Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

Jill A. Dembowski; Neal A. Deluca

doi:10.3791/56374

Oczyszczanie DNA wirusa w celu identyfikacji powiązanych białek wirusowych i komórkowych

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

Oczyszczanie DNA wirusa w celu identyfikacji powiązanych białek wirusowych i komórkowych

Full Text

14,184 Views

08:26 min

August 31, 2017

DOI: 10.3791/56374-v

Jill A. Dembowski¹, Neal A. Deluca¹

¹Department of Microbiology and Molecular Genetics,University of Pittsburgh School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Celem tego protokołu jest specyficzne oznaczanie i selektywne izolowanie wirusowego DNA z zakażonych komórek w celu scharakteryzowania białek związanych z genomem wirusa.

Ogólnym celem tej metody jest oczyszczenie DNA wirusa opryszczki pospolitej typu 1 z zakażonych komórek w celu analizy proteomicznej białek związanych z genomem wirusa. Metoda ta dostarcza kluczowych informacji na temat udziału czynników komórkowych i zakażenia wirusem opryszczki. Główną zaletą tej techniki jest to, że można ją dostosować do bezpośredniego oczyszczania różnych populacji wirusowego DNA z zakażonych komórek, co pozwala na analizę wielu aspektów infekcji.

Rozpocznij tę procedurę od hodowli pięciu komórek MRC, zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Następnie rozcieńczyć HSV-1 w zimnym roztworze soli fizjologicznej buforowanej trisem lub TBS. W kolejnych krokach ważne jest, aby wyłączyć dmuchawę i kaptur do hodowli tkankowych, aby zapobiec wysychaniu komórek.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos