RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pl_PL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/53682-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a quantitative method for measuring arenavirus particle attachment to host cells using a highly sensitive qRT-PCR-based assay. The technique can also be adapted to study virion endocytosis and genome release into the cytoplasm.
Pierwszym krokiem w cyklu życia arenawirusa jest dołączenie cząsteczek wirusa do komórek gospodarza. Przedstawiamy ilościowy test oparty na (q)RT-PCR do ultraczułego wykrywania i ilościowego oznaczania zdarzeń związanych z przyłączeniem arenawirusa.
Ogólnym celem tego protokołu jest ilościowy pomiar przyłączenia cząstek arenawirusa do komórek gospodarza. Główną zaletą tej techniki jest jej wysoka czułość. Można go również dostosować do pomiaru endocytozy wirionu, a także uwalniania genomu do cytoplazmy po fuzji.
Aby rozpocząć, aby uzyskać kompletny DMEM, do 500-mililitrowej butelki DMEM, dodaj 50 mililitrów inaktywowanej termicznie płodowej surowicy bydlęcej i po pięć mililitrów 100X penicyliny-streptomycyny i 100X buforu HEPES. Pod koniec dnia wysiewaj 2,5 razy 10 do 4 komórek Vero E6 na studzienkę, trzykrotnie dla każdego wirusa, na 48-dołkowej płytce do hodowli tkankowej w końcowej objętości 500 mikrolitrów kompletnego DMEM. Inkubować płytkę w temperaturze 37 stopni Celsjusza w wilgotnym inkubatorze z 5% dwutlenkiem węgla przez 10 do 18 godzin.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
04:54
Related Videos
1.1K Views
02:52
Related Videos
625 Views
02:47
Related Videos
1.1K Views
02:38
Related Videos
616 Views
09:29
Related Videos
31K Views
07:25
Related Videos
10.7K Views
10:32
Related Videos
8.4K Views
12:57
Related Videos
8.7K Views
14:49
Related Videos
14.5K Views
10:49
Related Videos
9.4K Views