Name: Łaskotanie, technika wywoływania pozytywnego afektu podczas obchodzenia się ze szczurami (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 37 s
Description: Poznaj technikę łaskotania szczurów w celu wywołania pozytywnego afektu i zmniejszenia lęku podczas obchodzenia się ze zwierzętami. Ta metoda poprawia dobrostan laboratoryjnych szczurów i ułatwia badania behawioralne oraz neurobiologiczne.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Sylvie Cloutier, Megan LaFollette, Brianna Gaskill i Ruth Newberry pragną poświęcić ten artykuł pamięci Jaaka Pankseppa, naszego ukochanego współautora, który zmarł w końcowej fazie tworzenia tego rękopisu. Z sentymentem wspominamy Jaaka jako "ojca łaskotania szczurów" - jego spostrzeżenia na temat emocji zwierząt stanowią fundamentalną inspirację dla tej pracy. Materiał ten jest częściowo oparty na pracach wspieranych przez Washington State University Veterinary Summer Research Fellowship, Animal Welfare Enhancement Award od Animal Welfare Institute oraz "Grant for Laboratory Animal Science" od American Association for Laboratory Animal Science. Publikacja tego artykułu była sponsorowana przez Petco Animal Supplies, Inc. Chcielibyśmy podziękować Carol Dowell i Purdue University's Laboratory Animal Program za umożliwienie nam łaskotania ich szczurów podczas sesji.

Wszystkie eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z Przewodnikiem National Institutes of Health dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych31,32 w obiektach akredytowanych przez AAALAC International i zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu Stanu Waszyngton. Poniższy protokół może narazić personel na alergeny zwierząt laboratoryjnych. Środki ochrony indywidualnej należy nosić zgodnie z zaleceniami instytucjonalnego programu bezpieczeństwa i higieny pracy oraz świadczeniodawców opieki zdrowotnej. Protokół przedstawia procedury w typowych warunkach laboratoryjnych, ale może być dostosowany do stosowania w obiektach o wyższym poziomie bezpieczeństwa biologicznego (np. przy użyciu szafy bezpieczeństwa biologicznego itp.).  
1. Przygotowanie sprzętu i ustawienie
<ol>
	<li>Skrzynka manipulacyjna
	<ol>
		<li>Przygotować klatkę domową zwierzęcia lub inne pomieszczenie do łaskotania, zwane dalej boksem manipulacyjnym.</li>
		<li>Upewnij się, że skrzynka transportowa jest wystarczająco duża, aby zapewnić miejsce na rękę łaskotki i poruszanie się szczurów, jednocześnie uniemożliwiając im wyskoczenie.</li>
		<li>Upewnij się, że skrzynka manipulacyjna jest wolna od przeszkód. Tak więc, jeśli przeprowadzasz łaskotanie w klatce domowej, usuń wszelkie przedmioty, takie jak chaty, patyki do gryzienia i pomarszczony papier.</li>
		<li>Wyłóż podłogę skrzyni manipulacyjnej pościelą33. Można użyć innych rodzajów miękkich pokryć podłogowych, ale nie są one tak skuteczne w wywoływaniu wokalizacji 50 kHz13.</li>
		<li>Umieść skrzynkę manipulacyjną na stole lub blacie na wysokości, która umożliwia wygodne dotarcie ręki obsługi do całej powierzchni podłogi skrzynki manipulacyjnej.</li>
		<li>Zminimalizuj efekt nowości, przyzwyczajając szczury do pudełka do obsługi przed łaskotaniem, jeśli to konieczne.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Timer: Aby wskazać początek i koniec 15-sekundowych walk, umieść urządzenie do pomiaru czasu w pobliżu skrzynki manipulacyjnej, gdzie można je łatwo odczytać. Alternatywnie, sygnał czasu słuchowego może być przesyłany do łaskotania przez słuchawki.</li>
	<li>Nagrywanie wokalizacji
	<ol>
		<li>Jeśli wokalizacje są nagrywane w celu ilościowego określenia różnych typów wokalizacji do celów badawczych, użyj mikrofonu zdolnego do przechwytywania dźwięku szerokopasmowego o częstotliwości 10-120 kHz, podłączonego do urządzenia zdolnego do nagrywania dźwięków o wysokiej częstotliwości.</li>
		<li>Zawieś lub przymocuj mikrofon na górze lub z boku pudełka, wystarczająco nisko, aby wyraźnie wykrywać rozmowy i uniknąć pomylenia z odgłosami szczurów w pobliskich klatkach, ale poza fizycznym zasięgiem szczurów.</li>
		<li>Jeśli wokalizacje muszą być monitorowane tylko w celu potwierdzenia prawidłowej techniki łaskotania, użyj wykrywacza nietoperzy i ustaw go z boku pudełka. Jeśli używasz prostego detektora heterodynowego, ustaw urządzenie na 50 kHz.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rękawice laboratoryjne: Podczas łaskotania używaj gołej lub cienkiej dłoni w rękawiczce. Technika łaskotania została opracowana przy użyciu gołej ręki. Jednak ręka w cienkiej rękawiczce jest również skuteczna w wywoływaniu zabawnych zachowań i produkcji USV 50 kHz, jednocześnie pozwalając treserowi wyczuć siłę nacisku wywieranego na ciało szczura i poczuć reakcje szczura przez rękawicę.</li>
</ol>
2. Procedura łaskotania
<ol>
	<li>W razie potrzeby załóż rękawice laboratoryjne. Przynieś klatkę domową do stołu lub stołu warsztatowego. Delikatnie przenieś szczura do pudełka manipulacyjnego, jeśli łaskotanie nie odbywa się w klatce domowej. Uruchom minutnik i nagrywanie dźwięku, jeśli to konieczne.</li>
	<li>Aby zapewnić konsekwentną aplikację, naprzemiennie przez 15 s kontaktu z dłonią i 15 s po odłączeniu od kontaktu, łącznie przez 2 minuty. Stwierdzono, że ten czas interakcji jest wystarczający do zwiększenia atrakcyjności szczurów dla ludzi11.
