Name: Metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 7 s
Description: Poznaj metodę oceny śrub transpedikularnych w chirurgii kręgosłupa przy użyciu modelu in vivo u świń. Technika umożliwia porównanie długoterminowej stabilności implantów.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez grant (CNUH-BRI-2012-02-005) ufundowany przez Instytut Badań Biomedycznych Narodowego Szpitala Uniwersyteckiego w Chonbuk (CNUH-BRI), Republika Korei.

Instytucjonalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Zwierząt Narodowego Uniwersytetu Chonbuk zatwierdził to badanie. Traktowanie, użytkowanie i obchodzenie się ze zwierzętami było zgodne ze wszystkimi wytycznymi i zasadami. Utrzymać temperaturę w sali operacyjnej w temperaturze 24 °C.
1. Znieczulenie
<ol>
	<li>Miniaturowe świnie w wieku 12 miesięcy należy zaaklimatyzować w jednostce doświadczalnej przez co najmniej tydzień. Wykonaj badanie kliniczne mierzące częstość oddechów, tętno i temperaturę ciała. Nie należy karmić każdej miniaturowej świni przez 12 godzin przed zabiegiem znieczulenia.</li>
	<li>Wstrzyknąć atropinę (0,05 mg/kg) i ketaminę (20 mg/kg)/ksylaksynę (2 mg/kg) w boczną okolicę mięśnia szyjnego, za uchem, w celu premedykacji.</li>
	<li>Po sedacji szczelnie przyłóż gumkę wokół podstawy ucha i wyczyść ucho miejscowym alkoholem.</li>
	<li>Umieść plastikowy cewnik nad igłą w żyle usznej i zdejmij gumkę. Upewnij się, że cewnik jest prawidłowo umieszczony. Przepłucz cewnik heparynizowaną solą fizjologiczną i przymocuj taśmą.</li>
	<li>W celu intubacji dotchawiczej umieść miniaturową świnię w pozycji leżącej mostka. Z pomocą asystenta przytrzymaj szczękę świni odpowiednią chustą i otwórz jej pysk.
	<ol>
		<li>Przełóż końcówkę laryngoskopu do jamy gardłowej, aby przemieścić nagłośnię z podniebienia miękkiego. Użyj końcówki ostrza laryngoskopu, aby uwidocznić struny głosowe i wsunąć rurkę dotchawiczą do tchawicy podczas wydechu.</li>
		<li>Wyczuj swobodny przepływ powietrza w celu prawidłowej intubacji i sprawdź osłuchiwanie klatki piersiowej pod kątem dźwięków oddechowych zarówno po lewej, jak i prawej stronie miniaturowej świni.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Napełnij mankiet odpowiednią ilością powietrza z rurki dotchawiczej powietrzem za pomocą strzykawki o pojemności 10 ml i przymocuj rurkę do pyska za pomocą taśmy klejącej.</li>
	<li>Podać 2,0% stężenie izofluranu, wziewnego środka znieczulającego do przedłużonego znieczulenia, przez rurkę intubacyjną dotchawiczą. Przetestuj odruchy rogówkowe i powiekowe, aby potwierdzić znieczulenie i użyj maści na oczy, aby zapobiec wysuszeniu.</li>
	<li>Monitoruj układ sercowo-naczyniowy, układ oddechowy i temperaturę ciała podczas znieczulenia co najmniej co 5 minut, aż miniaturowa świnia wyzdrowieje.</li>
	<li>30 minut przed operacją kręgosłupa należy powoli stosować 30 mg/kg cefazoliny dożylnie, antybiotyków cefalosporynowych 1. generacji.</li>
	<li>Podawać 5 - 10 ml/kg/h ciepłej (37 °C) soli fizjologicznej za pomocą linii dożylnej w celu utrzymania homeostazy i dostarczyć 50 μg/kg/min fentanylu w celu opanowania bólu.</li>
	<li>Po operacji kręgosłupa należy wykonać ekstubację, gdy widoczny jest silny odruch połykania.</li>
	<li>Zabierz miniaturową świnię do pokoju i monitoruj, aż dojdzie do siebie po znieczuleniu. Zapewnij jedzenie i wodę, gdy miniaturowa świnka jest w pełni przytomna.</li>
	<li>Stosować antybiotyk enrofloksacyny w dawce 3 mg/kg z 4,4 mg/kg karprofenu dziennie w celu kontroli bólu przez pierwsze 3 dni.</li>
	<li>Monitoruj świnię codziennie, aż do usunięcia szwów.</li>
</ol>
2. Chirurgia kręgosłupa
<ol>
