Name: Eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: Poznaj metodę tworzenia modelu zespołu metabolicznego u królików za pomocą diety wysokotłuszczowej i wysokosacharozowej. Model ten pozwala badać przebudowę narządów oraz testować nowe podejścia terapeutyczne.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez fundusze Generalitat Valenciana (GV2015-062), Universitat de València (UV-INV-PRECOMP14-206372) do MZ, Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) i Instituto de Salud Carlos III-FEDER (CIBERCV CB16/11/0486) dla FJC.

Opieka nad zwierzętami i protokoły eksperymentalne użyte w tym badaniu były zgodne z dyrektywą UE 2010/63 w sprawie ochrony zwierząt wykorzystywanych do celów naukowych i zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (2015/VSC/PEA/00049).
UWAGA: Protokół składa się z przewlekłego podawania diety wysokotłuszczowej i bogatej w sacharozę przez 28 tygodni oraz oceny głównych składników MetS. Użyliśmy 11 dorosłych samców królików nowozelandzkich białych (NZW) o wadze 4,39 ± 0,14 kg (s.d.), które na początku protokołu eksperymentalnego miały 20 - 22 tygodnie. Umieszczono je w pomieszczeniu, w którym wilgotność (50 ± 5%) i temperatura (20 ± 1,5 °C) były kontrolowane z 12-godzinnym cyklem świetlnym. Słowa "karma" i "dieta" mogą być używane zamiennie w krokach protokołu.
1. Administracja diety
<ol>
	<li>Zaopatrz się lub przygotuj diety
	<ol>
		<li>Zaopatrz się w dostępną na rynku dietę wysokotłuszczową z dodatkiem uwodornionego oleju kokosowego (10%) i smalcu (5%)19. Ta dieta dostarczy 3,7 kcal·g-1.</li>
		<li>Przygotuj od 5 do 15% roztworów sacharozy, rozpuszczając odpowiednie ilości sacharozy w wysterylizowanej wodzie (np. użyj 300 g sacharozy w 2 litrach bulionu na 15% roztwór sacharozy). 15% roztwór dostarczy 0,6 kcal·mL-1.</li>
		<li>Uzyskaj dostępną na rynku dietę kontrolną19, która dostarcza 2,7 kcal·g-1.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Aklimatyzuj zwierzęta przez 4 tygodnie
	<ol>
		<li>Każde zwierzę w grupie kontrolnej należy karmić 120 g diety kontrolnej dziennie. Dostarczaj wodę ad libitum.</li>
		<li>Karma dla zwierząt z grupy MetS 250 g karmy, zaczynając od 50% karmy kontrolnej i 50% karmy wysokotłuszczowej, stopniowo zwiększając do 100% karmy wysokotłuszczowej do końca tygodnia 4, 
		UWAGA: Celem byłoby osiągnięcie: (i) 35% kontroli i 65% wysokotłuszczowej paszy do końca 1. tygodnia; (ii) 25% karmy kontrolnej i 75% wysokotłuszczowej do końca 2. tygodnia; (iii) 15% grupy kontrolnej i 85% wysokotłuszczowej karmy do końca 3. tygodnia. (iv) 100% wysokotłuszczowa karma do końca 4 tygodnia.</li>
		<li>Na początku podawaj zwierzętom z grupy MetS wodę z 5% sacharozy i zwiększ stężenie sacharozy do 15% pod koniec 4tygodnia.</li>
		<li>Zarejestruj dzienne spożycie karmy i roztworu sacharozy, aby obliczyć spożycie kalorii zgodnie z wartościami podanymi w 1.1.1 i 1.1.2.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Induce MetS (28 tygodni)
	<ol>
		<li>Każde zwierzę w grupie kontrolnej należy karmić 120 g karmy kontrolnej i wody ad libitum dziennie.</li>
		<li>Pokarm zwierzęta z grupy MetS 250 g wysokotłuszczowej karmy i 15% sacharozy w wodzie. Wymieniaj karmę codziennie i roztwór sacharozy co trzeci dzień.</li>
		<li>Codziennie waż pozostałą karmę i wodę, aby oszacować dzienne spożycie.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Ocena morfologiczna
<ol>
	<li>Mierz masę ciała zwierzęcia co tydzień.</li>
	<li>Zmierz wzrost, długość, kontur brzucha i długość piszczeli oraz oszacuj BMI przed podaniem diety eksperymentalnej oraz w 14. i 28. tygodniu u znieczulonych zwierząt.
	<ol>
		<li>Kankanulować żyłę brzeżną prawego ucha za pomocą sterylnego jednorazowego cewnika (18 - 22 G) i wstrzyknąć propofol (8 mgkg-1), a następnie 1,5 ml 0,9% roztworu NaCl. U znieczulonego królika wykonaj pomiary wymienione w kolejnych krokach.</li>
		<li>Zmierz wysokość i długość. Za pomocą taśmy mierniczej zmierz i zapisz odległość od nosa do pięty w bocznej pozycji odleżynowej (długości). W tej samej pozycji zmierz odległość od wyrostka barkowego w ramieniu do czubka łapy (wysokość).</li>
		<li>Obliczać Wskaźnik masy ciała (BMI)20 jako masa ciała (kg) · [długość ciała (m) × wzrost (m)]-1.</li>
		<li>Delikatnie umieść taśmę mierniczą wokół konturu brzucha i wykonaj pomiar ze zwierzęciem w pozycji leżącej.</li>
