Name: Dostarczanie wewnątrzprzewodowe do gruczołu sutkowego królika (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 30 s
Description: Naucz się techniki wewnątrzprzewodowego dostarczania roztworów do gruczołu sutkowego królika z wykorzystaniem obrazowania ultrasonograficznego. Metoda umożliwia lokalne podawanie terapeutyków i ocenę ich interakcji z tkanką gruczołową.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Autorzy dziękują za wsparcie z Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) od Breast Cancer Research Foundation i American Association for Cancer Research.

Procedury z wykorzystaniem zwierząt zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu Teksańskiego w Austin.
1. Przygotowanie przedoperacyjne
<ol>
	<li>Zapisz masę ciała każdego królika. Podobnie jak w przypadku wszystkich badań przedklinicznych, należy regularnie monitorować masę ciała zwierząt w celu oceny potencjalnej toksyczności.</li>
	<li>Przed znieczuleniem królika należy napełnić stożkową probówkę o pojemności 50 ml dostępnym w handlu żelem ultradźwiękowym i wirować z prędkością 500 x g przez 30 s; po zakończeniu wirowania w żelu nie powinno być widocznych pęcherzyków.</li>
	<li>Glikopironian podawać podskórnie w dawce 0,1 mg/kg mc., a acepromazynę domięśniowo w dawce 0,75 mg/kg. Odczekaj 15-20 minut, aż środek uspokajający zacznie działać, jednocześnie monitorując parametry życiowe i zachowanie. 
	UWAGA: Glikopirolan jest środkiem antycholinergicznym, który zapobiega bradykardii i zmniejsza wydzielanie z dróg oddechowych i przewodu pokarmowego. Acepromazyna jest środkiem uspokajającym, który służy jako premedykacja do znieczulenia.</li>
	<li>Podawać podskórnie 35 mg/kg ketaminy i 5 mg/kg ksylazyny jako środek znieczulający. Jednakże, gdy operator staje się bardziej doświadczony i może szybciej wykonać podawanie wewnątrzprzewodowe, należy zmniejszyć dawki leku do 15 mg/kg ketaminy i 3 mg/kg ksylazyny podskórnie; Skróci to czas znieczulenia i czas potrzebny zwierzęciu do powrotu do zdrowia po znieczuleniu.</li>
	<li>Sprawdzaj i dokumentuj tętno, SPO2, temperaturę, częstość oddechów i kolor błony śluzowej co 15 minut. Nałóż smar do oczu na obie oczy. 
	UWAGA: Tylko personel, który przeszedł odpowiednie szkolenie i został zatwierdzony przez IACUC swojej instytucji, powinien podawać lub monitorować znieczulenie. Stosowanie monitora znieczulenia weterynaryjnego może pomóc w uzyskaniu parametrów życiowych i jest zalecane. Monitor anestezjologii weterynaryjnej nie zastępuje jednak konieczności ręcznego sprawdzania zwierzęcia co 15 minut. Zapoznaj się z instrukcjami producenta, aby uzyskać informacje na temat prawidłowego użytkowania monitora weterynaryjnego.</li>
	<li>Sprawdź początek znieczulenia poprzez delikatne uszczypnięcie palca u nogi; królik powinien nie reagować przed kontynuacją.</li>
	<li>Ostrożnie ogolić ogonowy brzuch królika w okolicy trzeciej i czwartej pary strzyków pachwinowych.</li>
	<li>Po usunięciu większości włosów nałóż dostępny bez recepty krem do depilacji na ogolony obszar. Usuń krem po 10 minutach od aplikacji za pomocą wilgotnych ręczników papierowych zwilżonych ciepłą wodą. 
	UWAGA: Skóra królika jest bardzo delikatna/wrażliwa. Krem do depilacji należy stosować nie dłużej niż 10 minut. W rzeczywistości bezpieczniej jest wypróbować "miejsce testowe" po 5 minutach i pozostawić je na dłużej tylko wtedy, gdy miejsce testowe wskazuje, że potrzebny jest dłuższy okres czasu.</li>
	<li>Przetrzeć miejsce gazikiem nasączonym alkoholem, aby oczyścić miejsce wstrzyknięcia.</li>
	<li>Umieść królika na grzbiecie w korycie w kształcie litery V wyłożonym kocem z recyrkulacją ciepłej wody i wkładką chłonną.</li>
</ol>
2. Przygotowanie środka kontrastowego
<ol>
	<li>Rozpuścić niecelowany odczynnik kontrastowy zgodnie z instrukcjami producenta. Delikatnie pipetować w górę i w dół, aby wymieszać. 
