Skutki narażenia na działanie formaldehydu na szczurzy model atopowego zapalenia skóry wywołanego leczeniem kapsaicyną u noworodków

Ogólnym celem tej procedury jest wywołanie objawów podobnych do atopowego zapalenia skóry poprzez leczenie noworodków kapsaicyną. I do pomiaru wpływu formaldehydu na objawy podobne do atopowego zapalenia skóry. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytanie związane z patofizjologią atopowego zapalenia skóry w dziedzinie dermatologii.

Główną zaletą tej techniki jest indukcja objawów podobnych do atopowego zapalenia skóry i ustanowienie ważnego systemu ekspozycji wraz ze przyrostami. Aby przygotować pięć miligramów na mililitr roztworu kapsaicyny, dodaj jeden mililitr Tween 80, jeden mililitr 100% etanolu i 50 miligramów kapsaicyny do 15-mililitrowej stożkowej probówki. Następnie dodaj osiem mililitrów soli fizjologicznej do stożkowej probówki.

Zakręć i energicznie potrząśnij tubką, aż nie będą widoczne żadne oddzielone warstwy. Bardzo ważne jest, aby dostarczyć kapsaicynę między 12 a 48 godzinami po urodzeniu. Wstrzyknąć roztwór kapsaicyny do tkanki podskórnej w linii środkowej i z tyłu szyi nowonarodzonego szczura Sprague Dawley.

Aby zapobiec zatrzymaniu oddechu w wyniku wstrzyknięcia kapsaicyny, należy umieścić noworodki w komorze tlenowej do czasu, aż oddychanie stanie się normalne. W razie potrzeby popchnij klatkę piersiową noworodków, aby zachęcić do oddychania. Zacznij od przygotowania plastikowych komór wyposażonych w lustro, aby umożliwić pełne pokrycie do oglądania oraz otwory, aby umożliwić szczurom oddychanie.

Umieść szczury w plastikowej komorze i przykryj sufit komory ciężkim przedmiotem, aby zapobiec otwarciu pokrywy. Następnie skonfiguruj cyfrową kamerę wideo, aby jednocześnie nagrywać zarówno widoki lustrzane, jak i widoki z przodu szczurów. Następnie nagrywaj spontaniczne zachowania szczurów przez godzinę.

Odtwórz klipy wideo i policz liczbę zachowań związanych z drapaniem, takich jak te wykazywane przez szczura po prawej stronie. I szczur w środku. Aby ocenić zmiany chorobowe, określ zakres i nasilenie zapalenia skóry w uszach i innych częściach znieczulonego szczura.

Określ rozmiar jednostki dla zasięgu zmian skórnych jako 0,25 centymetra kwadratowego. I nasilenie zmian skórnych za pomocą tej tabeli. Przygotuj pudełko ze szkła akrylowego, które ma dwa łączniki po przeciwnych stronach.

W celu cyrkulacji gazowego formaldehydu wylot odpowietrzający powinien być umieszczony wyżej niż wylot wlotu gazu. Podłącz rurki do obu złączy. Poprowadzić rurę wylotową odpowietrzania do okapu cyrkulacyjnego lub na zewnątrz budynku w celu emisji gazu.

I podłącz drugą rurkę wlotową do regulatora tlenu medycznego. Umieść konwencjonalną klatkę dla szczurów w pudełku ze szkła akrylowego. Umieść tygodniowe szczury w klatce, a następnie zamknij pudełko ze szkła akrylowego tak szczelnie, jak to możliwe, aby zapobiec wyciekowi gazu.

Nałóż folię spożywczą, aby owinąć komorę i zamknij komorę gumowaną pokrywą, aby zapewnić szczelne uszczelnienie. Dodaj 0,5% roztwór formaldehydu do butelki nawilżacza podłączonej do regulatora tlenu medycznego. Nie zapominaj, że praca w formaldehydzie może być bardzo niebezpieczna.

Podczas wykonywania tej procedury należy zawsze zachować środki ostrożności, takie jak maski i rękawiczki. Następnie włącz regulator i ustaw natężenie przepływu na pięć litrów na minutę. Wystaw szczury na działanie gazowego formaldehydu przez dwie godziny.

Pokazano tutaj reprezentatywne zdjęcia zapalenia skóry u szczura leczonego kapsaicyną. Chronologiczny rozwój zapalenia skóry u szczurów leczonych kapsaicyną przedstawiono tutaj. Obraz ten przedstawia chronologiczny rozwój zachowań związanych z drapaniem u szczurów leczonych kapsaicyną.

Jest to reprezentatywny obraz nawracających zmian skórnych u 16-tygodniowych szczurów leczonych kapsaicyną. Poziomy IgE w surowicy są znacznie podwyższone u zwierząt leczonych kapsaicyną. Znaczne zwiększenie ekspresji mRNA IL-4 obserwuje się również u zwierząt leczonych kapsaicyną.

Wykazano znaczne zwiększenie ekspresji mRNA IL-13 u zwierząt leczonych kapsaicyną. Te reprezentatywne zdjęcia pokazują atopowe zapalenie skóry po piątym tygodniu leczenia przy użyciu 1,2 części na milion. I 0,8 części na milion formaldehydu w porównaniu z kontrolowanym uzdatnianiem powietrzem.

Narażenie na formaldehyd w ilości 1,2 części na milion, ale nie 0,8 części na milion formaldehydu, znacznie zaostrzyło świąd w modelu atopowego zapalenia skóry leczonego kapsaicyną. Podobne wyniki zaobserwowano, gdy mierzono zapalenie skóry. Podwyższone poziomy IgE w surowicy zaobserwowano w szczurzym modelu AD leczonym kapsaicyną, któremu podawano 1,2 części na milion formaldehydu.

Postępując zgodnie z tą procedurą, można użyć innych materiałów, takich jak roztwór gylkolu, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania związane z wpływem określonego materiału na atopowe zapalenie skóry. Po tych osiągnięciach technika ta utorowała drogę naukowcom w dziedzinie dermatologii do zbadania roli czynników środowiskowych w patogenezie atopowego zapalenia skóry.