Name: Pierwszorzędowa ocena wyniku w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 19 s
Description: Poznaj metodologię oceny wyników w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego. Techniki obejmują echokardiografię przezprzełykową 3D oraz pomiary pętli ciśnieniowo-objętościowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują Marlijn Jansen, Joyce Visser, Grace Croft, Martijn van Nieuwburg, Danny'emu Elbersenowi i Evelyn Velemie za ich doskonałe wsparcie techniczne podczas eksperymentów na zwierzętach.

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet Etyczny ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersyteckiego Centrum Medycznego w Utrechcie (Utrecht, Holandia) i są zgodne z 'Przewodnikiem dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych'.
UWAGA: Protokół wykonywania okluzji balonu z zamkniętą klatką piersiową nie jest częścią obecnego manuskryptu i jest szczegółowo opisany gdzieindziej 5. Krótko mówiąc, świnie (60 - 70 kg) poddawane są 75-minutowej transluminalnej okluzji balonowej środkowej części lewej przedniej tętnicy zstępującej (LAD).
Zarówno trójwymiarowa echokardiografia przezprzełykowa (3D-TEE), jak i pomiary pętli ciśnienie-objętość (PV) mogą być wykonywane w obserwacji wyjściowej, krótko- i długoterminowej. Należy pamiętać, że pomiary te są uważane za niewiarygodne w pierwszych godzinach po zawale mięśnia sercowego z powodu częstych arytmii w tej fazie. Pomiary wielkości zawału (IS) i obszaru zagrożonego (AAR) są korzystnie oceniane podczas krótkoterminowej obserwacji (24 - 72 godziny)15,16, ponieważ zmiany w mikrokrążeniu i wtórne ścieńczenie blizny mięśnia sercowego prowadzą do mniej wiarygodnych wyników. Barwienie wielkości zawału przeprowadza się przy użyciu chlorku 2,3,5-trifenylotetrazolu (TTC) (UWAGA, drażniący), który jest uważany za wysoce powtarzalny i stosunkowo niedrogi. TTC to biały proszek, który bezbarwnie rozpuszcza się w soli fizjologicznej. W kontakcie z różnymi dehydrogenazami przekształca się w ceglastoczerwony kolor. W ten sposób rozróżnia żywotną (czerwoną) i martwą tkankę mięśnia sercowego (białą). Aby uzyskać przegląd zarówno inwazyjnego, jak i nieinwazyjnego określania wielkości zawału, czytelnicy są kierowani do obszernego przeglądu na ten temat17.
Rysunek 1 pokazuje oś czasu, w tym znieczulenie, przygotowanie chirurgiczne i pierwszorzędowe pomiary wyników użyte w tym badaniu.
1. Leki i znieczulenie
<ol>
	<li>Upewnij się, że zwierzę nie je ani nie pije przez co najmniej 5 godzin przed zabiegiem. Protokoły leczenia bólu przed leczeniem, znieczuleniem i pooperacyjnym bólem zostały szczegółowo opisane w innym miejscu5.</li>
	<li>Krótko mówiąc, dzień przed zabiegiem na skórę, która jest aktywna przez siedem dni, na skórę nakłada się plaster z buprenorfiną (5 μg/godz.) w celu ograniczenia bólu pooperacyjnego. W dniu zabiegu należy uspokoić świnie poprzez wstrzyknięcie domięśniowe 0,4 mg/kg midazolamu, 10 mg/kg ketaminy i 0,014 mg/kg atropiny. Odczekaj około 10 - 15 minut. Wprowadzić kaniulę 18 G do jednej z żył usznych i podać 5 mg/kg tiopentalu sodu w celu wywołania znieczulenia.</li>
	<li>Zaintubować świnię za pomocą rurki dotchawiczej (rozmiar 8,5 dla świń o wadze 60 - 70 kg). W razie potrzeby należy przeprowadzić wentylację balonową (częstotliwość 12/min) i przetransportować świnię na salę operacyjną.</li>
	<li>Po przybyciu na salę operacyjną należy uruchomić mechaniczną wentylację nadciśnieniową z FiO2 0,50, objętością oddechową 10 ml/kg i częstotliwością 12/min przy użyciu ciągłego zapisu kapnograficznego.</li>
	<li>Znieczulenie zrównoważone należy rozpocząć od ciągłego wlewu dożylnego złożonego z midazolamu (0,5 mg/kg mc./godz.), sufentanylu (2,5 μg/kg mc./godz.) i pankuronium (0,1 mg/kg mc./godz.).</li>
	<li>Potwierdź znieczulenie, badając odruch rogówkowy i monitorując wzorzec oddychania (np. spontaniczne oddychanie w połączeniu z wentylacją mechaniczną wskazuje na niepełne znieczulenie). Używaj maści weterynaryjnej na oczy, aby zapobiec wysuszeniu, gdy zwierzę jest pod narkozą.</li>
</ol>
2. 3D Echokardiografia przezprzełykowa (TEE)
<ol>
	<li>Aby umożliwić monitorowanie tętna i gromadzenie danych, podłącz zwierzę do 5 odprowadzeń EKG w echokardiografie.</li>
	<li>Umieść zwierzę w odpowiedniej pozycji bocznej. Upewnij się, że sonda jest prosta i elastyczna na końcówce, odblokowując element roboczy.</li>
	<li>Otwórz pysk świni i ostrożnie włóż sondę echo do przełyku. W razie potrzeby użyj laryngoskopu do wizualizacji. Uważaj, aby nie trafić do normalnego anatomicznego worka gardłowego, przypominającego uchyłek Zenkera18.</li>
	<li>Włóż sondę na 50 - 60 cm (mierz od czubka pyska). Powoli obracaj sondę i zegnij głowę do lewej pozycji przednio-bocznej, aby uwidocznić pracę serca (ryc. 2A - B). Upewnij się, że wszystkie ściany są dobrze widoczne.</li>
	<li>Użyj opcji "Pełna objętość 3D" na wyświetlaczu echokardiografu, aby wyświetlić dwa prostopadłe obrazy lewej komory, jak pokazano na rysunku 2C - D. Następnie zmaksymalizuj szerokość pozyskiwanego sektora, wybierając opcję "FV Opt Volume". Wstrzymaj wentylację, tymczasowo wyłączając wentylację mechaniczną i naciśnij "Acquire", aby uzyskać pełne pomiary objętości.</li>
	<li>Po akwizycji echa upewnij się, że końcówka jest elastyczna, odblokowując element operacyjny. Następnie powoli wyjmij sondę ze zwierzęcia. 
	UWAGA: Nie pozostawiaj zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyska wystarczającej przytomności, aby utrzymać pozycję leżącą na mostku. Nie należy zwracać zwierzęcia, które przeszło operację, do towarzystwa innych zwierząt, dopóki nie wyzdrowieje.</li>
	<li>Wykonuj analizę w trybie offline za pomocą zweryfikowanego oprogramowania, jak opisano wcześniej19.</li>
</ol>
3. Akwizycja pętli ciśnienia i objętości na podstawie admitancji
<ol>
	<li>Wstępnie zanurz końcówki detekcyjne czteropolarnego cewnika adentrywacyjnego 7 F w 0,9% soli fizjologicznej (temperatura pokojowa do 37 °C) przez co najmniej 20 minut, aby zapewnić odpowiednie nawodnienie i minimalny dryft ciśnienia podstawowego podczas eksperymentu20.</li>
	<li>Podać leki i znieczulenie zgodnie z opisem w punkcie 1.</li>
	<li>Wykonać przygotowanie chirurgiczne i uzyskać dostęp naczyniowy, jak opisano wcześniej5.
	<ol>
		<li>Krótko mówiąc, ogol i oczyść szyję. Zdezynfekować obszar operacyjny jodem 2% i przykryć niesterylne części świń sterylnymi obłożami chirurgicznymi.</li>
		<li>Wykonaj przyśrodkowe nacięcie w szyi, aby odsłonić tętnicę szyjną i żyłę szyjną wewnętrzną. Wprowadzić osłonkę 8 F do tętnicy szyjnej i osłonkę 9 F do żyły szyjnej.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wprowadzić cewnik Swan-Ganz (SG) przez osłonkę 9 F w żyle szyjnej i zaklinować go w małej tętnicy płucnej, nadmuchując balon na końcu cewnika. Po odpowiednim umieszczeniu w obwodowej części płuca należy opróżnić balon. Podłącz SG do zewnętrznego urządzenia do pomiaru rzutu serca.</li>
	<li>Podłączyć strzykawkę o pojemności 20 ml zawierającą 0,9% sterylnego roztworu soli fizjologicznej do portu iniekcyjnego, który łączy się ze światłem o najbardziej proksymalnym odsączu. Zmierz rzut serca przez szybką infuzję 5 ml 0,9% soli fizjologicznej (temperatura pokojowa) i uzyskaj tętno w celu obliczenia objętości wyrzutowej (SV). Powtórz tę procedurę trzy razy i oblicz średnią SV. 
	UWAGA: Rzut serca jest (automatycznie) obliczany przy użyciu równania termorozcieńczenia Stewarta-Hamiltona i opiera się na zmianach temperatury w tętnicy płucnej po infuzji soli fizjologicznej21 o temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Usuń cewnik SG. Wprowadzić cewnik Fogarty'ego 8 F przez osłonkę 9 F w żyle szyjnej i umieścić go w żyle głównej dolnej.</li>