	UWAGA: Środek kontrastowy stosowany w tym protokole jest stabilny w temperaturze pokojowej przez 4 - 6 godzin po rozpuszczeniu. Delikatnie kołysać fiolką między każdym pobraniem. 
	UWAGA: Wymagana objętość roztworu będzie zależeć od liczby kanałów, które mają zostać wstrzyknięte. Królik ma 4 otwory przewodowe na strzyk, a 0,2 ml roztworu wystarcza do wypełnienia jednego drzewa przewodowego dorosłego białego królika nowozelandzkiego (Oryctolaguscuniculus). W ten sposób do jednego gruczołu sutkowego można dostarczyć całkowitą objętość 0,8 ml.</li>
</ol>
3. Dostawa wewnątrzprzewodowa
<ol>
	<li>Zlokalizuj odpowiednie strzyki do wstrzyknięcia; zalecane są 3. i 4. para strzyków pachwinowych, ponieważ można je łatwo uwidocznić, gdy zwierzę znajduje się na grzbiecie.</li>
	<li>Załadować 0,2 ml sterylnego 0,9% soli fizjologicznej do 1 ml strzykawki tuberkulinowej Luer-lock za pomocą igły 22 G. Po umieszczeniu soli fizjologicznej w strzykawce należy prawidłowo zutylizować igłę 22 G i zastąpić ją sterylną igłą o rozmiarze 25G. Delikatnie przetrzyj obszar 85% alkoholem izopropylowym na gaziku.</li>
	<li>Trzymając skos igły do góry i strzykawkę równolegle do ciała zwierzęcia, włóż skos igły z boku smoczka i powoli wstrzyknij 0,1-0,2 ml soli fizjologicznej; pozwoli to na lepszą wizualizację otworów kanałowych.</li>
	<li>Umieścić 0,2 ml roztworu do wstrzykiwań w strzykawce tuberkulinowej Luer-lock o pojemności 1 ml.</li>
	<li>Delikatnie chwyć smoczek kciukiem i palcem wskazującym, a następnie lekko go unieś, aby ustawić go do wstrzyknięcia doprzewodowego; lupa oczna do noszenia na ciele może pomóc w wizualizacji otworów przewodowych.</li>
	<li>Utrzymując uniesioną pozycję smoczka, ostrożnie kanulować interesujący nas przewód za pomocą igły o końcówce 25 G.</li>
	<li>Po kannekulacji delikatnie przekręcić strzykawkę Luer-lock na piaście igły infuzyjnej z końcówką, aż do jej zablokowania.</li>
	<li>Podnieść smoczek i powoli wstrzykiwać roztwór, aby zminimalizować potencjalne uszkodzenia spowodowane przez szybko poruszający się płyn w przewodzie; w żadnym momencie nie powinno być oporu podczas wstrzykiwania roztworu.</li>
</ol>
4. Obrazowanie ultrasonograficzne
<ol>
	<li>Nałóż dużą ilość odwirowanego żelu ultradźwiękowego na skórę obszaru zainteresowania. Upewnij się, że w żelu nie ma pęcherzyków powietrza, ponieważ pogorszą one jakość obrazu.</li>
	<li>Ustaw głębokość obrazowania na 6 mm. Umieść przetwornik 21 MHz w kontakcie z żelem i zeskanuj obszar zainteresowania w trybie B. Obserwuj środek kontrastowy w skanowanym obszarze, w tym w otworze kanałowym i w całym kanale. 
	UWAGA: Te ustawienia zostały opracowane do użytku z określonym ultrasonografem fotoakustycznym. Więcej informacji można znaleźć w Tabeli materiałów. Może być konieczne dostosowanie mocy nadawania i głębokości obrazowania innych systemów obrazowania w celu optymalizacji wizualizacji gruczołu piersiowego.</li>
	<li>Usuń żel ultradźwiękowy ze skóry zwierzęcia za pomocą gaziku.</li>
</ol>
5. Opieka pooperacyjna
<ol>
	<li>Obserwuj miejsce wstrzyknięcia: nie powinno być żadnych śladów urazu okolicy strzyka lub otaczającej tkanki, a obrzęk w okolicy strzyka prawdopodobnie wskazuje na wstrzyknięcie poduszeczki tłuszczowej do sutka, a nie na udane wstrzyknięcie doprzewodowe.</li>
	<li>Umieść królika w pozycji mostkowej. W razie potrzeby podać dożylnie 0,2 mg / kg johimbiny do żyły ucha brzeżnego; Odwróci to działanie ksylazyny i pozwoli zwierzęciu szybciej dojść do siebie po znieczuleniu.</li>
	<li>Monitoruj królika co 15 minut przez cały okres rekonwalescencji, aż zwierzę stanie się czujne, zareaguje i utrzyma pozycję mostkową. 
	UWAGA: Ta procedura nie powinna powodować uszkodzenia tkanek ani obrzęku. W przypadku zaobserwowania zaczerwienienia lub obrzęku, należy podać dawkę meloksykamu 0,1-0,2 mg/kg PO, gdy zwierzę jest przytomne i może przyjmować leki doustnie. Skontaktuj się z personelem weterynaryjnym instytucji w celu uzyskania dalszych wskazówek.</li>
</ol>

<ol><li>Flanagan, M., Love, S., Hwang, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Status+of+Intraductal+Therapy+for+Ductal+Carcinoma+in+Situ%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Breast+Cancer+Rep%22%5BJournal%5D)">Status of Intraductal Therapy for Ductal Carcinoma in Situ.</a> Curr Breast Cancer Rep. 2 (2), 75-82 (2010).</li>
<li>Love, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Feasibility+Study+of+the+Intraductal+Administration+of+Chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Prevention+Research%22%5BJournal%5D)">A Feasibility Study of the Intraductal Administration of Chemotherapy.</a> Cancer Prevention Research. 6 (1), 51-58 (2013).</li>
<li>Stearns, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+and+Clinical+Evaluation+of+Intraductally+Administered+Agents+in+Early+Breast+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Preclinical and Clinical Evaluation of Intraductally Administered Agents in Early Breast Cancer.</a> Sci Transl Med. 3 (106), 106ra108(2011).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Safety+Parameters+of+the+Study+on+Intraductal+Cytotoxic+Agent+Delivery+to+the+Breast+before+Mastectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The Safety Parameters of the Study on Intraductal Cytotoxic Agent Delivery to the Breast before Mastectomy.</a> Chin J Cancer Res. 26 (5), 579-587 (2014).</li>
<li>Mahoney, M. E., Gordon, E. J., Rao, J. Y., Jin, Y., Hylton, N., Love, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraductal+Therapy+of+Ductal+Carcinoma+In+Situ%3A+a+Presurgery+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Breast+Cancer%22%5BJournal%5D)">Intraductal Therapy of Ductal Carcinoma In Situ: a Presurgery Study.</a> Clin Breast Cancer. 13 (4), 280-286 (2013).</li>
<li>Murata, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ductal+Access+for+Prevention+and+Therapy+of+Mammary+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Ductal Access for Prevention and Therapy of Mammary Tumors.</a> Cancer Res. 66 (2), 638-645 (2006).</li>
<li>Chun, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraductally+Administered+Pegylated+Liposomal+Doxorubicin+Reduces+Mammary+Stem+Cell+Function+In+the+Mammary+Gland+but+in+the+Long+Term%2C+Induces+Malignant+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res+Treat%22%5BJournal%5D)">Intraductally Administered Pegylated Liposomal Doxorubicin Reduces Mammary Stem Cell Function In the Mammary Gland but in the Long Term, Induces Malignant Tumors.</a> Breast Cancer Res Treat. 135 (1), 201-208 (2012).</li>
<li>Brock, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+HoxA1+by+Intraductal+Injection+of+siRNA+Lipidoid+Nanoparticles+Prevents+Mammary+Tumor+Progression+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">Silencing HoxA1 by Intraductal Injection of siRNA Lipidoid Nanoparticles Prevents Mammary Tumor Progression in Mice.</a> Sci Trans Med. 6 (217), 2172a2(2014).</li>
<li>Krause, S., Brock, A., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3938324/">Intraductal Injection For Localized Drug Delivery To The Mouse Mammary Epithelium.</a> J Vis Exp. (80), e50692(2013).</li>
<li>Brock, A., Goh, H. T., Yang, B., Yu, L., Li, H., Loh, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+Reprogramming%3A+A+New+Technology+Frontier+In+Pharmaceutical+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular Reprogramming: A New Technology Frontier In Pharmaceutical Research.</a> Pharm Res. 29 (1), 35-52 (2012).</li>
<li>Silverstein, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ductal+Carcinoma+In+Situ+of+the+Breast%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev+Med%22%5BJournal%5D)">Ductal Carcinoma In Situ of the Breast.</a> Annu. Rev Med. 51, 17-32 (2000).</li>
<li>Love, S. M., Barsky, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+of+the+Nipple+And+Breast+Ducts+Revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Anatomy of the Nipple And Breast Ducts Revisited.</a> Cancer. 101 (9), 1947-1957 (2004).</li>
<li>Virnig, B. A., Shamliyan, T., Tuttle, T. M., Kane, R. L., Wilt, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+Management+of+Ductal+Carcinoma+In+Situ+%28DCIS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence+Report%2FTechnology+Assessment%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and Management of Ductal Carcinoma In Situ (DCIS).</a> Evidence Report/Technology Assessment. , AHRQ Publication No. 09-E018 185(2009).</li>
<li>Mills, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examination+of+Duct+Physiology+in+the+Human+Mammary+Gland%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Examination of Duct Physiology in the Human Mammary Gland.</a> PLoS One. 11 (4), e0150653(2016).</li>
<li>King, B. L., Love, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Intraductal+Approach+to+the+Breast%3A+Raison+d%27Etre%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The Intraductal Approach to the Breast: Raison d'Etre.</a> Breast Cancer Res. 8 (2), 206(2006).</li>
<li>Bu, W., Xin, L., Toneff, M., Li, L., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentivirus+vectors+for+stably+introducing+genes+into+mammary+epithelial+cells+in+vivo+%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Lentivirus vectors for stably introducing genes into mammary epithelial cells in vivo .</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14, 401-404 (2009).</li>
<li>Lyons, W. R. <a target="_blank" href="http://journals.sagepub.com/doi/abs/10.3181/00379727-51-13952">The Direct Mammotrophic Action of Lactogenic Hormone.</a> Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 51 (2), 308-311 (1942).</li>
<li>Fiddler, T. J., Birkinshaw, M., Falconer, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+Of+Intraductal+Prolactin+On+Some+Aspects+of+the+Ultrastructure+and+Biochemistry+of+Mammary+Tissue+in+the+Pseudopregnant+Rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Effects Of Intraductal Prolactin On Some Aspects of the Ultrastructure and Biochemistry of Mammary Tissue in the Pseudopregnant Rabbit.</a> J Endocrinol. 49 (3), 459-469 (1971).</li>
<li>Falconer, I. R., Fiddler, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Intraductal+Administration+Of+Prolactin%2C+Actinomycin+D+and+Cycloheximide+on+Lipoprotein+Lipase+Activity+in+the+Mammary+Glands+of+Pseudopregnant+Rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Effects of Intraductal Administration Of Prolactin, Actinomycin D and Cycloheximide on Lipoprotein Lipase Activity in the Mammary Glands of Pseudopregnant Rabbits.</a> Biochim Biophys Acta. 218 (3), 508-514 (1970).</li>
<li>Singh, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+Molecular+Size+on+the+Retention+of+Polymeric+Nanocarrier+Diagnostic+Agents+in+Breast+Ducts%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of Molecular Size on the Retention of Polymeric Nanocarrier Diagnostic Agents in Breast Ducts.</a> Pharm Res. 29 (9), 2377-2388 (2012).</li>
<li>Jain, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+Ductal+Hyperplasia%3A+Interobserver+and+Intraobserver+Variability%5BTitle%5D)+AND+%22Mod+Pathol%22%5BJournal%5D)">Atypical Ductal Hyperplasia: Interobserver and Intraobserver Variability.</a> Mod Pathol. 24 (7), 917-923 (2011).</li>
<li>Betsill, W. L. Jr, Rosen, P. P., Lieberman, P. H., Robbins, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraductal+Carcinoma.+Long-term+Follow-up+After+Treatment+by+Biopsy+Alone%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Intraductal Carcinoma. Long-term Follow-up After Treatment by Biopsy Alone.</a> JAMA. 239 (18), 1863-1867 (1978).</li>
<li>Eusebi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+Follow-up+of+In+Situ+Carcinoma+of+the+Breast%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Diagn+Pathol%22%5BJournal%5D)">Long-term Follow-up of In Situ Carcinoma of the Breast.</a> Semin Diagn Pathol. 11 (3), 223-235 (1994).</li>
<li>Sanders, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Natural+History+Of+Low-Grade+Ductal+Carcinoma+In+Situ+Of+The+Breast+In+Women+Treated+By+Biopsy+Only+Revealed+Over+30+Years+Of+Long-Term+Follow-Up%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">The Natural History Of Low-Grade Ductal Carcinoma In Situ Of The Breast In Women Treated By Biopsy Only Revealed Over 30 Years Of Long-Term Follow-Up.</a> Cancer. 103 (12), 2481-2484 (2005).</li>
<li>Esserman, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addressing+Overdiagnosis+and+Overtreatment+in+Cancer%3A+A+Prescription+For+Change%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Addressing Overdiagnosis and Overtreatment in Cancer: A Prescription For Change.</a> Lancet Oncol. 15 (6), e234-e242 (2014).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Ta metoda dostarczania wewnątrzprzewodowego do gruczołu mlekowego królika może być stosowana do ultradźwięków, odczynników kontrastowych i wielu innych roztworów wodnych, w tym niezbędnych barwników i środków terapeutycznych. Wcześniejsze badania wykazały wewnątrzprzewodowe dostarczanie hormonów 17,18,19. W modelach gryzoni przeprowadzono wewnątrzprzewodowe dostarczanie kwasów nukleinowych8, chemioterapeu...

