-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Bardzo czuły test do pomiaru przyłączenia komórki arenawirusa
Bardzo czuły test do pomiaru przyłączenia komórki arenawirusa
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Highly Sensitive Assay for Measurement of Arenavirus-cell Attachment

Bardzo czuły test do pomiaru przyłączenia komórki arenawirusa

Full Text
10,141 Views
08:34 min
March 2, 2016

DOI: 10.3791/53682-v

Joseph P. Klaus1, Jason Botten1,2

1Department of Medicine, Division of Immunobiology,University of Vermont, 2Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of Vermont

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a quantitative method for measuring arenavirus particle attachment to host cells using a highly sensitive qRT-PCR-based assay. The technique can also be adapted to study virion endocytosis and genome release into the cytoplasm.

Key Study Components

Area of Science

  • Virology
  • Cell Biology
  • Molecular Biology

Background

  • Arenaviruses are a group of viruses that can cause significant diseases in humans.
  • Understanding the attachment of viral particles to host cells is crucial for developing antiviral strategies.
  • Current methods for detecting viral attachment lack the sensitivity needed for detailed studies.
  • This protocol provides a solution with its ultrasensitive detection capabilities.

Purpose of Study

  • To quantitatively measure the attachment of arenavirus particles to host cells.
  • To enhance the sensitivity of detection methods for viral attachment.
  • To provide a foundation for further studies on viral entry mechanisms.

Methods Used

  • Preparation of complete DMEM with fetal bovine serum and antibiotics.
  • Seeding of Vero E6 cells in a 48-well tissue culture plate.
  • Incubation of cells under controlled conditions to promote attachment.
  • Utilization of qRT-PCR for the detection of viral attachment events.

Main Results

  • The protocol successfully quantifies arenavirus attachment to host cells.
  • High sensitivity allows for the detection of low levels of viral particles.
  • Adaptability of the method for studying endocytosis and genome release.
  • Results contribute to a better understanding of arenavirus biology.

Conclusions

  • This method provides a reliable approach for studying arenavirus attachment.
  • High sensitivity is a significant advantage over existing techniques.
  • Future research can build on this foundation to explore viral entry mechanisms.

Frequently Asked Questions

What is the primary goal of this protocol?
The primary goal is to quantitatively measure arenavirus particle attachment to host cells.
How does this method improve sensitivity?
It utilizes a qRT-PCR-based assay that allows for ultrasensitive detection of viral attachment events.
Can this protocol be adapted for other studies?
Yes, it can be adapted to measure virion endocytosis and genome release into the cytoplasm.
What cell line is used in this protocol?
Vero E6 cells are used for the attachment assays.
What are the incubation conditions for the cells?
Cells are incubated at 37 degrees Celsius with 5% carbon dioxide for 10 to 18 hours.

Pierwszym krokiem w cyklu życia arenawirusa jest dołączenie cząsteczek wirusa do komórek gospodarza. Przedstawiamy ilościowy test oparty na (q)RT-PCR do ultraczułego wykrywania i ilościowego oznaczania zdarzeń związanych z przyłączeniem arenawirusa.

Ogólnym celem tego protokołu jest ilościowy pomiar przyłączenia cząstek arenawirusa do komórek gospodarza. Główną zaletą tej techniki jest jej wysoka czułość. Można go również dostosować do pomiaru endocytozy wirionu, a także uwalniania genomu do cytoplazmy po fuzji.

Aby rozpocząć, aby uzyskać kompletny DMEM, do 500-mililitrowej butelki DMEM, dodaj 50 mililitrów inaktywowanej termicznie płodowej surowicy bydlęcej i po pięć mililitrów 100X penicyliny-streptomycyny i 100X buforu HEPES. Pod koniec dnia wysiewaj 2,5 razy 10 do 4 komórek Vero E6 na studzienkę, trzykrotnie dla każdego wirusa, na 48-dołkowej płytce do hodowli tkankowej w końcowej objętości 500 mikrolitrów kompletnego DMEM. Inkubować płytkę w temperaturze 37 stopni Celsjusza w wilgotnym inkubatorze z 5% dwutlenkiem węgla przez 10 do 18 godzin.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Słowa kluczowe: Arenawirus przyłączanie wirusa endocytoza wirusa fuzja wirusa komórki Vero E6 wirus Junin Candid 1 jednostki tworzące ognisko jednostki tworzące blaszkę izolacja RNA liza komórek

Related Videos

Test przeciwciał neutralizujących AAV na bazie komórek: technika kolorymetryczna do wykrywania przeciwciał neutralizujących przeciwko specyficznym wirusom związanym z adenowirusami w surowicy

04:54

Test przeciwciał neutralizujących AAV na bazie komórek: technika kolorymetryczna do wykrywania przeciwciał neutralizujących przeciwko specyficznym wirusom związanym z adenowirusami w surowicy

Related Videos

1.1K Views

Test kinetyki przeżycia oparty na impedancji komórkowej w celu oceny przeżycia wirusa

02:52

Test kinetyki przeżycia oparty na impedancji komórkowej w celu oceny przeżycia wirusa

Related Videos

625 Views

Test przyłączania wirusa do badań przesiewowych związków przeciwwirusowych

02:47

Test przyłączania wirusa do badań przesiewowych związków przeciwwirusowych

Related Videos

1.1K Views

Test do oceny wpływu badanych związków na wnikanie wirusa i fuzję w komórkach gospodarza

02:38

Test do oceny wpływu badanych związków na wnikanie wirusa i fuzję w komórkach gospodarza

Related Videos

616 Views

Testy wczesnego wnikania wirusa w celu identyfikacji i oceny związków przeciwwirusowych

09:29

Testy wczesnego wnikania wirusa w celu identyfikacji i oceny związków przeciwwirusowych

Related Videos

31K Views

Pomiar przyczepiania i internalizacji wirusa grypy A w komórkach A549 za pomocą cytometrii przepływowej

07:25

Pomiar przyczepiania i internalizacji wirusa grypy A w komórkach A549 za pomocą cytometrii przepływowej

Related Videos

10.7K Views

Zminiaturyzowany test mikromacierzy glikanów do oceny awidności i swoistości hemaglutynin wirusa grypy A

10:32

Zminiaturyzowany test mikromacierzy glikanów do oceny awidności i swoistości hemaglutynin wirusa grypy A

Related Videos

8.4K Views

Alternatywne metody in vitro do oznaczania integralności strukturalnej kapsydu wirusa

12:57

Alternatywne metody in vitro do oznaczania integralności strukturalnej kapsydu wirusa

Related Videos

8.7K Views

Ilościowy test igłowy do miareczkowania AAV i jego zastosowanie do oceny funkcjonalnej białek aktywujących składanie wirusa związanego z adenowirusem

14:49

Ilościowy test igłowy do miareczkowania AAV i jego zastosowanie do oceny funkcjonalnej białek aktywujących składanie wirusa związanego z adenowirusem

Related Videos

14.5K Views

Testy specyficznej szybkości wzrostu i zdolności wiązania komórkowego rotawirusa

10:49

Testy specyficznej szybkości wzrostu i zdolności wiązania komórkowego rotawirusa

Related Videos

9.4K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code