Name: Powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Poznaj technikę tworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczurów przy użyciu cewnika Fogarty. Ta metoda umożliwia kontrolowany czas niedrożności aorty i ocenę deficytów motorycznych kończyn tylnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy nie mają żadnych podziękowań.

Ten protokół został zatwierdzony przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Szpitala Bundang Uniwersytetu Narodowego w Seulu. Opieka nad zwierzętami i eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z Przewodnikiem Narodowego Instytutu Zdrowia Stanów Zjednoczonych dotyczącym opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych.
1. Przygotowanie chirurgiczne
<ol>
	<li>Przed zabiegiem należy przepłukać cewniki sterylnym roztworem soli fizjologicznej, aby zapewnić drożność.</li>
	<li>Połóż koc grzewczy na stole operacyjnym i przykryj stół sterylną serwetą.</li>
	<li>Umieść samce szczurów Sprague−Dawley (270-330 g) w akrylowym pudełku z 3,0%-4,0% izofluranu w 100% tlenu.</li>
	<li>Nałóż smar na oczy szczura.</li>
	<li>Ułóż szczura na stole operacyjnym w pozycji leżącej na plecach i utrzymuj znieczulenie za pomocą maski na twarz z ciągłym podawaniem wziewnego izofluranu (1,0%-2,5% obj.).</li>
	<li>Umieść sondę doodbytniczą, aby monitorować i utrzymywać temperaturę ciała w zakresie 37,0-38,0 °C.</li>
</ol>
2. Cewnikowanie tętnicy udowej
<ol>
	<li>Delikatnie wyszoruj prawą okolicę pachwinową za pomocą Betadine i 70% etanolu.</li>
	<li>Wykonaj 2-centymetrowe poziome nacięcie skóry za pomocą nożyczek w prawej okolicy pachwinowej.</li>
	<li>Za pomocą retraktora odsłoń pole operacyjne.</li>
	<li>Wyciąć tętnicę udową z otaczającej żyły i nerwu. Odizoluj 1-centymetrowy odcinek tętnicy za pomocą zakrzywionych kleszczy i stępionych kleszczy.</li>
	<li>Używając czarnego jedwabnego szwu 4.0, umieść luźny krawat zarówno na bliższym, jak i dalszym końcu tętnicy, aby zmaksymalizować ekspozycję.</li>
	<li>Wykonaj nacięcie na tętnicy udowej za pomocą mikronożyczek.</li>
	<li>Wprowadzić cewnik z końcówką balonową 2 Fr. do tętnicy udowej za pomocą mikrokleszczy. Przymocuj cewnik do naczynia w odległości około 1 cm od główki cewnika za pomocą podwiązania bliższego, a następnie zawiąż dystalną ligaturę.</li>
</ol>
3. Cewnikowanie tętnicy szyjnej
<ol>
	<li>Wyszoruj prawą przednią część szyi za pomocą betadyny i 70% etanolu, a następnie wykonaj nacięcie skóry.</li>
	<li>Za pomocą retraktora odsłoń pole operacyjne. Odizoluj 1-centymetrowy odcinek tętnicy i zawiąż go luźno za pomocą jedwabnego szwu zarówno na bliższym, jak i dalszym końcu tętnicy, aby zmaksymalizować ekspozycję.</li>
	<li>Nakłuć tętnicę szyjną za pomocą cewnika dożylnego 24 G i przesunąć proksymalny 1 cm cewnika w kierunku serca.</li>
	<li>Zabezpiecz cewnik za pomocą podwiązania proksymalnej, a następnie zawiąż ligaturę dystalną.</li>
	<li>Za pomocą 3-drogowego kranu podłącz dystalny koniec cewnika do mikrorurki wypełnionej solą fizjologiczną i zewnętrznego zbiornika.</li>
</ol>
4. Cewnikowanie tętnicy ogonowej
<ol>
	<li>Wyszoruj brzuszną część ogona za pomocą betadyny i 70% etanolu i wykonaj 2-centymetrowe nacięcie skóry.</li>
