Stymulacja nerwów jamistych i rejestracja ciśnienia w ciałach jamistych u szczura

Ogólnym celem tej metody jest opisanie uproszczonej techniki chirurgicznej kaniulacji podudzia prącia w celu rejestracji ciśnienia wewnątrzjamistego oraz wypreparowania i izolacji nerwu jamistego w celu elektrostymulacji. Ten eksperymentalny protokół może być wykorzystany do badania patofizjologii zaburzeń erekcji i testowania nowych terapii. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest powtarzalna, szybka i niezawodna.

Rozwiązano w nim i wyeliminowano główne pułapki opisane w tym samouczku. Chociaż metoda ta może zapewnić wgląd w zaburzenia erekcji, izolacja kompleksu elektrod nerwowych za pomocą biokompatybilnego kleju silikonowego ma zastosowanie do elektrostymulacji dowolnego nerwu obwodowego, co pozwala na fizjologiczne badanie innych narządów. Aby rozpocząć tę procedurę, po znieczuleniu zwierzęcia należy ogolić dolną połowę jego brzucha i krocza.

Szoruj zwierzę 70% alkoholem i jodonem trzy razy na przemian. Następnie umieść szczura na podgrzewanej podkładce chirurgicznej w pozycji leżącej. Nałóż maść na oczy i utrzymuj szczura w znieczuleniu za pomocą stożka nosowego z 2,5% izofluranem.

Następnie należy wykonać cały zabieg chirurgiczny pod mikroskopem operacyjnym na serwety. Następnie wykonaj jednocentymetrowe nacięcie skóry pięć mililitrów w bok od linii środkowej, zaczynając od poziomu podstawy penisa i rozciągając się w dół. Użyj patyczka higienicznego, aby ostrożnie oddzielić powięź boczną od moszny.

Po wypreparowaniu powięzi użyj pary retraktorów, aby odciągnąć krawędzie skóry i jądro i zlokalizować guzowatość kulszową, dotykając palpacyjnie wacikiem z bawełnianą końcówką. Przeciąć tkankę tłuszczową przyśrodkowo, aż do wyświetlenia mięśnia kulszowo-jamistego. Użyj kleszczy, aby oddzielić mięsień wzdłużnie i odsłonić osłonkę białawą.

Tunica albuginea pojawi się jako jasna biała struktura. Po kalibracji ustawień systemu wprowadź rurkę przez skórę krocza, upewniając się, że biegnie równolegle do podudzia prącia. Następnie pozostaw linię na miejscu i utrzymuj nacięcie wilgotne solą fizjologiczną.

W tej procedurze wykonaj dwucentymetrowe nacięcie dolnej linii środkowej brzucha przez skórę. Wykonaj pasujące nacięcie przez powięź wzdłuż linea alba, aby odsłonić pęcherz moczowy i prostatę. Użyj zwijaczy, aby uzyskać dobrą ekspozycję.

Następnie użyj wacików z bawełnianą końcówką, aby oddzielić prostatę od tkanki tłuszczowej. Wyreguluj zwijacze i zakończ preparację, aż uzyskasz wyraźną wizualizację MPG i CN biegnących po grzbietowej bocznej stronie prostaty. Po zlokalizowaniu MPG i CN ostrożnie naciąć powięź leżącą nad nerwem od dwóch do pięciu milimetrów dystalnie do MPG.

Następnie rozprowadź tkankę po obu stronach nerwu i pod nim, aby uwolnić czteromilimetrową część, a następnie wsuń szew pod nerw. Lekko podnieś nerw za pomocą szwu, aby ułatwić umieszczenie haczyków elektrody bipolarnej wokół nerwu. Pozwól asystentowi mieszać dwuskładnikowy klej silikonowy z końcówką igły insulinowej przez pięć sekund.

Osusz nerw i nałóż klej na obszar wokół haczyków i nerwu. Utrzymuj nerw uniesiony, lekko pociągając za elektrodę przez około minutę, aby klej wyschł. Następnie wyjmij zwijacze, z wyjątkiem zwijaczy po prawej stronie, aby uniknąć ciągnięcia lub skręcania elektrody.