	<ol>
		<li>Aby rozpocząć sesję łaskotania od zwolnienia na 15 sekund, umieść rękę nieruchomo po jednej stronie pudełka do przenoszenia. Obecność dłoni pozwala szczurom na nakłanianie do interakcji poprzez kierowanie liźnięć i lekkich szczypania (skubnięć) w kierunku dłoni, wskazując na zainteresowanie szczura interakcją22. Kiedy tak się stanie, odsuń rękę od szczura, co może skłonić szczura do żartobliwego gonienia ręki. Alternatywnie, pozostaw rękę wyjętą z pudełka podczas zwalniania po 15 sekundach.</li>
		<li>Po uwolnieniu z 15 sekundami łaskotania rozpocznij interakcję od kontaktu grzbietowego (2-4 s). Jedną ręką energicznie dotknij opuszkami palców karku szczura (grzbietowej powierzchni szyi), wykonując szybkie ruchy palców, jak to zwykle bywa w przypadku łaskotania ludzi. Unikaj kontaktu z zadem, ponieważ ten obszar ciała jest celem podczas agresywnych spotkań34.</li>
		<li>Podążaj za stykiem grzbietowym za pomocą szpilki. Umieść kciuk i środkowy palec pod przednimi łapami szczura; Podnieś szczura na tyle wysoko, aby umożliwić szybkie obrócenie szczura na grzbiet, upewniając się, że ogon nie jest załamany. 
		UWAGA: Pomocne może być lekkie popchnięcie grzbietu szczura małym palcem podczas obracania szczura na plecy.</li>
		<li>Trzymaj szczura luźno, ale mocno, bądź asertywny, ale nie natarczywy. Gdy szczur znajdzie się na plecach na podłodze, przytrzymaj ciało luźno, poruszając palcami szybko i energicznie, ale delikatnie po brzuchu, jak to jest powszechnie stosowane w łaskotaniu ludzi.</li>
		<li>Mimo że stymulacja jest szybka i asertywna, utrzymuj szybkie przypinanie (2-4 s/pin), aby zminimalizować negatywne reakcje. Pozwól szczurowi wyprostować się i szybko podążaj za nim z kontaktem grzbietowym.</li>
		<li>Kontynuuj naprzemiennie między stykami grzbietowymi a szpilkami. Średnio powinno być od 4 do 5 pinów/15 s35.</li>
		<li>Nie podnoś szczura obiema rękami. Podczas 15 s łaskotania zawsze utrzymuj palce w ruchu i w kontakcie z ciałem szczura, nawet w przejściach między szpilkami i kontaktami grzbietowymi.</li>
		<li>Wykonaj trzy dodatkowe 15-sekundowe łaskotki i 15-sekundowe uwolnienia, w sumie przez 2 minuty.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Jeśli używasz pudełka do przenoszenia, przywróć szczura do jego klatki domowej. Jeśli korzystasz z klatki domowej, umieść przedmioty wzbogacające z powrotem w klatce. Wyczyść pudełko manipulacyjne ręcznikami papierowymi, aby usunąć kał i mocz, które nie zostały wchłonięte przez pościel.</li>
	<li>W razie potrzeby powtórz z następną klatką szczurów.</li>
</ol>
3. Łaskotanie wielu szczurów jednocześnie
<ol>
	<li>Szczury mogą być łaskotane jako group36. Jeśli czas obchodzenia się z szczurem nie jest istotny, naprzemiennie łaskotaj każdego szczura przez 15 sekund. W razie potrzeby czas trwania sesji łaskotania można wydłużyć powyżej 2 minut, tak aby każdy szczur otrzymał cztery napady łaskotania w dłoń przeplatane uwalnianiem.</li>
	<li>Jeśli czas obsługi jest istotny dla wyników badań, należy zastosować następujące procedury:
	<ol>
		<li>W przypadku par łaskotaj jednego szczura przez 15 sekund, a następnie natychmiast łaskotaj drugiego szczura przez następne 15 sekund (tj. podczas wypuszczania pierwszego szczura) i tak dalej. Łaskotka nie ma okresu odpoczynku.</li>
		<li>W przypadku trojaczków należy zastosować procedurę opisaną w ppkt 3.2.1 w celu łaskotania dwóch szczurów i łaskotania trzeciego w tym samym czasie, co jeden z pozostałych, używając drugiej ręki.</li>
		<li>W przypadku grup składających się z 4 lub więcej szczurów łaskocz każdego szczura lub parę szczurów przez 15 sekund. W razie potrzeby czas trwania sesji łaskotania można przedłużyć powyżej 2 minut.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Gartner, K., Buttner, D., Dohler, K., Friedel, R., Lindena, J., Trautschold, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+response+of+rats+to+handling+and+experimental+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Stress response of rats to handling and experimental procedures.</a> Lab Anim. 14 (3), 267-274 (1980).</li>
<li>Brudzynski, S. M., Ociepa, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalization+of+laboratory+rats+in+response+to+handling+and+touch%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalization of laboratory rats in response to handling and touch.</a> Physiol Behav. 52 (4), 655-660 (1992).</li>
<li>Davis, H., Pérusse, R. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.3758/BF03209048">Human-based social interaction can reward a rat's behavior.</a> Anim Learn Behav. 16 (1), 89-92 (1988).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20835246">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nat Methods. 7 (10), 825(2010).</li>
<li>Sherwin, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ingentaconnect.com/content/ufaw/aw/2004/00000013/A00101s1/art00003">The influences of standard laboratory cages on rodents and the validity of research data.</a> Anim Welf. 13 (1), 9-15 (2004).</li>
<li>Maurer, B. M., Doering, D., Scheipl, F., Kuechenhoff, H., Erhard, M. H. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168159108001172">Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans.</a> Appl Anim Behav Sci. 114 (3-4), 554-571 (2008).</li>
<li>Burgdorf, J., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tickling+induces+reward+in+adolescent+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Tickling induces reward in adolescent rats.</a> Physiol Behav. 72 (1-2), 167-173 (2001).</li>
<li>Cloutier, S., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168159107002341">Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats.</a> Appl Anim Behav Sci. 112 (1-2), 158-173 (2008).</li>
<li>Werner, C. M., Anderson, D. F. <a target="_blank" href="http://psycnet.apa.org/record/1976-25419-001">Opportunity for interaction as reinforcement in a T-maze.</a> Pers Soc Psychol Bull. 2 (2), 166-169 (1976).</li>