	<li>Wytnij tętnicę ogonową od otaczających struktur i odizoluj 1 cm odcinek tętnicy za pomocą zakrzywionych kleszczy i kleszczy.</li>
	<li>Używając czarnego jedwabnego szwu 4.0, umieść luźny krawat zarówno na bliższym, jak i dalszym końcu tętnicy, aby zmaksymalizować ekspozycję.</li>
	<li>Nakłuć tętnicę ogonową za pomocą cewnika dożylnego 24 G i wprowadzić cewnik do tętnicy.</li>
	<li>Przymocuj cewnik do naczynia (około 1 cm od główki cewnika) za pomocą bliższej ligatury i zawiąż dystalną ligaturę.</li>
	<li>Podłącz dystalną część cewnika do urządzenia monitorującego ciśnienie tętnicze.</li>
</ol>
5. Indukcja niedokrwienia rdzenia kręgowego
<ol>
	<li>Po zakończeniu cewnikowania wsuń cewnik z 2 fr. zakończony balonem do zstępującej aorty piersiowej tak, aby końcówka cewnika dotarła do lewej tętnicy podobojczykowej.</li>
	<li>Włożyć na głębokość 10 cm od miejsca wkłucia.</li>
	<li>Wstrzyknąć 150 jednostek heparyny w stężeniu 100 jednostek/ml do cewnika tętnicy szyjnej.</li>
	<li>Napełnij balon cewnika 0,05 ml soli fizjologicznej.</li>
	<li>Jednocześnie spuść krew do zewnętrznego pojemnika na krew z tętnicy szyjnej, aby wyregulować ciśnienie w tętnicy proksymalnej do 80 mmHg.</li>
	<li>Podłącz system monitorowania ciśnienia tętniczego do pozostałego światła 3-kierunkowego kurka odcinającego i kontroluj ilość drenażu krwi, monitorując ciśnienie tętnicze.</li>
	<li>Potwierdź powodzenie niedrożności aorty przez nagłe zmniejszenie i ciągłą utratę dystalnego ciśnienia tętniczego.</li>
	<li>Po niedrożności aorty trwającej 9, 10 lub 11 minut opróżnij balon cewnika Fogarty'ego i ponownie wlej odsączoną krew.</li>
</ol>
6. Opieka pooperacyjna i ocena neurologiczna
<ol>
	<li>Monitorując ciśnienie tętnicze przez tętnicę ogonową, usuń cewniki z tętnic udowych i szyjnych i zamknij rany szwami jedwabnymi.</li>
	<li>Po potwierdzeniu, że ciśnienie tętnicze zostało przywrócone do normalnego zakresu, usuń cewnik z tętnicy ogonowej i zamknij ranę.</li>
	<li>Po wyzdrowieniu ze znieczulenia włóż szczura z powrotem do klatki.</li>
	<li>Oceń funkcję motoryczną kończyn tylnych po 24 godzinach od operacji za pomocą wskaźnika deficytu motorycznego (tab. 1). Wskaźnik deficytu motorycznego definiuje się jako sumę wyniku poruszania się i wyniku odruchu stawiania/kroku. Wskaźnik deficytu motorycznego równy 6 oznacza maksymalny deficyt.</li>
</ol>
7. Ocena histopatologiczna
<ol>
	<li>Po ocenie neurologicznej znieczulij szczury izofluranem dostarczanym w masce, uświdź je przez perfuzję przezsercową ze 100 ml heparynizowanej soli fizjologicznej w znieczuleniu i usuń rdzeń kręgowy. 8</li>
	<li>Odcinki sznura od poziomu kręgów lędźwiowych 3-5 zatopić w parafinie.</li>
	<li>Zabarwić przekroje poprzeczne hematoksyliną i eozyną (H i E).</li>
	<li>Obserwuj uszkodzenie neuronu ruchowego pod mikroskopem. 9</li>
</ol>
8. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>Przeprowadzanie analiz statystycznych przy użyciu Pakietu Statystycznego dla Nauk Społecznych w wersji 20. Wskaźnik deficytu motorycznego w trzech grupach porównano za pomocą testu Kruskala-Wallisa, a następnie testu U-Manna-Whitneya. Wartość P <0,05 uznano za statystycznie istotną.</li>
</ol>

