Name: Połączony model tkankowy 3D guza płuca wykonany in vitro/in silico do przewidywania skuteczności leków w określonych tłach mutacyjnych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 34 s
Description: Poznaj połączony model 3D guza płuca in vitro/in silico do przewidywania skuteczności terapii ukierunkowanych w raku płuca niedrobnokomórkowym. Ta metoda integruje predykcje komputerowe z danymi eksperymentalnymi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było sponsorowane przez Centrum Interdyscyplinarnych Badań Klinicznych (IZKF, grant BD247) Szpitala Uniwersyteckiego w Würzburgu oraz program Bayern Fit (przyznany Heike Walles).

<ol><li>Bhattacharjee, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomedicine+Pharma+firms+push+for+sharing+of+cancer+trial+data%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biomedicine Pharma firms push for sharing of cancer trial data.</a> Science. 338, 29(2012).</li>
<li>Kola, I., Landis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+the+pharmaceutical+industry+reduce+attrition+rates%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Can the pharmaceutical industry reduce attrition rates?</a> Nat Rev Drug Discov. 3, 711-715 (2004).</li>
<li>Arrowsmith, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+Phase+II+failures%3A+2008-2010%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: Phase II failures: 2008-2010.</a> Nat Rev Drug Discov. 10, 328-329 (2011).</li>
<li>Arrowsmith, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+phase+III+and+submission+failures%3A+2007-2010%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: phase III and submission failures: 2007-2010.</a> Nat Rev Drug Discov. 10, 87(2011).</li>
<li>Arrowsmith, J., Miller, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+phase+II+and+phase+III+attrition+rates+2011-2012%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: phase II and phase III attrition rates 2011-2012.</a> Nat Rev Drug Discov. 12, 569(2013).</li>
<li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li>
<li>Hartung, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicology+for+the+twenty-first+century%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Toxicology for the twenty-first century.</a> Nature. 460, 208-212 (2009).</li>
<li>Stratmann, A. T., Dandekar, G., Nietzer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+in+vitro+tumor+Models+as+an+Alternative+for+Animal+Models+in+Preclinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Ind%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional in vitro tumor Models as an Alternative for Animal Models in Preclinical Studies.</a> Pharm Ind. 75, 485-489 (2013).</li>
<li>Stratmann, A. T., Dandekar, G., Nietzer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+in+vitro+tumor+Models+as+an+Alternative+for+Animal+Models+in+Preclinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Ind%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional in vitro tumor Models as an Alternative for Animal Models in Preclinical Studies.</a> Pharm Ind. 75, 675-680 (2013).</li>
<li>Gudjonsson, T., Ronnov-Jessen, L., Villadsen, R., Bissell, M. J., Petersen, O. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((To+create+the+correct+microenvironment%3A+three-dimensional+heterotypic+collagen+assays+for+human+breast+epithelial+morphogenesis+and+neoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">To create the correct microenvironment: three-dimensional heterotypic collagen assays for human breast epithelial morphogenesis and neoplasia.</a> Methods. 30, 247-255 (2003).</li>
<li>Weaver, V. M., Fischer, A. H., Peterson, O. W., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+microenvironment+in+breast+cancer+progression%3A+recapitulation+of+mammary+tumorigenesis+using+a+unique+human+mammary+epithelial+cell+model+and+a+three-dimensional+culture+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The importance of the microenvironment in breast cancer progression: recapitulation of mammary tumorigenesis using a unique human mammary epithelial cell model and a three-dimensional culture assay.</a> Biochem Cell Biol. 74, 833-851 (1996).</li>
<li>Antoni, D., Burckel, H., Josset, E., Noel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cell+culture%3A+a+breakthrough+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cell culture: a breakthrough in vivo.</a> Int J Mol Sci. 16, 5517-5527 (2015).</li>
<li>Kim, J., Tanner, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+the+Tumor+Ecosystem+Along+the+Metastatic+Cascade+Using+3D+Culture+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Recapitulating the Tumor Ecosystem Along the Metastatic Cascade Using 3D Culture Models.</a> Front Oncol. 5, 170(2015).</li>
<li>Worthington, P., Pochan, D. J., Langhans, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide+Hydrogels+-+Versatile+Matrices+for+3D+Cell+Culture+in+Cancer+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Peptide Hydrogels - Versatile Matrices for 3D Cell Culture in Cancer Medicine.</a> Front Oncol. 5, 92(2015).</li>
<li>Tanner, K., Gottesman, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+3D+culture+models+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Beyond 3D culture models of cancer.</a> Sci Transl Med. 7, 283ps9(2015).</li>
<li>Stadler, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+complexity+in+carcinomas%3A+Analyzing+and+modeling+the+interaction+of+human+cancer+cells+with+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Increased complexity in carcinomas: Analyzing and modeling the interaction of human cancer cells with their microenvironment.</a> Semin Cancer Biol. , (2015).</li>
<li>Stratmann, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+human+3D+lung+cancer+model+based+on+a+biological+tissue+matrix+combined+with+a+Boolean+in+silico+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Establishment of a human 3D lung cancer model based on a biological tissue matrix combined with a Boolean in silico model.</a> Mol Oncol. 8, 351-365 (2014).</li>