<li>Cloutier, S., Wahl, K., Baker, C., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+social+buffering+effect+of+playful+handling+on+responses+to+repeated+intraperitoneal+injections+in+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">The social buffering effect of playful handling on responses to repeated intraperitoneal injections in laboratory rats.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 53 (2), 168-173 (2014).</li>
<li>Cloutier, S., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S016815911200175X">Playful handling by caretakers reduces fear of humans in the laboratory rat.</a> Appl Anim Behav Sci. 140 (3-4), 161-171 (2012).</li>
<li>Cloutier, S., Wahl, K. L., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168159114003311">Playful handling of laboratory rats is more beneficial when applied before than after routine injections.</a> Appl Anim Behav Sci. 164, 81-90 (2015).</li>
<li>LaFollette, M. R., O'Haire, M. E., Cloutier, S., Blankenberger, W. B., Gaskill, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+tickling%3A+A+systematic+review+of+applications%2C+outcomes%2C+and+moderators%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Rat tickling: A systematic review of applications, outcomes, and moderators.</a> PLOS ONE. 12 (4), e0175320(2017).</li>
<li>Lawlor, M. M. <a target="_blank" href="http://ebooks.lib.ntu.edu.tw/1_file/AWI/96122405/06.htm">Comfortable quarters for rats in research institutions.</a> Comf Quart Lab Anim. , 26-32 (2002).</li>
<li>Hurst, J. L., Barnard, C. J., Nevison, C. M., West, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ingentaconnect.com/contentone/ufaw/aw/1997/00000006/00000004/art00004">Housing and welfare in laboratory rats: welfare implications of isolation and social contact among caged males.</a> Anim Welf. 6 (4), 329-347 (1997).</li>
<li>Hurst, J. L., Barnard, C. J., Nevison, C. M., West, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ingentaconnect.com/contentone/ufaw/aw/1998/00000007/00000002/art00002">Housing and welfare in laboratory rats: the welfare implications of social isolation and social contact among females.</a> Anim Welf. 7 (2), 121-136 (1998).</li>
<li>Patterson-Kane, E. G., Hunt, M., Harper, D. <a target="_blank" href="http://www.ingentaconnect.com/content/ufaw/aw/2002/00000011/00000003/art00006">Rats demand social contact.</a> Anim Welf. 11 (3), 327-332 (2002).</li>
<li>Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPanksepp%2C+J+%22Affective+neuroscience%3A+The+foundations+of+human+and+animal+emotions%22">Affective neuroscience: The foundations of human and animal emotions</a>. , Oxford University Press. New York, NY. (1998).</li>
<li>Panksepp, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7250521">The ontogeny of play in rats.</a> Dev Psychobiol. 14 (4), 327-332 (1981).</li>
<li>Lampe, J. F., Burman, O., Würbel, H., Melotti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Context-dependent+individual+differences+in+playfulness+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Context-dependent individual differences in playfulness in male rats.</a> Dev Psychobiol. 59 (4), 460-472 (2017).</li>
<li>Melotti, L., Bailoo, J. D., Murphy, E., Burman, O., Wurbel, H. <a target="_blank" href="http://animalbehaviorandcognition.org/uploads/journals/4/06.Melotti_etal_Final.pdf">Play in rats: association across contexts and types, and analysis of structure.</a> Anim Behav Cogn. 1 (4), 489-501 (2014).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((50-kHz+chirping+%28laughter%3F%29+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats%3A+Effects+of+social+housing+and+genetic+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: Effects of social housing and genetic variables.</a> Behav Brain Res. 115 (1), 25-38 (2000).</li>
<li>Mason, G. J., Hampton, C., Würbel, H., Wilson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasively+assessing+disturbance+and+stress+in+laboratory+rats+by+scoring+chromodacryorrhoea%5BTitle%5D)+AND+%22Altern+Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Non-invasively assessing disturbance and stress in laboratory rats by scoring chromodacryorrhoea.</a> Altern Lab Anim. 32 (32), 153-159 (2004).</li>
<li>Brudzynski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Communication+of+adult+rats+by+ultrasonic+vocalization%3A+biological%2C+sociobiological%2C+and+neuroscience+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Communication of adult rats by ultrasonic vocalization: biological, sociobiological, and neuroscience approaches.</a> ILAR J. 50 (1), 43-50 (2009).</li>
<li>Wintink, A. J., Brudzynski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+related+roles+of+dopamine+and+glutamate+in+the+initiation+of+50-kHz+ultrasonic+calls+in+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The related roles of dopamine and glutamate in the initiation of 50-kHz ultrasonic calls in adult rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 70 (2), 317-323 (2001).</li>
<li>Burgdorf, J., Panksepp, J., Brudzynski, S. M., Kroes, R., Moskal, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+for+50-kHz+positive+affective+vocalization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Genet%22%5BJournal%5D)">Breeding for 50-kHz positive affective vocalization in rats.</a> Behav Genet. 35 (1), 67-72 (2005).</li>
<li>Burgdorf, J., Kroes, R. A., Moskal, J. R., Pfaus, J. G., Brudzynski, S. M., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+of+Rats+%28Rattus+norvegicus%29+during+mating%2C+play%2C+and+aggression%3A+behavioral+concomitants%2C+relationship+to+reward%2C+and+self-administration+of+playback%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations of Rats (Rattus norvegicus) during mating, play, and aggression: behavioral concomitants, relationship to reward, and self-administration of playback.</a> J Comp Psychol. 122 (4), 357-367 (2008).</li>