	<li>transpedikularne i systemy stabilizatorów tylnych należy sterylizować w autoklawie, postępując zgodnie z wytycznymi producenta.</li>
	<li>Ogol grzbiet miniaturowej świni, około 10 cm od środka do lewej lub prawej strony, używając golarki, gdy świnia jest w pozycji leżącej. Oczyść skórę roztworem jodu powidonu i 70% alkoholem.</li>
	<li>Wykonaj podłużne nacięcie linii środkowej od drugiego wyrostka kolczystego kręgosłupa lędźwiowego do pierwszego środkowego grzebienia krzyżowego za pomocą skalpela. Wypreparuj tkankę podskórną i powięź do końca wyrostków kolczystych.</li>
	<li>Podnieś mięśnie przykręgosłupowe podskórnie od leżących poniżej blaszek za pomocą windy Cobba. Wypreparuj wzdłuż wyrostka kolczystego i blaszki ograniczonej do stawów międzywyrostkowych.</li>
	<li>Otwórz powierzchowną korę punktu wejścia (która jest nieco gorsza od wyrostka sutkowego od L3 do L5 po obu stronach) za pomocą zadzioru lub rongeur.</li>
	<li>Włóż kołek prowadzący w otwartym miejscu, równolegle do górnej płyty końcowej i pod kątem 20° do wyrostka kolczystego. Zdefiniuj idealny punkt wyjścia za pomocą ramienia C lub przenośnego tylno-przedniego/bocznego zdjęcia rentgenowskiego.</li>
	<li>Włóż sondę pedikularną do 25 mm zgodnie z promieniowaniem rentgenowskim. Potwierdzić pełną trajektorię śródkostną za pomocą badania palpacyjnego szypułki i ciała za pomocą urządzenia do sondowania szypułkowego.</li>
	<li>Włóż sześć pedikularnych do przygotowanej pedikuły od L3 do L5, aż będzie dobrze osadzony. Skieruj boczny otwór główki implantu w żądanym kierunku i wyrównaj pozycję poziomą z trajektorią pręta.</li>
	<li>Włóż odpowiednio dwa pręty po obu stronach pedikularnych. Włóż tuleję i nakrętkę na pedikularnej za pomocą uniwersalnego uchwytu.</li>
	<li>Luźno dokręć nakrętkę za pomocą prostego klucza nasadowego i mocno dokręć nakrętkę za pomocą klucza dynamometrycznego.</li>
	<li>Potwierdź położenie pedikularnych za pomocą przenośnych tylno-przednich/bocznych promieni rentgenowskich. 
	UWAGA: Poczekaj, aż miniaturowa świnia się obudzi i sprawdź wzorce chodu i funkcję motoryczną tylnej kończyny, aby ustalić, czy śruba nie została źle wszczepiona.</li>
	<li>Przepłukać miejsce operacji 3 litrami soli fizjologicznej za pomocą strzykawki do irygacji gruszki z odsysaniem.</li>
	<li>Umieść silikonowy drenaż w miejscu operacji i wyjmij silikonową końcówkę. Zamknij mięśnie przykręgosłupowe i podskórne za pomocą wchłanialnych szwów metrycznych 1,0. Zamknij skórę za pomocą niewchłanialnych szwów nylonowych o grubości 2,0 metrycznej.</li>
	<li>Zdezynfekuj miejsce szwu jodonem powidonu i nałóż opatrunek za pomocą wysterylizowanej gazy i taśmy.</li>
</ol>
3. Procedura zbioru
<ol>
	<li>Po 12 tygodniach od operacji wstrzyknąć ksylazynę (2 mg/kg) i ketaminę (10 mg/kg) w boczną okolicę mięśni szyjnych, za uchem, w celu premedykacji.</li>
	<li>Po sedacji podać 15 mg/kg KCl bezpośrednio do cewnika do żył usznych w celu eutanazji.</li>
	<li>Wykonaj podłużne nacięcie linii środkowej w miejscu poprzedniej zmiany bliznowatej po operacji. Rozwiń tkanki miękkie i mięśnie przykręgosłupowe.</li>
	<li>Odsłoń wyrostek kolczysty kolców lędźwiowych, blaszki, pręty, nakrętki i wyrostki poprzeczne od L3 do L5.</li>
	<li>Odkręć nakrętki za pomocą klucza dynamometrycznego i prętów. Wytnij przestrzeń między tarczami L2-3 i L5-S1 za pomocą piły oscylacyjnej.</li>
	<li>Wypreparuj obie strony środkowej i przedniej części kręgosłupa L3-5 za pomocą windy Cobba i kleszczy wieżowych. Po zbiorach, jeśli kręgosłup nie może być natychmiast przetestowany, zawiń go w gazę nasączoną solą fizjologiczną i przechowuj w temperaturze -20 °C.</li>
</ol>