<li>Mok, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+or+carboplatin-paclitaxel+in+pulmonary+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Gefitinib or carboplatin-paclitaxel in pulmonary adenocarcinoma.</a> N Engl J Med. 361, 947-957 (2009).</li>
<li>Maemondo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+or+chemotherapy+for+non-small-cell+lung+cancer+with+mutated+EGFR%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Gefitinib or chemotherapy for non-small-cell lung cancer with mutated EGFR.</a> N Engl J Med. 362, 2380-2388 (2010).</li>
<li>Rosell, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erlotinib+versus+standard+chemotherapy+as+first-line+treatment+for+European+patients+with+advanced+EGFR+mutation-positive+non-small-cell+lung+cancer+%28EURTAC%29%3A+a+multicentre%2C+open-label%2C+randomised+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Erlotinib versus standard chemotherapy as first-line treatment for European patients with advanced EGFR mutation-positive non-small-cell lung cancer (EURTAC): a multicentre, open-label, randomised phase 3 trial.</a> Lancet Oncol. 13, 239-246 (2012).</li>
<li>Sequist, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+III+study+of+afatinib+or+cisplatin+plus+pemetrexed+in+patients+with+metastatic+lung+adenocarcinoma+with+EGFR+mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Phase III study of afatinib or cisplatin plus pemetrexed in patients with metastatic lung adenocarcinoma with EGFR mutations.</a> J Clin Oncol. 31, 3327-3334 (2013).</li>
<li>Lee, J. M., Dedhar, S., Kalluri, R., Thompson, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epithelial-mesenchymal+transition%3A+new+insights+in+signaling%2C+development%2C+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The epithelial-mesenchymal transition: new insights in signaling, development, and disease.</a> J Cell Biol. 172, 973-981 (2006).</li>
<li>Wells, A., Yates, C., Shepard, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-cadherin+as+an+indicator+of+mesenchymal+to+epithelial+reverting+transitions+during+the+metastatic+seeding+of+disseminated+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">E-cadherin as an indicator of mesenchymal to epithelial reverting transitions during the metastatic seeding of disseminated carcinomas.</a> Clin Exp Metastasis. 25, 621-628 (2008).</li>
<li>Janne, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AZD9291+in+EGFR+inhibitor-resistant+non-small-cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">AZD9291 in EGFR inhibitor-resistant non-small-cell lung cancer.</a> N Engl J Med. 372, 1689-1699 (2015).</li>
<li>Moll, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineering+of+a+human+3D+in+vitro+tumor+test+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Tissue engineering of a human 3D in vitro tumor test system.</a> J Vis Exp. , (2013).</li>
<li>Funahashi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CellDesigner+3.5%3A+A+Versatile+Modeling+Tool+for+Biochemical+Networks%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+IEEE%22%5BJournal%5D)">CellDesigner 3.5: A Versatile Modeling Tool for Biochemical Networks.</a> Proceedings of the IEEE. 96, 1254-1265 (2008).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Auto+Threshold%28ImageJ%29v.v1.15%22">Auto Threshold(ImageJ)v.v1.15</a>. , Source: 
 <a target="_blank" href="http://fiji.sc/Auto_Threshold">http://fiji.sc/Auto_Threshold</a> (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22BioVoxxel+Toolbox+%28ImageJ+%2F+Fiji%29%22">BioVoxxel Toolbox (ImageJ / Fiji)</a>. , Source: 
 <a target="_blank" href="http://fiji.sc/BioVoxxel_Toolbox">http://fiji.sc/BioVoxxel_Toolbox</a> (2015).</li>
<li>Buettner, R., Wolf, J., Thomas, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+lung+cancer+genomics%3A+the+emerging+concept+of+individualized+diagnostics+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from lung cancer genomics: the emerging concept of individualized diagnostics and treatment.</a> J Clin Oncol. 31, 1858-1865 (2013).</li>
<li>Engelman, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MET+amplification+leads+to+gefitinib+resistance+in+lung+cancer+by+activating+ERBB3+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">MET amplification leads to gefitinib resistance in lung cancer by activating ERBB3 signaling.</a> Science. 316, 1039-1043 (2007).</li>
<li>Mukohara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+gefitinib+and+cetuximab+on+non-small-cell+lung+cancers+bearing+epidermal+growth+factor+receptor+mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Differential effects of gefitinib and cetuximab on non-small-cell lung cancers bearing epidermal growth factor receptor mutations.</a> J Natl Cancer Inst. 97, 1185-1194 (2005).</li>
<li>Noro, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+%28IRESSA%29+sensitive+lung+cancer+cell+lines+show+phosphorylation+of+Akt+without+ligand+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Gefitinib (IRESSA) sensitive lung cancer cell lines show phosphorylation of Akt without ligand stimulation.</a> BMC Cancer. 6, 277(2006).</li>
<li>Gill, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+synthetic+matrix+with+independently+tunable+biochemistry+and+mechanical+properties+to+study+epithelial+morphogenesis+and+EMT+in+a+lung+adenocarcinoma+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A synthetic matrix with independently tunable biochemistry and mechanical properties to study epithelial morphogenesis and EMT in a lung adenocarcinoma model.</a> Cancer Res. 72, 6013-6023 (2012).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Opracowaliśmy połączony system badań nowotworów in vitro/in silico do przewidywania leczenia na podstawie biomarkerów. Model in vitro ocenia różne ważne aspekty działania związków, takie jak zmiany proliferacji komórek nowotworowych i apoptoza, na określonym tle mutacyjnym, które można również symulować in silico17. W tym miejscu przedstawiamy ustandaryzowany protokół generowania modelu guza 3D i testowania związków, w tym kwantyfikację proliferacji i apoptozy oraz ustanowienie predy...