		<li>Zmierz długość kości piszczelowej od dolnej części stawu kolanowego do przyczepu ścięgna Achillesa.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Glikemia na czczo i dożylny test tolerancji glukozy (IVGTT)
UWAGA: Zaleca się rozpoczęcie procedur o tej samej porze dnia (tj. 14 - 15).
<ol>
	<li>Przygotować podstawowy roztwór glukozy (60%) z 60 g glukozy w 100 ml 0,9% roztworu NaCl. </li>
	<li>Pościć zwierzę przez 7 godzin (usuwając pokarm i utrzymując wodę), a następnie umieść przytomnego królika w unieruchomieniu w pozycji leżącej. Przygotuj glukometr (włóż nowy pasek do glukometru) i pobierz pierwszą próbkę z żyły brzeżnej lewego ucha za pomocą lancetu, aby uzyskać kroplę krwi. Następnie dotknij kropli krwi paskiem testowym i zmierz poziom glukozy we krwi za pomocą glukometru, aby określić glikemię na czczo.</li>
	<li>Kankaniutować żyłę brzeżną ucha prawego za pomocą jednorazowego cewnika (18 - 22 G) i wstrzyknąć bolus z 60% roztworem glukozy (0,6 g·kg-1). 
	UWAGA: Aby przygotować bolus, dodać 1 ml/kg bulionu glukozy.</li>
	<li>Pobrać próbki krwi za pomocą lancetu (jedna kropla krwi) po 15, 30, 60, 90, 120 i 180 minutach od wstrzyknięcia glukozy i przeanalizować je za pomocą glukometru, jak w ppkt 3.2.</li>
	<li>Wyjmij jednorazowy cewnik i ściśnij miejsce wprowadzenia cewnika gazą. Po krzepnięciu krwi zdejmij gazę i sprawdź stan zwierzęcia.</li>
</ol>
4. Ciśnienie krwi
<ol>
	<li>Przygotuj system akwizycji, w tym przetwornik ciśnienia, strzykawkę 10 ml z 0,9% NaCl, trójdrożny kurek, wzmacniacz oraz komputer PC/laptop z oprogramowaniem do akwizycji (do pomiaru ciśnienia krwi).</li>
	<li>Skonfiguruj sprzęt. Najpierw umieść trójdrożny kran i strzykawkę w przetworniku ciśnienia, między przetwornikiem a cewnikiem i podłącz przetwornik ciśnienia do amplifier. Następnie podłącz amplifier do komputera/laptopa.</li>
	<li>Przeprowadzić kalibrację przetwornika ciśnienia zgodnie z zaleceniami producenta.</li>
	<li>Umieść przytomne zwierzę w unieruchomieniu królika w pozycji leżącej. Rozgrzej ucho przed kaniulacją, a następnie miejscowo nałóż środek znieczulający miejscowo (2,5% lidokainy/prylokainy) do ucha w miejscu wprowadzenia. Delikatnie dotknij obszaru, w którym biegnie pakiet naczyniowy, aby łatwo zidentyfikować tętnicę. Następnie wprowadzić sterylny cewnik (18 - 22 G) do tętnicy centralnej lewego ucha. Poluzuj pasy i pozwól zwierzęciu zachować spokój przez 30 minut.</li>
	<li>Rejestruj ciśnienie krwi w sposób ciągły przez 20 minut bezpośrednio z cewnika tętniczego, umieszczając przetwornik ciśnienia umieszczony obok zwierzęcia na poziomie serca (częstotliwość próbkowania: 1 KHz, patrz <silna klasa="xfig">Rysunek 5B). 
	UWAGA: Aby zapis ciśnienia krwi (BP) był wolny od zakłóceń krzepnięcia krwi (sygnał BP traci amplitudę lub zanika), należy wykonać wstrzyknięcie NaCl (0,9%). Za pomocą trójdrogowego kranu zamknij obwód biegnący od przetwornika do cewnika, otwórz obwód biegnący od strzykawki do cewnika i wstrzyknij 1-2 ml. Spowoduje to usunięcie skrzepów krwi, które mogą tworzyć się w cewniku. Następnie otwórz obwód między przetwornikiem a cewnikiem i kontynuuj nagrywanie po odzyskaniu sygnału.</li>
	<li>Po zakończeniu nagrywania wyjmij cewnik i ściśnij gazą w miejscu wprowadzenia cewnika, aby zatrzymać utratę krwi. Gdy krew zakrzepnie, usuń gazę i sprawdź stan zwierzęcia.</li>
</ol>
5. Pomiary plazmy
UWAGA: Zaleca się rozpoczęcie procedur o tej samej porze dnia (tj. 14 - 15).
<ol>
	<li>Pościć zwierzę przez 7 godzin (usuwając pokarm i utrzymując wodę), a następnie umieść przytomne zwierzę w unieruchomieniu w pozycji leżącej i wprowadź sterylną igłę 21 G w żyłę brzeżną lewego ucha. Gdy krew zacznie kapać, wyrzuć pierwszą kroplę i zbierz próbki krwi w probówkach EDTA do poziomu wskazanego w probówce. Próbki należy przechowywać na lodzie.</li>
	<li>Odwirować próbki krwi w temperaturze 1 500 x g, 15 min, 4 °C. Po odwirowaniu odessać osocze za pomocą pipety i przygotować porcje 250 μl.</li>
	<li>Świeże próbki należy natychmiast przeanalizować. Podstawowe parametry kontrolne to: trójglicerydy, cholesterol całkowity, cholesterol HDL i cholesterol LDL. 
	UWAGA: Próbki, które nie zostały świeżo przeanalizowane, należy natychmiast przechowywać w zamrażarce w temperaturze -80 °C. Jeśli jesteś zainteresowany analizą stężenia glukozy we krwi z próbek osocza, test stężenia glukozy we krwi powinien używać probówek ze szczawianem fluoru zamiast EDTA.</li>
</ol>