<ol><li>Greenberg, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporary+analysis+of+descending+thoracic+and+thoracoabdominal+aneurysm+repair%3A+a+comparison+of+endovascular+and+open+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Contemporary analysis of descending thoracic and thoracoabdominal aneurysm repair: a comparison of endovascular and open techniques.</a> Circulation. 118 (8), 808-817 (2008).</li>
<li>Okita, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fighting+spinal+cord+complication+during+surgery+for+thoracoabdominal+aortic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Fighting spinal cord complication during surgery for thoracoabdominal aortic disease.</a> Gen Thorac Cardiovasc Surg. 59 (2), 79-90 (2011).</li>
<li>Fleck, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+outcome+in+thoracoabdominal+aortic+aneurysm+repair%3A+the+role+of+cerebrospinal+fluid+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Neurocrit+Care%22%5BJournal%5D)">Improved outcome in thoracoabdominal aortic aneurysm repair: the role of cerebrospinal fluid drainage.</a> Neurocrit Care. 2 (1), 11-16 (2005).</li>
<li>Kouchoukos, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+bypass+and+circulatory+arrest+for+operations+on+the+descending+thoracic+and+thoracoabdominal+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Hypothermic bypass and circulatory arrest for operations on the descending thoracic and thoracoabdominal aorta.</a> Ann Thorac Surg. 60 (1), 67-76 (1995).</li>
<li>Taira, Y., Marsala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+proximal+arterial+perfusion+pressure+on+function%2C+spinal+cord+blood+flow%2C+and+histopathologic+changes+after+increasing+intervals+of+aortic+occlusion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Effect of proximal arterial perfusion pressure on function, spinal cord blood flow, and histopathologic changes after increasing intervals of aortic occlusion in the rat.</a> Stroke. 27 (10), 1850-1858 (1996).</li>
<li>Tveten, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+vascularity.+III.+The+spinal+cord+arteries+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiol+Diagn+%28Stockh%29%22%5BJournal%5D)">Spinal cord vascularity. III. The spinal cord arteries in man.</a> Acta Radiol Diagn (Stockh). 17 (3), 257-273 (1976).</li>
<li>Woollam, D. H., Millen, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+arterial+supply+of+the+spinal+cord+and+its+significance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The arterial supply of the spinal cord and its significance.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 18 (2), 97-102 (1955).</li>
<li>Kennedy, H. S., Puth, F., Van Hoy, M., Le Pichon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+removing+the+brain+and+spinal+cord+as+one+unit+from+adult+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">A method for removing the brain and spinal cord as one unit from adult mice and rats.</a> Lab Anim (NY). 40 (2), 53-57 (2011).</li>
<li>Umehara, S., Goyagi, T., Nishikawa, T., Tobe, Y., Masaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Esmolol+and+landiolol%2C+selective+%CE%B21+adrenoreceptor+antagonists%2C+provide+neuroprotection+against+spinal+cord+ischemia+and+reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Esmolol and landiolol, selective β1 adrenoreceptor antagonists, provide neuroprotection against spinal cord ischemia and reperfusion in rats.</a> Anesth Analg. 110 (4), 1133-1137 (2010).</li>
<li>De Ley, G., Nshimyumuremyi, J. B., Leusen, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemispheric+blood+flow+in+the+rat+after+unilateral+common+carotid+occlusion%3A+evolution+with+time%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Hemispheric blood flow in the rat after unilateral common carotid occlusion: evolution with time.</a> Stroke. 16 (1), 69-73 (1985).</li>
<li>Coyle, P., Panzenbeck, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collateral+development+after+carotid+artery+occlusion+in+Fischer+344+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Collateral development after carotid artery occlusion in Fischer 344 rats.</a> Stroke. 21 (2), 316-321 (1990).</li>
<li>Levine, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoxic-ischemic+encephalopathy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Anoxic-ischemic encephalopathy in rats.</a> Am J Pathol. 36, 1-17 (1960).</li>
<li>Prior, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+changes+in+collateral+blood+flow+and+isolated+vessel+size+and+gene+expression+after+femoral+artery+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Time course of changes in collateral blood flow and isolated vessel size and gene expression after femoral artery occlusion in rats.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (6), H2434-H2447 (2004).</li>
<li>Yang, H. T., Feng, Y., Allen, L. A., Protter, A., Terjung, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+specificity+of+bFGFincreased+collateral+flow+in+experimental+peripheral+arterial+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Efficacy and specificity of bFGFincreased collateral flow in experimental peripheral arterial insufficiency.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278 (6), H1966-H1973 (2000).</li>
<li>Kakinohana, M., Fuchigami, T., Nakamura, S., Sasara, T., Kawabata, T., Sugahara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrathecal+administration+of+morphine%2C+but+not+small+dose%2C+induced+spastic+paraparesis+after+a+noninjurious+interval+of+aortic+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Intrathecal administration of morphine, but not small dose, induced spastic paraparesis after a noninjurious interval of aortic occlusion in rats.</a> Anesth Analg. 96 (3), 769-775 (2003).</li>
<li>Horiuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+the+delta-opioid+agonist+SNC80+on+hind-limb+motor+function+and+neuronal+injury+after+spinal+cord+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">The effects of the delta-opioid agonist SNC80 on hind-limb motor function and neuronal injury after spinal cord ischemia in rats.</a> Anesth Analg. 99 (1), 235-240 (2004).</li>
<li>Griepp, R. B., Griepp, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+perfusion+and+protection+during+descending+thoracic+and+thoracoabdominal+aortic+surgery%3A+the+collateral+network+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Spinal cord perfusion and protection during descending thoracic and thoracoabdominal aortic surgery: the collateral network concept.</a> Ann Thorac Surg. 83 (2), S865-S869 (2007).</li>
</ol>