Przemysł farmaceutyczny boryka się z wysokimi wskaźnikami rotacji sięgającymi 95% w dziedzinie leczenia raka w fazie klinicznej, co powoduje ogromne koszty 1-5. Jedną z przyczyn tego deficytu jest fakt, że obecnie skuteczność potencjalnych nowych związków jest oceniana w badaniach przesiewowych na dużą skalę na hodowlach komórkowych 2D linii komórek nowotworowych lub w modelach zwierzęcych. Modele zwierzęce mają większą złożoność, ale istnieją zasadnicze różnice między myszami a ludźmi 6,7. W ciągu ostatniej dekady wygenerowano modele 3D raka przy użyciu różnych podejść, aby wypełnić lukę między hodowlą 2D linii komórek rakowych a złożonym guzem in vivo 6,8,9. Wpływ środowiska 3D na różnicowanie komórek, a także na sygnalizację, wykazano w kilku badaniach sprzed lat (np. Mina Bissell) 10,11. Obecnie dostępnych jest wiele modeli hodowli komórkowych 3D, takich jak kultury sferoidalne, hydrożele lub chipy mikroprzepływowe 12-16. Mimo że modele te zwiększają złożoność w porównaniu z konwencjonalnymi systemami hodowli 2D, w większości brakuje im mikrośrodowiska tkankowego, o którym wiadomo, że ma działanie wspomagające nowotwór, a także wpływa na skuteczność leków.
Aby rozwiązać ten problem, wygenerowaliśmy model 3D guza oparty na biologicznym rusztowaniu o nazwie SISmuc (podśluzówka jelita cienkiego + błona śluzowa), która pochodzi z pozbawionego komórek jelita czczego świni. W ten sposób zachowana jest architektura tkankowa i ważne składniki ECM, takie jak różne kolageny, a także struktura błony podstawnej 17. Ta unikalna cecha ma kluczowe znaczenie dla generowania modeli nowotworów nowotworowych, które powstają z nabłonka i stanowią około 80% guzów litych. Co więcej, tempo proliferacji w naszym modelach guza inżynierii tkankowej jest zmniejszone w porównaniu ze sztucznie wysokimi wskaźnikami osiąganymi w hodowli 2D. Ponieważ proliferacja jest ważnym parametrem w ocenie skuteczności leku, testowanie leków jest możliwe w naszym modelu w warunkach bardziej podobnych do nowotworów in vivo 17.
Aby ocenić potencjał naszego modelu do prawidłowego przewidywania skuteczności leków zależnych od biomarkerów, prezentujemy tutaj dane dla dwóch różnych linii komórkowych raka płuc, które różnią się statusem biomarkerów EGFR. Ten status mutacji zaczęto rutynowo określać u pacjentów z niedrobnokomórkowym rakiem płuca. Celowane leczenie TKI, takie jak inhibitor EGFR gefitynib, przeciwko nowotworom z aktywującą mutacją EGFR, wykazuje lepsze wyniki w porównaniu z chemioterapią opartą na platynie 18-21.
Ustaliliśmy kilka technik odczytu, które są istotne dla oceny skuteczności związku. Co więcej, po stymulacji TGF-beta-1 jesteśmy w stanie zbadać działanie związków w komórkach nowotworowych, które rozpoczęły proces EMT, który jest uważany za ważny krok w złośliwej transformacji 22,23 i który jest związany z opornością na leki 24.
Model guza 3D pozwala na monitorowanie specyficznych dla komórek odpowiedzi na celowane leczenie, chemioterapię lub kombinacje leków z dobrymi kontrastami. Aby jeszcze bardziej usprawnić i przyspieszyć badania przesiewowe leków oraz napotkać oporność, uzupełniono je symulacją in silico. Na podstawie kilku eksperymentów można przewidzieć odpowiedź guza in silico w odniesieniu do wyników dla pełnej gamy leków i ich kombinacji.