<ol><li>Cornier, M. A., Dabelea, D., Hernandez, T. L., Lindstrom, R. C., Steig, A. J., Stob, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+rev%22%5BJournal%5D)">The metabolic syndrome.</a> Endocr rev. 29 (7), 777-822 (2008).</li>
<li>Alberti, K. G., Zimmet, P., Shaw, J., Grundy, S. M. IDF Consensus Worldwide Definition of the Metabolic Syndrome. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html">https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html</a> (2006).</li>
<li>Alberti, K. G., Eckel, R. H., Grundy, S. M., Zimmet, P. Z., Cleeman, J. I., Donato, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmonizing+the+metabolic+syndrome%3A+a+joint+interim+statement+of+the+International+Diabetes+Federation+Task+Force+on+Epidemiology+and+Prevention%3B+National+Heart%2C+Lung%2C+and+Blood+Institute%3B+American+Heart+Association%3B+World+Heart+Federation%3B+International+Atherosclerosis+Society%3B+and+International+Association+for+the+Study+of+Obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity.</a> Circulation. 120 (16), 1640-1645 (2009).</li>
<li>Grundy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-diabetes%2C+metabolic+syndrome%2C+and+cardiovascular+risk%5BTitle%5D)+AND+%22JACC%22%5BJournal%5D)">Pre-diabetes, metabolic syndrome, and cardiovascular risk.</a> JACC. 59 (7), 635-643 (2012).</li>
<li>Verkest, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+metabolic+syndrome+a+useful+clinical+concept+in+dogs%3F+A+review+of+the+evidence%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+J%22%5BJournal%5D)">Is the metabolic syndrome a useful clinical concept in dogs? A review of the evidence.</a> Vet J. 199 (1), 24-30 (2014).</li>
<li>Zhang, X., Lerman, L. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+Metabolic+Syndrome%3A+Contributions+of+Swine+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Investigating the Metabolic Syndrome: Contributions of Swine Models.</a> Toxicol Pathol. 44 (3), 358-366 (2016).</li>
<li>Wong, S. K., Chin, K. Y., Suhaimi, F. H., Fairus, A., Ima-Nirwana, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+metabolic+syndrome%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Animal models of metabolic syndrome: a review.</a> Nutr Metab (Lond). 13, 65(2016).</li>
<li>Carroll, J. F., Dwyer, T. M., Grady, A. W., Reinhart, G. A., Montani, J. P., Cockrell, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension%2C+cardiac+hypertrophy%2C+and+neurohumoral+activity+in+a+new+animal+model+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hypertension, cardiac hypertrophy, and neurohumoral activity in a new animal model of obesity.</a> Am J Physiol. 271 (1 Pt 2), H373-H378 (1996).</li>
<li>Grooth, G. J., Klerkx, A. H., Stroes, E. S., Stalenhoef, A. F., Kastelein, J. J., Kuivenhoven, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+CETP+and+its+relation+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">A review of CETP and its relation to atherosclerosis.</a> J Lipid Res. 45 (11), 1967-1974 (2004).</li>
<li>Zarzoso, M., Mironov, S., Guerrero-Serna, G., Willis, B. C., Pandit, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventricular+remodelling+in+rabbits+with+sustained+high-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Ventricular remodelling in rabbits with sustained high-fat diet.</a> Acta Physiol (Oxf). 211 (1), 36-47 (2014).</li>
<li>Filippi, S., Vignozzi, L., Morelli, A., Chavalmane, A. K., Sarchielli, E., Fibbi, B., Saad, F., Sandner, P., Ruggiano, P., Vannelli, G. B., Mannucci, E., Maggi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testosterone+partially+ameliorates+metabolic+profile+and+erectile+responsiveness+to+PDE5+inhibitors+in+an+animal+model+of+male+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Testosterone partially ameliorates metabolic profile and erectile responsiveness to PDE5 inhibitors in an animal model of male metabolic syndrome.</a> J Sex Med. 6 (12), 3274-3288 (2009).</li>
<li>Waqar, A. B., Koike, T., Yu, Y., Inoue, T., Aoki, T., Liu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet+without+excess+calories+induces+metabolic+disorders+and+enhances+atherosclerosis+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">High-fat diet without excess calories induces metabolic disorders and enhances atherosclerosis in rabbits.</a> Atherosclerosis. 213 (1), 148-155 (2010).</li>
<li>Fan, J., Watanabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol-fed+and+transgenic+rabbit+models+for+the+study+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Atheroscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Cholesterol-fed and transgenic rabbit models for the study of atherosclerosis.</a> J Atheroscler Thromb. 7 (1), 26-32 (2000).</li>
<li>Yin, W., Yuan, Z., Wang, Z., Yang, B., Yang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+diet+high+in+saturated+fat+and+sucrose+alters+glucoregulation+and+induces+aortic+fatty+streaks+in+New+Zealand+White+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Diabetes+Res%22%5BJournal%5D)">A diet high in saturated fat and sucrose alters glucoregulation and induces aortic fatty streaks in New Zealand White rabbits.</a> Int J Exp Diabetes Res. 3 (3), 179-184 (2002).</li>
<li>Zhao, S., Chu, Y., Zhang, C., Lin, Y., Xu, K., Yang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diet-induced+central+obesity+and+insulin+resistance+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Physiol+Anim+Nutr+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Diet-induced central obesity and insulin resistance in rabbits.</a> J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 92 (1), 105-111 (2008).</li>
<li>Helfenstein, T., Fonseca, F. A., Ihara, S. S., Bottos, J. M., Moreira, F. T., Pott, H. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+glucose+tolerance+plus+hyperlipidaemia+induced+by+diet+promotes+retina+microaneurysms+in+New+Zealand+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Impaired glucose tolerance plus hyperlipidaemia induced by diet promotes retina microaneurysms in New Zealand rabbits.</a> Int J Exp Pathol. 92 (1), 40-49 (2011).</li>
<li>Ning, B., Wang, X., Yu, Y., Waqar, A. B., Yu, Q., Koike, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fructose+and+high-fat+diet-induced+insulin+resistance+enhances+atherosclerosis+in+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">High-fructose and high-fat diet-induced insulin resistance enhances atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits.</a> Nutr Metab (Lond). 12, 30(2015).</li>
<li>Liu, Y., Li, B., Li, M., Yu, Y., Wang, Z., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+cardiac+dysfunction+by+bilateral+surgical+renal+denervation+in+animals+with+diabetes+induced+by+high+fructose+and+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Improvement of cardiac dysfunction by bilateral surgical renal denervation in animals with diabetes induced by high fructose and high fat diet.</a> Diabetes Res Clin Pract. 115, 140-149 (2016).</li>
<li>Arias-Mutis, O. J., Marrachelli, V. G., Ruiz-Saurí, A., Alberola, A., Morales, J. M., Such-Miquel, L., Monleon, D., Chorro, F. J., Such, L., Zarzoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+an+experimental+model+of+diet-induced+metabolic+syndrome+in+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of an experimental model of diet-induced metabolic syndrome in rabbit.</a> PLoS One. 12 (5), e0178315(2017).</li>
<li>Nelson, R. W., Himsel, C. A., Feldman, E. C., Bottoms, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+tolerance+and+insulin+response+in+normal-weight+and+obese+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Glucose tolerance and insulin response in normal-weight and obese cats.</a> Am J Vet Res. 51 (9), 1357-1362 (1990).</li>
<li>Staup, M., Aoyagi, G., Bayless, T., Wang, Y., Chng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Metabolic+Status+in+Nonhuman+Primates+with+the+Intravenous+Glucose+Tolerance+Test%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test.</a> J Vis Exp. (117), e52895(2016).</li>
<li>Hall, J. E., do Carmo, J. M., da Silva, A. A., Wang, Z., Hall, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity-induced+hypertension%3A+interaction+of+neurohumoral+and+renal+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Obesity-induced hypertension: interaction of neurohumoral and renal mechanisms.</a> Circ Res. 116 (6), 991-1006 (2015).</li>
<li>Linz, D., Hohl, M., Mahfoud, F., Reil, J. C., Linz, W., Hübschle, T., Juretschke, H. P., Neumann-Häflin, C., Rütten, H., Böhm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+remodeling+and+myocardial+dysfunction+in+obese+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac remodeling and myocardial dysfunction in obese spontaneously hypertensive rats.</a> J Transl Med. 10 (10), 187(2012).</li>
<li>Sasser, T. A., Chapman, S. E., Li, S., Hudson, C., Orton, S. P., Diener, J. M., Gammon, S. T., Correcher, C., Leevy, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segmentation+and+measurement+of+fat+volumes+in+murine+obesity+models+using+X-ray+computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Segmentation and measurement of fat volumes in murine obesity models using X-ray computed tomography.</a> J Vis Exp. (62), e3680(2012).</li>
<li>Kawai, T., Ito, T., Ohwada, K., Mera, Y., Matsushita, M., Tomoike, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hereditary+postprandial+hypertriglyceridemic+rabbit+exhibits+insulin+resistance+and+central+obesity%3A+a+novel+model+of+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Hereditary postprandial hypertriglyceridemic rabbit exhibits insulin resistance and central obesity: a novel model of metabolic syndrome.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (12), 2752-2757 (2006).</li>
<li>Shiomi, M., Kobayashi, T., Kuniyoshi, N., Yamada, S., Ito, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction-prone+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits+with+mesenteric+fat+accumulation+are+a+novel+animal+model+for+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiology%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction-prone Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits with mesenteric fat accumulation are a novel animal model for metabolic syndrome.</a> Pathobiology. 79 (6), 329-338 (2012).</li>
<li>Hildrum, B., Mykletun, A., Hole, T., Midthjell, K., Dahl, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-specific+prevalence+of+the+metabolic+syndrome+defined+by+the+International+Diabetes+Federation+and+the+National+Cholesterol+Education+Program%3A+The+Norwegian+HUNT+2+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Age-specific prevalence of the metabolic syndrome defined by the International Diabetes Federation and the National Cholesterol Education Program: The Norwegian HUNT 2 study.</a> BMC Public Health. 7, 220(2007).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Ustanowienie odpowiedniego modelu eksperymentalnego może zapewnić bardziej spójną i wiarygodną metodę badania rozwoju MetS, a także konieczne jest zrozumienie podstawowych mechanizmów, które leżą u podstaw przebudowy narządów i układów. W tym miejscu opisujemy metody zastosowane do opracowania odpowiedniego modelu eksperymentalnego MetS indukowanego dietą oraz sposób oceny głównych składników tego klastra nieprawidłowości metabolicznych i sercowo-naczyniowych, które charakteryzują ten model: otyłość centralna, nadciśnien...