<li>Knutson, B., Burgdorf, J., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+as+indices+of+affective+states+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol+Bull%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations as indices of affective states in rats.</a> Psychol Bull. 128 (6), 961-977 (2002).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Laughing%22+rats+and+the+evolutionary+antecedents+of+human+joy%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">"Laughing" rats and the evolutionary antecedents of human joy?</a> Physiol Behav. 79 (3), 533-547 (2003).</li>
<li>Burgdorf, J., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neurobiology+of+positive+emotions%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The neurobiology of positive emotions.</a> Neurosci Biobehav Rev. 30 (2), 173-187 (2006).</li>
<li>National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+care+and+use+of+laboratory+animals%22">Guide for the care and use of laboratory animals</a>. , National Academies Press. Washington, D.C. (1996).</li>
<li>National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+care+and+use+of+laboratory+animals%22">Guide for the care and use of laboratory animals</a>. , National Academies Press. Washington, D.C. (2011).</li>
<li>Natusch, C., Schwarting, R. K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+bedding+in+a+test+environment+critically+affects+50-kHz+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Using bedding in a test environment critically affects 50-kHz ultrasonic vocalizations in laboratory rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 96 (3), 251-259 (2010).</li>
<li>Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/1098-2337(1988)14:2%3C85::AID-AB2480140203%3E3.0.CO;2-5/abstract">Agonistic versus amicable targets of attack and defense.</a> Aggress Behav. 14 (2), 85-104 (1988).</li>
<li>Panksepp, J., Yovell, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+modeling+of+primal+emotional+affects+%28SEEKING%2C+PANIC+and+PLAY%29%3A+gateways+to+the+development+of+new+treatments+for+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopathology%22%5BJournal%5D)">Preclinical modeling of primal emotional affects (SEEKING, PANIC and PLAY): gateways to the development of new treatments for depression.</a> Psychopathology. 47 (6), 383-393 (2014).</li>
<li>Cloutier, S., Baker, C., Wahl, K., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168159112003012">Playful handling as social enrichment for individually- and group-housed laboratory rats.</a> Appl Anim Behav Sci. 143 (2-4), 85-95 (2013).</li>
<li>Hori, M., Hayashi, T., Nakagawa, Y., Sakamoto, S., Urayama, O., Murakami, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+emotion-specific+changes+in+the+gene+expression+profile+of+tickled+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med+Rep%22%5BJournal%5D)">Positive emotion-specific changes in the gene expression profile of tickled rats.</a> Mol Med Rep. 2 (2), 157-161 (2009).</li>
<li>Yamamuro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenesis+in+the+dentate+gyrus+of+the+rat+hippocampus+enhanced+by+tickling+stimulation+with+positive+emotion%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Neurogenesis in the dentate gyrus of the rat hippocampus enhanced by tickling stimulation with positive emotion.</a> Neurosci Res. 68 (4), 285-289 (2010).</li>
<li>Wohr, M., Schwarting, R. K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+communication+in+rodents%3A+ultrasonic+vocalizations+as+a+tool+for+research+on+emotion+and+motivation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Affective communication in rodents: ultrasonic vocalizations as a tool for research on emotion and motivation.</a> Cell Tissue Res. 354 (1), 81-97 (2013).</li>
<li>Hori, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+repeated+tickling+on+conditioned+fear+and+hormonal+responses+in+socially+isolated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of repeated tickling on conditioned fear and hormonal responses in socially isolated rats.</a> Neurosci Lett. 536 (1), 85-89 (2013).</li>
<li>Hori, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tickling+during+adolescence+alters+fear-related+and+cognitive+behaviors+in+rats+after+prolonged+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Tickling during adolescence alters fear-related and cognitive behaviors in rats after prolonged isolation.</a> Physiol Behav. 131, 62-67 (2014).</li>
<li>Pellis, S., Pellis, V. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPellis%2C+S+%22The+playful+brain%3A+venturing+to+the+limits+of+neuroscience%22">The playful brain: venturing to the limits of neuroscience</a>. , Oneworld Publications. Oxford. (2009).</li>
<li>Spinka, M., Newberry, R. C., Bekoff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+play%3A+training+for+the+Unexpected%5BTitle%5D)+AND+%22Q+Rev+Biol%22%5BJournal%5D)">Mammalian play: training for the Unexpected.</a> Q Rev Biol. 76 (2), 141-168 (2001).</li>
<li>Burgdorf, J., Kroes, R. A., Beinfeld, M. C., Panksepp, J., Moskal, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncovering+the+molecular+basis+of+positive+affect+using+rough-and-tumble+play+in+rats%3A+a+role+for+insulin-like+growth+factor+I%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Uncovering the molecular basis of positive affect using rough-and-tumble play in rats: a role for insulin-like growth factor I.</a> Neuroscience. 168 (3), 769-777 (2010).</li>
<li>Werner, C. M., Anderson, D. F. <a target="_blank" href="http://psycnet.apa.org/record/1976-25419-001">Opportunity for interaction as reinforcement in a T-maze.</a> Pers Soc Psychol Bull. 2 (2), 166-169 (1976).</li>
<li>Burgdorf, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+selective+breeding+for+differential+rates+of+50-kHz+ultrasonic+vocalizations+on+emotional+behavior+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The effects of selective breeding for differential rates of 50-kHz ultrasonic vocalizations on emotional behavior in rats.</a> Dev Psychobiol. 51 (1), 34-46 (2009).</li>