<ol><li>Greenfield, R. T., Grant, R. E., Bryant, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pedicle+screw+fixation+in+the+management+of+unstable+thoracolumbar+spine+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Orthop+Rev%22%5BJournal%5D)">Pedicle screw fixation in the management of unstable thoracolumbar spine injuries.</a> Orthop Rev. 21 (6), 701-706 (1992).</li>
<li>Upasani, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pedicle+screw+surface+coatings+improve+fixation+in+nonfusion+spinal+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Pedicle screw surface coatings improve fixation in nonfusion spinal constructs.</a> Spine. 34 (4), 335-343 (2009).</li>
<li>Halvorson, T. L., Kelley, L. A., Thomas, K. A., Whitecloud, T. S., Cook, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+bone+mineral+density+on+pedicle+screw+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Effects of bone mineral density on pedicle screw fixation.</a> Spine. 19 (21), 2415-2420 (1994).</li>
<li>Weinstein, J. N., Spratt, K. F., Spengler, D., Brick, C., Reid, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+pedicle+fixation%3A+reliability+and+validity+of+roentgenogram-based+assessment+and+surgical+factors+on+successful+screw+placement%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Spinal pedicle fixation: reliability and validity of roentgenogram-based assessment and surgical factors on successful screw placement.</a> Spine. 13 (9), 1012-1018 (1988).</li>
<li>Fini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+assessment+of+the+bone-screw+interface+after+insertion+of+uncoated+and+hydroxyapatite-coated+pedicular+screws+in+the+osteopenic+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Biological assessment of the bone-screw interface after insertion of uncoated and hydroxyapatite-coated pedicular screws in the osteopenic sheep.</a> J Biomed Mater Res A. 66 (1), 176-183 (2003).</li>
<li>Kim, D. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Titanium-Coated+Pedicle+Screws%3A+In+Vivo+Porcine+Lumbar+Spine+Model%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Titanium-Coated Pedicle Screws: In Vivo Porcine Lumbar Spine Model.</a> World Neurosurg. 91, 163-171 (2016).</li>
<li>Upasani, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pedicle+screw+surface+coatings+improve+fixation+in+nonfusion+spinal+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Pedicle screw surface coatings improve fixation in nonfusion spinal constructs.</a> Spine. 34 (4), 335-343 (2009).</li>
<li>Smit, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+a+quadrupted+as+an+in+vivo+model+for+the+study+of+the+spine-biomechanical+considrations%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">The use of a quadrupted as an in vivo model for the study of the spine-biomechanical considrations.</a> Eur Spine J. 11 (2), 137-144 (2002).</li>
<li>Aldini, N. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pedicular+fixation+in+the+osteoporotic+spine%3A+a+pilot+in+vivo+study+on+long-term+ovariectomized+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Pedicular fixation in the osteoporotic spine: a pilot in vivo study on long-term ovariectomized sheep.</a> J Orthop Res. 20 (6), 1217-1224 (2002).</li>
<li>Fini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+assessment+of+the+bone-screw+interface+after+insertion+of+uncoated+and+hydroxyapatite-coated+pedicular+screws+in+the+osteopenic+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Biological assessment of the bone-screw interface after insertion of uncoated and hydroxyapatite-coated pedicular screws in the osteopenic sheep.</a> J Biomed Mater Res A. 66 (1), 176-183 (2003).</li>
<li>Branemark, R., Ohrnell, L. O., Skalak, R., Carlsson, L., Branemark, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+characterization+of+osseointegration%3A+an+experimental+in+vivo+investigation+in+the+beagle+dog%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Biomechanical characterization of osseointegration: an experimental in vivo investigation in the beagle dog.</a> J Orthop Res. 16 (1), 61-69 (1998).</li>
<li>McLain, R. F., Yerby, S. A., Moseley, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+morphometry+of+L4+vertebrae%3A+comparison+of+large+animal+models+for+the+human+lumbar+spine%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Comparative morphometry of L4 vertebrae: comparison of large animal models for the human lumbar spine.</a> Spine. 27 (8), E200-E206 (2002).</li>
<li>Giavaresi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+preclinical+evaluation+of+the+influence+of+osteoporosis+on+the+anchorage+of+different+pedicle+screw+designs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">In vivo preclinical evaluation of the influence of osteoporosis on the anchorage of different pedicle screw designs.</a> Eur Spine J. 20 (8), 1289-1296 (2011).</li>
<li>Hasegawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydroxyapatite-coating+of+pedicle+screws+improves+resistance+against+pull-out+force+in+the+osteoporotic+canine+lumbar+spine+model%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+J%22%5BJournal%5D)">Hydroxyapatite-coating of pedicle screws improves resistance against pull-out force in the osteoporotic canine lumbar spine model: a pilot study.</a> Spine J. 5 (3), 239-243 (2005).</li>
<li>Smorgick, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-+versus+multilevel+fusion+for+single-level+degenerative+spondylolisthesis+and+multilevel+lumbar+stenosis%3A+four-year+results+of+the+spine+patient+outcomes+research+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Single- versus multilevel fusion for single-level degenerative spondylolisthesis and multilevel lumbar stenosis: four-year results of the spine patient outcomes research trial.</a> Spine. 38 (10), 797-805 (2013).</li>
<li>Busscher, I., Ploegmakers, J. J., Verkerke, G. J., Veldhuizen, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+anatomical+dimensions+of+the+complete+human+and+porcine+spine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">Comparative anatomical dimensions of the complete human and porcine spine.</a> Eur Spine J. 19 (7), 1104-1114 (2010).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia w związku z tym artykułem.