Wewnątrzprzewodowe dostarczanie środków terapeutycznych zostało zbadane na modelach gryzoni i we wczesnych fazach badań na ludziach3,4,5,6,11,12. Niedawne badanie fazy I wykazało bezpieczeństwo i wykonalność wewnątrzprzewodowej karboplatyny lub wewnątrzprzewodowej pegylowanej liposomalnej doksorubicyny u kobiet oczekujących na mastektomię w leczeniu raka inwazyjnego2.
Poprzednie protokoły dostarczania wewnątrzprzewodowego zostały opracowane dla gruczołów sutkowych myszy i szczurów6,7,8,9. Do celów badawczych przeprowadzono również wewnątrzprzewodowe iniekcje komórek nowotworowych i dostarczanie onkogenów do wektorów lentiwirusowych w modelach gryzoni13,14,15,16. Jednak idealny model in vivo procesu dostarczania wewnątrzprzewodowego powinien pozwolić na opracowanie nowych klas związków terapeutycznych i ułatwić ocenę przedkliniczną. Różnice anatomiczne między gryzoniami a ludźmi skomplikowały tłumaczenie tych badań.
W przeciwieństwie do myszy, u których każdy przewód kończy się osobnym smoczkiem, ludzka pierś składa się z 5 do 9 niezależnych systemów kanałowych, z których każdy ma osobny otwór kończący się na smoczku. Gruczoły sutkowe królika posiadają cztery niezależne systemy przewodów, z których każdy jest oddzielnie dostępny przez jeden z czterech otworów w jednym smoczku. Model królika bardziej odpowiada anatomii człowieka i pozwala na badanie wewnątrzprzewodowego dostarczania leków w bardziej odpowiednim kontekście.
Tutaj używamy dwóch technik do oceny dostarczania wewnątrzprzewodowego. Jednoczesne podanie barwnika witalnego pozwala na wizualizację przez skórę i zapewnia proste i szybkie potwierdzenie metody. W przypadku niektórych zastosowań preferowane może być mapowanie kanałów w wyższej rozdzielczości. Przedstawiamy tutaj protokół obrazowania ultrasonograficznego przewodów poprzez doprzewodowe podanie niecelowanego odczynnika kontrastowego.

