą mocnego szwu...

Urazowe uszkodzenie rdzenia kręgowego nie tylko prowadzi do utraty aksonów, ale także do wad tkanek, które utrudniają jakiekolwiek reakcje regeneracyjne (zobacz 1,2). Tkanka rdzenia kręgowego jest często tracona w wyniku wtórnego zwyrodnienia, co prowadzi do powstawania torbieli lub w obszarze zmiany i wokół niej. Większość eksperymentalnych interwencji terapeutycznych koncentruje się na niekompletnych uszkodzeniach rdzenia kręgowego, takich jak częściowe przecięcie, zmiażdżenie lub stłuczenie z pozostałą krawędzią zdrowej tkanki. W przypadku całkowitych urazów, takich jak całkowite przecięcia w wyniku urazów lub interwencji chirurgicznych, takich jak resekcja guza, dostępne są obecnie tylko bardzo ograniczone możliwości leczenia3,4. Po całkowitym przecięciu mechaniczne napięcie tkanki powoduje retrakcję kikuta kręgowego, pozostawiając niewielką szczelinę w rdzeniu kręgowym. Większość strategii koncentruje się na wypełnieniu tej luki tkankami, komórkami lub matrycami5,6.
Tutaj prezentowana jest inna strategia, a mianowicie readaptacja oddzielonych pni za pomocą nowatorskiego urządzenia z mikrozłączem7. Aby ponownie przystosować dwa pniaki, należy przyłożyć siłę mechaniczną w postaci lekkiego podciśnienia, aby to osiągnąć (rysunek 1). Mechaniczny system mikrozłączy (mMS) to wielokanałowy system z polimetakrylanu metylu (PMMA) z otworami w kształcie plastra miodu (rysunek 1A) i wyposażony w system rurek wylotowych. Wszczepia się go w szczelinę tkankową powstałą w wyniku całkowitego przecięcia rdzenia kręgowego u szczura (ryc. 1C). Jedną rurkę można podłączyć do pompy próżniowej, aby wytworzyć podciśnienie w mMS (rysunek 1D). Ciśnienie wciąga odłączone kikuty rdzenia kręgowego do otworów w kształcie plastra miodu w mMS, które mają mikrostrukturalne ścianki, które utrzymują tkankę na miejscu po zwolnieniu ciśnienia (ryc. 1B). Rurkę można pozostawić nienaruszoną po operacji i podłączyć do minipompy osmotycznej w celu wprowadzenia substancji do rdzenia zmiany chorobowej (ryc. 1E-F).
Oprócz ostrego przecięcia rdzenia kręgowego, inny rodzaj całkowitej zmiany wynika z chirurgicznego usunięcia guza kręgosłupa lub solidnej blizny po przewlekłej zmianie, co prowadzi do dużych luk tkankowych o długości kilku milimetrów, które jak dotąd nie mogą być pokonane przez mMS. Większość pacjentów z urazami rdzenia kręgowego cierpi z powodu przewlekłych urazów. U tych pacjentów w pełni rozwinięta blizna zajmuje rdzeń zmiany. Chirurgiczne usunięcie blizny po zmianie chorobowej jest koncepcją leczenia, która jest obecnie badana po eksperymentalnym SCI8,9. Podczas gdy sam zabieg resekcji może być wykonany bez powodowania znacznych dodatkowych uszkodzeń, powstała luka tkankowa musi zostać zmostkowana za pomocą odpowiedniej matrycy, która umożliwia i wspomaga regenerację tkanki oraz, w szczególnym przypadku urazów rdzenia kręgowego, regenerację włókien nerwowych w celu utrzymania i promowania funkcji lokomotorycznych. Stwierdzono, że niskocząsteczkowy glikol polietylenowy (PEG 600) jest bardzo odpowiednim materiałem do tego celu. Jego brak immunogenności i bardzo niska lepkość pozwalają na płynną integrację z otaczającą tkanką. Wprowadzenie samego biopolimeru sprzyja inwazji korzystnych komórek, w tym komórek śródbłonka, obwodowych komórek Schwanna i astrocytów oraz - co bardzo ważne - regeneracji i wydłużeniu aksonów zstępujących i wstępujących dróg włóknistych, a także ich pokryciu zwartą mieliną8. Stwierdzono, że tym reakcjom regeneracyjnym towarzyszy długotrwała poprawa funkcjonalna. Połączenie resekcji tkanki bliznowatej z późniejszą implantacją PEG 600 stanowi bezpieczny i prosty, a jednocześnie bardzo skuteczny sposób na zniwelowanie znacznych ubytków tkanki rdzenia kręgowego.