	<li>Skalibruj sygnał ciśnienia cewnika z pętlą fotowoltaiczną za pomocą przycisków "Kurs" i "Dobrze", podczas gdy końcówka pozostaje w 0,9% soli fizjologicznej. Następnie wprowadź zmierzoną SV do systemu.</li>
	<li>Przeprowadź cewnik pętli PV przez osłonkę 8 F w tętnicy szyjnej i wyśrodkuj końcówkę w lewej komorze (LV) pod fluoroskopią.</li>
	<li>Wybierz największy, odpowiednio umieszczony segment, wykreślając nieprzetworzony sygnał przewodności w stosunku do sygnału ciśnienia. Upewnij się, że pętle ciśnienie-przewodność mają kształt prostokąta. Oczekuje się, że sygnał fazowy pokaże ślad zatokowy o wartościach od 3 do 5 stopni. Wstrzymaj wentylację i wykonaj skanowanie linii bazowej, aby przekonwertować przewodność na objętość.
	<ol>
		<li>Zaakceptuj dane podstawowe, naciskając "Kontynuuj", gdy sygnały są stabilne (brak arytmii), tętno jest równe EKG lub tętno na podstawie ciśnienia, a przewodność końcowoskurczowa (ES) / końcoworozkurczowa (ED) jest odpowiednio wykrywana przez system20. 
		UWAGA: To ostatnie można zweryfikować, wykreślając nieprzetworzony sygnał przewodności z sygnałem ciśnienia i porównując wartości przewodności ES / ED uzyskane ze skanu linii bazowej z przewodnością w czasie rzeczywistym. Jeśli którykolwiek z powyższych wymagań nie jest spełniony, powtórz procedurę.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Uzyskaj podstawowe pętle ciśnienia-objętości, nagrywając 10 - 12 kolejnych uderzeń podczas bezdechu, wstrzymując wentylację.</li>
	<li>Napompuj cewnik Fogarty'ego pod kierunkiem fluoroskopowym, aby zmniejszyć obciążenie wstępne i nagrać 10 - 12 kolejnych uderzeń, jak opisano powyżej. Upewnij się, że skurczowe ciśnienie krwi utrzymuje się na poziomie >60 mmHg i żadne arytmie nie zakłócają pomiarów.</li>
	<li>Usuń cewniki Fogarty i PV loop. Rejestruj ciśnienie tętnicze przed i podczas usuwania cewnika pętli PV, aby umożliwić korektę dryftu ciśnienia (tj. różnicy ciśnień przed i po zabiegu ex vivo). 
	UWAGA: Nie pozostawiaj zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyska wystarczającej przytomności, aby utrzymać pozycję leżącą na mostku. Nie należy zwracać zwierzęcia, które przeszło operację, do towarzystwa innych zwierząt, dopóki nie wyzdrowieje.</li>
	<li>Wykonuj analizę offline pomiarów geometrycznych i parametrów funkcjonalnych za pomocą zatwierdzonego oprogramowania22.</li>
</ol>
4. Kwantyfikacja obszaru zagrożonego (AAR) i rozmiaru zawału (IS)
<ol>
	<li>Rozpuścić 1,00 g błękitu Evansa (UWAGA23, toksyczny) w 50 ml 0,9% soli fizjologicznej, napełnić dwie 50 ml strzykawki Luer lock odpowiednio 20 ml i 30 ml 2% roztworu niebieskiego Evansa i przechowywać w temperaturze pokojowej. 
	UWAGA: Pracuj pod wyciągiem i noś maskę przeciwpyłową, aby ograniczyć narażenie na niebezpieczne pyły oraz używaj rękawic i okularów ochronnych, aby zapobiec kontaktowi skóry i oczu.</li>
	<li>Zachowując podobne środki ostrożności, rozpuścić 1% chlorek 2,3,5-trifenylo-tetrazoliu (TTC) (UWAGA, drażniący) w temperaturze 37 °C 0,9% soli fizjologicznej i przechowywać w temperaturze 37 °C.</li>
	<li>Chirurgicznie przygotuj zwierzę do uzyskania dostępu naczyniowego do obu tętnic szyjnych. Wykonaj sternotomię, aby umożliwić bezpośrednią wizualizację efektu infuzji in vivo z niebieskiego naparu Evansa5.</li>
	<li>Włożyć osłonkę wprowadzającą 7 F i 8 F do odpowiedniej tętnicy szyjnej. Alternatywnie można wprowadzić obie osłonki wprowadzające do jednej tętnicy szyjnej lub użyć jednej z tętnic udowych jako jednego z obu cewników prowadzących.</li>
	<li>Podłącz dwa standardowe złącza Y odpowiednio do cewnika prowadzącego 7 F JL4 i 8 F JL4. W przypadku dostępu udowego użyj JR4 dla prawej tętnicy wieńcowej (RCA) i JL4 dla lewej głównej tętnicy wieńcowej (LCMA). Do obu łączników Y należy podłączyć dodatkowy kran trójdrożny z przedłużeniem 10 cm.</li>
	<li>Podawać 100 j.m./kg heparyny. Umieścić cewnik prowadzący 8 F JL4 w ujściu LMCA za pomocą jednej z dwóch osłonek wprowadzających.</li>
	<li>Za pomocą prowadnika 0,014" przeprowadź cewnik rozszerzający naczynia wieńcowe przez cewnik LCMA i umieść balon w miejscu, w którym wykonano okluzję wieńcową podczas indukcji zawału mięśnia sercowego. Nie pompuj jeszcze.</li>
	<li>Umieścić drugi cewnik prowadzący 8 F JL4 w ujściu RCA przez drugą osłonę wprowadzającą.</li>
	<li>Wykonaj koronarografię (CAG) poprzez infuzję środka kontrastowego pod fluoroskopią, aby potwierdzić prawidłowe ustawienie zarówno cewników prowadzących, jak i balonu w tętnicach wieńcowych, używając widoków przednio-tylnych i LAO 30°.</li>
	<li>Podłączyć dwie strzykawki o pojemności 50 ml zawierające 30 ml (LCMA) i 20 ml (RCA) 2% niebieskiego Evansa do odpowiednich kranów trójdrożnych przymocowanych do łączników Y na cewnikach prowadzących.</li>
	<li>Napompuj balon i potwierdź niedrożność tętnicy wieńcowej przez CAG. Tylko wtedy, gdy balon całkowicie zablokuje przejście jakiegokolwiek środka kontrastowego, wstrzyknąć niebieski barwnik Evansa przez oba cewniki prowadzące (5 ml/s), podczas gdy balon jest napompowany.</li>
	<li>Bezpośrednio po zakończeniu wlewu z niebieskiego wlewu Evansa należy wywołać migotanie komór poprzez umieszczenie baterii 9 V na niezawałowej części serca.</li>
	<li>Naciąć żyłę jamy wnętowej, aby uwolnić ciśnienie i upewnić się, że dostępna jest jednostka ssąca, która umożliwi drenaż krwi.</li>
	<li>Opróżnij balon, wsuń go razem z obydwoma cewnikami prowadzącymi i wyprowadź serce, przecinając otaczające błony. Poprzeczne przecięcie dużych naczyń (tj. aorty, tętnicy/żył płucnych) pozwala na całkowitą eksplantację. Szybko zmyć krew i zbędny barwnik z powierzchni zewnętrznej i w jamach serca za pomocą 0,9% soli fizjologicznej.</li>
	<li>Ostrożnie rozetnij lewą komorę i wykonaj nacięcia w 5 równych odcinkach o grubości 10 mm od wierzchołka do podstawy, w płaszczyźnie równoległej do rowka przedsionkowo-komorowego (AV).</li>
	<li>Sfotografuj obie strony wszystkich pięciu plasterków oddzielnie w warunkach oświetlenia otoczenia, ponieważ w kolejnym kroku może wystąpić wypłukanie niebieskiego Evansa. Aby skalibrować, upewnij się, że na obrazie znajduje się linijka.</li>
	<li>Inkubować przez 10 minut w 1% roztworze TTC w temperaturze 37 °C, obracając sekcje po 5 minutach w celu równomiernego zabarwienia.</li>
	<li>Ponownie sfotografuj obie strony wszystkich pięciu plasterków osobno w warunkach oświetlenia otoczenia i upewnij się, że linijka jest wizualizowana na obrazie w celu kalibracji.</li>
	<li>Zważ wszystkie plasterki. Korzystać z oprogramowania odpowiedniego do analiz5. W przypadku korzystania z ImageJ (wersja 1.47) kliknij przycisk "Linia prosta". Teraz narysuj linię prostą o znanej odległości za pomocą linijki na obrazie (np. 5 cm). Kliknij "Analizuj" -> "Ustaw skalę" i wprowadź odległość w polu "Znana odległość". Procedura ta pozwala na kalibrację odległości w pikselach do jednostek długości w układzie SI.</li>
	<li>Za pomocą przycisku "Wybory wielokątów" wybierz całkowity obszar odpowiadający mięśniowi sercowemu LV na obecnym obrazie, kliknij "Analizuj" -> "Zmierz", aby uzyskać pomiary. Wykonaj tę procedurę dla obu stron każdego wycinka mięśnia sercowego i uśredniając na plasterek.
	<ol>
		<li>Pomnóż przez wagę plasterka proporcjonalnie do całkowitej wagi wszystkich pięciu plasterków i uśrednij te pomiary dla wszystkich plasterków.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wykonaj podobne pomiary dla obszaru zagrożonego (AAR) i wielkości zawału (IS). Podziel IS/AAR, AAR/LV i IS/LV i pomnóż przez 100%, aby uzyskać odpowiednie pomiary wyników5.</li>
</ol>