Otyłość i zespół metaboliczny (MetS) stały się narastającym problemem dla zdrowia publicznego i praktyki klinicznej, biorąc pod uwagę ich zwiększoną rozpowszechnioność wynikającą ze wzrostu siedzącego trybu życia i niezdrowych nawyków żywieniowych1. Istnieje kilka definicji MetS, ale większość z nich opisuje go jako zespół zmian sercowo-naczyniowych i metabolicznych, takich jak otyłość brzuszna, obniżony poziom cholesterolu HDL i podwyższony poziom cholesterolu LDL, podwyższony poziom trójglicerydów, nietolerancja glukozy oraz nadciśnienie tętnicze2,3,4. Rozpoznanie wymaga wystąpienia trzech z tych pięciu kryteriów.
Dzięki modelom zwierzęcym badania podstawowe pozwoliły na zbadanie mechanizmów leżących u podstaw procesów patologicznych, takich jak MetS. Wykorzystywano kilka modeli zwierzęcych, jednak kluczowe znaczenie ma to, aby wybrany model odtwarzał główne objawy kliniczne patologii ludzkiej (Rycina 1). W tym celu opracowano modele zwierzęce uznawane za podobne do ludzkich, głównie modele psie i świńskie (przegląd w Verkest5 oraz Zhang &amp; Lerman6). Jednak modele psie nie wykazują wszystkich komponentów MetS, ponieważ wywołanie miażdżycy lub hiperglikemii u psów za pomocą diety jest kwestią dyskusyjną5. Modele świńskie wykazują największe podobieństwo anatomiczne i fizjologiczne do ludzi, a tym samym oferują znaczną moc prognostyczną w wyjaśnianiu mechanizmów leżących u podstaw MetS, lecz ich utrzymanie oraz złożoność procedur eksperymentalnych sprawiają, że stosowanie tego modelu jest bardzo pracochłonne i kosztowne6.
Z drugiej strony, modele gryzoni (myszy i szczury), zarówno indukowane dietą (spontaniczne), jak i transgeniczne, były szeroko wykorzystywane w literaturze do badania otyłości, nadciśnienia tętniczego oraz zespołu metabolicznego (MetS) i jego patologicznych następstw w różnych narządach i układach (patrz przegląd Wong et al.7). Chociaż stosowanie tych modeli jest bardziej przystępne kosztowo niż modeli psich lub świńskich, mają one istotne wady. Rzeczywiście, w zależności od szczepu, zwierzęta rozwijają niektóre komponenty MetS, podczas gdy inne, takie jak nadciśnienie, hiperglikemia i hiperinsulinemia, nie występują7. Co więcej, jeden z głównych komponentów MetS, czyli otyłość, w niektórych szczepach modyfikowanych genetycznie nie zależy wyłącznie od czynników związanych z dietą; wykazano wręcz, że niektóre zwierzęta stają się otyłe przy normalnym, a nawet zmniejszonym spożyciu pokarmu8. Wreszcie, myszy i szczury wykazują naturalny niedobór białka CETP (cholesteryl ester transfer protein) i wykorzystują HDL jako główny środek transportu cholesterolu, co czyni je stosunkowo odpornymi na rozwój miażdżycy. Jest to istotna różnica w metabolizmie lipidów w porównaniu z ludźmi, którzy wykazują ekspresję CETP i transportują cholesterol głównie w LDL9.
Z drugiej strony królik laboratoryjny reprezentuje etap pośredni między dużymi zwierzętami a gryzoniem w modelach eksperymentalnych. Dzięki temu królika można łatwo poddać różnym rodzajom protokołów przy minimalnych wymaganiach dotyczących personelu i utrzymania, ponieważ jest on łatwiejszy w obsłudze podczas procedur eksperymentalnych niż modele dużych zwierząt. Ponadto wykazano, że króliki karmione dietą bogatą w tłuszcze wykazują zmiany hemodynamiczne i neurohumoralne podobne do tych u osób z otyłością8,10,11. Warto zauważyć, że w odniesieniu do metabolizmu lipidów króliki posiadają w osoczu obfitą ilość CETP, a ich profil lipoprotein jest bogaty w LDL12, co również jest podobne do stanu u ludzi. Dodatkowo u królików hiperlipidemia rozwija się dość szybko, biorąc pod uwagę, że jako roślinożercy są one bardzo wrażliwe na tłuszcze w diecie13.
<img alt="Tabela porównawcza modeli zwierzęcych zespołu metabolicznego przedstawiająca różne cechy i charakterystyki." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57117/57117fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Porównanie modeli zwierzęcych MetS. Przegląd wyników znajduje się w pracach Verkesta5, Zhanga i Lermana6 oraz Wonga et al.7. „<img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, diagram, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1">” oznacza zaletę, a „<img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, diagram; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2">” oznacza wadę. *kontrowersyjne, zależy od badania, **jak zauważyli Carroll et al.8, niektóre szczepy zmodyfikowane genetycznie stają się otyłe niezależnie od spożycia pokarmu. CEPT: białko transferu estrów cholesterolu. GTT: test tolerancji glukozy. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57117/57117fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
W celu wyjaśnienia podstawowych mechanizmów leżących u podstaw patologicznego remodelingu wywołanego przez MetS w różnych narządach i układach oraz aby zrozumieć tę złożoną patologię, niezbędny jest wybór modelu eksperymentalnego, który odzwierciedla główne komponenty ludzkiego MetS. Królik może oferować wiele zalet ze względu na podobieństwo do fizjologii człowieka oraz przystępność kosztową w przypadku protokołów i pomiarów chronicznych. W tym zakresie wykorzystano kilka modeli króliczych indukowanych dietą z wysoką zawartością tłuszczu i sacharozy14,15,16,17,18,19 (Tabela 1), a charakterystyka różnych komponentów MetS ma ogromne znaczenie przy wiązaniu fenotypu z remodelingiem narządów. Zatem głównym celem niniejszego artykułu jest opisanie metod opracowania modelu MetS indukowanego dietą u królików, który umożliwia badanie jego patofizjologii oraz wpływu na remodeling narządów.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td rowspan="2">Badanie</td>
			<td rowspan="2">Dieta</td>
			<td rowspan="2">Czas trwania</td>
			<td rowspan="2">Rasa</td>
			<td colspan="4">Składniki zespołu metabolicznego (MetS)</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Ob</td>
			<td >HT</td>
			<td >HG</td>
			<td >Dl</td>
		</tr >
		<tr >
			<td rowspan="2">Yin et al. (2002)14</td>
			<td >·    10% tłuszczu</td >
			<td rowspan="2">24 tygodnie</td >
			<td >·      Samce NZW</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2">-</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    37% sacharozy</td >
			<td >·      2 kg</td >
		</tr >
		<tr >
			<td rowspan="2">Zhao et al. (2007)15</td>
			<td >·    10% tłuszczu</td >
			<td rowspan="2">36 tygodni</td >
			<td >·      Samce JW</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    30% sacharozy</td >
			<td >·      16 tygodni</td >
		</tr >
		<tr >
			<td rowspan="3">Helfestein et al. (2011)16</td>
			<td >·    10% tłuszczu</td >
			<td rowspan="3">24 tygodnie</td >
			<td >·      Samce NZW</td >
			<td rowspan="3"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="3">-</td >
			<td rowspan="3"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td rowspan="3"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    40% sacharozy</td >
			<td >·      12 tygodni</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    0.5-0.1 cholesterolu</td >
			<td ></td >
		</tr >
		<tr >
			<td rowspan="2">Ning et al. (2015)17</td>
			<td >·    10% tłuszczu</td >
			<td rowspan="2">8-16 tygodni</td >
			<td >·      Samce WHHL</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2">-</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    30% fruktozy*</td >
			<td >·      12 tygodni</td >
		</tr >
		<tr >
			<td rowspan="2">Liu et al. (2016)18</td>
			<td >·    10% tłuszczu</td >
			<td rowspan="2">48 tygodni</td >
			<td >·      Samce NZW</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat; układ wagi ramiennej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2"></td >
			<td rowspan="2">-</td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td rowspan="2"><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
		</tr >
		<tr >
			<td >·    30% sacharozy</td >
			<td >·      12 tygodni</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Arias-Mutis et al. (2017)19</td>
			<td >·    15% tłuszczu</td >
			<td >28 tygodni</td >
			<td >·      Samce NZW</td >
			<td ><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td ><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td ><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
			<td ><img alt="Równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1"></td >
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 1: Modele królików z MetS indukowanym dietą z zastosowaniem diety wysokotłuszczowej i wysokosacharozowej. Symbol "<img alt="Statyczna równowaga, ΣFx=0, schemat; ustawienie wagi szalkowej, analiza rozkładu sił, stabilność mechaniczna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 2">" oznacza brak, "<img alt="Statyczna równowaga, ΣFx=0, schemat, wektory sił, analiza mechaniczna, stabilność strukturalna." src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Równanie 1">" obecność, a "-" brak oceny. *ograniczony. WHHL, dziedziczne hiperlipidemiczne króliki Watanabe. JW, japońskie króliki białe. Ob, otyłość. HT, nadciśnienie tętnicze. HG, hiperglikemia. Dl, dyslipidemia.

