24 kwietnia 2017
Testy behawioralne są złotym standardem do określania wyników po urazie mózgu i mogą zidentyfikować obecność niepełnosprawności rozwojowej u niemowląt i dzieci. Odruchy neurorozwojowe są wczesnym wskaźnikiem tych nieprawidłowości. Opracowano i opisano tutaj szereg łatwych do wykonania testów odruchów rozwojowych u noworodków gryzoni.
Ogólnym celem tej metodologii odruchów noworodków szczurów jest nauczenie się, jak wykonywać te zadania szybko, dokładnie i porównywalnie. Metoda ta może odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu zaburzeń rozwojowych nerwów, takich jak porażenie mózgowe. Główną zaletą tej techniki jest to, że oferuje ona sposób na przetestowanie wczesnych odruchów rozwojowych u nowonarodzonych szczeniąt szczurów.
Podobnie jak ludzie, nowonarodzone gryzonie mają wczesne odruchy rozwojowe, które dają okno na późniejszy rozwój. Osoby, które są nowicjuszami w tej metodzie, będą miały trudności, ponieważ odruchy pojawiają się szybko i mogą być trudne do zdobycia. Ważne jest, aby być tak konsekwentnym, jak to tylko możliwe.
Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku terapii i diagnozy porażenia mózgowego i niepełnosprawności rozwojowej. Określenie zachowań odruchowych jest złotym standardem w ustalaniu i skuteczności interwencji terapeutycznych. Wizualna demonstracja tej metody ma kluczowe znaczenie, ponieważ kroki są trudne do nauczenia się za pomocą słów pisanych.
Na początek należy przystosować szczury do środowiska i obchodzenia się z nimi przez człowieka, zgodnie z opisem w dołączonym protokole tekstowym. Po zaaklimatyzowaniu się połącz szczury w pary, aby wyprodukować miot szczeniąt do testów. Począwszy od trzeciego dnia po porodzie, przenieś młode do cichego pokoju o stałej porze każdego dnia.
Pozwól im zaaklimatyzować się przez co najmniej godzinę przed wykonaniem szeregu testów odruchów neurorozwojowych. W pomieszczeniu ustaw lampę grzewczą lub poduszkę grzewczą, aby utrzymać temperaturę ciała szczeniaka na poziomie 36,5 stopnia Celsjusza. Rejestruj również wagę szczeniaka każdego dnia.
Następnie skonfiguruj kamerę wideo z czasem otwarcia migawki wynoszącym co najmniej 1/1000 sekundy, aby przeanalizować testy refleksyjne klatka po klatce. Ustaw kamerę tak, aby znajdowała się bezpośrednio nad lub obok szczeniaka szczura i materiałów testowych podczas każdego testu. Dla każdego z poniższych testów wykonuj test codziennie, aż szczeniak będzie w stanie wykonać zadanie przez dwa kolejne dni.
Data pierwszego wystąpienia jest datą, która powinna zostać zarejestrowana w celu ilościowego określenia danych. Począwszy od trzeciej dmy po porodzie, wykonaj test odruchu chwytania kończyn przednich. W tym teście przyłóż pręt do dłoni każdej z przednich łap szczeniaka, pojedynczo i ręcznie lekko dociśnij.
Nacisk powinien nieznacznie przesunąć przednią łapę, aby zapewnić kontakt, a szczenięta mogą wyczuć pręt. Chwytanie pojawi się jako zgięcie wszystkich palców wokół pręta. Pomyślne nabycie tego odruchu następuje, gdy obie przednie łapy chwytają pręt przez dwa dni z rzędu.
Następnie przyłóż pręt do podeszwy każdej tylnej łapy i ręcznie lekko dociśnij, aby przeprowadzić test odruchu chwytania kończyn tylnych. Lekki nacisk powinien nieznacznie przesunąć tylną łapę, aby zapewnić kontakt i szczenięta mogą poczuć pręt. Udane uchwycenie pręta objawia się zgięciem palców wokół pręta.
Nabycie tego odruchu następuje, gdy obie tylne łapy chwytają pręt przez dwa dni z rzędu. Również począwszy od trzeciego dnia po porodzie, przeprowadź test odruchu prostowania. W tym teście mocno trzymaj szczeniaka w pozycji leżącej, tak aby wszystkie cztery łapy były wyprostowane.
Puść szczeniaka i natychmiast uruchom stoper. Wyprostowanie osiąga się, gdy szczenię jest w stanie przewrócić się lub przewrócić na wszystkie cztery łapy, a każda łapa jest prostopadła do ciała. Daj każdemu szczeniakowi maksymalnie 15 sekund na osiągnięcie tego celu.
Począwszy od czwartej dmy po urodzeniu, wykonaj test odruchu ułożenia kończyn tylnych. W tym teście trzymaj szczeniaka pionowo w powietrzu za tułów. Delikatnie pogłaszcz grzbiet tylnej łapy powierzchnią, taką jak krawędź stołu.
Prawidłowy odruch umieszczania ma miejsce, gdy szczenię szczura wycofuje stymulowaną tylną kończynę, a następnie kładzie tylną kończynę na tej powierzchni. Również zaczynając w czwartym dniu po porodzie, przeprowadź test unikania klifu. W tym teście umieść młode szczura na krawędzi płaskiej powierzchni, tak aby przednie łapy i pysk szczeniaka znajdowały się poza krawędzią.
