Mikroiniekcja nefrotoksyny u danio pręgowanego w celu modelowania ostrego uszkodzenia nerek

Ogólnym celem tego protokołu jest wykorzystanie danio pręgowanego do obserwacji wpływu nefrotoksyn, takich jak gentamycyna lub cisplatyna, do modelowania ostrego uszkodzenia nerek. Główną zaletą tej techniki jest to, że model danio pręgowanego umożliwia obrazowanie w czasie rzeczywistym uszkodzeń komórek i ich regeneracji po ostrym uszkodzeniu nerek. Aby rozpocząć tę procedurę, przygotuj narzędzie do manipulacji zarodkami do pozycjonowania zarodków do mikrowstrzyknięcia, mocując końcówkę ładującą żel na końcu pięciocalowej prostej igły preparacyjnej i zabezpiecz ją taśmą lub super klejem.

Następnie przygotuj kilka cienkich, stożkowych igieł do mikroiniekcji, ciągnąc wypolerowane ogniowo szkła borokrzemianowe z żarnikiem za pomocą ściągacza do pipet. Następnie użyj żyletki lub cienkiej krawędzi kleszczy, aby przeciąć końcówki igieł, aby uzyskać ostre, kątowe końcówki do wstrzykiwań. Następnie umieść igły na pasku modeliny na szalce Petriego, aby chronić końcówki igieł.