Autorzy nie mają konkurencyjnych interesów finansowych. Prace te były wspierane przez grant 2012R1A1A3014010 z Narodowej Fundacji Badawczej Rządu Koreańskiego.

W obecnym badaniu wykazaliśmy szczurzy model niedokrwienia rdzenia kręgowego oparty na metodzie Taira i Marsali5 , który indukuje różne stopnie deficytu motorycznego kończyny tylnej w zależności od czasu zgryzu aorty.
Długość zgryzu aorty może wpływać na stopień deficytu motorycznego. Jeśli czas zgryzu aorty jest dłuższy, deficyt motoryczny staje się bardziej dotkliwy. W ten sposób naukowcy mogą osiągnąć pewien stopień deficytu motorycznego, kontrolując czas okluzji aor...

Paraplegia jest śmiertelnym powikłaniem operacji tętniaka aorty piersiowo-brzusznej. Wynika to z uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego rdzenia kręgowego, do którego dochodzi podczas krzyżowego zaciskania i odpinania aorty. 1 Wprowadzono kilka strategii, w tym ogólnoustrojową hipotermię i drenaż mózgowo-rdzeniowy, aby chronić rdzeń kręgowy,2,3,4 ale wielu pacjentów nadal odczuwa skutki urazu.
Wprowadzono kilka modeli niedokrwienia rdzenia kręgowego u zwierząt, aby zbadać jego patogenezę i opracować strategie ochronne przed urazem. W niniejszym badaniu przedstawiamy szczurzy model niedokrwienia rdzenia kręgowego oparty na metodzie Tairy i Marsali. 5 System krążenia rdzeniowego u szczurów jest bardzo podobny do układu naczyniowego i pobocznego rdzenia kręgowego u ludzi, chociaż istnieją pewne różnice w wielkości i lokalizacji. 6,7 Tak więc, szczur jest anatomicznie odpowiednim zwierzęciem do wykorzystania w eksperymentalnym modelu badającym patogenezę, powikłania i leczenie niedokrwienia rdzenia kręgowego. Co więcej, ten model niedokrwienia rdzenia kręgowego zapewnia niezawodną okluzję aorty przy minimalnej interwencji dzięki wykorzystaniu wewnątrznaczyniowej okluzji balonowej aorty piersiowej.
W tym badaniu wykazaliśmy, że ten szczurzy model niedokrwienia rdzenia kręgowego wywołuje powtarzalne deficyty motoryczne w kończynach tylnych, które różnią się nasileniem w zależności od czasu zamknięcia aorty.