<table><tbody><tr><td></td><td>Katedra Bioreaktorów Inżynierii Tkankowej i Medycyny Regeneracyjnej, W&uuml; rzburg (GER)</td><td></td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>BioVoxxel Toolbox (ImageJ / Fidżi)</td><td>Jan Brocher, Thorsten Wagner, https://github.com/biovoxxel/BioVoxxel_Toolbox</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Korony komórkowe</td><td>Katedra Inżynierii Tkankowej i Medycyny Regeneracyjnej, W&uuml; rzburg (GER)</td><td></td><td>do statycznej hodowli 3D</td></tr><tr><td>CellDesigner</td><td>http://www.celldesigner.org/</td><td>-</td><td>To oprogramowanie zostało użyte do rysowania sieci.</td></tr><tr><td>Podstawowy roztwór buforowy cytrynianu (10x)</td> <td>produkcji własnej 42</td><td></td><td>g/L Kwas cytrynowy jednowodny, 17,6 g/l Granulki wodorotlenku sodu w wodzie dejonizowanej, pH 6,0, przechowywany w temperaturze RT.</td></tr><tr><td>Bufor cytrynianowy roztwór roboczy</td><td>w produkcji</td><td></td> własnej <td>10% Bufor Budonowy roztwór podstawowy w wodzie demineralizowanej, przechowywany w temperaturze pokojowej.</td></tr><tr><td>Kwas cytrynowy jednowodny</td><td>VWR, Darmstadt (GER)</td><td>1002441000</td><td>stosowany jako bufor cytrynianowy</td></tr><tr><td>Szkiełka nakrywkowe</td><td>VWR, Darmstadt (GER)</td><td>631-1339</td><td></td></tr><tr><td>DAPI Fluoromount-GTM</td><td>SouthernBiotech, Birmingham (USA)</td><td>SBA-0100-20</td><td></td></tr><tr><td>Bazy danych, takie jak KEGG, HPRD i QIAGEN (Genes & Pathways)</td><td>http://www.genome.jp/kegg/pathway.html; http://www.hprd.org/; https://www.qiagen.com/de/geneglobe/ -</td><td></td> <td>Do wygenerowania topologii sieci wykorzystano różne znane bazy danych literatury.</td></tr><tr><td>Damska koszulka Luer Lug Style</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>FTLT-1</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Gwint wewnętrzny Luer z gwintem sześciokątnym 5/16" do 1/4-28 UNF</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>SFTLL-J1A&nbsp;</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Surowica cielęca płodu</td><td>Bio& SPRZEDAM, Feucht (GER)</td><td>FCS. ADD.0500</td><td>nieinaktywowany termicznie</td></tr><tr><td>Gefitinib</td><td>Absource Diagnostics GmbH, M&uuml; nchen (GER)</td><td>S1025-100 mg</td><td>100 mM roztwór podstawowy z kolbą DMSO</td></tr><tr><td>Glas (Schott, GER) dostarczaną z przyłączem węża szklanego</td><td>Weckert, Kitzingen (GER)</td><td>na</td><td></td>zamówienie</tr><tr><td>Histofix 4% (paraformaldehyd)</td><td>Carl Roth, Karlsruhe (GER)</td><td>P087.1</td><td></td></tr><tr><td>Złączka do węża</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>CC-9</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Inkubator do bioreaktorów</td><td>Katedra Inżynierii Tkankowej i Medycyny Regeneracyjnej, W&uuml; Rzburg (GER)</td><td></td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>M30 CytoDeathTM ELISA</td><td>Peviva, Bromma (SWE)</td><td>10900</td><td></td></tr><tr><td>Męski integralny pierścień blokujący Luer</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>MTLL230-J1A</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Komora wilgotnościowa</td><td>wykonana</td><td></td><td></td>na zamówienie</tr><tr><td>Mysz anty Pan-Cytokeratin</td><td>Sigma-Aldrich, Monachium (GER)&nbsp; &nbsp;</td><td>C2562-2ML</td><td>Klon C-11 + PCK-26 + CY-90 + KS-1A3
+M20 + A53-B / A2, używany 1/100 do immunofluorescencji</td></tr><tr><td>Bezigłowy zawór wabowalny żeński Luer</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>NVFMLLPC</td><td>Konfiguracja bioreaktora, do pobierania próbek, O-ring sterylizowany promieniami gamma</td></tr><tr><td>MVQ 10 czerwony 37 x 3 mm</td><td>Arcus Dichtelemente, Seevetal (GER)</td><td>21444</td><td>O-ring duży, Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>O-ring MVQ 70 czerwony 27 x 2,5 mm</td><td>Arcus Dichtelemente, Seevetal (GER)</td><td>19170</td><td>O-ring mały, Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Długopis PAP Dako</td><td>, Hamburg (GER)</td><td>S002</td><td></td></tr><tr><td>Parafina</td><td>Carl Roth, Karlsruhe (GER)</td><td>6642.6</td><td></td></tr><tr><td>Pompa perystaltyczna</td><td>Ismatec, Wertheim-Mondfeld (GER)</td><td></td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna buforowana fosforanami</td><td>Sigma-Aldrich, Monachium (GER)&nbsp; &nbsp;</td><td>D8537-6x500ml</td><td></td></tr><tr><td>Kaseta na rurki pompy</td><td>Ismatec, Wertheim (GER)</td> <td>IS 3710</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Królik anty Ki67</td><td>Abcam, Cambridge (Wielka Brytania)</td> <td>ab16667</td><td>Klon SP6, używany do 1/100 dla IF</td></tr><tr><td>Królik anty Vimentin</td><td>Abcam, Cambridge (Wielka Brytania)</td> <td>ab92547</td><td>używany 1/100 dla IF</td></tr><tr><td>RPMI-1640 medium</td><td>Life technologies, Darmstadt (GER)</td> <td>61870-044</td><td>Ciepły w 37 & C kąpiel wodna przed użyciem</td></tr><tr><td>Rurka silikonowa</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe (GER)</td><td>HC66.1</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Wodorotlenek sodu</td><td>Sigma-Aldrich, M&uuml; nchen (GER)</td><td>30620-1KG-R</td><td>używany do buforu cytrynianowego</td></tr><tr><td>SQUAD</td><td></td> <td>http://sbos.eu/docu/docu/SQUAD/doku.php.htm-To</td> <td>oprogramowanie zostało użyte do przeprowadzenia symulacji półilościowych.</td></tr><tr><td>Sterylny filtr powietrza, wielkość porów 0,2 i mikro; m</td><td>Sartorius Stedium Biotech, G&ouml; ttlingen (GER)</td><td>16596-HYK</td><td>Konfiguracja bioreaktora</td></tr><tr><td>Strzykawka Luer Lok 5 ml</td><td>BD Biosciences, Heidelberg (GER)</td><td>309649</td><td>do pobierania próbek z bioreaktora</td></tr><tr><td>Płytki testowe do hodowli tkankowych: 6-,&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 12-, 24-, 96-dołkowe</td><td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen (GER)</td><td>92006, 92012, 92024, 92048&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Transformujący czynnik wzrostu-beta 1 (TGF-&beta; 1) z sygnalizacją komórkową nośnika</td><td>, Frankfurt (GER)</td> <td>8915LC</td><td>roztwór podstawowy w sterylnym buforze cytrynianowym pH 3,0</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich, M&uuml; nchen (GER)</td><td>X100-1L</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Sigma-Aldrich, M&uuml; nchen (GER)</td><td>P7949-500ml</td><td>do płukania buforu barwienia immunofluorescencyjnego</td></tr></tbody></table>