<table><tbody><tr><td>PEG 600 Ph Eur&nbsp;</td><td>Merck/VWR&nbsp;</td><td>8 170 041 000</td><td></td></tr><tr><td>Gąbka żelatynowa Gelastypt&nbsp; &nbsp;</td><td>sanofi Aventis</td><td>PZN-8789582</td><td></td></tr><tr><td>Uszczelniacz Nescofilm&nbsp;</td><td>Roth</td><td>2569.1</td><td></td></tr><tr><td>Baytril</td><td>Bayer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl (Carpofen)</td><td>Pfizer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forene (Isoflurane)</td><td>Abbvie</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kodan (środek do dezynfekcji skóry)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Histoacryl (klej do tkanek)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson Rongeur, kubek 1 mm, prosty&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>16020-14</td><td></td></tr><tr><td>Mikroszpatułka dwa w jednym - 12 cm&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>10091-12</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze Dumont #7 - Inox Medical&nbsp;</td><td>Narzędzia Fine Science</td><td>11273-20</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5/45 Kleszcze - Inox Medical&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>Hak do rdzenia kręgowego&nbsp;</td><td>Narzędzia do nauki pięknej</td><td>10162-12</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki&nbsp;</td><td>Narzędzia do nauki precyzyjnej</td><td>14078-10</td><td></td></tr><tr><td>Zacisk&nbsp;</td><td>Aesculap</td><td>EA016R</td><td></td></tr><tr><td>Ethicon Vicryl 4-0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen Augen- und Nasensalbe</td><td>Bayer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze anatomiczne&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-13</td><td></td></tr><tr><td>Zwijacz samozatrzymujący się&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>17008-07</td><td></td></tr><tr><td>Zacisk do skóry&nbsp;</td><td>Narzędzia Fine Science</td><td>13008-12</td><td></td></tr><tr><td>Aluspray&nbsp;</td><td>Selectavet</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

eksperymentalne strategie wypełniania dużych luk tkankowych w uszkodzonym rdzeniu kręgowym po ostrym i przewlekłym uszkodzeniu

Experimental Strategies to Bridge Large Tissue Gaps in the Injured Spinal Cord after Acute and Chronic Lesion

Po urazie rdzenia kręgowego (SCI) w rdzeniu uszkodzenia tworzy się blizna, która utrudnia regenerację aksonów. Wypełnienie miejsca urazu po uszkodzeniu rdzenia kręgowego, resekcjach guza lub ubytkach tkanek wynikających z urazów może pomóc w ułatwieniu ogólnej naprawy tkanek, a także regeneracyjnego wzrostu włókien nerwowych do i poza dotkniętym obszarem. Przedstawiono dwie eksperymentalne strategie leczenia: (1) wszczepienie nowatorskiego urządzenia z mikrołącznikiem do rdzenia kręgowego szczura z ostrym i całkowicie przeciętym odcinkiem klatki piersiowej w celu readaptacji przerwanych kikutów tkanki rdzenia kręgowego oraz (2) wypełnienie glikolem polietylenowym miejsca SCI u szczurów z przewlekłymi zmianami po resekcji blizny. Przewlekła zmiana rdzenia kręgowego w tym modelu to całkowite przecięcie rdzenia kręgowego, które zostało wykonane 5 tygodni przed leczeniem. Obie metody przyniosły ostatnio bardzo obiecujące wyniki i przyczyniły się do odrastania aksonów, korzystnej inwazji komórkowej i poprawy funkcjonalnej w modelach uszkodzenia rdzenia kręgowego u gryzoni.
Mechaniczny system mikrozłączy (mMS) to wielokanałowy system składający się z polimetakrylanu metylu (PMMA) z systemem rurek wylotowych do wywierania podciśnienia na światło mMS, wciągając w ten sposób kikuty rdzenia kręgowego do otworów o strukturze plastra miodu. Po zagnieżdżeniu się w szczelinie tkankowej o średnicy 1 mm tkanka jest zasysana do urządzenia. Ponadto wewnętrzne ścianki mMS są mikrostrukturalne dla lepszej przyczepności tkanek.
W przypadku przewlekłego uszkodzenia rdzenia kręgowego, tkanka rdzenia kręgowego - w tym obszar zmiany wypełnionej blizną - jest wycinana na obszarze o długości 4 mm. Po mikrochirurgicznej resekcji blizny powstały ubytek wypełnia się glikolem polietylenowym (PEG 600), który okazał się stanowić doskonałe podłoże do inwazji komórkowej, rewaskularyzacji, regeneracji aksonów, a nawet kompaktowej remielinizacji in vivo.