<table><tbody><tr><td>Cewnik do embolektomii tętniczej Fogarty</td><td>Edward Life Sciences</td><td>120602F</td><td>cewnik z końcówką balonową wprowadzany do tętnicy udowej</td></tr><tr><td>Cewnik dożylny BD Insyte-N Autoguard Shielded&nbsp;</td><td>BD&nbsp;</td><td>381411</td><td>Cewnik dożylny o rozmiarze 24</td></tr><tr><td>strzykawka 50 ml</td><td>SZCZEPIONKA KOREA&nbsp;</td><td>KOVAX-SY-STRZYKAWKA 50 ml</td><td>Maska na twarz</td></tr><tr><td>1 ml strzykawka</td><td>KOREA VACCINE</td><td>KOVAX-STRZYKAWKA 1ml</td><td></td></tr><tr><td>Sonda Recal</td><td>APARAT HARVARD</td><td>50-7221F</td><td>Sonda doodbytnicza do monitorowania temperatury</td></tr><tr><td>Mikro nożyczki sprężynowe do preparowania</td><td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>JD-S-10</td><td>Nożyczki mikronożycowe</td></tr><tr><td>(ostre-ostre)</td> <td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>S-51-12-S</td><td>Nożyce</td></tr><tr><td>Retraktor</td><td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>JD-S-74A</td><td>Retraktor</td></tr><tr><td>Mikro kleszcz&nbsp;</td><td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>JD-S-29</td><td>Mikrokleszczyki</td></tr><tr><td>KLESZCZ DO KOMARÓW (zakrzywiony)</td><td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>S-44-CPK</td><td>Kleszcze zakrzywione</td></tr><tr><td>SZCZYPCE OPATRUNKOWEP&nbsp;</td><td>Jeung do bio & Roślina co.LTD.</td><td>S-37-16S</td><td>Kleszcze</td></tr><tr><td>4/0 jedwab&nbsp;</td><td>Woori Medical</td><td>S431</td><td>4.0 jedwabny szew</td></tr><tr><td>3-kierunkowy</td><td>Seonwon Medcal</td><td>D-98-01</td><td>3-kierunkowy zawór odcinający</td></tr><tr><td>Monitor pacjenta</td><td>PHILIPS</td><td>MP20</td><td>Urządzenie do monitorowania ciśnienia tętniczego.&nbsp;</td></tr><tr><td>Koc grzewczy</td><td>Produkcja własna</td><td></td><td>Koc grzewczy</td></tr><tr><td>Mikroprobówka i zbiornik zewnętrzny</td><td>Własna produkcja</td><td></td><td>Mikroprobówka i zbiornik zewnętrzny</td></tr><tr><td>Heparyna</td><td>JW Heparyna farmaceutyczna</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9% NS 1000ml</td><td>JW Pharmaceutical</td><td></td><td>Sól fizjologiczna</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Hana Med</td><td></td><td>Isoflurane</td></tr></tbody></table>

powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Niedokrwienie rdzenia kręgowego jest śmiertelnym powikłaniem po operacji tętniaka aorty piersiowo-brzusznej. Naukowcy mogą badać strategie zapobiegania i leczenia tego powikłania za pomocą eksperymentalnych modeli niedokrwienia rdzenia kręgowego. Opisany tutaj model pokazuje różne stopnie paraplegii, które odnoszą się do długości okluzji po zamknięciu aorty piersiowej w modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego szczura.
Cewnik z balonem o średnicy 2 stopni był wprowadzany przez tętnicę udową do zstępującej aorty piersiowej, aż końcówka cewnika została umieszczona na lewej tętnicy podobojczykowej u znieczulonych samców szczurów Sprague-Dawley. Niedokrwienie rdzenia kręgowego zostało wywołane przez napompowanie balonu cewnika. Po określonym czasie okluzji (9, 10 lub 11 minut) balon został opróżniony. Ocenę neurologiczną wykonano za pomocą wskaźnika deficytu ruchowego po 24 godzinach od zabiegu chirurgicznego, a rdzeń kręgowy pobrano do badania histopatologicznego.
Szczury, które przeszły 9-minutową niedrożność aorty, wykazały łagodne i odwracalne upośledzenie motoryczne kończyny tylnej. Szczury poddane 10-minutowej niedrożności aorty wykazywały umiarkowane, ale odwracalne upośledzenie motoryczne. Szczury poddane 11-minutowej niedrożności aorty wykazywały całkowity i trwały paraliż. Neurony ruchowe w odcinkach rdzenia kręgowego były bardziej zachowane u szczurów poddanych krótszemu czasowi niedrożności aorty.
Badacze mogą osiągnąć powtarzalny deficyt motoryczny kończyn tylnych po zamknięciu aorty piersiowej za pomocą tego modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego.