<table><tbody><tr><td>MicroMarker niecelowany odczynnik kontrastowy</td><td>VisualSonics</td><td>VS-11694</td><td></td></tr><tr><td>Luer Lock 1 mL Strzykawki</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Glikopirolan 0,2 mg / ml</td><td>Wedgewood Compounding Pharmacy</td><td>GLYCOP-INJ013VC</td><td>6-miesięczny okres przydatności do spożycia, zapasy mogą być ograniczone.</td></tr><tr><td>Siarczan atropiny 0,5 mg/ml</td><td>Animal Health International</td><td>15320764</td><td>Jeśli glikopirolan jest niedostępny. Nie stosować w skojarzeniu z glikopironianem.</td></tr><tr><td>Ketamina HCL 100 mg/ml</td><td>Animal Health International</td><td>21250699</td><td><a href="http://www.animalhealthinternational.com/">http://www.animalhealthinternational.com/</a></td></tr><tr><td>Acepromazyna 10 mg/ml</td><td>Animal Health International</td><td>17640541</td><td></td></tr><tr><td>Ksylazyna 20 mg/ml</td><td>Animal Health International</td><td>20101547</td><td></td></tr><tr><td>Johimbina 0,2 mg/ml</td><td>Zwierzę Health International</td><td>14588965</td><td></td></tr><tr><td>Krem do depilacji Veet</td><td></td><td></td><td>Sensitive skin solution. Dostępne u lokalnych sprzedawców.</td></tr><tr><td>Igły infuzyjne z końcówką</td><td>Sai Infusion Technology</td><td>B14-50</td><td><a href="http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles">http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles</a></td></tr><tr><td>Pulsoksymetr weterynaryjny</td><td>EdanUSA</td><td>VE-H100B</td><td><a href="http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html">http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html</a></td></tr><tr><td>Pompa ciepłej wody</td><td>Gaymar</td><td>TP700</td><td></td></tr><tr><td>Koc z ciepłą wodą</td><td>Animal Health International</td><td>21232696</td><td>Maxi-Therm Lite Podkładki ocieplające</td></tr><tr><td>System ultradźwiękowy</td><td>VisualSonics</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr></tbody></table>