<li>Mällo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tickling-induced+50-kHz+ultrasonic+vocalization+is+individually+stable+and+predicts+behaviour+in+tests+of+anxiety+and+depression+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Tickling-induced 50-kHz ultrasonic vocalization is individually stable and predicts behaviour in tests of anxiety and depression in rats.</a> Behav Brain Res. 184 (1), 57-71 (2007).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.journalofplay.org/sites/www.journalofplay.org/files/pdf-articles/2-3-article-laughing-rats-panksepp.pdf">Laughing rats? Playful tickling arouses high-frequency ultrasonic chirping in young rodents.</a> Am J Play. 2 (3), 357-372 (2010).</li>
<li>Pellis, S. M., Field, E. F., Smith, L. K., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+differences+in+the+play+fighting+of+male+and+female+rats.+Implications+for+the+causes+and+functions+of+play%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Multiple differences in the play fighting of male and female rats. Implications for the causes and functions of play.</a> Neurosci Biobehav Rev. 21 (1), 105-120 (1997).</li>
<li>Burgdorf, J., Wood, P. L., Kroes, R. A., Moskal, J. R., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+50-kHz+ultrasonic+vocalizations+in+rats%3A+electrode+mapping%2C+lesion%2C+and+pharmacology+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of 50-kHz ultrasonic vocalizations in rats: electrode mapping, lesion, and pharmacology studies.</a> Behav Brain Res. 182 (2), 274-283 (2007).</li>
<li>Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://psycnet.apa.org/record/1993-98052-005">Rough and tumble play: A fundamental brain process.</a> Parent-Child Play. , 147-184 (1993).</li>
<li>Panksepp, J., Siviy, S., Normansell, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+psychobiology+of+play%3A+theoretical+and+methodological+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The psychobiology of play: theoretical and methodological perspectives.</a> Neurosci Biobehav Rev. 8 (4), 465-492 (1984).</li>
<li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://journals.sagepub.com/doi/abs/10.1111/j.1467-8721.2007.00483.x">Rough-and-tumble play and the development of the social brain.</a> Curr Dir Psychol Sci. 16 (2), 95-98 (2007).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie mają nic do ujawnienia.

Protokół ten opisuje technikę łaskotania szczurów, zabawną technikę obchodzenia się z nim, naśladującą zachowanie szczura podczas zabawy, która jest skuteczna w generowaniu wokalizacji wskazujących na pozytywny afekt i zwiększaniu zachowania zbliżonego, gdy szczury są traktowane w celu wspólnej hodowli lub procedur medycznych i badawczych, takich jak wstrzykiwanie IP.
Zaproponowano, aby zabawa społeczna, typowo pozytywna forma kontaktu społecznego, pomagała w kalibracji reakcji emocjonalnych na przerażające sytuacje42,43 i generowała odporność na lęk i depresję44. Naśladując zabawę społeczną szczura, łaskotanie wydaje się mieć podobnie korzystne efekty7. Tak więc, aby zastosowanie łaskotania było skuteczne w wywoływaniu pozytywnych stanów afektywnych, ważne jest, aby pamiętać, że ręka ma działać jako "partner do zabawy" podczas łaskotania. Ręka jest atrakcyjna, ponieważ symuluje zachowania, których szczury oczekują i lubią od innego szczura podczas ostrej gry. W związku z tym podnoszenie i trzymanie szczura obiema rękami nie naśladuje zabawy szczura i może nie mieć takiego samego efektu. W rzeczywistości szczury laboratoryjne nauczą się unikać niezabawnych ograniczeń, w których treser trzyma je jedną ręką, a głaszczedrugą ręką. Podczas łaskotania szczurów ważne jest również, aby poruszać ręką pewnie i asertywnie, będąc jednocześnie żywym i zabawnym. Utrzymywanie szybkiego przypinania (2-4 s/pin) powinno zminimalizować negatywne reakcje, ponieważ w brutalnej zabawie między szczurami, powtarzające się przypinanie prowadzi do wypowiadania USV22 kHz 18.
Mimo że młode szczury są bardziej zabawne i wykazują silniejsze reakcje na łaskotanie niż dorosłe szczury18, łaskotanie w wieku dorosłym ma również korzyści10. Stwierdzonorównież, że łaskotanie szczurów w młodości przynosi korzyści w późniejszym życiu, co sugeruje, że szczury doświadczają przedłużonego pozytywnego wpływu na ich emocjonalną reakcję na obecność człowieka. Różnice płci w odpowiedzi na łaskotanie są niespójne, z doniesieniami o braku różnic płci u młodych szczurów46,47, młodocianych samców wytwarzających więcej wokalizacji 50 kHz i mniej wokalizacji 22 kHz niż młode samice 29,48,39 i starszych samic wytwarzających więcej wokalizacji 50 kHz niż samce w tym samym wieku 29, podobnie jak wyniki dotyczące zabawy społecznej49.
Skuteczność techniki łaskotania można ocenić za pomocą wzorców ruchowych szczurów i wokalizacji. Szczury będą skubać i lizać palce przewodnika podczas 15-sekundowych okresów uwalniania po łaskotaniu11. Skubania to lekkie, nieszkodliwe ugryzienia, które zostały opisane jako zachowania związane z nakłanianiem do zabawy u młodych szczurów22. Kiedy treser porusza ręką po pudełku manipulacyjnym, szczur będzie za nim podążał i gonił. Szczury, zwłaszcza młode, będą również biegać, biegać wokół pudełka między atakami łaskotania i wykazywać wyraźny wzrost aktywności po napadzie łaskotania, podobnie jak w przypadku biegania, który charakteryzuje ostrą zabawę. Jeśli szczur pozostaje nieruchomy podczas uwalniania, prawdopodobnie konieczne jest dostosowanie techniki łaskotania, takie jak skrócenie czasu trwania szpilki lub danie mniejszej liczby szpilek. Na pierwszą sesję łaskotania najlepiej jest dać szpilki o krótkim czasie trwania. Czas trwania i liczbę szpilek można zwiększyć, gdy szczury przyzwyczają się do łaskotania. Szczury wydają dźwięki USV o częstotliwości 50 kHz, w tym tryle, podczas łaskotania i między napadami łaskotania. Stopniowy wzrost liczby trylów wytwarzanych podczas wypuszczania 15-s można zaobserwować w ciągu pierwszych dwóch tygodni codziennego łaskotania, zanim ustabilizował się47. Różnice indywidualne pozwalają podzielić łaskotane szczury na osoby o wysokiej i niskiej liczbie rozmówców, które różnie reagują na stres, niepokój i anhedonię 46,47,50.