W trakcie okresu niedokrwienia rdzenia kręgowego przeprowadzono zamknięcie aorty na 9 min (n=3), 10 min (n=3) lub 11 min (n=3). Wskaźnik deficytu motorycznego u szczurów przedstawiono w Tabeli 2. Szczury, u których zastosowano 9-minutowe zamknięcie aorty, wykazywały łagodne i odwracalne upośledzenie motoryczne kończyn tylnych. Szczury poddane 10-minutowemu zamknięciu aorty wykazywały umiarkowany deficyt motoryczny, lecz nie całkowity paraliż. Szczury, u których czas zamknięcia wynosił 11 min, wykazywały całkowity i trwał...

To badanie demonstruje technikę tworzenia minimalnie inwazyjnego i łatwego do odtworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczurów. Różne stopnie deficytu motorycznego kończyn tylnych mogą być wytwarzane przez kontrolowanie czasu zgryzu aorty.

Powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest przedstawienie techniki tworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczura. Procedura zostanie zaprezentowana przez Mi-Sun Lim. Cewnik umieszczony w tętnicy ogonowej służy do monitorowania ciśnienia tętniczego.Po zakończeniu kaniulacji wprowadź cewnik Fogarty przez tętnicę udową do zstępującej aorty piersiowej. Aby wywołać niedokrwienie rdzenia kręgowego, napompuj balon cewnika Fogarty i odprowadź przepływ krwi z tętnicy szyjnej do zewnętrznego zbiornika krwi w celu kontrolowania proksymalnego ciśnienia tętniczego. Po zaplanowanym czasie okluzji spuść powietrze z balonu cewnika Fogarty, ponownie wprowadź odprowadzoną krew i usuń cewnik udowy.Po znieczuleniu szczura umieść go na stole operacyjnym w pozycji brzusznej i podtrzymuj znieczulenie przy zachowaniu spontanicznego oddychania, stosując maskę twarzową do podawania izofluranu drogą wziewną. Wykonaj poziome nacięcie skóry w prawym obszarze pachwinowym. Używając czarnej nici jedwabnej 4.0, zawiąż luźne pętle na obu końcach tętnicy (proksymalnym i dystalnym), aby zmaksymalizować obszar odsłonięcia. Monitorując ciśnienie tętnicze poprzez tętnicę ogonową, usuń cewniki z tętnicy udowej oraz szyjnej, a następnie zamknij ranę szwami jedwabnymi.Funkcję motoryczną kończyn tylnych można ocenić za pomocą wskaźnika deficytu motorycznego. Wskaźnik deficytu motorycznego definiuje się jako sumę punktów w odniesieniu do kończyn dolnych oraz odruchu stawiania/kroczenia, a maksymalny deficyt jest wskazywany przez wynik sześć. Podczas oceny funkcji motorycznej kończyn tylnych 24 godziny po operacji, szczury poddane dziewięciominutowemu zamknięciu aorty wykazały łagodne i odwracalne upośledzenie motoryczne kończyn tylnych.Szczury poddane 10-minutowej okluzji aorty wykazywały umiarkowany deficyt motoryczny, ale nie całkowity paraliż. Szczury, u których czas okluzji wynosił 11 minut, wykazywały całkowity i trwały paraliż. Wykorzystując ten model niedokrwienia rdzenia kręgowego, można wywołać różny stopień deficytu motorycznego kończyn tylnych poprzez kontrolowanie czasu okluzji aorty.Po opanowaniu tej techniki, można ją przeprowadzić w ciągu 40 minut. Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w przeprowadzaniu eksperymentu.

reproducible-motor-deficit-following-aortic-occlusion-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Chirurgiczne wywołanie niedokrwiennego uszkodzenia mózgu u szczura jest powszechnie stosowanym modelem w badaniach nad udarem. W niniejszej pracy demonstrujemy indukcję ogniskowego niedokrwienia mózgu poprzez zamknięcie tętnicy środkowej mózgu. Przedstawiono również wizualizację powstałego zawału za pomocą barwienia histologicznego oraz obrazowania rezonansem magnetycznym.

