Szczurzy model ortotopowego przeszczepu wątroby z wykorzystaniem nowatorskiej techniki zespolenia magnetycznego do rekonstrukcji żyły głównej nadwątrobowej

Ogólnym celem tego protokołu jest wprowadzenie ortotopalnego modelu przeszczepu wątroby u szczurów przy użyciu techniki zespolenia magnetycznego do rekonstrukcji żyły głównej nadwątrobowej. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytanie w modelu przeszczepiania wątroby dotyczące rekonstrukcji żyły głównej nadwątrobowej. Główną zaletą tej techniki jest to, że skraca fazę bezwątrobową przeszczepu wątroby i znacznie poprawia wskaźnik przeżycia pooperacyjnego.

Najpierw ogol całą skórę brzucha szczura. Zdezynfekuj odpowiednią skórę roztworem jodu powidonu. Wypreparuj więzadło pospolite wokół wątroby.

Następnie wyizoluj i podwiąż lewą dolną żyłę przeponową . Wykonaj nacięcie w kształcie litery V na przedniej ścianie. Wprowadzić stent do światła przewodu żółciowego.

Upewnij się, że co najmniej połowa stentu znajduje się poza kanałem żółciowym. Zabezpiecz stent jedwabnym szwem 6-0. Odetnij jeden koniec szwu.

Drugi trzymaj do przytrzymania podczas późniejszego zespolenia. Odizolować żyłę podwątrobową główną do poziomu lewej żyły nerkowej. Wypreparuj go, aż żyła główna podwątrobowa zostanie zeszkieletowana.

Oddziel i podwiąż prawą żyłę nadnerczową. Oddziel i podwiąż prawą żyłę nerkową. Heparynizuj szczura przez żyłę grzbietową prącia.

Wprowadzić cewnik o rozmiarze 22 do aorty brzusznej poniżej lewej żyły nerkowej. Wykonaj torakotomię. Zacisnąć aortę piersiową za pomocą mikrokleszczy.

Wykonać perfuzję wątroby dawcy przez cewnik w aorcie. Przeciąć żyłę główną nadwątrobową. W międzyczasie przeciąć żyłę główną poniżej prawej żyły nerkowej, aby umożliwić wypływ perfuzatu z wątroby.

Wypreparuj tkankę łączną otaczającą żyłę wrotną. Podwiązać i podzielić żyłę odźwiernika. Przeciąć żyłę wrotną na poziomie żyły śledzionowej.

Przeciąć żyłę główną podwątrobową na poziomie lewej żyły nerkowej. Preparaty do przeszczepu wątroby wykonuje się w kąpieli solankowej o temperaturze czterech stopni Celsjusza. Wprowadzić żyłę główną podwątrobową do mankietu, tak aby przedłużenie mankietu było skierowane w stronę wątroby.

Evert dystalny koniec żyły głównej podwątrobowej nad ciałem mankietu. Zabezpiecz krawędź jedwabnym szwem 6-0. Powtórz powyższe kroki na żyle wrotnej, aby przymocować mankiet do żyły wrotnej dawcy.

Przeciągnij membranę przez kleszcze i przytnij żyłę nadwątrobową główną. Przeprowadź żyłę główną nadwątrobową przez pierścień magnetyczny. Evert dystalny koniec żyły głównej nadwątrobowej nad pierścieniem.

I zabezpiecz pierścionek jedwabnym szwem 6-0. Następnie usuń nadmiar membrany wokół wątroby. Umieść jedwabny szew 6-0 i podwiązaj wspólny przewód żółciowy.

Odizoluj wspólny przewód żółciowy od pierwszego wrotu wątroby. Podwiązaj i podziel prawą żyłę nadnercza. Umieść pasek w żyle głównej nadwątrobowej wątroby.

Zacisnąć żyłę podwątrobową tuż nad prawą żyłą nerkową za pomocą klipsów do mikronaczyń. Zacisnąć żyłę wrotną na poziomie żyły odźwiernika. Wstrzyknij powoli dwa mililitry normalnej soli fizjologicznej przez żyłę wrotną, aby wypłukać krew z wątroby.

Przeciągnij wątrobę w dół, pociągając za poprzednio umieszczony pasek. Zacisnąć żyłę główną nadwątrobową i część przepony za pomocą zacisku Satinsky. Wyciąć wątrobę, przecinając żyłę główną nadwątrobową tuż nad wątrobą.

Przeciąć żyłę główną podwątrobową w pobliżu miąższu i żyły wrotnej w guzie wątrobowym. Włożyć pozostałą żyłę nadwątrobową biorcy do pierścienia magnetycznego. Zamocuj pierścień magnetyczny na zacisku Satinsky za pomocą przyciągania magnetycznego.

Evert żyły głównej nadwątrobowej nad pierścieniem magnetycznym. Umieść przeszczep wątroby dawcy ortotopowo i napełnij światło normalnym roztworem soli fizjologicznej, sprzęgając pierścienie magnetyczne, aby wypełnić konstrukcję naczynia. Zrekonstruuj żyłę wrotną.

Wypełnij światło żyły wrotnej zwykłą solą fizjologiczną. Włóż korpus mankietu żyły wrotnej dawcy do żyły wrotnej biorcy. I zabezpiecz to za pomocą obwodowej jedwabnej ligatury 6-0.

Usuń zacisk Satinsky z żyły głównej nadwątrobowej. Naciąć literę V na przedniej ścianie wspólnego przewodu żółciowego. Wprowadzić stent dawcy do światła przewodu żółciowego biorcy.

I napraw go jedwabnym szwem obwodowym 6-0. Pociągnij szwy na dwóch drogach żółciowych do siebie i zawiąż szwy, aby zbliżyć drogi żółciowe do siebie. Angiografia dwa tygodnie POD wykazała opatentowany przepływ krwi w zespoleniu żyły głównej nadwątrobowej.

Wskaźnik przeżycia po przeszczepie wynosił do 85% do 30 dnia POD. Technika zespolenia magnetycznego umożliwia łatwą i szybką rekonstrukcję żyły głównej nadwątrobowej u szczurów. Po obejrzeniu tego filmu, bez zaawansowanych umiejętności mikrochirurgicznych, można uzyskać wiarygodne i powtarzalne wyniki przy użyciu tego szczurzego modelu przeszczepu wątroby.