Ocena transpedikularnych w kręgosłupie świni wymaga dużo czasu i wysiłku. Po pierwsze, miniaturowa świnia jest dużym zwierzęciem. Do opieki nad zwierzętami i znieczulenia badacz potrzebuje specjalistycznego protokołu. Po drugie, chirurgia powinna utrzymywać środowisko podobne do tego, jakie ma miejsce w chirurgii ludzkiej. Celem oceny pedikularnych w kręgosłupie świni jest opracowanie skutecznej, którą można zastosować u ludzi. Po trzecie, ocena długoterminowej stabilności transpedikularnych wymaga około trzech miesięcy ...

Transpedicular screwation jest złotym standardem leczenia zwyrodnieniowego kręgosłupa lędźwiowego i pękającego złamania, ponieważ obejmuje trzy kolumny kręgosłupa i osiąga stabilizację1,2. Jednak większość pacjentów, którzy przechodzą taką operację, ma również osteoporozę3,4. W wielu badaniach oceniano siłę mocowania i stan osteointegracji transpedikularnych, ponieważ poluzowanie obecnie stosowanych pedikularnych zgłaszano u pacjentów z osteoporozą5,6.
Kręgosłup świni jest podobny do kręgosłupa ludzkiego pod względem wielkości. Jest tańszy w porównaniu do modelu naczelnych7. Co więcej, badanie mechaniczne in vivo wykazało, że kręgosłup czworonożnej świni jest zasadniczo obciążony w taki sam sposób, jak kręgosłup ludzki kręgosłup8, dlatego wielu badaczy używa kolców świń do badań nad zapobieganiem poluzowaniu się szypułkowej. Jednak badanie pedikularnych w kręgosłupie świni zajmuje kilka miesięcy, ponieważ określenie długoterminowej stabilności pedikularnych wymaga czasu. Aby porównać różne rodzaje w trzonie kręgu, konieczne jest włożenie w podobnych pozycjach. Dlatego badacze powinni być dobrze zaznajomieni z odpowiednimi technikami znieczulenia, standardowymi protokołami chirurgicznymi i procedurami pobierania plonów przed wykonaniem jakichkolwiek eksperymentów. Tutaj opisujemy szczegółową metodę znieczulenia, chirurgii i zbioru w celu oceny mocowania pedikularnej przy użyciu modelu kręgosłupa świni, w tym obrazowania ex vivo, histologii i testów wytrzymałościowych.