połączony model tkankowy 3d guza płuca wykonany in vitro/in silico do przewidywania skuteczności leków w określonych tłach mutacyjnych

A Combined 3D Tissue Engineered In Vitro/In Silico Lung Tumor Model for Predicting Drug Effectiveness in Specific Mutational Backgrounds

W obecnym badaniu połączyliśmy model 3D guza płuca in vitro z modelem in silico, aby zoptymalizować przewidywania odpowiedzi na lek w oparciu o specyficzne tło mutacyjne. Model jest generowany na bezkomórkowym rusztowaniu świni, które odtwarza cechy specyficzne dla tkanek w zakresie składu i architektury macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym błony podstawnej. Ustandaryzowaliśmy protokół, który umożliwia wytworzenie sztucznej tkanki nowotworowej w ciągu 14 dni, w tym trzy dni leczenia farmakologicznego. Nasz artykuł zawiera kilka szczegółowych opisów technik przesiewowych odczytu 3D, takich jak oznaczanie wskaźnika proliferacji barwienia Ki67, apoptoza z supernatantów za pomocą M30-ELISA oraz ocena przejścia nabłonkowego do mezenchymalnego (EMT), które są pomocnymi narzędziami do oceny skuteczności związków terapeutycznych. Mogliśmy pokazać w porównaniu z hodowlą 2D zmniejszenie proliferacji w naszym modelu guza 3D, co jest związane z sytuacją kliniczną. Pomimo tej mniejszej proliferacji, model przewidywał prawidłowo odpowiedzi na leki ukierunkowane na EGFR zgodnie ze statusem biomarkera, jak wykazano przez porównanie linii komórkowych raka płuc HCC827 (zmutowany EGFR, KRAS typu dzikiego) i A549 (EGFR typu dzikiego, zmutowany KRAS) leczonych inhibitorem kinazy tyrozynowej (TKI) gefitynib. Aby zbadać odpowiedzi na leki bardziej zaawansowanych komórek nowotworowych, wyindukowaliśmy EMT poprzez długotrwałe leczenie TGF-beta-1, co oceniano za pomocą barwienia immunofluorescencyjnego wimentyny / pan-cytokeratyny. Wykorzystano bioreaktor przepływowy, aby dostosować hodowlę do warunków fizjologicznych, co usprawniło wytwarzanie tkanek. Ponadto pokazujemy integrację odpowiedzi na leki po leczeniu gefitynibem lub stymulacji TGF-beta-1 - apoptoza, wskaźnik proliferacji i EMT - w modelu Boole'a in silico. Dodatkowo wyjaśniamy, w jaki sposób można przewidzieć reakcje komórek nowotworowych o określonym tle mutacyjnym na leki i strategie przeciwdziałania oporności. Jesteśmy przekonani, że nasze podejście 3D in vitro, zwłaszcza z jego ekspansją in silico, zapewnia dodatkową wartość dla przedklinicznych testów leków w bardziej realistycznych warunkach niż w hodowli komórkowej 2D.

W oparciu o rusztowanie SISmuc (Rysunek 2A do C) opracowaliśmy znormalizowany protokół operacyjny dla generowania, stymulacji i leczenia trójwymiarowego systemu testowego guza (Rysunek 2D). Model ten umożliwia wyznaczenie indeksu proliferacji oraz kwantyfikację apoptozy za pomocą testu M30-ELISA, jak pokazano odpowiednio na Rysunku 1 oraz Rysunku 3. Rysunek 3 przedstawia reprezentacyjne barwienie H&amp;E ...

Prezentujemy trójwymiarowy (3D) model raka płuc oparty na biologicznym rusztowaniu kolagenowym do badania wrażliwości na terapie ukierunkowane na niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC). Pokazujemy różne techniki odczytu w celu określenia wskaźnika proliferacji, apoptozy i stanu przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego (EMT). Zebrane dane są integrowane z modelem in silico w celu przewidywania wrażliwości leków.

Połączony model tkankowy 3D guza płuca wykonany in vitro/in silico do przewidywania skuteczności leków w określonych tłach mutacyjnych

In the present study, we combined an in vitro 3D lung tumor model with an in silico model to optimize predictions of drug response based on a specific ...