<ol><li>Mosterd, A., Hoes, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+epidemiology+of+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Clinical epidemiology of heart failure.</a> Heart. 93 (9), 1137-1146 (2007).</li>
<li>Nichols, M., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNichols%2C+M+%22European+Cardiovascular+Disease+Statistics%22">European Cardiovascular Disease Statistics</a>. , Brussels. (2012).</li>
<li>Krumholz, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+in+Acute+Myocardial+Infarction+Mortality+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Reduction in Acute Myocardial Infarction Mortality in the United States.</a> JAMA. 302 (7), 767-773 (2010).</li>
<li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics+-+2013+update%3A+A+Report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics - 2013 update: A Report from the American Heart Association.</a> Circulation. 127 (1), (2013).</li>
<li>Koudstaal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+and+functional+outcome+assessment+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs.</a> J. Vis. Exp. (86), e51269(2014).</li>
<li>Chareonthaitawee, P., Christian, T. F., Hirose, K., Gibbons, R. J., Rumberger, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+of+initial+infarct+size+to+extent+of+left+ventricular+remodeling+in+the+year+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Relation of initial infarct size to extent of left ventricular remodeling in the year after acute myocardial infarction.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 25 (3), 567-573 (1995).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N. Engl. J. Med. 357 (11), 1221-1235 (2007).</li>
<li>Suzuki, Y., Lyons, J. K., Yeung, A. C., Ikeno, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+porcine+model+of+reperfused+myocardial+infarction%3A+In+situ+double+staining+to+measure+precise+infarct+area%2Farea+at+risk%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc.+Interv%22%5BJournal%5D)">In vivo porcine model of reperfused myocardial infarction: In situ double staining to measure precise infarct area/area at risk.</a> Catheter Cardiovasc. Interv. 71 (1), 100-107 (2008).</li>
<li>Weidemann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+function+defined+by+strain+rate+and+strain+during+alterations+in+inotropic+states+and+heart+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial function defined by strain rate and strain during alterations in inotropic states and heart rate.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283 (2), H792-H799 (2002).</li>
<li>Mercier, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-dimensional+echocardiographic+assessment+of+left+ventricular+volumes+and+ejection+fraction+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Two-dimensional echocardiographic assessment of left ventricular volumes and ejection fraction in children.</a> Circulation. 65 (5), 962-969 (1982).</li>
<li>De Jong, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+Function+in+a+Long-Term+Follow-Up+Study+of+Moderate+and+Severe+Porcine+Model+of+Chronic+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Res.+Int%22%5BJournal%5D)">Cardiac Function in a Long-Term Follow-Up Study of Moderate and Severe Porcine Model of Chronic Myocardial Infarction.</a> Biomed. Res. Int. 2015, 1-11 (2015).</li>
<li>Van Hout, G. P. J., et al. Invasive surgery reduces infarct size and preserves cardiac function in a porcine model of myocardial infarction. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVan+Hout%2C+GPJ+%22J.+Cell.+Mol.+Med%22">J. Cell. Mol. Med</a>. , 2655-2663 (2015).</li>
<li>Meybohm, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+left+ventricular+systolic+function+during+acute+myocardial+ischemia%3A+A+comparison+of+transpulmonary+thermodilution+and+transesophageal+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Anestesiol%22%5BJournal%5D)">Assessment of left ventricular systolic function during acute myocardial ischemia: A comparison of transpulmonary thermodilution and transesophageal echocardiography.</a> Minerva Anestesiol. 77 (2), 132-141 (2011).</li>
<li>Gruenewald, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evaluation+of+left+ventricular+performance+predicts+volume+responsiveness+early+after+resuscitation+from+cardiac+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Visual evaluation of left ventricular performance predicts volume responsiveness early after resuscitation from cardiac arrest.</a> Resuscitation. 82 (12), 1553-1557 (2011).</li>
<li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., Lathrop, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+The+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: The need for translation into clinical therapy.</a> Circ. Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Timmers, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exenatide+reduces+infarct+size+and+improves+cardiac+function+in+a+porcine+model+of+ischemia+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Exenatide reduces infarct size and improves cardiac function in a porcine model of ischemia and reperfusion injury.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 53 (6), 501-510 (2009).</li>
<li>Csonka, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+myocardial+infarct+size+in+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Measurement of myocardial infarct size in preclinical studies.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 61 (2), 163-170 (2010).</li>
<li>Law, R., Katzka, D. A., Baron, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zenker%27s+Diverticulum%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Gastroenterol.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Zenker's Diverticulum.</a> Clin. Gastroenterol. Hepatol. 12 (11), 1773-1782 (2014).</li>
<li>Philips Healthcare. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22QLAB+10.0+Quick+Card%3A+3DQ+and+3DQ+Adv+measurements+guide%22">QLAB 10.0 Quick Card: 3DQ and 3DQ Adv measurements guide</a>. , (2013).</li>
<li>Transonic. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22ADV500+Pressure-Volume+Measurement+System+Use+and+Care+Manual%2C+version+5%22">ADV500 Pressure-Volume Measurement System Use and Care Manual, version 5</a>. , (2006).</li>
<li>Schramm, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+cardiac+output+obtained+from+a+Swan-Ganz+catheter+always+zero%3F%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Monit.+Comput%22%5BJournal%5D)">Is the cardiac output obtained from a Swan-Ganz catheter always zero?</a> J. Clin. Monit. Comput. 22 (6), 431-433 (2008).</li>
<li>iWorx. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22LabScribe+3%3A+Software+Manual+for+Pressure-Volume+Analyses%22">LabScribe 3: Software Manual for Pressure-Volume Analyses</a>. , (2014).</li>
<li>Hueper, W. C., Ichniowski, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicopathologic+studies+on+the+dye+T-1824%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Surg%22%5BJournal%5D)">Toxicopathologic studies on the dye T-1824.</a> Arch. Surg. 48 (1), 17-26 (1944).</li>
<li>Van Hout, G. P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Admittance-based+pressure-volume+loops+versus+gold+standard+cardiac+magnetic+resonance+imaging+in+a+porcine+model+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rep%22%5BJournal%5D)">Admittance-based pressure-volume loops versus gold standard cardiac magnetic resonance imaging in a porcine model of myocardial infarction.</a> Physiol. Rep. 2 (4), 1-9 (2014).</li>
<li>Burkhoff, D., Mirsky, I., Suga, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+systolic+and+diastolic+ventricular+properties+via+pressure-volume+analysis%3A+a+guide+for+clinical%2C+translational%2C+and+basic+researchers%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Assessment of systolic and diastolic ventricular properties via pressure-volume analysis: a guide for clinical, translational, and basic researchers.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289 (2), H501-H512 (2005).</li>
<li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+in+myocardial+injury%2C+repair%2C+and+remodelling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response in myocardial injury, repair, and remodelling.</a> Nat. Rev. Cardiol. 11 (5), 255-265 (2014).</li>
<li>Fishbein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+phase+acute+myocardial+infarct+size+quantification%3A+validation+of+the+triphenyl+tetrazolium+chloride+tissue+enzyme+staining+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+Heart.+J%22%5BJournal%5D)">Early phase acute myocardial infarct size quantification: validation of the triphenyl tetrazolium chloride tissue enzyme staining technique.</a> Am. Heart. J. 101 (5), 593-600 (1981).</li>
<li>Arslan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+with+OPN-305%2C+a+humanized+anti-toll-like+receptor-2+antibody%2C+reduces+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Cardiovasc.+Interv%22%5BJournal%5D)">Treatment with OPN-305, a humanized anti-toll-like receptor-2 antibody, reduces myocardial ischemia/reperfusion injury in pigs.</a> Circ. Cardiovasc. Interv. 5 (2), 279-287 (2012).</li>
<li>Meyns, B., Stolinski, J., Leunens, V., Verbeken, E., Flameng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+support+by+Catheter-Mountedaxial+flow+pump+reduces+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Left ventricular support by Catheter-Mountedaxial flow pump reduces infarct size.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 41 (7), 1087-1095 (2003).</li>
<li>Khalil, P. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histochemical+assessment+of+early+myocardial+infarction+using+2%2C3%2C5-triphenyltetrazolium+chloride+in+blood-perfused+porcine+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Histochemical assessment of early myocardial infarction using 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride in blood-perfused porcine hearts.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 54 (3), 307-312 (2006).</li>
<li>Gardner, B. I., Bingham, S. E., Allen, M. R., Blatter, D. D., Anderson, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+magnetic+resonance+versus+transthoracic+echocardiography+for+the+assessment+of+cardiac+volumes+and+regional+function+after+myocardial+infarction%3A+an+intrasubject+comparison+using+simultaneous+intrasubject+recordings%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Cardiac magnetic resonance versus transthoracic echocardiography for the assessment of cardiac volumes and regional function after myocardial infarction: an intrasubject comparison using simultaneous intrasubject recordings.</a> Cardiovasc. Ultrasound. 7, 38(2009).</li>
<li>Santos-Gallego, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D-Echocardiography+Demonstrates+Excellent+Correlation+With+Cardiac+Magnetic+Resonance+for+Assessment+of+Left+Ventricular+Function+and+Volumes+in+a+Model+of+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">3D-Echocardiography Demonstrates Excellent Correlation With Cardiac Magnetic Resonance for Assessment of Left Ventricular Function and Volumes in a Model of Myocardial Infarction.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 59 (13), E1564(2012).</li>
<li>Keith Jones,, W,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+nociception+associated+with+surgical+incision+elicits+remote+nonischemic+cardioprotection+via+neurogenic+activation+of+protein+kinase+C+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Peripheral nociception associated with surgical incision elicits remote nonischemic cardioprotection via neurogenic activation of protein kinase C signaling.</a> Circulation. 120, Suppl 1. S1-S9 (2009).</li>
<li>Gross, G. J., Baker, J. E., Moore, J., Falck, J. R., Nithipatikom, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+Surgical+Incision+Induces+Remote+Preconditioning+of+Trauma+%28RPCT%29+via+Activation+of+Bradykinin+Receptors+%28BK2R%29+and+the+Cytochrome+P450+Epoxygenase+Pathway+in+Canine+Hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Drugs+Ther%22%5BJournal%5D)">Abdominal Surgical Incision Induces Remote Preconditioning of Trauma (RPCT) via Activation of Bradykinin Receptors (BK2R) and the Cytochrome P450 Epoxygenase Pathway in Canine Hearts.</a> Cardiovasc. Drugs Ther. 25 (6), 517-522 (2011).</li>
<li>Van Hout, G. P. J., de Jong, R., Vrijenhoek, J. E. P., Timmers, L., Duckers, H. J., Hoefer, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Admittance-based+pressure-volume+loop+measurements+in+a+porcine+model+of+chronic+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Admittance-based pressure-volume loop measurements in a porcine model of chronic myocardial infarction.</a> Exp. Physiol. 98 (11), 1565-1575 (2013).</li>
<li>Sunagawa, K., Maughan, W. L., Burkhoff, D., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+interaction+with+arterial+load+studied+in+isolated+canine+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Left ventricular interaction with arterial load studied in isolated canine ventricle.</a> Am. J. Physiol. 245 (5 Pt 1), H773-H780 (1983).</li>
<li>Steendijk, P., Baan, J., Der Velde, E. T. V. an, Baan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+critical+coronary+stenosis+on+global+systolic+left+ventricular+function+quantified+by+pressure-volume+relations+during+dobutamine+stress+in+the+canine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Effects of critical coronary stenosis on global systolic left ventricular function quantified by pressure-volume relations during dobutamine stress in the canine heart.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 32 (3), 816-826 (1998).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Przebudowa serca zależy w dużej mierze od wielkości zawału mięśnia sercowego i jakości naprawy zawału mięśnia sercowego6,26. Aby ocenić to pierwsze w ustandaryzowany sposób, niniejszy manuskrypt przedstawia elegancką metodę infuzji in vivo błękitu Evansa w połączeniu z barwieniem ex vivo TTC, która została zwalidowana i szeroko stosowana8,16,27,28. Metoda ta pozwala na ilościowe określenie obszaru zagrożonego (AAR) i wielkości zawału w odniesieniu do AAR16. Obecne podejś...