<table><tbody><tr><td>Waga weterynaryjna</td><td>SOEHNLE</td><td>7858</td><td>Waga https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Łopata do paszy aluminiowej</td><td>COPELE</td><td>10308</td><td>Łopata do podawania aluminium http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html</td></tr><tr><td>Balance</td><td>PCE Ib&eacute; rica</td><td>PCE-TB 15</td><td>Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm</td></tr><tr><td>Sitko (średnica 20 cm)</td><td>ZWILLING</td><td>39643-020-0</td><td>Sitko https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html</td></tr><tr><td>Miska</td><td>ZWILLING</td><td>40850-751-0</td><td>Skala https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Lejek</td><td>BT Ingenieros</td><td>niedostępny</td><td>Lejek http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE</td></tr><tr><td>Introcan Certo 22G niebieski</td><td>B Braun</td><td>4251318</td><td>Obwodowy cewnik dożylny http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Propofol</td></tr> <tr><td>Lipuro 10 mg/ml fiolka 20 ml</td><td>B Braun</td><td>3544761VET</td><td>Ogólny znieczulenie dożylne<br/</td></tr><tr><td>> http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-FisioVet roztwór surowicy 500ml</td><td>B Waga do 472779 Braun</td><td></td><td> https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 1,25cm x 5m</td> B Plaster z tworzywa sztucznego <td>Braun</td><td>OCT13501</td><td> http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 2,50cm x 5m</td><td>B Braun</td><td>OCT13502</td><td>Plastikowy gips http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>Injekt strzykawka 10ml luer</td><td>B Braun</td><td>4606108V</td><td>Strzykawka iniekcyjno-aspiracyjna dwóch jednorazowych korpusów http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-Seca</td></tr> <tr><td>201</td><td>seca</td><td>seca 201</td><td>Ergonomiczna taśma do pomiaru obwodów https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred</td></tr><tr><td>Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde</td><td>B Braun</td><td>4657543</td><td>Jednorazowa igła podskórna http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-CONTOURNEXT-Meter</td></tr> <tr><td></td><td>BAYER</td><td>84413470</td><td>System do analizy stężenia glukozy we krwi http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2</td></tr><tr><td>Paski testowe CONTOUR NEXT</td><td>BAYER</td><td>83624788</td><td>Paski testowe do pomiaru stężenia glukozy we krwi http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package</td></tr><tr><td>NAKŁUWACZ MICROLET NEXT</td><td>NAKŁUWACZ BAYER</td><td>6702</td><td> http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device</td></tr><tr><td>MICROLET 2 kolorowe lancety</td><td>BAYER</td><td>81264857</td><td>Ultracienki sterylny lancet do nakłuwania naczyń włosowatych http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s</td></tr><tr><td>Injekt 20ml luer siringe</td><td>B Braun</td><td>4606205V</td><td>Waga https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterylny</td><td>B Braun</td><td>9031219N</td><td>Sterylne saszetki z gazy w kopertach http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril</td></tr><tr><td>Emla lidokaina/prylokaina</td><td>AstraZeneca</td><td>niedostępne</td><td>Znieczulenie miejscowe https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html</td></tr><tr><td>Introcan Certo 18G short</td><td>B Cewnik dożylny obwodowy Braun</td><td>4251342</td><td> </td></tr><tr><td>http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Introcan Certo 20G</td><td>B Braun</td><td>4251326</td><td>Obwodowy cewnik dożylny http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Przetworniki</td></tr> <tr><td>ciśnienia krwi-MA1 72-4497</td><td>Aparat Harvard</td><td>724497</td><td>Przetwornik do monitorowania ciśnienia krwi http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html</td></tr><tr><td>PowerLab 2/26</td><td>AD Instruments</td><td>ML826</td><td>Amplifier https://www.adinstruments.com/products/powerlab</td></tr><tr><td>LabChart ver. 6</td><td>AD Instruments</td><td>niedostępne</td><td>Oprogramowanie do akwizycji https://www.adinstruments.com/products/labchart</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>AD Instruments</td><td>FE136</td><td>Wzmacniacz https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136</td></tr><tr><td>K2EDTA 7,2 mg</td><td>BD</td><td>367861</td><td>Probówki do pobierania krwi http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861</td></tr><tr><td>Wirówka</td><td>SciQuip</td><td>2-16KL</td><td> http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/</td></tr> <tr><td>Eppendorf Reference 2, 100 &ndash; 1000 &mu; L</td><td>Eppendorf</td><td>4920000083</td><td>Pipeta https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html</td></tr><tr><td>Probówki Eppendorf Safe-Lock, 0,5 ml</td><td>Eppendorf</td><td>30121023</td><td>Probówki https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html</td></tr><tr><td>Króliki NZW (16-18 tygodni)</td><td>Granja San Bernardo</td><td>niedostępne</td><td>Króliki białe nowozelandzkie http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/</td></tr> <tr><td>sacharoza&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S0389-5KG</td><td>Sacharoza do roztworu do picia http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES</td></tr><tr><td>Dieta kontrolna dla królików</td><td>Ssniff</td><td>V2333-000</td><td>Dieta kontrolna http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>Dieta wysokotłuszczowa dla królików</td><td>Ssniff</td><td>S9052-E020</td><td>Dieta wysokotłuszczowa http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>Stojak i poidełko dla królików</td><td>Sodispan</td><td>niedostępny</td><td>Stojak dla królików https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/</td></tr> <tr><td>Krępowanie królików</td><td>Zoonlab</td><td>3045601</td><td>http://www.zoonlab.de/en/index.html</td></tr></tbody></table>

eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena

An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment

W ostatnich latach, otyłość i zespół metaboliczny (MetS) stały się coraz większym problemem dla zdrowia publicznego i praktyki klinicznej, biorąc pod uwagę ich częstość występowania z powodu wzrostu siedzącego trybu życia i niezdrowych nawyków żywieniowych. Dzięki modelom zwierzęcym badania podstawowe mogą badać mechanizmy leżące u podstaw procesów patologicznych, takich jak MetS. W tym miejscu opisano metody zastosowane do opracowania eksperymentalnego modelu królika MetS indukowanego dietą i jego oceny. Po okresie aklimatyzacji zwierzęta są karmione dietą wysokotłuszczową (10% uwodornionego oleju kokosowego i 5% smalcu), bogatą w sacharozę (15% sacharozy rozpuszczonej w wodzie) przez 28 tygodni. W tym okresie przeprowadzono kilka procedur eksperymentalnych w celu oceny różnych składników MetS: pomiary morfologiczne i ciśnienia krwi, określenie tolerancji glukozy oraz analizę kilku markerów osocza. Pod koniec okresu eksperymentalnego u zwierząt rozwinęła się otyłość centralna, łagodne nadciśnienie, stan przedcukrzycowy i dyslipidemia z niskim HDL, wysokim LDL i wzrostem poziomu trójglicerydów (TG), odtwarzając w ten sposób główne składniki ludzkiego MetS. Ten przewlekły model daje nowe perspektywy zrozumienia mechanizmów leżących u podstaw postępu choroby, wykrywania markerów przedklinicznych i klinicznych, które umożliwiają identyfikację pacjentów zagrożonych, a nawet testowanie nowych podejść terapeutycznych w leczeniu tej złożonej patologii.

MetS reprezentuje zespół zaburzeń metabolicznych i sercowo-naczyniowych, których badanie można ułatwić dzięki zastosowaniu modeli eksperymentalnych. W rzeczywistości, aby wyjaśnić mechanizmy leżące u podstaw patologicznego przebudowy wywołanej przez MetS, kluczowe znaczenie ma wybór modelu eksperymentalnego, który odpowiednio odzwierciedla stan ludzki i nadaje się do prowadzenia badań. W niniejszej pracy przedstawiamy metody indukcji MetS u królika za pomocą diety bogatej w nasycone tłusz...

Opisujemy metody rozwoju eksperymentalnego modelu zespołu metabolicznego wywołanego dietą (MetS) u królików stosujących dietę wysokotłuszczową i bogatą w sacharozę. U zwierząt rozwinęła się otyłość centralna, łagodne nadciśnienie, stan przedcukrzycowy i dyslipidemia, reprodukując w ten sposób główne składniki ludzkiego MetS. Ten przewlekły model pozwoli na zdobycie wiedzy leżącej u podstaw mechanizmów progresji choroby.

Eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena

In recent years, obesity and metabolic syndrome (MetS) have become a growing problem for public health and clinical practice, given their increased ...