Łaskotanie szczurów było z powodzeniem stosowane w celu wywołania pozytywnego afektu, jak oceniono na podstawie produkcji 50-kHz USV podczas łaskotania13. Ostatnio został wdrożony jako technika zmniejszająca strach przed ludźmi u szczurów i łagodząca ich awersję do procedur medycznych i badawczych, takich jak zastrzyki. Dowody sugerują, że łaskotanie jest skuteczną i praktyczną metodą ograniczania unikania ludzi przez zaledwie 2 minuty dzienniena zwierzę. Biorąc pod uwagę, że młode szczury bawią się razem przez około 60 minut dziennie 51,52,53, łaskotanie przez 2 minuty dziennie jest praktyczne, ale przypuszczalnie zbyt krótkie, aby odtworzyć pełne efekty zabawy społecznej wśród szczurów. Właściciele szczurów domowych, którzy na ogół mają więcej czasu na zajmowanie się swoimi szczurami niż opiekunowie laboratoryjni, mogą zapewnić szczurom dodatkowe łaskotanie, o ile szczury nadal będą reagować pozytywnie. Na podstawie Burgdorf i wsp.44,45, pierwsze 15 minut ostrej zabawy wydaje się być najbardziej pozytywne dla szczurów. Z kolei skuteczniejsze może okazać się łaskotanie szczurów przez okres do 15 minut, zwłaszcza jeśli z uzasadnionego powodu nie mogą być trzymane w grupie społecznej. Jednakże, opierając się na zabawie jako "treningu na nieoczekiwane"38, bardziej zróżnicowana technika niż opisana tutaj może być potrzebna, aby utrzymać zabawę podczas dłuższych sesji łaskotania. Dodatkowe sesje łaskotania każdego dnia mogą być również korzystne, o ile inne biologicznie ważne czynności, takie jak sen i karmienie, nie są zakłócone. Oprócz przyczyniania się do poprawy dobrostanu szczurów laboratoryjnych i domowych, opisana standaryzowana technika łaskotania może być wykorzystana w dalszych badaniach mających na celu zrozumienie wpływu zabawy społecznej i jej składników na rozwój behawioralny, społeczny i mózgu.
Gdy łaskotanie wykonywano w okolicach wstrzyknięcia, szczególnie w połączeniu z wcześniejszymi doświadczeniami z łaskotaniem (kończącymi się 40-50 dni wcześniej), zwiększało to częstotliwość 50 kHz USV przed i po wstrzyknięciu oraz zmniejszało częstotliwość słyszalnych nawoływań podczas wstrzyknięcia10. Wydaje się więc, że łaskotanie złagodziło niekorzystne skutki wstrzyknięć IP, zwłaszcza u szczurów przyzwyczajonych do łaskotania jako młode osobniki10. Mimo że łaskotanie nie zapobiegło dyskomfortowi związanemu z wstrzyknięciem, jak oceniono na podstawie produkcji sygnałów dźwiękowych, zwiększyło ono USV 50 kHz w porównaniu z warunkami kontrolnymi, przed, w trakcie i po procedurze krępowania12. Zgodnie z danymi USV 50 kHz najbardziej efektywnym momentem stosowania łaskotania był okres tuż przed procedurą krępowania, a nie po niej12. Łaskotanie szczurów przed wstrzyknięciem miało efekt przeniesienia, który nasilał pozytywny wpływ podczas zabiegu12. Łaskotanie może zatem zminimalizować potencjalny negatywny wpływ rutynowych procedur medycznych na dobrostan i zachowanie szczurów. Konieczne są dalsze badania, aby określić, w jaki sposób technika ta może być skutecznie połączona z innymi technikami iniekcji i innymi procedurami medycznymi/eksperymentalnymi.
Ogólnie rzecz biorąc, wykazaliśmy, że łaskotanie szczurów skutkuje pozytywnymi wynikami, takimi jak zwiększona produkcja USV 50 kHz i zachowanie podczas zbliżania się, a także zmniejszone unikanie ludzi i odporność na obchodzenie się. Zalecamy łaskotanie szczurów jako realną metodę poprawy dobrostanu szczurów i modelowania pozytywnych stanów afektywnych.

Obchodzenie się z małymi zwierzętami, takimi jak szczury domowe (Rattus norvegicus) trzymane w laboratoriach i jako zwierzęta domowe, może powodować znaczny wzrost behawioralnych i fizjologicznych wskaźników stresu1, a także reakcje awersyjne sugerujące cierpienie emocjonalne2. Obchodzenie się ze szczurami może wywoływać reakcje oparte na strachu wobec ludzi3,4, co może utrudnić dalsze obchodzenie się ze zwierzętami, zwiększyć ryzyko zranienia zarówno zwierzęcia, jak i przewodnika, oraz ograniczyć ważność danych eksperymentalnych5.