<table><tbody><tr><td>Miniaturowa świnia</td><td>OrientBio</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Jeil A04900241 farmaceutyczny</td><td></td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Plastikowy cewnik nad igłą</td><td>BD</td><td>REF382412</td><td>Utrzymanie linii dożylnej</td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Yuhan</td><td>A04502441</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Ksylazyna</td><td>Bayer Korea</td><td>A00800071</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Laryngoskop</td><td>Karl storz</td><td></td><td>Intubacja</td></tr><tr><td>Rurka dotchawicza</td><td>Covidien</td><td></td><td>Intubacja</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>JW pharmaceutical Co</td><td>A02104781</td><td>Anestezjologia</td></tr><tr><td>Maść do oczu</td><td>Hanlim pharma</td><td>A37851721</td><td>Ochrona oka świni</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>Donga pharma</td><td>A01503951</td><td>Antybiotyki</td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna</td><td>JW pharmaceutical Co</td><td>A02151392</td><td>Utrzymanie homeostazy płynów</td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Hana pharm</td><td>C03200032</td><td>Kontrola bólu</td></tr><tr><td>Enrofloksacyna</td><td>Bayer</td><td>93106-60-6&nbsp;</td><td>antybiotyki</td></tr><tr><td>Morfina</td><td>Myungmoon pharma</td><td>C03700091</td><td>Kontrola bólu</td></tr><tr><td>Meloksykam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>A07600711</td><td>Antybiotyki</td></tr><tr><td>Powidon-jod</td><td>Hyundai pharma</td><td></td><td>Opatrunek na rany</td></tr><tr><td>Skalpel rozmiar ostrza 15</td><td>Braun</td><td>&nbsp; I1 BB515</td><td>Nacięcie skóry</td></tr><tr><td>Winda Cobba</td><td>Codman</td><td>65-2546</td><td>Rozwarstwienie zadziorów</td></tr><tr><td></td><td>mięśniowych Medtronic</td><td></td><td>Wykonanie punktu początkowego</td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Aesculap</td><td>FO515R</td><td>Wykonanie punktu początkowego</td></tr><tr><td>Sworzeń prowadzący (drut K)</td><td>CE</td><td>01067803</td><td>Prowadzenie trajektorii</td></tr><tr><td>Ramię C</td><td>GE</td><td>OEC 9800 plus</td><td>Prowadzenie trajektorii</td></tr><tr><td>Przenośny aparat rentgenowski</td><td>Siemens</td><td>Mobile XP hybrydowy</td><td>Prowadzenie trajektorii</td></tr><tr><td>Sonda pedikularna</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-02-01</td><td>Prowadzenie trajektorii</td></tr><tr><td>Sonda pedikularna</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-03-01</td><td>Prowadzenie trajektorii</td></tr><tr><td>Śruba pedikularna</td><td>OtisBiotech</td><td>MS-40025</td><td></td></tr><tr><td>Systemy stabilizacji tylnej</td><td>OtisBiotech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rod&nbsp;</td><td>OtisBiotech</td><td>ROD-60140</td><td>Sztywne mocowanie między</td></tr><tr><td>Uchwyt uniwersalny</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-08-01</td><td>Do mocowania do pręta</td></tr><tr><td>Klucz nasadowy prosty</td><td>OtisBiotech</td><td>SPI-06-01</td><td>Do mocowania do</td></tr><tr><td>pręta Klucz dynamometryczny z licznikiem</td> prętów <td>OtisBiotech</td><td>SPI-07-01</td><td>Do mocowania do pręta</td></tr><tr><td>Strzykawka do irygacji bańki</td><td>Hyupsug medical</td><td>HS-IR-140</td><td>Irygacja</td></tr><tr><td>Drenaż silikonowy</td><td>Sewon medyczny</td><td>2205-006</td><td>Do odprowadzania płynu w miejscu operacyjnym</td></tr><tr><td>3.0 metryczny szew wchłanialny</td><td>Ethicon</td><td>BA1673H</td><td>Szew mięśniowy</td></tr><tr><td>2.0 metryczny niewchłanialny nylonowy szew</td><td>Ethicon</td><td>W1626T</td><td>Szew do skóry</td></tr><tr><td>Gaza</td><td>Kingphar Korea</td><td>KP120-06</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td>Hanlim pharma</td><td>645301221</td><td>Eutanazja Piła</td></tr><tr><td>oscylacyjna</td><td>Zimmer</td><td></td><td>Harvest kręgosłup</td></tr><tr><td>Kleszcze wieżowe</td><td>Aesculap</td><td>BF461R</td><td>Kręgosłup żniwny</td></tr></tbody></table>

metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo

An Anesthesia, Surgery, and Harvest Method for the Evaluation of Transpedicular Screws Using an In Vivo Porcine Lumbar Spine Model

Mocowanie śrubą pedikularną jest złotym standardem w leczeniu chorób kręgosłupa. Jednak wiele badań donosiło o problemie poluzowania pedikularnych po operacji kręgosłupa, co jest poważnym problemem. Aby rozwiązać ten problem, zbadano różne rodzaje pedikularnych w celu zidentyfikowania tych o dobrej sile mocowania i osteointegracji w kości kręgosłupa. Kręgosłup świni jest dobrą alternatywą dla ludzkiego kręgosłupa w ocenie pedikularnych ze względu na rozmiar anatomiczny, właściwości mechaniczne i koszt. Chociaż kilka badań wykazało, że pedikularne są skuteczne w modelu świni, żadne badanie nie opisało szczegółowych protokołów oceny pedikularnej przy użyciu modelu świni. W tym miejscu opisujemy szczegółową metodę oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo. Podane tutaj szczegóły techniczne dotyczące znieczulenia, chirurgii kręgosłupa i zbioru będą ułatwione w ocenie modelu mocowania śrubowego transpedikularnego.