Zachowanie tkanki, odrost aksonalny i korzyść funkcjonalna po implantacji mMS po ostrym całkowitym przerwaniu rdzenia kręgowego 
Wykazano, że ostra implantacja mMS ustabilizowała kikut całkowicie przerwanego rdzenia kręgowego i zmniejszyła kurczenie się tkanki (Rysunek 2A versus B). Jak pokazano w barwieniu trichromowym w przekrojach strzałkowych, zielone barwienie tkanki łącznej włóknistej blizny w centrum zmiany jest znaczni...

Poważne urazy rdzenia kręgowego często skutkują wadami tkanek. Opisano dwie możliwości skutecznego wypełnienia takich luk w celu promowania adaptacji tkanek, reakcji regeneracyjnych i poprawy funkcjonalnej u szczurów poprzez wszczepienie mechanicznego systemu mikrołączników po ostrym urazie i pięć tygodni po całkowitym przecięciu rdzenia kręgowego.

Eksperymentalne strategie wypełniania dużych luk tkankowych w uszkodzonym rdzeniu kręgowym po ostrym i przewlekłym uszkodzeniu

After a spinal cord injury (SCI) a scar forms in the lesion core which hinders axonal regeneration. Bridging the site of injury after an insult to the ...

Ogólnym celem tego filmu jest zaprezentowanie metody ADOR (assembly-disassembly-organization-reassembly), służącej do otrzymywania nowych materiałów zeolitowych poprzez rozkład wcześniej zmontowanego zeolitu na jego komponenty, a następnie organizowanie i ponowne montowanie ich w różny sposób w celu utworzenia nowych materiałów. Zeolity są niezwykle istotnymi ciałami stałymi, wykorzystywanymi w wielu gałęziach przemysłu – od katalizatorów w rafineriach ropy naftowej po powłoki antybakteryjne na urządzeniach medycznych. Metoda ADOR przygotowywania zeolitów znacząco różni się od tradycyjnych metod syntezy zeolitów.W konsekwencji różnią się również rodzaje materiałów, które możemy przygotować. Otwiera to wiele możliwości dla nowych zastosowań. W tym filmie pokażemy, jak wytworzyć dwa nowe zeolity o różnych rozmiarach porów: IPC-4, który ma najmniejszy rozmiar porów, oraz większy, IPC-2.Aby zsyntetyzować macierzysty zeolit germanowo-UTL, najpierw rozpuścić 1,08 g dwutlenku germanu w 15 ml roztworu środka kierującego strukturą. Do roztworu dodawać porcjami 1,246 g pirolitycznego dwutlenku krzemu i mieszać przez kolejne 30 minut, aż powstanie jednorodny roztwór. Powstały żel przenieść do

experimental-strategies-to-bridge-large-tissue-gaps-injured-spinal

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Uraz rdzenia kręgowego zaburza komunikację z mózgiem. Aby przywrócić utraconą łączność, wykorzystujemy przeszczep nerwu obwodowego, który stanowi podłoże dla regenerujących się włókien, w połączeniu z czynnikami neurotroficznymi i enzymami modyfikującymi macierz, które usuwają cząsteczki hamujące w celu promowania wzrostu na duże odległości.

Połączenie przeszczepu nerwu obwodowego i modulacji macierzy w celu naprawy uszkodzonego rdzenia kręgowego szczura

Źródło: Lee, Y., et.al. Przeszczep komórek Schwanna do przewodów PVDF-TrFE w celu zmostkowania przeciętych kikutów rdzenia kręgowego szczura w celu promowania regeneracji aksonów w poprzek luki. J. Vis. Exp. (2017)Ten film demonstruje zastosowanie piezoelektrycznego przewodu polimerowego wysianego komórkami Schwanna w celu promowania regeneracji aksonów w rdzeniu kręgowym szczura przeciętym przez sieć. Przewód zapewnia przewodnictwo strukturalne, a jego właściwości bioelektryczne stymulują...

Przewody wysiewane komórkami Schwanna do regeneracji aksonów po urazie rdzenia kręgowego

Opisano nowatorską technikę tworzenia powtarzalnego modelu in vivo uszkodzenia rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym u myszy.  Technika ta opiera się na stabilizacji kręgosłupa poprzez unieruchomienie fasetek szyjnych i uszkodzenie rdzenia kręgowego za pomocą oscylującego ostrza z dokładnością do ±0,01 mm.