Aby uniknąć negatywnego wpływu obchodzenia się z nimi na wyniki eksperymentów i relacje człowiek-zwierzę, powszechną praktyką jest dawanie nowo nabytym młodym zwierzętom czasu na przyzwyczajenie się do interakcji z człowiekiem przed przypisaniem ich do eksperymentalnych metod leczenia. W tym okresie aklimatyzacji opiekunowie mogą narażać szczury na szereg zdarzeń, które mogą być bardzo zmienne zarówno pod względem formy, jak i czasu trwania. Może to obejmować bierną ekspozycję na ludzi, dotykanie, podnoszenie, pieszczoty, trzymanie, mówienie i oferowanie smakołyków. Chociaż doniesiono, że kombinacje takich procedur zmniejszają strach przed ludźmi6, nie jest jasne, które konkretne praktyki są najbardziej skuteczne w przypadku zapracowanych opiekunów zwierząt. Istnieją doniesienia, że szczury mogą mieć albo niepożądane reakcje, albo przynajmniej nie mieć żadnej pozytywnej reakcji, na niektóre z tych indywidualnych technik2,7,8,9.
Przeciwnie, liczne dowody potwierdzają wniosek, że łaskotanie, technika obchodzenia się z dzieckiem, która naśladuje aspekty zabawnego, agresywnego zachowania szczurów, jest bardzo korzystną formą kontaktów społecznych, szczególnie dla młodych szczurów10,11,12,13. Szczury są ssakami bardzo towarzyskimi, co jasno wynika z obserwacji czasu, jaki spędzają razem na zabawie jako młode osobniki14 oraz ich silnej motywacji do ponownego nawiązania i utrzymania kontaktów społecznych z przedstawicielami tego samego gatunku15,16,17. Łaskotanie szczurów czerpie z zabawnej społecznej natury szczurów, aby przekształcić obchodzenie się z nimi w pozytywne doświadczenie. Koncepcja ta została pierwotnie opracowana jako model do badania neurobiologicznych podstaw pozytywnych stanów afektywnych wywoływanych przez zachowania związane z zabawą społeczną7. Od tego czasu łaskotanie szczurów zostało wykorzystane w ponad 56 różnych eksperymentach, z których 22 porównywały łaskotanie z innymi technikami obchodzenia się z nim13.
Nieokrzesana zabawa szczura charakteryzuje się dwoma kluczowymi zachowaniami: "kontakt grzbietowy" i "szpilka" (Rysunek 1)18,19. Podczas ostrej zabawy szczur rozpoczyna zabawę, nawiązując kontakt grzbietowy z karkiem partnera. Odbiorca odpowiada, zwijając się na wznak i zostaje przygwożdżony przez inicjatora stojącego powyżej19. Gra toczy się dalej, a szczury na zmianę znajdują się w każdej pozycji, na górze i na dole18. Opiekunowie są w stanie naśladować dwa kluczowe elementy zabawy w stylu szorstkim, naprzemiennie dotykając karku szczura (kontakt grzbietowy) i powierzchni brzusznej (szpilka) za pomocą energicznych, szybkich ruchów palców podobnych do tych, których używa się podczas łaskotania dziecka. Oczywiście łaskotanie nie jest dokładną kopią szczurzej zabawy, ponieważ szczury nie mogą przygwoździć ludzkiej ręki podczas łaskotania. Rzeczywiście, poziom zaangażowania poszczególnych osób w brutalną zabawę i łaskotanie może się różnić20,21. Mimo to wydaje się, że łaskotanie wywołuje te same mechanizmy nagrody, co szorstka zabawa wśród przedstawicieli tego samego gatunku. Łaskotanie jest aktywnie zabiegane przez zwierzęta i może służyć jako nagroda za instrumentalne uczenie się, dostarczając dowodów na to, że łaskotanie jest znacznie satysfakcjonujące dla młodych szczurów7,11,12,13,22. Mimo, że doniesiono również, że szczury uczą się zadania instrumentalnego w zamian za delikatne głaskanie jako nagrodę, szybciej podchodziły do ręki osoby oferującej łaskotanie w porównaniu do głaskania7.
Szpilki używane do łaskotania mogą wydawać się podobne do typowych procedur krępowania, ale istnieją dowody na to, że szczury inaczej postrzegają te rodzaje obchodzenia się. Kiedy szczury są wielokrotnie krępowane, na przykład podczas procedury wstrzykiwania, wydzielają nadmierną ilość porfiryn, co powoduje chromodacryorrhea ("czerwone łzy")8. Chromodacryorrhea występuje w odpowiedzi na ostre czynniki stresogenne i powoduje, że skóra i sierść wokół oczu i nosa stają się zabarwione na czerwonawy kolor23. Wielokrotnie przytrzymywane i krępowane na plecach jak w szpilce, szczury wykazywały mniejszy pociąg do ludzi niż wtedy, gdy były łaskotane12. Wyniki te sugerują, że powtarzające się krótkie krępowanie i zwalnianie podczas łaskotania są odbierane inaczej niż powściągliwość bez zabawy. Tak więc dokładna technika stosowana w łaskotaniu ma ważne implikacje dla generowania pozytywnego stanu afektywnego, a nie przyczynia się do radzenia sobie ze stresem.