W niniejszym dokumencie opisano szczegółowy protokół znieczulenia, operacji i pobierania próbek do oceny śrub transpedikularnych z wykorzystaniem modelu in vivo odcinka lędźwiowego kręgosłupa świni. Protokół ten nadaje się do szeregu analiz następczych, w tym do badań mechanicznych (Rysunek 1), ilościowej oceny mikro-CT (Rysunek 2) oraz histologii (Rysunek 3). Reprezentatywne badania mechaniczne (Rysunek 1) przed...

Tutaj wprowadzamy metodę oceny transpedikularnych za pomocą modelu in vivo odcinka lędźwiowego kręgosłupa u świń.

Metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo

Pedicle screw fixation is the gold standard for the treatment of spinal diseases. However, many studies have reported the issue of loosening pedicle ...

Ogólnym celem tej interwencji chirurgicznej jest ocena śrub transpedikularnych z wykorzystaniem modelu kręgosłupa lędźwiowego świni in vivo. Metoda ta może pomóc w odpowiedzi na kluczowe pytania dotyczące powikłań kręgosłupa, takich jak poluzowanie śruby pedikularnej. Główną zaletą tej techniki jest możliwość porównania długoterminowej stabilności różnych typów śrub.Utrzymuj 12-miesięczne świnie miniaturowe w jednostce eksperymentalnej przez co najmniej jeden tydzień. Po tym okresie aklimatyzacji przeprowadź u każdej świni badanie kliniczne oraz zmierz częstotliwość oddechów, tętno i temperaturę ciała. Przed znieczuleniem poddaj świnie 12-godzinnemu głodzeniu.Aby uspokoić świnię, należy wstrzyknąć atropinę w boczny region mięśni szyjnych za uchem. Po uspokojeniu zwierzęcia należy ucisnąć dłonią podstawę ucha, a następnie oczyścić ucho alkoholem. Następnie w żyłę ucha należy wprowadzić plastikowy kaniulę nad igłą.Następnie przemyj cewnik solą fizjologiczną z heparyną i zabezpiecz go taśmą. Teraz wprowadź znieczulenie, podając ketaminę i ksylazynę przez cewnik. Aby przeprowadzić intubację świni, umieść ją w pozycji grzbietnej.Następnie, z pomocą asystenta, należy utrzymać rozwartą żuchwę, używając odpowiedniej pętli. Po tym prze prowadzi się końcówkę laryngoskopu do jam gardłowych, aby odsunąć nagłośnię od podniebienia miękkiego. Po przeprowadzeniu intubacji należy odsłuchać oddech w obu płucach.Następnie, za pomocą strzykawki 10 ml należy napełnić mankiet rurki endotrachealne powietrzem i przymocować rurkę do ryjca za pomocą taśmy klejącej. W dalszej kolejności należy rozpocząć podawanie 2% isofluranu przez rurkę. Następnie należy sprawdzić odruchy rogówkowe i powiekowe świni, aby potwierdzić osiągnięcie poziomu znieczulenia chirurgicznego.Następnie należy nanieść maść na oczy i przygotować monitory parametrów życiowych, które powinny być sprawdzane co najmniej co pięć minut. Na 30 minut przed operacją należy podać dawkę bolusa cefazoliny przez cewnik w żyle usznej. Następnie należy zmienić linię dożylną, aby podawać sól fizjologiczną o temperaturze 37 °C oraz fentanyl w celu opanowania bólu.Na początek należy ogolić grzbiet świni na obszarze 10 centymetrów po obu stronach linii środkowej. Następnie należy oczyścić skórę, stosując naprzemienne przemycia roztworem jodyny oraz 70% ethanol. Teraz należy wykonać podłużne nacięcie w linii środkowej, od drugiego wyrostka kolczystego kręgosłupa lędźwiowego do pierwszej grzebieni kości krzyżowej.Następnie należy przeprowadzić przecinanie tkanek podskórnych i powięzi w dół, aż do wierzchołków wyrostków kolczystych. Dalej, używając elewatora Cobba, należy odsunąć mięśnie przykręgosłupowe podokostnowo od leżącej pod nimi blaszki łuku. Następnie należy przeprowadzić preparację wzdłuż wyrostka kolczystego i blaszki łuku na poziomie stawów międzywyrostkowych.W punkcie wejścia, znajdującym się bezpośrednio poniżej wyrostka sutkowatego od L3 do L5, należy użyć wiertła lub kleszczyków do otwarcia kory powierzchownej. Następnie należy wprowadzić prowadnicę równolegle do górnej blaszki końcowej, pod kątem 20 stopni względem wyrostka kolczystego. Teraz należy wykonać zdjęcia rentgenowskie w projekcji tylno-przedniej bocznej, aby wyznaczyć punkty wprowadzenia