dostarczanie wewnątrzprzewodowe do gruczołu sutkowego królika

Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland

Miejscowe wewnątrzprzewodowe leczenie raka piersi oferuje potencjalne korzyści, w tym skuteczne dostarczanie do guza oraz zmniejszenie toksyczności ogólnoustrojowej i działań niepożądanych1,2,3,4,5,6,7. Pozostaje jednak kilka wyzwań, zanim zabiegi te będą mogły być stosowane na szerszą skalę. Opracowanie i walidacja wewnątrzprzewodowych środków terapeutycznych w odpowiednim modelu zwierzęcym ułatwia opracowanie wewnątrzprzewodowych strategii terapeutycznych dla pacjentów. Podczas gdy gruczoł sutkowy myszy jest szeroko stosowany jako modelowy system rozwoju sutka i nowotworzenia, anatomia różni się od gruczołu ludzkiego. Większy model zwierzęcy, taki jak królik, może służyć jako lepszy model dla struktury gruczołu mlekowego i wewnątrzprzewodowego rozwoju terapeutycznego. W przeciwieństwie do myszy, u których dziesięć drzew przewodowych jest rozmieszczonych przestrzennie wzdłuż osi ciała, a każde z nich kończy się osobnym smoczkiem, gruczoł sutkowy królika bardziej przypomina gruczoł ludzki, z wieloma nakładającymi się na siebie systemami przewodowymi, które wychodzą przez oddzielne otwory w jednym smoczku. W tym miejscu przedstawiamy małoinwazyjne metody dostarczania odczynników bezpośrednio do przewodu mlecznego królika oraz wizualizacji samego porodu za pomocą obrazowania ultrasonograficznego o wysokiej rozdzielczości.

W niniejszej pracy wykazujemy, że wewnątrzprzewodowe podawanie środków kontrastowych do przewodów mlecznych królika może zostać przeprowadzone bez uszkodzenia tkanek (Rysunek 2). U królików cztery oddzielne systemy przewodowe zbiegają się w jednym sutku, dzięki czemu można uzyskać do nich dostęp i obrazować je indywidualnie za pomocą tej metody. Poszczególne ujścia przewodów są łatwo widoczne; zwróć uwagę na grot strzałki wskazujący drugie ujście przewodu sąsiadujące z ka...

Tutaj opisujemy technikę miejscowego dostarczania odczynników do gruczołu sutkowego królika poprzez wstrzyknięcie doprzewodowe. Dodatkowo opisujemy protokół wizualizacji i potwierdzenia porodu za pomocą wysokorozdzielczego obrazowania ultrasonograficznego środków kontrastowych.

Dostarczanie wewnątrzprzewodowe do gruczołu sutkowego królika

Localized intraductal treatments for breast cancer offer potential advantages, including efficient delivery to the tumor and reduced systemic toxicity and ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest dostarczenie roztworów wodnych do przewodu mlecznego królika oraz wizualizacja wewnątrzprzewodowej podaży za pomocą obrazowania ultradźwiękowego. Metoda ta może pomóc w odpowiedzi na kluczowe pytania w dziedzinie biologii piersi, takie jak sposób, w jaki preparaty terapeutyczne wchodzą w interakcje z środowiskiem przewodu mlecznego w porównaniu z innymi miejscami podania. Główną zaletą tej techniki jest możliwość lokalnego podania środka kontrastowego do obrazowania lub wszelkich potencjalnych preparatów terapeutycznych do oceny bezpośrednio do tkanki, w której powstają zmiany w piersiach.Technikę zaprezentuje Amelia Clark, technik w moim laboratorium. Aby rozpocząć tę procedurę, należy ostrożnie ogolić tylną część brzucha znieczulonego królika w obszarze wokół trzeciej i czwartej pary sutków pachwinowych. Po usunięciu większości owłosienia należy nałożyć krem do depilacji na ogolone miejsca, a po 10 minutach od aplikacji usunąć krem za pomocą wilgotnego ręcznika papierowego zwilżonego ciepłą wodą.Następnie przemyj obszar gazikami nasączonymi alkoholem, aby oczyścić miejsce wstrzyknięcia. Umieść królika na grzbiecie w rynnie w kształcie liter

intraductal-delivery-to-the-rabbit-mammary-gland

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Ten film opisuje technikę iniekcji wewnątrzprzewodowych, w której dostarczamy mieszankę iniekcyjną do przewodów mysich gruczołów sutkowych.

Iniekcja doprzewodowa: dostarczanie mieszanki iniekcyjnej do przewodów gruczołu sutkowego myszy

W tym filmie opisujemy technikę podawania interesującego roztworu do przewodu sutkowego królika i potwierdzamy dostarczenie za pomocą wysokorozdzielczego obrazowania ultrasonograficznego środków kontrastowych.

Wstrzyknięcie wewnątrzprzewodowe królika: miejscowe dostarczanie roztworu będącego przedmiotem zainteresowania do gruczołu sutkowego królika

Ten film opisuje technikę transferu zarodków do jajowodu samicy biorcy za pomocą laparoskopii. Umożliwia przebudowę zarodka u królików podczas jego migracji przez jajowód, ostatecznie pomagając w udanej implantacji. Technika ta może być również stosowana w przypadku przechowywanych zarodków z dobrą wydajnością.