Ogólnym celem tego połączonego modelu raka płuca in vitro i in silico jest zbadanie wrażliwości terapii celowanych w niedrobnokomórkowym raku płuca oraz przewidzenie skuteczności nowych substancji. Ten system modeli 3D umożliwia monitorowanie specyficznych odpowiedzi komórek na ukierunkowane leczenie lub bezpośrednie kombinacje. Główną zaletą tej techniki jest to, że przewidywania pokryte in silico mogą ułatwić przedkliniczne testowanie leków w bardziej odpowiednim fizjologicznie środowisku.Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku terapii różnych jednostek nowotworowych, ponieważ można ją wykorzystać do optymalizacji przewidywań odpowiedzi na leki w oparciu o określone tła mutacyjne. Procedurę zademonstruje Franziska Schmitt, asystentka naukowa z naszego laboratorium. Aby skonfigurować dynamiczną hodowlę, zacznij od hodowli modelu guza w warunkach hodowli statycznej, w koronie komórkowej w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% CO2, w konwencjonalnym inkubatorze.Po trzech dniach zmontuj autoklawizowany bioreaktor i włóż do systemu wysiewane, biologiczne submucoso jelita cienkiego wraz z rusztowaniem błony śluzowej. Następnie dodać 45 mililitrów RPMI, uzupełnionych odpowiednią ilością FCS do kolby i podłączyć bezigłowe urządzenie do pobierania próbek do systemu rurek między bioreaktorem a kolbą z podłożem. Umieść bioreaktor w inkubatorze i podłącz go do pompy, aby hodować model guza przez dodatkowe 14 dni, ze stałym przepływem medium wynoszącym trzy mililitry na minutę.Aby leczyć statyczny model nowotworu, Gefitynib, w 11 dniu hodowli w konwencjonalnym inkubatorze, najpierw użyj pipety Pasteura, aby usunąć stare podłoże z dołków. Następnie dodaj jeden mililitr świeżo przygotowanego RPMI, uzupełnionego FCS i Gefitinibem, do wnętrza każdej korony komórkowej i 1,5 mililitra do dna każdej studzienki. Aby pobrać próbki Elisy z dynamicznej hodowli, w dniach od 11 do 14 hodowli należy podłączyć strzykawkę do urządzenia do pobierania próbek i usunąć jeden mililitr pożywki z systemu bioreaktora.Następnie przechowuj próbki w temperaturze minus 80 stopni Celsjusza, aż do wykonania testu Elisa. Aby określić liczbę jąder dodatnich Ki67, najpierw użyj mikroskopu odwróconego, aby uzyskać pięć obrazów fluorescencyjnych barwienia DAPI i pięciu Ki67 kultur 2D przy 20-krotnym powiększeniu każdego warunku, z nienakładających się na siebie odcinków próbki. Aby ręcznie policzyć dodatnie jądra Ki67, otwórz wyłoniony obraz na Fidżi i wybierz Wtyczki i Licznik komórek, a następnie kliknij inicjalizację, wybierz typ licznika i kliknij każde dodatnie jądro Ki67.Liczba klikniętych komórek pojawi się obok wybranego typu licznika. Aby automatycznie zliczać komórki całkowitej liczby jąder na obrazach 2D, uruchom rejestrator makr, otwórz obraz DAPI i kliknij obraz, wpisz i 8-bitowy, a następnie kliknij zwiększ kontrast i ustaw nasycony parametr na jeden i znormalizuj. Aby wyostrzyć obraz, ustaw maskę wyostrzającą, używając promienia 1 i maski 60.Aby zbindować obraz, kliknij przycisk Automatyczny próg i wybierz metodę Reny/Entropia z białymi obiektami na czarnym tle. Następnie kliknij Wtyczki, a następnie BioVoxxel i nieregularny element zlewni, o promieniu erozji równym pięć, aby oddzielić komórki. Kliknij przycisk Analizuj i analizuj cząstki, a następnie ustaw rozmiar na 02 nieskończoność i zaznacz opcję podsumowania.Liczba komórek zostanie wyświetlona w tabeli podsumowania jako liczby. Następnie kliknij przycisk Utwórz, aby zapisać makro umożliwiające automatyczne zliczanie jąder w kolejnych obrazach hodowli komórkowych 2D. Po użyciu znanych baz danych do wygenerowania sieci nowotworów, otwórz odpowiednie oprogramowanie do analizy sieci, kliknij plik i nowy, a następnie wprowadź modele guza jowisza.Kliknij ok, aby wygenerować nową sieć, a następnie kliknij, kwadrat do północy i ok, aby zwizualizować receptor w podwójnej błonie. Aby wyświetlić węzły jako prostokąty, kliknij białko ogólne, następnie EGFR, a następnie Ok.To oznacz węzły w sieci, kliknij prawym przyciskiem myszy, aby zmienić kolor i kształt, a następnie ustaw kody kolorów węzłów zgodnie ze wskazaniami. Aby zobrazować parametry odczytu w postaci sześciokątów, wybierz fenotyp, wprowadź proliferację i kliknij przycisk OK.Następnie kliknij prawym przyciskiem myszy