śrub pedikularnych.Następnie wprowadź sondę do pedikła na głębokość do 25 mm i potwierdź prawidłowy przebieg wewnątrzkostny za pomocą sondy i palpacji. Teraz wprowadź sześć śrub pedikularnych. Upewnij się, że łebki śrub są dobrze osadzone.Należy zwrócić uwagę na orientację otworu oraz pozycję poziomą, która musi być wyrównana z prętem. Następnie należy wsunąć dwa pręty w obie strony głowic śrub pedykularnych. W kolejnym kroku należy przymocować tuleje i nakrętki do głowic śrub.Najpierw lekko dokręć nakrętki za pomocą nasadki z kluczem płaskim, a następnie dociągnij je kluczem dynamometrycznym. Następnie potwierdź położenie śrub pedikularnych za pomocą promieni rentgenowskich. Gdy miejsce operacyjne będzie gotowe do zamknięcia, przepłucz je trzema litrami soli fizjologicznej.Następnie przymocuj silikonowy dren i wyjmij silikonowy cewnik. Teraz zamknij mięśnie przykręgosłupowe i tkanki podskórne za pomocą szwów wchłanialnych, a następnie zamknij skórę szwami nylonowymi niewchłanialnymi. Po zaszyciu odkaź miejsce operowane jodynem powidonowym i załóż opatrunek.Gdy pojawi się wyraźny odruch połykania, przeprowadź ekstubację świni i przenieś ją do pomieszczenia wybudzeniowego. Po odzyskaniu pełnej świadomości zapewnij świni dostęp do pokarmu i wody oraz sprawdź sposób chodzenia. Monitoruj ruchy kończyn tylnych, aby ocenić implant, i podawaj leki przeciwbólowe przez trzy dni.12 tygodni po implantacji należy poddać świni eutanazji. Aby pobrać fragment kręgosłupa, wykonuje się podłużne nacięcie w linii środkowej w miejscu poprzedniej blizny pooperacyjnej. Następnie rozcinany jest tkanką miękką i mięśnie przykręgowe, aby w pełni odsłonić implant od poziomu L3 do L5. Następnie nakrętki należy odkręcić za pomocą klucza dynamometrycznego.Następnie należy usunąć pręty. W kolejnym kroku, używając piły oscylacyjnej, należy przeciąć przestrzeń krążka międzykręgowego L2-3 oraz przestrzeń krążka L5-S1. Następnie obie lokalizacje w części środkowej i przedniej kręgosłupa L3-5 należy rozdzielić za pomocą elewatora Cobba i kleszczy wieżowych.Jeśli przekrój rdzenia kręgowego nie może zostać natychmiast poddany analizie, należy go przechowywać w gazie nasączonej solą fizjologiczną w temperaturze -20 °C. Wyceniono wytrzymałość wiązania między śrubami pedikularnymi a kością dla trzech typów śrub: niepowlekanych, powlekanych hydroksyapatytem oraz powlekanych tytanem.Główny moment obrotowy przy wyrywaniu, czyli wytrzymałość wiązania, był najwyższy w przypadku śrub pedikularnych powlekanych tytanem. Obszar zainteresowania można ocenić za pomocą programu mikro-CT w celu analizy frakcji objętości kości, gęstości powierzchni kości oraz specyficznej powierzchni kości. Skanowanie przekroju kręgosłupa z użyciem barwienia trichromem Goldnera ukazuje powierzchnię styku między śrubą pedikularną a kością.Tkanka włóknista jest czerwona, a kość niebieska. W przypadku zastosowania niepowlekanych śrub pedikularnych na styku zaobserwowano jedynie tkankę włóknistą. Jednakże dla obu typów śrub powlekanych na styku stwierdzono tworzenie się nowej kości.Zaobserwowano nawet, że w przypadku śrub pedikularnych pokrytych tytanem przestrzeń między zwojami śruby w kości została całkowicie zagęszczona. Po opanowaniu tej techniki procedura ta może zostać wykonana w trzy godziny, pod warunkiem jej prawidłowego przeprowadzenia. Podczas wykonywania tego zabiegu ważne jest skupienie się na właściwym rozmieszczeniu śrub pedikularnych, aby zapobiec błędnemu umieszczeniu śruby w pedikule.Po opracowaniu technika ta utorowała drogę badaczom z dziedziny chirurgii kręgosłupa do badania poluzowania śrub pedykularnych u pacjentów z osteoporozą.

an-anesthesia-surgery-harvest-method-for-evaluation-transpedicular

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W tym filmie opisujemy zabieg chirurgiczny mający na celu wywołanie niestabilności kręgosłupa lędźwiowego w modelu mysim poprzez resekcję wyrostka kolczystego L3 do L5 lędźwiowego wraz z więzadłami nadkolcowymi i międzykolcowymi.

