-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Cancer Research
Zliczanie białek w pojedynczych komórkach za pomocą adresowalnych mikromacierzy kropelkowych
Zliczanie białek w pojedynczych komórkach za pomocą adresowalnych mikromacierzy kropelkowych
JoVE Journal
Cancer Research
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Cancer Research
Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Zliczanie białek w pojedynczych komórkach za pomocą adresowalnych mikromacierzy kropelkowych

Full Text
9,029 Views
12:25 min
July 6, 2018

DOI: 10.3791/56110-v

Stelios Chatzimichail*1, Pashiini Supramaniam*1, Oscar Ces1, Ali Salehi-Reyhani1

1Institute of Chemical Biology, Department of Chemistry,Imperial College London

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study introduces addressable droplet microarrays (ADMs), a novel method for determining absolute protein abundance in single cells. The technique is demonstrated through the characterization of p53 protein expression heterogeneity in a human cancer cell line.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Proteomics

Background

  • Understanding protein behavior at the single-cell level is crucial for biological research.
  • Traditional biochemical techniques often obscure the heterogeneity of cell populations.
  • Single-cell assays can provide insights into gene expression dynamics.
  • Addressable droplet microarrays offer a sensitive approach for protein quantification.

Purpose of Study

  • To determine the absolute protein copy number of target proteins in single cells.
  • To explore the variability in protein expression among individual cells.
  • To enhance the accuracy of quantifying controlled gene expression.

Methods Used

  • Development of chips and antibody microarrays.
  • Implementation of droplet microarray technology.
  • Single-cell protein assays for downstream analysis.
  • Characterization of protein expression in cancer cell lines.

Main Results

  • Successful quantification of p53 protein levels in single cells.
  • Demonstration of heterogeneity in protein expression within a cell population.
  • Validation of the ADM method for single-cell analysis.
  • Insights into the relationship between protein abundance and cellular behavior.

Conclusions

  • ADMs provide a powerful tool for studying protein dynamics at the single-cell level.
  • The method can reveal critical insights into cancer biology.
  • Future applications may extend to various fields of biological research.

Frequently Asked Questions

What are addressable droplet microarrays?
ADMs are a method for analyzing proteins in single cells using droplet technology.
How does single-cell analysis benefit research?
It captures the heterogeneity of cell populations, providing more accurate biological insights.
What protein was characterized in this study?
The tumor suppressor protein p53 was characterized for its expression levels.
What challenges do researchers face with single-cell assays?
Sensitivity issues and limited protein amounts can complicate single-cell analyses.
What is the significance of studying protein abundance?
Understanding protein abundance is crucial for insights into cellular functions and disease mechanisms.

Tutaj prezentujemy adresowalne mikromacierze kropelkowe (ADM), metodę opartą na tablicy kropelkowej, która jest w stanie określić bezwzględną obfitość białek w pojedynczych komórkach. Wykazujemy zdolność ADM do charakteryzowania niejednorodności ekspresji białka supresorowego p53 w ludzkiej linii komórek nowotworowych.

Ogólnym celem tego eksperymentu jest określenie bezwzględnej liczby kopii białka docelowego białka z rozdzielczością pojedynczej komórki. Techniki jednokomórkowe umożliwią lepsze zrozumienie zachowania białka w odniesieniu do centralnego dogmatu i pomogą w dokładnym określeniu ilościowym kontrolowanej ekspresji genów. Praca na poziomie pojedynczej komórki może uchwycić bogatą heterogeniczność populacji komórek, która w przeciwnym razie zostałaby utracona w wyniku uśredniania, które ma miejsce przy użyciu tradycyjnych technik biochemicznych.

Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały trudności ze względu na czułość testów jednokomórkowych lub ograniczoną ilość białka w każdej komórce. Po raz pierwszy wpadliśmy na pomysł tej metody, gdy chcieliśmy przeprowadzić test białka jednokomórkowego, który można by łatwo pobrać do dalszej analizy. Rozpocznij tę procedurę od wykonania chipów i wydrukowania mikromacierzy przeciwciał zgodnie z opisem w protokole tekstowym.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Słowa kluczowe: Pojedyncza komórka liczba kopii białka adresowalna mikromacierz kropelkowa niejednorodność centralny dogmat ekspresja genów rurki z topionej krzemionki dysza koncentryczna rurka PTFE rurka FEP strzykawka Hamiltona klej cyjanoakrylowy roztwór blokujący PBSA

Related Videos

Metody detekcji fluorescencji dla mikroprzepływowych platform kropelkowych

14:16

Metody detekcji fluorescencji dla mikroprzepływowych platform kropelkowych

Related Videos

23K Views

Mikroprzepływowy chip do wszechstronnej analizy chemicznej pojedynczych komórek

15:41

Mikroprzepływowy chip do wszechstronnej analizy chemicznej pojedynczych komórek

Related Videos

15.6K Views

Prosty masowy odczyt cyfrowych testów ilościowych kwasów nukleinowych

06:55

Prosty masowy odczyt cyfrowych testów ilościowych kwasów nukleinowych

Related Videos

8.8K Views

Wytwarzanie mikromacierzy przeciwciał z kodami kreskowymi o dużej gęstości pod kontrolą przepływu

09:05

Wytwarzanie mikromacierzy przeciwciał z kodami kreskowymi o dużej gęstości pod kontrolą przepływu

Related Videos

21.9K Views

Kwantyfikacja krążącego mikroRNA przy użyciu chemii barwnika wiążącego DNA i kropelkowego cyfrowego PCR

07:37

Kwantyfikacja krążącego mikroRNA przy użyciu chemii barwnika wiążącego DNA i kropelkowego cyfrowego PCR

Related Videos

9.2K Views

Snap Chip do multipleksowanych testów immunologicznych typu sandwich wolnych od reaktywności krzyżowej i Spotterów

10:44

Snap Chip do multipleksowanych testów immunologicznych typu sandwich wolnych od reaktywności krzyżowej i Spotterów

Related Videos

6.9K Views

Kwantyfikacja jednorodności znakowania w całym proteomie na poziomie pojedynczej cząsteczki

08:29

Kwantyfikacja jednorodności znakowania w całym proteomie na poziomie pojedynczej cząsteczki

Related Videos

6.6K Views

Femtolitrowa matryca kropelkowa do masowo równoległej syntezy białek z pojedynczych cząsteczek DNA

10:45

Femtolitrowa matryca kropelkowa do masowo równoległej syntezy białek z pojedynczych cząsteczek DNA

Related Videos

11K Views

Pomiar liczby kopii i heteroplazmii mitochondrialnego DNA pojedynczej komórki za pomocą cyfrowej reakcji łańcuchowej polimerazy kropelkowej

09:15

Pomiar liczby kopii i heteroplazmii mitochondrialnego DNA pojedynczej komórki za pomocą cyfrowej reakcji łańcuchowej polimerazy kropelkowej

Related Videos

5.6K Views

Szybkie zliczanie jednostek tworzących kolonie w formacie 96-dołkowej płytki zastosowane do mikrobiomu Drosophila

12:55

Szybkie zliczanie jednostek tworzących kolonie w formacie 96-dołkowej płytki zastosowane do mikrobiomu Drosophila

Related Videos

8.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code