i ponownie wybierz zmień kolor i kształt, aby ustawić kod koloru na 255, 204, 204. Aby zwizualizować krawędzie interakcji węzłów, kliknij przycisk Przejście stanu dla strzałek aktywacji i przycisk Blokada dla stępionych strzałek hamowania. Następnie kliknij plik i zapisz jako, a następnie zapisz wygenerowaną sieć sygnalizacyjną, tak jak models.xml guz jove.Aby przeprowadzić analizę równowagi systemu w stanie ustalonym, otwórz oprogramowanie SQUAD, kliknij przycisk załaduj sieć i prześlij plik models. xml guza jowisza. Kliknij, uruchom analizę.Aby napisać protokół symulacji, kliknij przycisk Zaawansowane i Pertubator, a następnie kliknij przycisk Edytuj protokół, aby zasymulować opór anit-EGFR. Następnie kliknij, pertubacja i wybierz standardowy stan początkowy równy cztery. Kliknij przycisk dodaj, aby dodać nowy stały impuls, a następnie wybierz parametr stanu i ustaw cel na FLIP, czas na zero, a wartość na 4.Kliknij przycisk OK i ustaw stany dla c-MET i Gefitynibu w ten sam sposób. Aby ustawić wartość stanu dla aktywnego węzła EGFR, kliknij przycisk Aktywny węzeł, a następnie kliknij przycisk Edytuj. Ustaw stan na 8 i kliknij przycisk OK.Kliknij przycisk OK, aby zapisać protokół. Aby wyświetlić określone krzywe, w panelu opcji wybierz EGF-EGFR, gwiazda EGF-EGFR, gwiazda Mek, kaspazy, PI3K, gegitynib, apoptoza, proliferacja, inhibitor MEk i inhibitor PI3K. Następnie kliknij przycisk Zainicjuj i Uruchom, aby rozpocząć pełną symulację odpowiedzi systemu.Aby zasymulować skojarzone leczenie inhibitorem PI3K i Mek, kliknij przycisk edytuj protokół. Następnie, używając tego samego parametru węzła, jak właśnie pokazano, kliknij pertubację, a następnie dodaj, aby dodać nowy stały impuls. Następnie wybierz parametr stanu i ustaw cel na inhibitor PI3K, czas na zero, a wartość na jeden, a następnie kliknij ok.Kliknij ponownie dodaj, aby dodać kolejny nowy stały impuls i pod parametrem state ustaw cel na Mek inhibitor, ustaw czas na zero, a wartość na jeden, a następnie kliknij ok, a następnie ponownie ok, aby zapisać protokół. W panelu opcji, używając tych samych węzłów do reprezentacji graficznej, jak pokazano powyżej, kliknij przycisk inicjuj i uruchom, aby rozpocząć pełną symulację odpowiedzi systemu. Następnie, aby zakończyć symulację, kliknij przycisk resetuj.Ten system testowania nowotworów 3D ułatwia określenie wskaźnika proliferacji. I kwantyfikacja apoptozy za pomocą M30 Elisa. Na przykład w tym reprezentatywnym eksperymencie tylko komórki nowotworowe HCC827 z mutacją EGFR, inkubowane w warunkach hodowli statycznej, zareagowały na hamowanie naskórkowego czynnika wzrostu.Przez inhibitor kinazy tyrozyny, Gefitynib, o czym świadczy wzrost apoptozy obserwowany w systemie modelu guza HCC827. Tutaj pokazano reprezentatywne obrazy statycznych modeli 3D guzów, z lub bez, induktorem przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego, symulacją TGF-beta-1. Zwróć uwagę na wzrost ekspresji wimentyny w leczonych kulturach komórek nowotworowych.W warunkach dynamicznych gefitynib wywiera silny wpływ na komórki HCC827 z mutacją EGFR, o czym świadczy zmniejszenie struktur tkankopodobnych w obecności inhibitora kinazy tyrozynowej w porównaniu z niekontrolowaną hodowlą nieleczoną. Na tym wykresie zaobserwowano symulację znanego napędu mutacji, koaktywacji EGFR i c-MET oraz zwiększonego tempa proliferacji i zmniejszonego wskaźnika apoptozy w komórkach HCC827 w czasie, co odzwierciedla oporność indukowaną przez gefitynib, która koreluje z aktywacją MEK i PI3K. Rzeczywiście, modelowanie połączonych inhibitorów PI3K i MEK prowadzi do odwrócenia efektu oporności na anty-EGFR, zmniejszenia proliferacji i indukcji apoptozy.Po tej procedurze można zastosować inne metody, takie jak Western Blot lub w celu zbadania dalszych szlaków sygnałowych. Co więcej, systemy kohodowli z różnymi typami komórek mogą być również wykorzystywane do analizy wzajemnych oddziaływań między różnymi komórkami w mikrośrodowisku guza. Technika ta toruje drogę naukowcom zajmującym się opracowywaniem leków do badania skuteczności leków w Silico.Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak przewidywać skuteczność leku w stratyfikowanych grupach pacjentów, symulując zmiany sygnalizacyjne i analizując wynikowe odpowiedzi systemu w różnych mutacjach i tłach.