Ogólnym celem tej procedury jest opracowanie i scharakteryzowanie modelu zespołu metabolicznego u królików stosujących dietę wysokotłuszczową i bogatą w sacharozę, co ma ogromne znaczenie przy kojarzeniu fenotypu z przebudową narządów. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie patofizjologii, takie jak zrozumienie przebudowy narządów i postępu choroby, wykrywanie markerów paraklinicznych i klinicznych w celu identyfikacji pacjentów zagrożonych lub testowanie nowych podejść terapeutycznych. Królik może mieć wiele zalet w porównaniu z innymi modelami zwierzęcymi, w tym mysimi, psami lub świniami, biorąc pod uwagę jego podobieństwo do ludzkiej fizjologii oraz przystępność cenową stosowania w przewlekłych protokołach i pomiarach.Zademonstruje tę procedurę Oscar Arias, doktorant z naszego laboratorium. Aby przyzwyczaić zwierzęta do diety, należy karmić każde zwierzę z grupy kontrolnej 120 gramami diety kontrolnej dziennie przez cztery tygodnie i dostarczać wodę ad libitum. Karm zwierzęta z grupy MetS 250 gramami karmy, zaczynając od 50% kontroli i 50% karmy o wysokiej zawartości tłuszczu.Następnie stopniowo zwiększaj dietę do 100% wysokotłuszczowej karmy do końca czwartego tygodnia. Ponadto na początku należy podać zwierzętom z grupy MetS wodę z 5% sacharozą i zwiększyć stężenie sacharozy do 15% pod koniec czwartego tygodnia. Zarejestruj dzienne spożycie karmy i roztworu sacharozy, aby obliczyć spożycie kalorii.Gdy zwierzęta zaaklimatyzują się do diety, należy codziennie karmić każde zwierzę z grupy kontrolnej 120 gramami karmy kontrolnej i wodą ad libitum. Nakarm zwierzęta z grupy MetS 250 gramami wysokotłuszczowej karmy i 15% sacharozy w wodzie. Wymieniaj karmę codziennie, a roztwór sacharozy co trzeci dzień.Codziennie waż pozostałą karmę i wodę, aby oszacować dzienne spożycie. Aby przeprowadzić ocenę morfologiczną, waż każde zwierzę co tydzień. Przed podaniem diety eksperymentalnej oraz w 14. i 28. tygodniu należy znieczulić zwierzę za pomocą sterylnego jednorazowego cewnika do kanulacji żyły brzeżnej prawego ucha.Następnie wstrzyknąć osiem miligramów na kilogram propofolu, a następnie 1,5 ml 0,9% roztworu chlorku sodu. Po potwierdzeniu znieczulenia ułóż zwierzę w bocznej pozycji odleżynowej i za pomocą taśmy mierniczej zmierz odległość od nosa do pięty. Zapisz ten pomiar jako długość.Gdy zwierzę znajduje się w tej samej pozycji, zmierz odległość od wyrostka barkowego w ramieniu do czubka łapy i zapisz to jako wysokość. Teraz, gdy zwierzę znajduje się w pozycji leżącej, delikatnie umieść taśmę mierniczą wokół konturu brzucha i wykonaj pomiar. Następnie zmierz długość kości piszczelowej od dolnej części stawu kolanowego do przyczepu ścięgna Achillesa.Przygotuj 60% roztwór podstawowy glukozy z 60 gramami glukozy w 100 mililitrach 0,9% chlorku sodu. Pozwól zwierzętom pościć tylko wodą przez siedem godzin. Następnie, aby określić glikemię na czczo, umieść przytomnego królika w unieruchomieniu w pozycji leżącej.Włóż nowy pasek do glukometru, a następnie użyj lancetu do lewej żyły ucha brzeżnego, aby uzyskać kroplę krwi i przyłóż kroplę do paska testowego. Użyj glukometru, aby zmierzyć poziom glukozy we krwi. Za pomocą jednorazowego cewnika należy wprowadzić kaniulację do żyły brzeżnej prawego ucha i wstrzyknąć bolus z 60% roztworem glukozy.Użyj lancetu, jak poprzednio, aby pobrać próbki krwi po 15, 30, 60, 90, 120 i 180 minutach od wstrzyknięcia glukozy i użyj glukometru do ich analizy. Wyjmij jednorazowy cewnik i użyj gazy, aby uszczypnąć miejsce wprowadzenia cewnika. Po krzepnięciu krwi zdejmij gazę i sprawdź stan zwierzęcia.Do pomiaru ciśnienia krwi przygotuj system akwizycji, który zawiera przetwornik ciśnienia, 10-mililitrową strzykawkę z 0,9% chlorkiem sodu, trójdrożny kran odcinający, wzmacniacz i laptop PC z oprogramowaniem do akwizycji. Aby skonfigurować sprzęt, umieść trójdrożny zawór odcinający i strzykawkę w przetworniku ciśnienia między przetwornikiem w cewniku i podłącz przetwornik ciśnienia do amplifier. Następnie podłącz amplifier do laptopa PC.Umieść przytomne zwierzę, które krępuje królik, w pozycji leżącej. Rozgrzej ucho przed kaniulacją, a następnie miejscowo nałóż znieczulenie miejscowe do ucha wokół miejsca wprowadzenia. Delikatnie dotknij obszaru, w którym biegnie pakiet naczyniowy, aby łatwo zidentyfikować tętnicę.Następnie wprowadź sterylny cewnik do centralnej tętnicy lewego ucha. Teraz poluzuj pasy i pozwól zwierzęciu pozostać cicho przez 30 minut. Umieść przetwornik ciśnienia obok zwierzęcia na poziomie serca i rejestruj ciśnienie krwi w sposób ciągły przez 20 minut, bezpośrednio z cewnika tętniczego.Po zakończeniu nagrywania wyjmij cewnik i użyj gazy, aby ścisnąć miejsce wprowadzenia cewnika, aby zatrzymać utratę krwi. Po skrzepnięciu krwi usuń gazę i sprawdź stan zwierzęcia. Aby wykonać pomiary osocza, pozwól zwierzętom pościć wodą tylko przez siedem godzin.Następnie umieść przytomne zwierzę w unieruchomieniu w pozycji leżącej i wbij sterylną igłę o rozmiarze 21 do żyły brzeżnej lewego ucha. Gdy krew zacznie kapać, wyrzuć pierwszą kroplę i zbierz próbki krwi w probówkach EDTA do poziomu wskazanego w probówce. Następnie przechowuj próbki na lodzie.Odwirować próbki krwi w temperaturze 1500 g i czterech stopniach Celsjusza przez 15 minut. Po odwirowaniu za pomocą pipety zebrać osocze i przygotować 250 mikrolitrów porcji. Natychmiast przeanalizuj świeże próbki pod kątem cholesterolu całkowitego, HDL, LDL i trójglicerydów.Jak pokazano w tej tabeli, masa ciała królików w grupie MetS wzrastała stopniowo na diecie wysokotłuszczowej aż do końca protokołu eksperymentalnego. Zachowanie spożycia energii i jego wahania są zilustrowane na tym wykresie, w zakresie od 250 do 815 kilokalorii w grupie MetS. Na tym wykresie przedstawiono względny udział różnych źródeł energii.W 14. i 28. tygodniu występują okresy krytyczne, ponieważ, biorąc pod uwagę stres wywołany procedurami eksperymentalnymi, króliki mogą zmniejszyć spożycie karmy i wody. Łagodną hiperglikemię obserwuje się w 14. tygodniu, która osiąga plateau i utrzymuje podobne wartości w 28. tygodniu. Obszar pod krzywą zwiększa się również w grupie MedS.Nadciśnienie tętnicze jest ściśle i bezpośrednio związane z nasileniem otyłości. Króliki karmione dietą wysokotłuszczową i bogatą w sacharozę przez 28 tygodni wykazały wzrost skurczowego, rozkurczowego i średniego ciśnienia krwi już w 14. tygodniu, a wzrost ciśnienia krwi utrzymuje się w 28. tygodniu. Wreszcie, w tym przewlekłym modelu, zmianę profilu lipidowego zaobserwowano już w 14 tygodniu, a zmiana ta pozostała stabilna do 28 tygodnia.Obejmowało to wzrost trójglicerydów i LDL, spadek HDL i brak zmian w całkowitym cholesterolu u zwierząt MedS w porównaniu z grupą kontrolną w obu punktach czasowych. Korzystając z tego przewlekłego modelu, można przeprowadzić inne badania, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania, takie jak to, w jaki sposób patologia przekształca się w podobny sposób w ludzkim zespole metabolicznym, umożliwiając nowe perspektywy w zakresie mechanizmów patofizjologicznych zaangażowanych w postęp choroby. Ten eksperymentalny model utorował drogę naukowcom zajmującym się interaktywną fizjologią i patofizjologią do zbadania mechanizmów leżących u podstaw przebudowy narządów.Wykrywanie biomarkerów w celu identyfikacji pacjentów zagrożonych lub testowanie nowych podejść terapeutycznych w leczeniu zespołu metabolicznego.