Niewydolność serca ze zmniejszoną frakcją wyrzutową (HFrEF) stanowi około 50% wszystkich przypadków niewydolności serca, dotykając około 1 - 2% ludzi w świecie zachodnim1. Jego najczęstszą przyczyną jest ostry zawał mięśnia sercowego (AMI). Ponieważ ostra śmiertelność po zawale mięśnia sercowego znacznie spadła dzięki zwiększonej świadomości i lepszym opcjom leczenia, nacisk przesunął się w kierunku jej przewlekłych następstw; najbardziej znanym z nich jest HFrEF2,3. Wraz z rosnącymi kosztami opieki zdrowotnej4 rosnąca epidemia niewydolności serca podkreśla potrzebę nowatorskiej diagnostyki i terapii, które można badać w wysoce translacyjnym modelu niekorzystnej przebudowy świń po AMI, jak opisano wcześniej5.
Zarówno determinanty (np. wielkość zawału), jak i oceny funkcjonalne (np. echokardiografia) niekorzystnej przebudowy są często wykorzystywane do testowania skuteczności nowych terapii, wskazując na potrzebę niezawodnych i stosunkowo tanich metod. Celem niniejszej pracy jest zaspokojenie tej potrzeby poprzez wprowadzenie ważnych i wiarygodnych mierników wyników badań skuteczności w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego. Obejmują one rozmiar zawału (IS) w stosunku do obszaru ryzyka (AAR), echokardiografię przełyku 3D (3D-TEE) oraz szczegółową akwizycję pętli ciśnienia i objętości (PV) na podstawie admitancji.
Rozmiar zawału jest głównym wyznacznikiem niekorzystnej przebudowy i przeżycia po AMI6. Chociaż szybka reperfuzja mięśnia sercowego niedokrwiennego może uratować odwracalnie uszkodzone kardiomiocyty i ograniczyć rozmiar zawału, sama reperfuzja powoduje dodatkowe uszkodzenia poprzez generowanie stresu oksydacyjnego i nieproporcjonalną reakcję zapalną (uszkodzenie niedokrwienno-reperfuzyjne (IRI))7. W związku z tym IRI został zidentyfikowany jako obiecujący cel terapeutyczny. Zdolność nowych terapii do zmniejszania wielkości zawału określa się ilościowo poprzez ocenę wielkości zawału w odniesieniu do obszaru ryzyka (AAR). Kwantyfikacja AAR jest obowiązkowa w celu skorygowania międzyosobniczej zmienności w anatomii wieńcowej modeli zwierzęcych, ponieważ większy AAR prowadzi do większego bezwzględnego rozmiaru zawału. Ponieważ wielkość zawału jest bezpośrednio związana z czynnością serca i kurczliwością mięśnia sercowego, zmiany w AAR mogą wpływać na wskaźniki wyników badania niezależnie od metod leczenia8.
Trójwymiarowa echokardiografia przezprzełykowa (3D-TEE) jest bezpieczną, niezawodną i, co najważniejsze, klinicznie stosowaną niedrogą metodą nieinwazyjnego pomiaru czynności serca. Podczas gdy obrazy echokardiografii przezklatkowej (TTE) są ograniczone do widoków 2D przymostkowej długiej i krótkiej osi u świń9, 3D-TEE można wykorzystać do uzyskania pełnych trójwymiarowych obrazów lewej komory. W związku z tym nie wymaga matematycznych przybliżeń objętości lewej komory (LV), takich jak zmodyfikowana regułaSimpsona 10. Ten ostatni nie jest w stanie prawidłowo oszacować objętości LV po przebudowie LV ze względu na brak geometrii cylindrycznej11. Co więcej, 3D-TEE jest korzystniejsza niż echokardiografia nasierdziowa, ponieważ nie wymaga interwencji chirurgicznych, które zaobserwowano, że wywierają działanie kardioprotekcyjne w obecnym modelu12. Chociaż zastosowanie 2D-TEE do oceny funkcji mięśnia sercowego zostało opisane wcześniej13,14, ograniczenia dotyczące geometrii komór są podobne do tych obserwowanych w 2D-TTE i zależą od zakresu przebudowy lewej komory. W związku z tym im większy zawał (a tym samym większe prawdopodobieństwo niewydolności serca), tym większe prawdopodobieństwo, że pomiary 2D staną się wadliwe z powodu nieprawidłowych założeń geometrycznych i tym większe zapotrzebowanie na techniki 3D.
Niemniej jednak, większość metod obrazowania ma ograniczoną zdolność do oceny wewnętrznych właściwości funkcjonalnych mięśnia sercowego. Pętle fotowoltaiczne dostarczają takich istotnych dodatkowych informacji, dlatego ich pozyskiwanie zostało szczegółowo opisane poniżej.