a-combined-3d-tissue-engineered-vitroin-silico-lung-tumor-model-for

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Przedstawiamy procedurę wykonania i obsługi urządzenia mikrofluidycznego, które odtwarza heterogeniczne mikrośrodowiska nowotworowe in vitro. Zmienność apoptozy w obrębie tkanki nowotworowej została określona ilościowo przy użyciu barwników fluorescencyjnych, a następnie oceniono efektywny współczynnik dyfuzji leku chemioterapeutycznego, doksorubicyny, do tkanki nowotworowej.

Urządzenie mikrofluidyczne do odtwarzania mikrośrodowiska nowotworu in vitro

Opisano metody tworzenia ludzkich tkanek nowotworowych 3D jako systemów testowych. Technologie te opierają się na bezkomórkowym biologicznym rusztowaniu unaczynionym (BioVaSc), pierwotnych komórkach ludzkich i linii komórek nowotworowych, które mogą być hodowane zarówno w warunkach statycznych, jak i dynamicznych w bioreaktorze przepływowym.

Inżynieria tkankowa ludzkiego systemu badań 3D nowotworów in vitro

Ksenoprzeszczepy glejaka wielopostaciowego pochodzące od pacjentów mogą być miniaturyzowane do żywych mikroguzów za pomocą systemu hodowli biożelu ludzkiego 3D. Ten test 3D guza in vivo nadaje się do testowania odpowiedzi na lek i profilowania molekularnego, w tym analizy kinomicznej.

Generowanie mikroguzów przy użyciu systemu hodowli biożelu ludzkiego 3D i komórek glejaka pochodzących od pacjentów do profilowania kinomicznego i testowania odpowiedzi na leki

Ten protokół opisuje wytwarzanie elastycznych makroporowatych mikrokriożeli 3D poprzez integrację mikrofabrykacji z technologią kriożelacji. Po załadowaniu komórkami generowane są mikrotkanki 3D, które można łatwo wstrzyknąć in vivo w celu ułatwienia terapii regeneracyjnej lub złożyć w matryce do wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków in vitro.

Mikrotkanki 3D do iniekcyjnej terapii regeneracyjnej i wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków

Niedotlenienie jest cechą charakterystyczną mikrośrodowiska guza i odgrywa kluczową rolę w progresji raka. Ten artykuł opisuje proces wytwarzania niedotlenionego raka na chipie opartego na technologii drukowania komórek 3D w celu podsumowania patologii raka związanej z niedotlenieniem.

Drukowany w 3D hipoksyjny rak na chipie do rekapitulacji patologicznej progresji raka litego

Ten artykuł opisuje metody generowania, leczenia lekami i analizy eksplantatów pochodzących od pacjentów do oceny reakcji na leki nowotworowe w żywym, istotnym dla pacjenta, przedklinicznym systemie modelowym.

Eksplantaty nowotworów pochodzące od pacjentów jako "żywa" platforma przedkliniczna do przewidywania oporności na leki u pacjentów

Ten test wykorzystuje embrionalne komórki macierzyste myszy zróżnicowane w ciała embrionalne hodowane w żelu 3D-collagen do analizy procesów biologicznych, które kontrolują angiogenezę kiełkowania in vitro. Technika ta może być stosowana do testowania leków, modelowania chorób oraz do badania określonych genów w kontekście delecji, które są śmiertelne dla zarodka.

In vitro Trójwymiarowy test angiogenezy w kiełkowaniu przy użyciu embrionalnych komórek macierzystych myszy do modelowania chorób naczyniowych i testowania leków

Ten protokół dostarcza metod generowania tkanek serca i mięśni szkieletowych w inżynierii 3D oraz opisuje ich zastosowanie w przedklinicznych badaniach przesiewowych leków. Opisane metody wykorzystują system detekcji magnetycznej, aby ułatwić jednoczesną ocenę 24 tkanek równolegle.

Przedkliniczne testy leków w skalowalnych tkankach mięśniowych modyfikowanych w 3D

Ten artykuł demonstruje ustandaryzowaną metodę konstruowania trójwymiarowych sferoid nowotworowych. Opisano również strategię obserwacji sferoidy i analizy głębokiego uczenia opartego na obrazach przy użyciu zautomatyzowanego systemu obrazowania.

Generowanie sferoid 3D guza do badań oceny leków

Ten protokół przedstawia fizjologicznie istotny model guza na chipie do przeprowadzenia wysokoprzepustowych podstawowych i translacyjnych badań nad rakiem u ludzi, postępu w badaniach przesiewowych leków, modelowania chorób i spersonalizowanych podejść medycznych z opisem procedur ładowania, konserwacji i oceny.

Ustanowienie fizjologicznego unaczynionego modelu mikroguza człowieka do badań nad rakiem

To badanie przedstawia ortotopowy model niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) oparty na wewnątrzpłucnej inokulacji wielokomórkowych sferoid fluorescencyjnych komórek A549-iRFP. Model podsumowuje kliniczne stadia niedrobnokomórkowego raka płuca i reaguje na cisplatynę, zgodnie z dynamicznym monitorowaniem in vivo fluorescencji na długich falach.

Budowa ortotopowego modelu ksenoprzeszczepu niedrobnokomórkowego raka płuca naśladującego postęp choroby i predykcję działania leków

Poznaj połączony model 3D guza płuca in vitro/in silico do przewidywania skuteczności terapii ukierunkowanych w raku płuca niedrobnokomórkowym. Ta metoda integruje predykcje komputerowe z danymi eksperymentalnymi.

Połączony model tkankowy 3D guza płuca wykonany in vitro/in silico do przewidywania skuteczności leków w określonych tłach mutacyjnych (Wideo) | JoVE Journal

Połączony model tkankowy 3D guza płuca wykonany in vitro/in silico do przewidywania skuteczności leków w określonych tłach mutacyjnych

Przeglądaj więcej filmów