an-experimental-model-diet-induced-metabolic-syndrome-rabbit

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Ten film demonstruje generowanie modelu królika raka endometrium poprzez wstrzyknięcie wysoce przerzutowej zawiesiny komórek VX2 do zszytych rogów macicy królika. Prowadzi to do powstania pierwotnego raka endometrium z przerzutami do węzłów chłonnych zaotrzewnowych.

Modelowanie przerzutowego modelu raka endometrium: technika generowania raka endometrium z przerzutami do węzłów chłonnych w modelach królików

Zwierzęce modele miażdżycy są niezbędne do zrozumienia mechanizmu i zbadania nowszych metod zapobiegania rozwojowi lub pękaniu płytki nazębnej, głównej przyczynie zgonów w uprzemysłowionym świecie. Protokół ten wykorzystuje połączenie uszkodzenia balonu i diety bogatej w cholesterol w celu wywołania blaszek miażdżycowych w tętnicy biodrowej królika.

Króliczy model przyspieszonej miażdżycy: perspektywa metodologiczna uszkodzenia balonika tętnicy biodrowej

Opisujemy zabieg chirurgiczny stosowany do wywołania niedokrwienia obwodowego u królików z hiperlipidemią i cukrzycą. Operacja ta działa jako model przedkliniczny dla stanów doświadczanych w chorobie tętnic obwodowych u pacjentów. Angiografia jest również opisywana jako sposób pomiaru stopnia wprowadzonego niedokrwienia i odzyskania perfuzji.

Przedkliniczny model niedokrwienia kończyn tylnych u królików z cukrzycą

Tutaj opisujemy, krok po kroku, szczegółowy protokół wykonywania echokardiografii w modelu królika. Pokazujemy, jak prawidłowo uzyskać różne widoki echokardiograficzne i płaszczyzny obrazowania, a także różne tryby obrazowania dostępne w systemie echokardiografii klinicznej rutynowo stosowanym u pacjentów i pacjentów weterynaryjnych.

Badanie echokardiograficzne przezklatkowe w modelu królika

Ten protokół opisuje użycie bardzo smacznej diety stołówkowej w stylu zachodnim do modelowania przejadania się i otyłości u gryzoni. W tym miejscu przedstawiamy szczegółowy zarys selekcji, przygotowania i pomiaru żywności oraz wyjaśniamy czynniki metodologiczne, które pomagają w generowaniu solidnego i powtarzalnego fenotypu.

Smaczna dieta stołówkowa w stylu zachodnim jako niezawodna metoda modelowania otyłości wywołanej dietą u gryzoni

Ciągły zapis ciśnienia tętniczego krwi pozwala na badanie wpływu różnych parametrów hemodynamicznych. W niniejszym raporcie przedstawiono zastosowanie ciągłego monitorowania ciśnienia tętniczego krwi w dużym zwierzęcym modelu udaru niedokrwiennego w celu określenia patofizjologii udaru, wpływu różnych czynników hemodynamicznych oraz oceny nowych podejść do leczenia.

Monitorowanie i modulacja ciśnienia krwi w czasie rzeczywistym w króliczym modelu udaru niedokrwiennego

Obecne badanie demonstruje wysoce powtarzalny model zwierzęcy ostrego regionalnego niedokrwienia mięśnia sercowego i uszkodzenia reperfuzyjnego u królików przy użyciu mini-torakotomii lewej dla przypadków przeżycia lub sternotomii linii środkowej dla przypadków nieprzeżytych.

Model uszkodzenia niedokrwiennego i reperfuzyjnego u królików

To badanie szczegółowo opisuje procedury ustalania przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika (RC). W szczególności uraz powstaje w jednostce mięśniowo-ścięgnistej / mięśniowo-ścięgnistej podłopatkowej (SSC), aby naśladować ludzką anatomię i patofizjologię RC, w tym ciężkie zwyrodnienie tłuszczowe mięśni (FD). Protokół ten może być stosowany do badania urazów RC i oceny terapii regeneracyjnych.

Opracowanie modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika do badania zwłóknienia i zwyrodnienia mięśniowego

Ten protokół przedstawia metodę wywoływania kardiomiopatii cukrzycowej poprzez połączenie diety wysokotłuszczowej i wstrzykiwania streptozotocyny. Podejście to ma na celu zapewnienie wiarygodnych ram dla badań naukowych nad kardiomiopatią cukrzycową oraz zbadanie potencjalnych możliwości zastosowań leczenia klinicznego.

Modelowanie i ocena modelu mysiej kardiomiopatii cukrzycowej

Badanie to oferuje powtarzalną i standaryzowaną metodę mająca na celu ustalenie modeli otyłych szczurów wykazujących prostą otyłość, często charakteryzującą się stłuszczeniem trzustki. Zawiera również szczegółowe protokoły pobierania próbek tkanki trzustki oraz immunohistochemii.

Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Poznaj metodę tworzenia modelu zespołu metabolicznego u królików za pomocą diety wysokotłuszczowej i wysokosacharozowej. Model ten pozwala badać przebudowę narządów oraz testować nowe podejścia terapeutyczne.

Eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena

Przeglądaj więcej filmów