Prawidłowym wynikiem jest reakcja ochronna, w której szczenię szczura odwraca się od krawędzi klifu. Rozpocznij ocenę chodu w szóstej dobie po urodzeniu. W tym teście umieść młode w środku koła o średnicy 15 centymetrów i pozwól szczeniakowi na 30 sekund na opuszczenie koła.
Udany chód jest wykonywany, gdy młode szczura jest w stanie wysunąć obie przednie łapy poza krąg w mniej niż 30 sekund. Rozpocznij analizę zaskoczenia słuchowego w 10 dniu po urodzeniu. Tutaj potrzebne jest coś, na przykład dzwonek, który jest w stanie wytworzyć głośny dźwięk.
Umieść dzwonek bezpośrednio nad szczeniakiem. Zadzwoń dzwonkiem, a następnie oceń, czy występuje reakcja zaskoczenia. Pozytywną reakcję zaskoczenia obserwuje się, gdy szczeniak wykazuje szarpnięcie z dala od dźwięku.
Począwszy od 12 dnia po urodzeniu, umieść szczenięta na antypoślizgowej, otwartej powierzchni i obserwuj postawę, jaką ma szczenię podczas ruchu. Niedojrzała postawa przejawia się w przeciąganiu brzucha podczas ruchu i prostopadłym skierowaniu zarówno przednich, jak i tylnych łap względem ciała. Dojrzałą postawę uzyskuje się, gdy szczenię może podnieść brzuch z powierzchni, a zarówno przednie, jak i tylne łapy są skierowane prosto lub równolegle do ciała podczas ruchu.
Również począwszy od 12 dnia po porodzie, zacznij obserwować powieki szczeniaka. Nagraj dzień, w którym obie powieki są otwarte. W 14 dniu po porodzie rozpocznij przyspieszone testy prostowania.
W tym teście umieść szczeniaka w pozycji leżącej 30.48 centymetra nad piankową podkładką do lądowania. Upuść szczeniaka i obserwuj jego zdolność do wyprostowania się. Prawidłowe prostowanie odnosi się do sytuacji, w której szczenię jest w stanie przewrócić się do pozycji leżącej i wylądować na łapach.
Nowonarodzone szczenięta narażone na zapalenie w macicy rodziły się znacznie mniejsze niż osoby z grupy kontrolnej. Suplementacja diety kiełkami brokułów była w stanie zwiększyć masę urodzeniową tych szczeniąt. Wraz z masą urodzeniową, testy odruchów neurorozwojowych są miarą predykcyjną nieprawidłowego rozwoju i dojrzewania kory mózgowej, co może mieć znaczenie w okolicznościach, w których jawna neuropatologia nie jest oczywista.
Po urodzeniu badanie ułożenia kończyn tylnych noworodków w tych grupach wykazało znaczne opóźnienie w nabywaniu tego odruchu u szczeniąt narażonych na zapalenie w macicy w porównaniu z grupą kontrolną. Suplementacja diety kiełkami brokułów zapobiegła opóźnieniu. Wyniki testu unikania klifu odruchu noworodkowego wykazały, że szczenięta narażone na zapalenie w macicy są znacznie opóźnione w uzyskaniu odpowiedzi ochronnej.
Również w tym przypadku spożycie kiełków brokułów zapobiegło znacznemu opóźnieniu. Ten sam wynik zaobserwowano po zbadaniu odruchowego chodu noworodka. Podczas tej procedury można wykonać inne metody, takie jak codzienne zapisy wagi, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania, takie jak dzienne tempo wzrostu, nadrabianie zaległości, nasilenie urazu i efekt ograniczenia wzrostu.
Po opracowaniu technika ta utorowała drogę naukowcom z dziedziny neurobiologii do zbadania testów odruchów rozwojowych u noworodków gryzoni. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak przeprowadzać wczesne testy odruchów rozwojowych u nowonarodzonych szczeniąt szczurów. Co więcej, należy zrozumieć znaczenie wczesnych odruchów behawioralnych, ponieważ stanowią one wczesny biomarker urazu i efekt interwencji terapeutycznej.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
W tym artykule przedstawiono metodologię oceny wczesnych odruchów rozwojowych u noworodków szczurów, która może dostarczyć informacji na temat potencjalnych niepełnosprawności rozwojowych. Technika ma na celu ułatwienie dokładnego i spójnego testowania tych odruchów, które są kluczowe dla zrozumienia problemów z rozwojem nerwowym.
Neurodevelopmental reflex testing in neonatal rat pups provides an early biomarker for detecting brain injury and evaluating therapeutic interventions in preclinical models. This approach supports mechanistic de-risking by linking behavioral phenotypes to neurodevelopmental outcomes, enabling predictive confidence in target validation for CNS disorders. The methodology enhances translational continuity from discovery through preclinical stages by offering quantifiable, reproducible reflex metrics.
The method integrates into the discovery continuum from early biology to lead identification, providing behavioral phenotyping that complements molecular and histological assessments in CNS drug development.