Model ogniskowego niedokrwienia mózgu poprzez endowaskularną okluzję tętnicy środkowej mózgu u szczura za pomocą szwu

Obustronna niedrożność tętnicy szyjnej w połączeniu z niedociśnieniem ogólnoustrojowym powoduje globalne niedokrwienie mózgu u szczura, powodując uszkodzenie hipokampa z powtarzalnym nasileniem. Zwierzęta są upośledzone z przewidywalnymi wzorcami uszkodzeń mózgu, szybko wracają do zdrowia, a wskaźniki śmiertelności są stosunkowo niskie.

Okluzja / niedociśnienie 2-naczyniowe: szczurzy model globalnego niedokrwienia mózgu

Brak mechanistycznego zrozumienia uszkodzenia niedokrwienia rdzenia kręgowego i reperfuzji utrudnił dalsze działania wspomagające zapobieganie paraplegii po operacjach aorty wysokiego ryzyka. W związku z tym konieczny jest rozwój modeli zwierzęcych. Manuskrypt ten przedstawia powtarzalne porażenie kończyn dolnych po niedrożności aorty piersiowej w modelu mysim.

Odtwarzalna paraplegia przez niedrożność aorty piersiowej w mysim modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

Tutaj prezentujemy protokół do trwałego zamknięcia dystalnej tętnicy środkowej mózgu u starszych samic szczurów z jednoczesnym zamknięciem tętnic szyjnych w celu wygenerowania dużych zawałów korowych i utrzymujących się deficytów. Pokazujemy potwierdzenie wielkości zmiany za pomocą strukturalnego rezonansu magnetycznego po 24 godzinach i 8 tygodniach po udarze.

Wykonywanie stałej dystalnej środkowej części mózgu z niedrożnością tętnicy szyjnej wspólnej u starszych szczurów w celu zbadania niedokrwienia kory mózgowej z trwałą niepełnosprawnością

Mysi model niedokrwienia i reperfuzji mózgu został stworzony w celu zbadania patofizjologii udaru. Podwiązujemy dystalnie prawą środkową tętnicę mózgową i prawą tętnicę szyjną wspólną i przywracamy przepływ krwi po 10 lub 40 minutach niedokrwienia.

Mysi model zamknięcia dwóch naczyń niedokrwienia mózgu-reperfuzji

Celem tego badania jest stworzenie i walidacja modelu zwierzęcego do badań w fazach odzyskiwania i następstwa niedokrwienia mózgu poprzez testowanie zawału mózgu i funkcji sensomotorycznych po okluzji/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu (MCAO/R) po 1-90 dniach u szczurów.

Model przedkliniczny do oceny regeneracji mózgu po ostrym udarze mózgu u szczurów

Mikrokrążenie rdzenia kręgowego odgrywa kluczową rolę w uszkodzeniu rdzenia kręgowego. Większość metod nie pozwala na ocenę mikrokrążenia rdzenia kręgowego w czasie rzeczywistym, co jest niezbędne do opracowania terapii ukierunkowanych na mikrokrążenie. W tym miejscu proponujemy protokół z użyciem sond Laser-Doppler-Flow Needle w dużym zwierzęcym modelu niedokrwienia/reperfuzji.

Ocena mikroperfuzji rdzenia kręgowego w czasie rzeczywistym w świńskim modelu niedokrwienia/reperfuzji

Obecny protokół opisuje szczurzy model okluzji/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu, który zachowuje anatomiczną strukturę naczyń mózgowych bez powodowania uszkodzeń.

Szczurzy model niedrożności/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu bez uszkadzania struktury anatomicznej naczyń mózgowych

Ten protokół opisuje proces przygotowania do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu przez tętnicę szyjną wspólną.

Zmodyfikowany model preparatu do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Celem niniejszej pracy było ustalenie reprodukowalnej metody wykonywania kraniektomii z późniejszym trwałym, selektywnym zamknięciem tętnicy mózgowej środkowej u szczurów dla zastosowania w badaniach eksperymentalnych nad deficytami ruchowymi i przestrzenną pamięcią.

Selektywne i trwałe zatorowanie środkowej tętnicy mózgowej u szczurów: eksperymentalne podejście do badania niedoborów motorycznych i przestrzennej pamięci

Poznaj technikę tworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczurów przy użyciu cewnika Fogarty. Ta metoda umożliwia kontrolowany czas niedrożności aorty i ocenę deficytów motorycznych kończyn tylnych.

Powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

Przeglądaj więcej filmów