<table><tbody><tr><td><silna>3-wymiarowa echokardiografia przezprzełykowa</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>iE33 ultrasonografia</td><td>Przetwornik Philips-X7-2t</td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Żel</td> do transmisji ultradźwięków <td>Philips-Aquasonic</td><td></td></tr><tr><td>&reg; 100</td> Parker <td>Laboratories Inc.</td><td>01-34</td><td>Można użyć produktu alternatywnego</td></tr><tr><td>Uchwyt baterii typu C (uchwyt laryngoskopowy)</td><td>Riester</td><td>12303</td><td></td></tr><tr><td>Ri-Standard Ostrze Miller MIL 4 (ostrze laryngoskopowe)</td><td>Riester</td><td>12225</td><td></td></tr><tr><td>Qlab 10.0 (3DQ Advanced) oprogramowanie analityczne</td><td>Philips</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Nazwa</td><td>Firma</td><td>Numer katalogowy</td><td>Komentarze</td></tr><tr><td>Akwizycja pętli ciśnieniowo-objętościowej</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Defibrylator serca</td><td>Philips</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9% soli fizjologicznej</td><td>Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>8 F Zestaw wprowadzający osłony przezskórnej</td><td>Arrow</td><td>CP-08803</td><td>Można użyć</td></tr> <tr><td>produktu alternatywnego9 F Radifocus&reg; Zestaw Introducer II Standard&nbsp;</td><td>Terumo</td><td>RS*A90K10SQ</td><td>Można zastosować produkt alternatywny</td></tr><tr><td>8 F Cewnik Fogarty'ego</td><td>Edward Life Sciences</td><td>62080814F</td><td>Można użyć produktu alternatywnego</td></tr><tr><td>7 F Krytyka&handel; SP5107H cewnik TD (Swan-Ganz)</td><td>Becton Dickinson (BD)</td><td>680078</td><td>Można zastosować produkt alternatywny</td></tr><tr><td>Monitor pacjenta Ultraview SL i inwazyjny moduł dowodzenia (zewnętrzne urządzenie do rzutu serca)</td><td>Spacelabs Healthcare</td><td>91387</td><td>Alternatywny produkt może być stosowany</td></tr><tr><td>ADVantage system i handel;</td><td>Transonic SciSense-7</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>F Czterobiegunowy cewnik adymitacyjny (7,0 VSL Pigtail / bez prześwitu)</td><td>Transsonic SciSense-Wielokanałowy</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>system akwizycji (Iworx 404)</td>Można stosować oprogramowanie analityczne <td>Iworx-Labscribe</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>V2.0</td> Produkt <td>Iworx-Alternative</td><td></td><td></td></tr><tr><td><silny>Nazwa</silny></td><td><silny>Firma</silny></td><td><silny>Numer katalogowy</td><td>Uwagi</td></tr><tr><td>Rozmiar zawału / obszar zagrożony oznaczanie ilościowe</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diatermia-Można</td><td></td><td></td> <td>użyć</td></tr><tr><td>produktu alternatywnego Nóż</td><td></td><td></td> Lebsch-Produkt <td>alternatywny może być użyty</td></tr> <tr><td>Młotek-Produkt</td><td></td><td></td> <td>alternatywny może być stosowany</td></tr><tr><td>Wosk szpiku kostnego</td><td>Synetura</td><td></td><td>Alternatywny produkt może być użyty</td></tr><tr><td>Nożyczki Klinkenberg-Alternatywny</td><td></td><td></td> <td>produkt może być użyty</td></tr><tr><td>Retraktor-Alternatywny</td><td></td><td></td> <td>produkt może być użyty</td></tr><tr><td>Nożyczki chirurgiczne-7</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>F Zestaw wprowadzający przezskórną osłonkę&nbsp;</td><td>Strzała</td><td>CP-08703</td><td>Alternatywny produkt może być użyty</td></tr><tr><td>8 F Zestaw wprowadzający do osłonki przezskórnej&nbsp;</td><td>Strzałka</td><td>CP-08803</td><td>Można użyć alternatywnego produktu</td></tr><tr><td>7 F JL4 cewnik prowadzący&nbsp;</td><td>Boston Scientific</td><td>H749 34357-662</td><td>Można zastosować alternatywny produkt</td></tr><tr><td>Cewnik prowadzący 8 F JL4&nbsp;</td><td>Boston Scientific</td><td>H749 34358-662&nbsp;</td><td>Można użyć produktu alternatywnego</td></tr><tr><td>Zawory sterujące odpływem COPILOT&nbsp;</td><td>Abbott Vascular</td><td>1003331</td><td>Alternatywny produkt może być stosowany</td></tr><tr><td>BD Connecta&trade; &nbsp;</td><td>Franklin Lakes</td><td>394995</td><td>Alternatywny produkt może być użyty</td></tr><tr><td>Środek kontrastowy</td><td>Telebrix</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Persuader 9 Steerable Guidewire 9 (0,014", 180 cm, prosta końcówka), powłoka hydrofilowa</td><td>Medtronic Inc.</td><td>9PSDR180HS</td><td>Alternatywny produkt może być używany</td></tr><tr><td>SAPPHIRE&handel; Cewnik rozszerzający naczynia wieńcowe (balon PTCA odpowiedni do wielkości danej tętnicy wieńcowej (2,75 - 3,25 mm))</td><td>OrbusNeich</td><td>103-3015</td><td>Można zastosować produkt alternatywny</td></tr><tr><td>Evans Blue&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E2129-100G</td><td>Toksyczny. Alternatywnym produktem może być stosowany</td></tr><tr><td>chlorek 2,3,5-trifenylo-tetrazolu (TTC)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8877-100G</td><td>Substancja drażniąca. Alternatywny produkt może być używany</td></tr><tr><td>Bateria 9 V</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Linijka</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Aparat fotograficzny</td><td>Sony-ImageJ</td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td>National Institutes of</td> <td>Health-Można</td> <td>użyć produktu alternatywnego</td></tr></tbody></table>