Chirurgiczna indukcja niestabilności kręgosłupa lędźwiowego w modelu mysim: zabieg chirurgiczny resekcji wyrostków kolczystych odcinka lędźwiowego i więzadeł w modelu mysim

W tym filmie opisujemy procedurę wszczepienia przewlekłej komory obrazowania optycznego do grzbietowego rdzenia kręgowego żywej myszy. Komora, zabieg chirurgiczny i przewlekłe obrazowanie są oceniane i demonstrowane.

Procedura wszczepienia komory rdzeniowej do podłużnego obrazowania in vivo rdzenia kręgowego myszy

Zwyrodnienie krążka międzykręgowego jest znaczącym czynnikiem przyczyniającym się do bólu pleców i główną przyczyną niepełnosprawności na całym świecie. Istnieje wiele zwierzęcych modeli zwyrodnienia krążka międzykręgowego. Demonstrujemy owczy model zwyrodnienia krążka międzykręgowego, wykorzystując wiertło, które osiąga stały uraz dysku i powtarzalny poziom zwyrodnienia dysku.

Model zwyrodnienia krążka międzykręgowego odcinka lędźwiowego owiec z wykorzystaniem bocznego urazu wiertła zaotrzewnowego

Ten protokół opisuje wszczepienie szklanego okienka do rdzenia kręgowego myszy w celu ułatwienia wizualizacji za pomocą mikroskopii przyżyciowej.

Laminektomia i implantacja okienka rdzenia kręgowego u myszy

Protokół opisuje nowatorski model infekcji implantu kręgosłupa in vivo, gdzie implant z drutu k-wire ze stali nierdzewnej jest infekowany bioluminescencyjnym Staphylococcus aureus Xen36. Obciążenie bakteryjne jest monitorowane podłużnie za pomocą obrazowania bioluminescencyjnego i potwierdzane liczbą jednostek tworzących kolonie po eutanazji.

Mysi model zakażenia implantu rdzeniowego in vivo

Opracowaliśmy model zwyrodnienia krążka międzykręgowego w odcinku lędźwiowym myszy poprzez resekcję wyrostków kolczystych L3–L5 wraz z więzadłami nad- i międzykolcowymi oraz odłączeniem mięśni przykolcowych.

Mysi model niestabilności odcinka lędźwiowego kręgosłupa

Mikrokrążenie rdzenia kręgowego odgrywa kluczową rolę w uszkodzeniu rdzenia kręgowego. Większość metod nie pozwala na ocenę mikrokrążenia rdzenia kręgowego w czasie rzeczywistym, co jest niezbędne do opracowania terapii ukierunkowanych na mikrokrążenie. W tym miejscu proponujemy protokół z użyciem sond Laser-Doppler-Flow Needle w dużym zwierzęcym modelu niedokrwienia/reperfuzji.

Ocena mikroperfuzji rdzenia kręgowego w czasie rzeczywistym w świńskim modelu niedokrwienia/reperfuzji

Wyświetlacz rzeczywistości rozszerzonej, Magic Leap, został użyty w połączeniu z konwencjonalnym systemem nawigacji do umieszczania pedikularnych w modelu świni, stosując nowatorski przepływ pracy. Przy medianie czasu wprowadzania wynoszącej &lt;2,5 min, według Gertzbeina osiągnięto submilimetrową dokładność techniczną i 100% dokładność kliniczną.

Umieszczanie pedikularnych za pomocą wyświetlacza montowanego na głowie w modelu świni

Określenie wszczepienia komórek dawcy stanowi wyzwanie w modelach przeszczepu szpiku kostnego u myszy, które nie mają dobrze zdefiniowanych markerów fenotypowych. Opisaliśmy metodologię ilościowego oznaczania wszczepienia męskich komórek dawcy u samic myszy biorców przeszczepu. Metoda ta może być stosowana u wszystkich szczepów myszy do badania funkcji HSC.

Wykorzystanie ilościowej reakcji PCR w czasie rzeczywistym do określenia wszczepienia komórek dawcy w konkurencyjnym modelu przeszczepu mysiego szpiku kostnego

Ten artykuł przedstawia szybką i prostą metodę podawania bleomycyny bezpośrednio do tchawicy myszy poprzez intubację. Kluczowymi zaletami tej metody jest to, że jest wysoce powtarzalna, łatwa do opanowania i nie wymaga specjalistycznego sprzętu ani długiego czasu rekonwalescencji.

Ulepszona metoda szybkiej intubacji tchawicy u myszy

Poznaj metodę oceny śrub transpedikularnych w chirurgii kręgosłupa przy użyciu modelu in vivo u świń. Technika umożliwia porównanie długoterminowej stabilności implantów.

Metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo (Wideo) | JoVE Journal

Metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo

Przeglądaj więcej filmów