Nowa metoda wywoływania zachowań podobnych do depresji u szczurów

Ogólnym celem tego modelu jest ustalenie zarażenia depresją u szczurów. Ta metoda może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie behawioralnej, takie jak mechanizm działania, zapobieganie, powstrzymywanie i leczenie depresji zakaźnej. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest to nowy model ustalania depresji zakaźnej.

Implikacje tej techniki rozciągają się na terapię depresji, ponieważ w chwili obecnej nie istnieje żaden format badania depresji zakaźnej. Do procedury eksperymentalnej wybierz samce szczurów Sprague Dawley bez jawnej patologii, z których każdy waży od 300 do 350 gramów. Trzymaj trzy szczury w klatce z karmą i wodą dostępną ad libitum.

Pozwól na co najmniej dwa tygodnie adaptacji w 12-godzinnym cyklu światła i ciemności. Przed rozpoczęciem eksperymentu przetestuj wszystkie szczury pod kątem obecności zachowań podobnych do depresji za pomocą trzydniowego testu preferencji sacharozy. Aby to zrobić, umieść szczury w indywidualnych klatkach w tym samym pomieszczeniu co obudowa podczas ciemnego cyklu.

Umieść butelkę ze 100 mililitrami 1% roztworu sacharozy w każdej klatce na 24 godziny i pozwól na adaptację. Po 24 godzinach wyjmij butelki i pozbawij szczury jedzenia i wody na 12 godzin. Po 12 godzinach umieść dwie butelki, jedną zawierającą 100 mililitrów 1% roztworu sacharozy, a drugą 100 mililitrów wody z kranu w każdej klatce na cztery godziny.

Po czterech godzinach zapisz objętość w mililitrach spożytego roztworu sacharozy i wody i oblicz powinowactwo do preferencji sacharozy, jak pokazano. Wyeliminuj szczury, które uzyskały pozytywny wynik testu na depresję, a następnie wyeliminuj szczury, które były trzymane w tych samych klatkach co szczury z depresją. W razie potrzeby wyklucz losowo dodatkowe szczury, aby utworzyć końcowe grupy.

Oznacz szczury za pomocą ponumerowanych naklejek. Aby wywołać depresję, poddaj 60 szczurów w grupie narażonej na przewlekły nieprzewidywalny stres dowolnym dwóm z poniższych siedmiu stresorów. W losowej kolejności przez pięć kolejnych tygodni używaj jednego stresora w ciągu dnia, a drugiego w nocy.

Trzymaj szczury w większych grupach, umieszczając sześć szczurów zamiast zwykłych trzech w klatce na 18 godzin. Umieść szczury w klatce nachylonej pod kątem 45 stopni wzdłuż osi pionowej na trzy godziny. Jedzenie pozbawia szczury na 18 godzin.

Pozbawij szczury wody na 18 godzin, wystawiając je na puste butelki z wodą po jednej godzinie. Umieść szczury w klatce z mokrą ściółką na osiem godzin w cyklu nocnym. Wystawiaj szczury na ciągłe oświetlenie przez 24 godziny w odwróconym cyklu światło-ciemność dwa razy w tygodniu.

Umieść szczury w gorącym środowisku ustawionym na 40 stopni Celsjusza na pięć minut w cyklu nocnym. Po ekspozycji na dwa wybrane stresory potwierdź rozwój depresji, wykonując test preferencji sacharozy. Najpierw umieść dwa szczury narażone na CUS w klatce w 30 różnych klatkach.

Następnie dodaj jednego szczura z grupy zarażonej depresją do każdej klatki zawierającej dwa szczury narażone na CUS i pozwól na wspólne zamieszkiwanie przez pięć tygodni w standardowych warunkach. Po pięciu tygodniach wspólnego zamieszkiwania poddaj wszystkie grupy testom preferencji sacharozy, na otwartym polu i wymuszonemu pływaniu. Wyczyść aparat 5% alkoholem przed wprowadzeniem każdego zwierzęcia.

Umieść szczura w rogu otwartego pola przodem do ściany. Nagrywaj zachowanie szczura za pomocą kamery wideo przez pięć minut. Analizuj nagrania postów dotyczące całkowitej odległości podróży, prędkości w centralnej części pola i czasu spędzonego w centralnej części pola.

W celu przyzwyczajenia umieść szczura w szklanym cylindrze zawierającym wodę o temperaturze pokojowej na 15-minutową sesję pływania. Wyjmij szczura z cylindra, osusz ręcznikami papierowymi i umieść w ciepłej klatce na 15 minut przed powrotem szczura do klatki domowej. Następnego dnia nagraj na wideo pięciominutową sesję pływania i przeanalizuj nagrania pod kątem bezruchu, wspinaczki i defekacji.

Po wystawieniu szczurów na pięciotygodniowy CUS w celu indukcji depresji, a następnie wystawieniu zdrowych szczurów na działanie szczurów narażonych na CUS przez kolejne pięć tygodni, obie grupy szczurów wykazywały pod koniec zachowania podobne do depresji, co wykazano zmniejszoną preferencją dla sacharozy. W teście terenowym szczury zarówno w grupie narażonej na CUS, jak i w grupie zarażonej depresją miały zmniejszone całkowite odległości podróży i zmniejszone średnie prędkości w porównaniu z grupą kontrolną. Czas spędzony na środku otwartego pola przez szczury z grupy kontrolnej w dwóch grupach eksperymentalnych nie różnił się istotnie.

Zarówno szczury narażone na CJ, jak i zarażone depresją wykazywały przedłużony bezruch po teście wymuszonego pływania. Jednak znacznie wydłużony czas bezczynności zarejestrowano tylko w grupie narażonej na CUS w porównaniu z grupą kontrolną. W innym badanym parametrze testu wymuszonego pływania, czasie wznoszenia, obie grupy szczurów narażonych na CUS i zaraźliwych depresji wykazywały bardzo ograniczone właściwości wspinaczkowe w porównaniu z grupą kontrolną.

Ocena szybkości wypróżniania się skutkowała rejestracją dużych ilości kału dla obu grup doświadczalnych w porównaniu z grupą kontrolną. Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać o zaplanowaniu z wyprzedzeniem losowej rotacji stresorów podczas modelu przewlekłego nieprzewidywalnego stresu ze względu na duże zapotrzebowanie na pracę fizyczną. Zgodnie z tą procedurą można wykonać inne testy, takie jak podwyższony plus labirynt lub test lustra, w celu dalszego zbadania zmian w zachowaniu po depresji.