pierwszorzędowa ocena wyniku w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Śmiertelność po ostrym zawale mięśnia sercowego pozostaje znaczna i wiąże się ze znaczną zachorowalnością, taką jak niewydolność serca. W związku z tym potrzebne są nowatorskie metody leczenia, aby ograniczyć uszkodzenia serca, zwiększyć przeżywalność i zmniejszyć obciążenie chorobami związanymi z niewydolnością serca. Eksperymenty na dużych zwierzętach są istotną częścią procesu translacji od terapii eksperymentalnych do klinicznych. Aby zoptymalizować translację kliniczną, konieczne są solidne i reprezentatywne pomiary wyników. Niniejszy artykuł ma na celu zaspokojenie tej potrzeby poprzez opisanie oceny trzech klinicznie istotnych modalności wyników w modelu ostrego zawału mięśnia sercowego (AMI) świni: rozmiar zawału w stosunku do barwienia obszaru ryzyka (IS/AAR), trójwymiarowa echokardiografia przezprzełykowa (TEE) i pętle ciśnienia i objętości oparte na przyznaniu (PV). Wielkość zawału jest głównym wyznacznikiem napędzającym przejście od AMI do niewydolności serca i można ją określić ilościowo za pomocą barwienia IS/AAR. Echokardiografia jest wiarygodnym i solidnym narzędziem do oceny globalnej i regionalnej funkcji serca w kardiologii klinicznej. W tym miejscu przedstawiono metodę trójwymiarowej echokardiografii przezprzełykowej (3D-TEE) u świń. Obszerny wgląd w wydolność serca można uzyskać dzięki pętlom ciśnienia i objętości (PV) opartym na przyznaniu, w tym wewnętrznym parametrom funkcji mięśnia sercowego, które są niezależne od obciążenia wstępnego i następczego. W połączeniu z klinicznie wykonalnym protokołem badania eksperymentalnego, te miary wyników dostarczają naukowcom niezbędnych informacji do ustalenia, czy nowe strategie terapeutyczne mogą przynieść obiecujące cele do przyszłych testów w badaniach klinicznych.

Trójwymiarowe echokardiograficzne badanie przezprzełykowe
Trójwymiarowe echokardiografie przezprzełykowe (3D-TEE) mogą być wykorzystywane do oceny globalnej funkcji serca. Po AMI globalna funkcja serca różni się od zdrowych wartości wyjściowych. W szczególności frakcja wyrzutowa lewej komory (LVEF) spada z 59 ± 4% do 37 ± 6% po jednym tygodniu reperfuzji (n = 10) (GPJ van Hout, 2015). Obserwuje się również wzros...

Rzetelna i dokładna ocena wyników jest kluczem do przełożenia terapii przedklinicznych na leczenie kliniczne. W niniejszej pracy opisano, w jaki sposób można ocenić trzy klinicznie istotne pierwszorzędowe parametry końcowe dotyczące wydolności i uszkodzenia serca w modelu ostrego zawału mięśnia sercowego u świni.