Następnie zwilż odsłonięte narządy solą fizjologiczną i połóż gazę nasączoną solą fizjologiczną na nacięciu. W tej procedurze przywróć wizualizację osłonki białawej za pomocą zwijaczy. Upewnij się, że nie przyczepiasz zwijaczy do mięśnia kulszowo-jamistego, ponieważ spowoduje to zniekształcenie podudzia.

Następnie przymocuj igłę do rurki PE50 i przepłucz rurkę heparynizowaną solą fizjologiczną przed wprowadzeniem jej do osłonki białawej. Utrzymuj osłonkę białawą rozciągniętą i przytrzymaj leżący nad nią mięsień dystalnie do punktu przyczepu dominującą ręką. Następnie przytrzymaj igłę w swojej niedominującej ręce i wprowadź ją do ciała jamistego.

Przepłukać linię, aby potwierdzić prawidłowe umieszczenie w ciałach jamistych bez wycieku. Wkłucie igły w ciało jamiste w celu rejestracji ciśnienia stanowi krytyczny krok. Podczas wprowadzania igły do podkuli ważne jest, aby podpórka była rozciągnięta, a igła była ułożona równolegle do jej biegu.

Przepłucz rurkę i dociśnij crus, aby przetestować linię. Upewnij się, że nie ma wycieków. Następnie przymocuj rurkę do stołu za pomocą taśmy, aby zapobiec przypadkowemu pociągnięciu za żyłkę.

Następnie wyjmij zwijacze. Ustaw parametry na stymulatorze i stosuj stymulację przez 50 sekund z minimum jednominutową przerwą między stymulacjami. Rysunek ten pokazuje zmniejszoną pierwszą reakcję ze stymulacją 50 milimetrów słupa rtęci, po której następuje druga i trzecia stymulacja 66 milimetrów słupa rtęci.

Następnie kolejne pomiary zostały zarejestrowane na normalnym poziomie przy 73 milimetrach słupa rtęci. Pokazano tutaj stabilność wyników przy użyciu tego protokołu z 10 stymulacjami back-to-back między 75 a 78 milimetrami słupa rtęci. Rysunek ten przedstawia skuteczne dawki znieczulenia w przypadku ciśnienia w ciałach jamistych.

Obserwowano zmniejszoną i bardziej zmienną odpowiedź na zwiększenie dawki izofluranu w porównaniu ze stabilną odpowiedzią na 2% w pierwszych dwóch i ostatnich trzech stymulacjach. Niebieski ślad na górze pokazuje stałe ciśnienie w tętnicy głównej. Rysunek ten przedstawia wpływ rodzaju znieczulenia na ciśnienie w ciałach jamistych.

Początkowe stymulacje przeprowadzone w znieczuleniu izofluranem wykazały wzrost ciśnienia o 80 milimetrów słupa rtęci. Po podaniu fentanylu midazolamu nastąpił wzrost reakcji na 110 milimetrów słupa rtęci. Rysunek ten pokazuje efekt podawania tlenu przez stożek nosowy.

Zaprzestanie podawania tlenu przez stożek nosowy spowodowało znaczne zmniejszenie wzrostu ciśnienia w ciałach jamistych przy stymulacji nerwów jamistych. Nie stwierdzono wpływu na ciśnienie tętnicze główne. Po opanowaniu i prawidłowym wykonaniu procedura ta może zostać zakończona w ciągu 30 minut.

Podczas wykonywania stymulacji należy pamiętać, że zarówno rodzaj, jak i poziom znieczulenia oraz natlenienia mają zasadniczy wpływ na ciśnienie w ciałach jamistych. Po tej procedurze można przetestować różne środki, aby odpowiedzieć na pytania związane z patofizjologią zaburzeń erekcji i wprowadzaniem nowych metod leczenia. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dokładnie zrozumieć, jak wykonywać stymulację nerwów kaniuli, w tym izolację elektrokompleksu nerwowego za pomocą kleju uszczelniającego i rejestrację ciśnienia w ciałach jamistych po minimalnie inwazyjnym rozwarstwieniu i kaniulacji części jamistych.