Transfer zarodka do królika: procedura transferu zarodków pod kontrolą laparoskopii do jajowodu owulującego biorcy modelu królika

Opisano protokół nieinwazyjnego wewnątrzprzewodowego dostarczania wodnych odczynników do gruczołu sutkowego myszy. Metoda wykorzystuje miejscowe wstrzyknięcie do sutków gruczołów sutkowych, celując konkretnie w przewody sutkowe. Technika ta można dostosować do różnych związków, w tym siRNA, chemioterapeutyków i małych cząsteczek.

Wstrzyknięcie doprzewodowe w celu miejscowego dostarczania leku do mysiego gruczołu sutkowego

Ten artykuł opisuje i demonstruje podawanie szczepionek donosowych oraz pobieranie mleka od królików w okresie laktacji (Oryctolagus cuniculus) jako sposób oceny odporności błony śluzowej w translacyjnie odpowiednim modelu immunizacji matki.

Immunizacja donosowa i pobieranie mleka w badaniach immunizacji matek u białych królików nowozelandzkich (Oryctolagus cuniculus)

Opisano metodę doprzewodowego wstrzykiwania odczynników do roztworu ablacyjnego na bazie etanolu do mysiego drzewa sutkowego do obrazowania in vivo i zapobiegania rakowi piersi. Wstrzyknięcie bezpośrednio do otworu brodawki sutkowej pozwala na celowanie w komórki nabłonka sutka przy minimalnym uszkodzeniu tkanek ubocznych.

Dostarczanie wewnątrzprzewodowe i wizualizacja rentgenowska roztworu ablacyjnego na bazie etanolu w profilaktyce i leczeniu miejscowym raka piersi w modelach mysich

Opisano procedurę dostarczania chemicznego roztworu ablacyjnego do drzewa przewodowego sutka szczura w celu profilaktycznego leczenia raka piersi pod kontrolą obrazu. Komórki nabłonka sutka mogą być celowane przy minimalnym uszkodzeniu tkanek pobocznych poprzez kaniulację bezpośrednio do otworu brodawki sutkowej i doprzewodową infuzję 70% roztworu ablacyjnego na bazie etanolu.

Wizualizacja rentgenowska wewnątrzprzewodowego leczenia ablacyjnego opartego na etanolu w profilaktyce raka piersi w modelach szczurzych

Obecny protokół opisuje doprzewodową iniekcję wektorów wirusowych przez smoczek w celu dostarczenia interesujących genów do komórek nabłonka sutka.

In vivo (in vivo) Dostarczanie genów do komórek nabłonka sutka myszy poprzez wstrzyknięcie doprzewodowe sutka

W protokole tym przedstawiono procedurę infuzji pod kontrolą obrazu do systemu drzew przewodowych gruczołu sutkowego królika. Demonstrujemy kontrolowaną infuzję rentgenowskiego środka kontrastowego zawierającego roztwór ablacyjny na bazie etanolu do wszystkich otworów strzyków za pomocą obrazowania fluoroskopowego w czasie rzeczywistym.

Wizualizacja rentgenowska wewnątrzprzewodowego wlewu ablacyjnego na bazie etanolu w profilaktyce raka piersi w modelach króliczych

Ten protokół opisuje skalowalne podejście do wewnątrzkanalikowego przesiewania CRISPR, umożliwiające równoległe in vivo badania nad wyłączeniem genów i aktywacją w gruczołach piersiowych myszy.

Równoległe in vivo badanie wyłączania i aktywacji genów w gruczołach piersiowych myszy

Naucz się techniki wewnątrzprzewodowego dostarczania roztworów do gruczołu sutkowego królika z wykorzystaniem obrazowania ultrasonograficznego. Metoda umożliwia lokalne podawanie terapeutyków i ocenę ich interakcji z tkanką gruczołową.

Dostarczanie wewnątrzprzewodowe do gruczołu sutkowego królika

Przeglądaj więcej filmów