Pierwszorzędowa ocena wyniku w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Ogólnym celem niniejszej metodologii jest uzyskanie wiarygodnych i powtarzalnych pomiarów wyników do oceny nowych terapii w modelu ostrego zawału mięśnia sercowego u świń. Metoda ta może pomóc w odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie układu sercowo-naczyniowego, takie jak wpływ interwencji terapeutycznych na schemat uszkodzenia po reperfuzji, a także w modelowaniu ostrego zawału mięśnia sercowego. Główną zaletą tych technik jest to, że pozwalają one na dokładną i klinicznie istotną ocenę uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego oraz przebudowy serca.Dzięki tej metodzie można uzyskać wgląd w obrażenia reperfuzyjne w przebiegu niedokrwienia mięśnia sercowego. Można ją również zastosować w innych badaniach obejmujących ocenę funkcji serca. Niniejszy protokół umożliwia pozyskanie pomiarów pierwszorzędowych punktów końcowych przed lub po ostrym zawale mięśnia sercowego.Zawał wywołuje się poprzez 75-minutową przezświatową okluzję balonową lewej tętnicy zstępującej, co zostało szczegółowo omówione w cytowanym filmie. Niniejszy film prezentuje sposób wykonania trójwymiarowej echokardiografii przezprzełykowej oraz pomiary pętli ciśnienie-objętość dla wartości bazowych, a także w ramach kontroli krótkoterminowej i długoterminowej. Film demonstruje również sposób pomiaru wielkości zawału i obszaru zagrożonego za pomocą barwienia po zakończeniu badania.Przygotować świnię pod narkozą zgodnie z opisem w protokole tekstowym, a następnie podłączyć zwierzę do echokardiografu za pomocą odprowadzeń EKG. Następnie przygotować głowicę echo. Nanieść niewielką ilość żelu do badań ultrasonograficznych na końcówkę i odblokować ją, aby była elastyczna.Ustaw kąt obrazowania na 90 stopni za pomocą ręcznego elementu sterującego. Przy świni w pozycji bocznej prawej otwórz pysk i ostrożnie wprowadź sondę do przełyku. Należy uważać, aby nie wywierać zbyt dużego nacisku i unikać normalnej anatomicznej kieszonki gardłowej, która przypomina dywertykuł Zenkera.Następnie wprowadź sondę na głębokość od 50 do 60 cm, mierząc od czubka pyska, a następnie powoli obracaj i zginaj głowę w kierunku przednio-boczno-lewym, aby uwidocznić serce. Upewnij się, że wszystkie ściany serca są wyraźnie widoczne. W razie potrzeby zablokuj końcówkę sondy echokardiograficznej, aby ustabilizować obraz podczas akwizycji.Na wyświetlaczu przełącz opcję 3D Full Volume, aby wygenerować dwa prostopadłe obrazy lewej komory. Następnie zmaksymalizuj szerokość sektora obrazowania, wybierając FV Opt Volume. Teraz wstrzymaj wentylację i naciśnij Acquire, aby uzyskać pomiary pełnej objętości.Po uzyskaniu pełnego pomiaru włącz wentylację mechaniczną. Po zakończeniu akwizycji echo解锁 odblokuj głowicę i powoli wyjmij ją z organizmu zwierzęcia. Następnie monitoruj świnię aż do czasu jej wybudzenia z operacji.W ramach przygotowań końcówki sensoryczne cewnika należy namoczyć w 0,9% soli fizjologicznej przez co najmniej 20 minut. Po przygotowaniu świni do zabiegu należy podać 100 jednostek międzynarodowych heparyny na kilogram masy ciała, a następnie wprowadzić osłonkę wprowadzającą 8F do tętnicy szyjnej oraz osłonkę 9F do żyły szyjnej. Następnie przez osłonkę 9F należy wprowadzić cewnik Swan-Ganza, napompować balon na końcówce cewnika i zablokować go w małej tętnicy płucnej.Po odpowiednim umieszczeniu w obwodowej części płuca, spuść powietrze z balonika i podłącz cewnik Swan-Ganza do zewnętrznego urządzenia do pomiaru rzutu serca. Po podłączeniu otwórz menu rzutu serca na zewnętrznym urządzeniu. Wprowadź masę ciała zwierzęcia do systemu i oblicz długość w taki sposób, aby BMI wynosiło 22,5.Należy nabrać 20 ml soli fizjologicznej (0,9%) o temperaturze pokojowej do strzykawki i podłączyć ją do portu wtryskowego połączonego z lumenem o najbardziej proksymalnym ujściu. Wyłączyć wentylację i odczekać pięć uderzeń serca. Najpierw nacisnąć przycisk Manual, a następnie Start na urządzeniu wyjściowym.Następnie szybko wstrzyknij pięć mililitrów soli fizjologicznej, aby zmierzyć rzut serca. Pomiary urządzenia zostaną wyświetlone w ciągu 15 sekund. Po tym czasie włącz wentylację.Powtórz tę procedurę trzy razy i oblicz średnią objętość wyrzutową. Pomiędzy infuzjami odczekaj minutę lub dwie, aby stężenie dwutlenku węgla w powietrzu wydychanym na końcu wydechu powróciło do wartości wyjściowych. Następnie usuń cewnik Swansa-Ganza i wprowadź cewnik Fogarty'ego 8F przez osłonkę 9F w żyłę szyjną, a następnie umieść go w żyle głównej dolnej.Podczas gdy końcówka pozostaje w 0,9% soli fizjologicznej, skalibruj sygnał ciśnienia cewnika do pętli PV tak, aby był jak najbliższy 0, korzystając z przycisków regulacji grubej i precyzyjnej. Następnie wprowadź zmierzoną objętość wyrzutową do systemu. Kolejnym krokiem jest przesunięcie cewnika do pętli PV przez osłonkę 8F w tętnicy szyjnej, a następnie, przy użyciu fluoroskopii, przesunięcie i wycentrowanie końcówki w lewej komorze.Następnie należy nanieść surowy sygnał przewodnictwa na sygnał ciśnienia, co powinno utworzyć pętlę prostokątną. Na podstawie tego wykresu należy wybrać największy, odpowiednio rozmieszczony segment. Następnie należy przerwać wentylację mechaniczną i nacisnąć enter w module pętli ciśnienie-objętość, aby wykonać skan bazowy w celu przeliczenia przewodnictwa na objętość.Gdy moduł wyświetli tętno oraz przewodność skurczową i rozkurczową, ponownie włącz pomiar oddychania. Przed kontynuacją zmierzone tętno musi być zgodne z tętnem z EKG lub tętnem wyznaczonym z ciśnienia. Nie może występować żadna arytmia, a przewodność skurczowa i rozkurczowa muszą być odpowiednio wykrywane.Jeśli dane bazowe zostaną uznane za odpowiednie, należy je zatwierdzić, naciskając enter, a następnie zapisać częstotliwość akcji serca oraz przewodnictwo skurczowe i rozkurczowe wyświetlone w module pętli PV. Następnie należy nanieść sygnał objętości na sygnał ciśnienia. Pętle nadal muszą mieć kształt prostokąta.Następnie należy przerwać wentylację i uzyskać wyjściową pętlę ciśnienie-objętość, rejestrując od 10 do 12 kolejnych uderzeń serca. Potem należy ponownie włączyć wentylację i poczekać, aż poziom końcowego wydychanego dwutlenku węgla powróci do wartości wyjściowych. W następnym kroku, pod kontrolą fluoroskopową, należy nadmuchać cewnik Fogarty'ego w celu zmniejszenia obciążenia wstępnego.Następnie, podobnie jak wcześniej, zarejestruj od 10 do 12 kolejnych uderzeń serca bez wentylacji. Ciśnienie skurczowe krwi musi pozostać powyżej 60 mmHg, a żadna arytmia nie może zakłócać pomiarów. Po pozyskaniu danych spuść powietrze z cewnika Fogarty'ego, włącz wentylację i poczekaj, aż końcowe stężenie dwutlenku węgla w powietrzu wydychanym powróci do poziomu wyjściowego.Teraz usuń cewniki Fogarty'ego oraz pętli PV, kontynuując pomiar ciśnienia tętniczego w celu skorygowania dryftu ciśnienia. Na koniec monitoruj zwierzę aż do momentu wybudzenia, przed powrotem do pozostałych zwierząt. Po przygotowaniu zwierzęcia do zabiegu, uzyskaj dostęp do obu tętnic szyjnych poprzez chirurgiczną eksplorację szyi.Następnie wprowadź pochewkę wprowadzającą 7F i 8F do odpowiednich tętnic szyjnych. Teraz podaj heparynę w dawce 100 jednostek na kilogram masy ciała. Aby przeprowadzić sternotomię, wykonaj nacięcie o długości od 30 do 40 cm, od miejsca tuż poniżej wcięcia nadmostkowego do punktu tuż poniżej wyrostka mieczowatego.Następnie przesunąć się wzdłuż linea alba w kierunku mostka. Za pomocą diatermii ostrożnie rozciąć wyrostek mieczowaty i użyć nożyczek Klinkenberga, aby oddzielić tylną część mostka od osierdzia. Kontynuować separację tępą, przesuwając się w kierunku kranio-rostralnym.Należy skierować końcówki nożyczek w górę, w stronę mostka, aby uniknąć uszkodzenia serca. Wykonaj sternotomię, używając młotka i noża Lebsche. Krwawienie z szpiku kostnego można zminimalizować, pocierając szpik woskiem do szpiku kostnego.Otwórz klatkę piersiową za pomocą rozszerzacza. Następnie otwórz osierdzie, używając nożyczek chirurgicznych. Podłącz standardowe cewniki w kształcie litery Y do cewników prowadzących.Następnie połącz oba złączki Y za pomocą trójdrożnego kurka z 10 centymetrowym przedłużeniem. Potem wprowadź jeden z cewników prowadzących do ujścia lewej tętnicy wieńcowej głównej poprzez jedną z osłonek. Następnie, używając drutu prowadzącego wprowadzonego do lewej przedniej zstępującej tętnicy, przesuń cewnik do dylatacji tętnic wieńcowych przez cewnik lewej tętnicy wieńcowej głównej i ustaw balon w miejscu, w którym wykonano zamknięcie tętnicy podczas indukcji zawału mięśnia sercowego.Nie nadmuchiwać jeszcze. Kontynuować, wprowadzając drugi cewnik prowadzący do ujścia prawej tętnicy wieńcowej przy użyciu drugiego wprowadzacza. Następnie wykonać angiografię wieńcową.Wprowadź środek kontrastowy pod kontrolą fluoroskopii. Najpierw, w rzucie przednio-tylnym, potwierdź prawidłowe ustawienie cewnika prowadzącego w lewej tętnicy wieńcowej głównej. Następnie zwizualizuj prawą tętnicę wieńcową.Wprowadzenie kontrastu może przesunąć balon głębiej do tętnicy wieńcowej. W razie potrzeby należy go ponownie ustawić. Następnie do kurków trójdrożnych należy podłączyć strzykawki ze świeżo przygotowanym 2% barwnikiem Evans Blue.Następnie, wykonując angiografię wieńcową, należy nadmuchać balon i potwierdzić, że całkowicie zamyka on część tętnicy wieńcowej. Okluzyjność jest kluczowa. Podczas nadmuchania balonu wstrzyknij kontrast przez oba cewniki prowadzące z prędkością 5 milliliters per second.Serce nie powinno stać się niebieskie, z wyjątkiem części lewej komory pozbawionej przepływu krwi. Jeśli w sercu nie wystąpi spontanicznie migotanie komór, należy dotknąć baterii dziewięciowoltowej niezawałowej części serca pięć uderzeń po infuzji barwnika. Następnie należy naciąć żyłę kablem, aby zwolnić ciśnienie i użyć ssaka do odessania krwi.Teraz spuść powietrze z balonu. Wycofaj go wraz z obydwoma cewnikami prowadzącymi. Następnie dokonaj eksplantacji serca, rozcinając otaczające błony i wykonując poprzeczne cięcie przez duże naczynia.Należy upewnić się, że cała krew i barwnik zostały wypłukane 0.9% solą fizjologiczną, zarówno z zewnątrz, jak i z wewnątrz. Następnie ostrożnie należy wypreparować lewą komorę. Po tym wykonać pięć równych przekrojów o grubości 10 mm od wierzchołka do podstawy, w płaszczyźnie równoległej do bruzdy międzyprzedsionkowej a komorową.Wykonaj zdjęcia obu stron wszystkich pięciu przekrojów w warunkach oświetlenia otoczenia, umieszczając w kadrze linijkę do kalibracji. Następnie zabarw przekroje w TTC i sfotografuj je ponownie. Do oceny globalnej funkcji serca wykorzystano trójwymiarową echokardiografię przezezoesophagialną.Tydzień po ostrym zawale mięśnia sercowego, w oparciu o wyniki uzyskane u 10 zwierząt, stwierdzono pogorszenie globalnej funkcji serca w porównaniu do zdrowych wartości bazowych. Było to spowodowane zmniejszonym skurczem ściany przednio-przegrodowej. Do oceny globalnej funkcji serca oraz obliczenia wewnętrznych właściwości mięśnia sercowego wykorzystano również pętle ciśnienie-objętość.Pomiary wyników dla poprzedniego etapu zostały łatwo obliczone i obejmują EDV w prawym dolnym rogu oraz ESV w lewym górnym rogu. Wartości te dostarczają istotnych informacji na temat geometrii lewej komory. Na podstawie tych pomiarów obliczono frakcję wyrzutową lewej komory, będącą ważnym wskaźnikiem funkcji pompowania lewej komory, wraz z kilkoma innymi parametrami.W celu oceny wewnętrznej wydolności serca z pętli PV wyliczono różne parametry, takie jak zależność ciśnienia od objętości w końcowej fazie skurczu oraz w końcowej fazie rozkurczu. Po zawale mięśnia sercowego nachylenie krzywej zależności ciśnienia od objętości końcowoskurczowej może ulec zmniejszeniu, co wskazuje na obniżoną kurczliwość. Ostatecznie zastosowano barwienia w celu odróżnienia niezmianionego mięśnia sercowego od obszaru zagrożonego oraz obszaru zawału.Około 22% lewej komory stanowił obszar zagrożony (area at risk), z którego większość uległa zawałowi. Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo mieć dobrą wiedzę na temat przeprowadzania trójwymiarowej echokardiografii przezprzełykowej, pozyskiwania danych pętli ciśnienie-objętość oraz barwienia w celu określenia wielkości zawału w stosunku do obszaru zagrożonego. Po opanowaniu techniki, echokardiografię przezprzełykową można wykonać w ciągu 20 minut.Pozyskiwanie danych pętli ciśnienie-objętość trwa 30 minut. Barwienie w celu oznaczenia wielkości zawału oraz obszaru zagrożonego niedokrwieniem trwa 60 minut. Podczas wykonywania pomiarów pętli PV oraz barwienia wielkości zawału i obszaru zagrożonego niedokrwieniem, należy pamiętać o zachowaniu ostrożności, aby nie wywołać arytmii.Techniki przedstawione w tym filmie mogą pomóc badaczom z dziedziny chorób układu sercowo-naczyniowego w badaniu uszkodzeń niedokrwienno-reperfuzyjnych w modelach zwierzęcych dużych zwierząt.

primary-outcome-assessment-pig-model-acute-myocardial

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Szczurzy model ostrego zawału mięśnia sercowego (AMI) jest przydatny do badania skutków zawału dla patofizjologicznych i fizjologicznych funkcji serca.

Ostry zawał mięśnia sercowego u szczurów

Ten protokół opisuje model zawału mięśnia sercowego (MI) świni za pomocą 90-minutowej zamkniętej klatki piersiowej zamknięcia balonu wieńcowego lewej tętnicy zstępującej przedniej (LAD), po której następuje reperfuzja. Ponadto przedstawiono również protokół dla kilku parametrów końcowych, takich jak czynność serca, hemodynamika, opór mikronaczyniowy i wielkość zawału.

Zawał mięśnia sercowego i ocena wyników funkcjonalnych u świń

Pośmiertna ocena zawału mięśnia sercowego (MI) u gryzoni opiera się na ilościowym określeniu zawału na barwionych odcinkach serca. Opisujemy dokładną metodę ilościowego określania wielkości zawału przy użyciu systematycznego pobierania próbek pobranych serc szczurów od podstawy do wierzchołka oraz analiz obrazowych skrawków histologicznych barwionych trichromem.

Histologiczna ocena ilościowa przewlekłego zawału mięśnia sercowego u szczurów

Tutaj demonstrujemy protokół standaryzacji procedur pobierania próbek z ustalonego modelu ostrego zawału mięśnia sercowego u świń, aby zwiększyć jego wartość translacyjną w zrozumieniu patofizjologii niedokrwienia mięśnia sercowego/uszkodzenia reperfuzyjnego i przetestować nowych kandydatów na leki.

Udoskonalenie modelu zawału mięśnia sercowego u świń w zamkniętej klatce piersiowej poprzez standaryzację procedur pobierania próbek tkanek i krwi

Tutaj opisujemy zabieg chirurgiczny pokazujący, jak osiągnąć trwałe podwiązanie lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej u myszy. Model ten ma duże znaczenie dla badania patofizjologii zawału mięśnia sercowego i towarzyszących mu procesów biologicznych.

Mysi model zawału mięśnia sercowego z wykorzystaniem trwałego podwiązania lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej

Staraliśmy się stworzyć świński model niewydolności serca wywołanej zablokowaniem lewej tętnicy obwodowej i szybką stymulacją, aby przetestować efekt i bezpieczeństwo domięśniowego podawania komórek macierzystych w terapiach komórkowych.

Opracowanie świńskiego modelu niewydolności serca po zawale mięśnia sercowego do leczenia komórkami macierzystymi

Ogólnym celem obecnego badania jest przedstawienie technik indukcji zawału mięśnia sercowego (MI) i niewydolności serca po zawale mięśnia sercowego (post-MI HF) u dorosłych miniświnek z Getyngi z zamkniętą klatką piersiową oraz charakterystyka modelu post-MI HF u miniświnek z Getyngi w porównaniu do świń rasy Landrace.

Niewydolność serca po zawale mięśnia sercowego w modelu niedrożności/reperfuzji wieńcowej z zamkniętą klatką piersiową u świń miniaturowych i landrace

Modele zwierzęce zawału mięśnia sercowego (MI), które naśladują naturalny proces choroby u ludzi, są kluczowe dla zrozumienia mechanizmów patofizjologicznych i testowania bezpieczeństwa i skuteczności nowych terapii. W tym miejscu opisujemy model trzody chlewnej MI utworzony przez zastosowanie przezskórnej cewki embolizującej.

Zawał mięśnia sercowego przez przezskórne wprowadzenie cewki embolizacyjnej w modelu trzody chlewnej

Echokardiografia przezklatkowa jest testem diagnostycznym pierwszego rzutu dla dysfunkcji lewej komory po resuscytacji i zmian strukturalnych w świńskim modelu zatrzymania krążenia.

Echokardiografia przezklatkowa w celu oceny dysfunkcji lewej komory po resuscytacji po ostrym zawale mięśnia sercowego i zatrzymaniu krążenia u świń

Opisujemy, jak wykonać rezonans magnetyczny i obrazowanie PET serca myszy. Protokół jest dostosowany do oceny skuteczności leczenia w modelach zawału mięśnia sercowego i niewydolności serca.

MRI i PET w mysich modelach zawału mięśnia sercowego

Poznaj metodologię oceny wyników w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego. Techniki obejmują echokardiografię przezprzełykową 3D oraz pomiary pętli ciśnieniowo-objętościowych.

Pierwszorzędowa ocena wyniku w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego

Przeglądaj więcej filmów