Kontrolowane uszkodzenie szyjki macicy u myszy

Matryce fibrynowe zawierające czynniki wzrostu zostały użyte do zatrzymania przeszczepionych nerwowych komórek macierzystych w miejscach całkowitego przecięcia rdzenia kręgowego. Przeszczepione komórki całkowicie wypełniły jamę chorobową i zróżnicowały się w wiele typów komórek nerwowych, w tym neurony, które rozciągały aksony do rdzenia kręgowego gospodarza na duże odległości.

Promowanie przeżycia i różnicowania nerwowych komórek macierzystych z koktajlami fibryny i czynnika wzrostu po ciężkim urazie rdzenia kręgowego

Leczenie uszkodzeń rdzenia kręgowego odcinka szyjnego zarówno za pomocą peptydów samoorganizujących się (SAP), jak i nerwowych komórek prekursorowych (NPC), wraz z czynnikami wzrostu, jest obiecującym podejściem do promowania regeneracji i regeneracji. Ustalono szczurzy model klisa do stłuczenia/ucisku tętniaka szyjki macicy i leczenia skojarzonego obejmującego wstrzyknięcie SAP i przeszczep NPC.

Synergiczne zastosowanie neuronalnych komórek prekursorowych i samoorganizujących się peptydów w eksperymentalnym uszkodzeniu rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym

Uraz rdzenia kręgowego to traumatyczny stan, który powoduje ciężką zachorowalność i wysoką śmiertelność. W niniejszej pracy szczegółowo opisano model kontuzji rdzenia kręgowego u myszy, po którym następuje przeszczepienie nerwowych komórek macierzystych.

Przeszczepienie nerwowych komórek macierzystych w eksperymentalnym modelu kontuzyjnym uszkodzenia rdzenia kręgowego

Tutaj prezentujemy protokół, który opiera się na wycinkach rdzenia kręgowego hodowanych na układach wieloelektrodowych w celu zbadania funkcjonalnej regeneracji połączeń propriordzeniowych in vitro.

Badanie regeneracji funkcjonalnej w organotypowych kokulturach rdzenia kręgowego hodowanych na matrycach wieloelektrodowych

Ten artykuł opisuje technikę wprowadzania pustego przewodu między kikuty rdzenia kręgowego po całkowitym przecięciu i wypełnieniu komórkami Schwanna (SC) oraz wstrzykiwalną macierzą błony podstawnej w celu wypełnienia i wspomagania regeneracji aksonów w poprzek szczeliny.

Przeszczep komórek Schwanna wewnątrz przewodów PVDF-TrFE w celu zmostkowania przeciętych kikutów rdzenia kręgowego szczura w celu promowania regeneracji aksonów w poprzek luki

Tutaj opisujemy procedury chirurgiczne mające na celu uzyskanie niezawodnej bocznej hemisekcji rdzenia kręgowego (HX) na 9 poziomie klatki piersiowej u dorosłych szczurów oraz oceny neurobehawioralne przeznaczone do wykrywania asymetrycznych deficytów po takim jednostronnym urazie.

Hemisekcja boczna rdzenia kręgowego i asymetryczna ocena zachowania u dorosłych szczurów

Tutaj opisujemy nową, szybką technikę modelowania uszkodzenia otwartego rdzenia kręgowego u szczurów, która eliminuje laminektomię. Hemisekcję boczną wykonuje się podczas oglądania przez mikroskop. Technika ta jest wszechstronna i może być również stosowana w odcinku szyjnym, piersiowym i lędźwiowym rdzenia kręgowego innych zwierząt.

Minimalnie inwazyjna, szybka technika hemisekcji bocznej rdzenia kręgowego do modelowania otwartych urazów rdzenia kręgowego u szczurów

Minimalnie inwazyjne techniki i proste urządzenie laboratoryjne poprawiają odtwarzalność modelu uszkodzenia rdzenia kręgowego, zmniejszając uszkodzenia operacyjne u zwierząt doświadczalnych i umożliwiając utrzymanie anatomicznej morfologii. Metoda ta jest opłacalna, ponieważ wiarygodne wyniki i powtarzalna procedura ułatwiają badanie mechanizmów naprawy choroby.

Ustalenie modelu urazu rdzenia kręgowego stłuczenia u myszy w oparciu o technikę minimalnie inwazyjną

Poznaj metodę ADOR do syntezy nowych zeolitów poprzez demontaż i ponowne złożenie materiału UTL. Technika ta umożliwia precyzyjną kontrolę porowatości materiałów katalizatorowych.

Eksperymentalne strategie wypełniania dużych luk tkankowych w uszkodzonym rdzeniu kręgowym po ostrym i przewlekłym uszkodzeniu

Przeglądaj więcej filmów