Monitorowanie wpływu łaskotania na stan afektywny szczura można łatwo osiągnąć, zwracając uwagę na wokalizacje szczurów. Szczury zazwyczaj wytwarzają dwie kategorie wokalizacji ultradźwiękowych (USV), przy około 22 kHz i 50 kHz, oprócz wokalizacji słyszalnych. USV 22 kHz zwykle występują, gdy przewidywane są zdarzenia awersyjne i towarzyszy im podwyższona aktywność cholinergiczna mózgu24. Dlatego uważa się, że USV 22 kHz wskazują na negatywny afektywny stan lęku. USV 50 kHz, zwłaszcza typu "tryl" z modulacją częstotliwości (<silna klasa="xfig">Rysunek 2), są na ogół związane z sytuacjami i bodźcami nagradzającymi i towarzyszy im zwiększona aktywność dopaminergiczna mózgu24,25. W związku z tym uważa się, że wyrażenie licznych USV 50 kHz odzwierciedla pozytywny stan afektywny24,26,27,28. Wreszcie, słyszalne wokalizacje są zwykle kojarzone, a zatem używane jako markery fizycznego bólu i dyskomfortu. Zróżnicowana produkcja tych trzech form wokalizacji stanowi zatem wiarygodny zapis zmian w stanie afektywnym szczurów26. Szczury wytwarzają USV o częstotliwości około 22 kHz podczas ekspozycji na drapieżniki, ekspozycji na bolesne bodźce, takie jak wstrząs stopy i walki między samcami28. Doniesiono również, że głaskanie wywołuje wiele USV 22 kHz u naiwnych szczurów, co wskazuje na negatywny afekt2. W przeciwieństwie do tego, gdy są łaskotane przez ludzi, na przykład gdy są zaangażowane w brutalną zabawę z innymi szczurami, szczury wytwarzają liczne USV o częstotliwości 50 kHz. Wynika z tego, że częstotliwość USV 50 kHz zapewnia stopniowaną miarę pozytywnej reakcji afektywnej generowanej przez tickling29,30.
Istniejące opisy "jak łaskotać szczura" są raczej krótkie i mogą prowadzić do różnych wyników. Co więcej, początkujący "łaskotki szczurów" mogą być zbyt niepewni w swoich próbach naśladowania brutalnej zabawy. Słowa "łaskotać energicznie" są łatwiejsze do zrozumienia, gdy są demonstrowane wizualnie. Dlatego celem tego artykułu jest przedstawienie szczegółowego opisu i pokazanie, jak naśladować pozytywne, zabawne interakcje szczurów w skuteczny i spójny sposób, który niezawodnie wywołuje pozytywne reakcje u większości szczurów podczas obsługi. Protokół ten opisuje znormalizowaną technikę łaskotania i wyjaśnia, w jaki sposób łaskotanie można połączyć z procedurami, takimi jak krępowanie i wstrzykiwanie, w celu złagodzenia potencjalnie nieprzyjemnych doświadczeń afektywnych.

<table><tbody><tr><td>Stół lub stół</td><td></td><td></td> warsztatowy <td>Nie jest zalecana żadna konkretna marka.</td></tr><tr><td>Pudełko manipulacyjne (klatka domowa dla szczurów lub inna wybiega)</td><td></td><td></td><td>Nie jest zalecana żadna konkretna marka.</td></tr><tr><td>Pościel lub inny rodzaj miękkiego pokrowca</td><td></td><td></td><td>Nie jest zalecana żadna konkretna marka.</td></tr><tr><td>Rękawiczki (cienkie rękawice laboratoryjne)</td><td></td><td></td><td>Opcjonalnie.</td></tr><tr><td>Urządzenie do pomiaru czasu</td><td>Deltaworks</td><td>Interwał czasowy:Czas treningu HIIT, treningów https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8</td><td>Opcjonalnie. Każdy timer będzie dobry, chociaż wygodnie jest używać timera interwałowego, jeśli łaskoczesz wiele szczurów.</td></tr><tr><td>Mikrofon ultradźwiękowy, taki jak wykrywacz nietoperzy lub mikrofon USB</td>, <td>Magenta Electronics LTD</td><td>Bat4 Bat4 Bat Detector https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html</td><td>Opcjonalnie. Wykrywacz nietoperzy Magenta jest stosunkowo niedrogi i łatwy w użyciu, ale może wykrywać wokalizacje tylko w jednym zakresie na raz.</td></tr><tr><td></td><td>Dodotronic</td><td>Ultramic 200K http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa</td><td>opcjonalnie. Ten mikrofon sprawdził się w naszych eksperymentach. Istnieje wiele innych opcji dla mikrofonów ultradźwiękowych.</td></tr><tr><td>Oprogramowanie bioakustyczne</td><td>CIBRA</td><td>SeaWave http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html</td><td>Opcjonalnie. Darmowe oprogramowanie z ograniczonymi możliwościami nagrywania.</td></tr><tr><td></td><td>CIBRA</td><td>SeaPro http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html</td><td>Opcjonalnie. To oprogramowanie ma szerokie możliwości nagrywania i dobrze sprawdziło się w naszych badaniach. Istnieje wiele innych pakietów oprogramowania, które współpracują z mikrofonami bioakustycznymi.</td></tr></tbody></table>

Łaskotanie, technika wywoływania pozytywnego afektu podczas obchodzenia się ze szczurami

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Obchodzenie się z małymi zwierzętami, takimi jak szczury, może prowadzić do wielu negatywnych skutków. Należą do nich strach przed ludźmi, opór przed obchodzeniem się, zwiększone ryzyko obrażeń zarówno zwierząt, jak i rąk ich opiekunów, zmniejszony dobrostan zwierząt i mniej ważne dane badawcze. Aby zminimalizować negatywny wpływ na wyniki eksperymentów i relacje człowiek-zwierzę, zwierzęta badawcze są często przyzwyczajone do obchodzenia się z nimi. Metody habituacji są jednak bardzo zmienne i często mają ograniczoną skuteczność. Co więcej, ludzie mogą naśladować aspekty zabawnego, szorstkiego zachowania zwierząt podczas obchodzenia się z nimi. W systematycznym stosowaniu u szczurów laboratoryjnych, to zabawne obchodzenie się, określane jako łaskotanie, konsekwentnie powoduje pozytywne reakcje behawioralne. Ten artykuł zawiera szczegółowy opis znormalizowanej techniki łaskotania szczurów. Metoda ta może przyczynić się do przyszłych badań nad pozytywnymi stanami afektywnymi u zwierząt, ułatwić obchodzenie się ze szczurami w typowych czynnościach hodowlanych, takich jak zmiana klatki lub procedury medyczne/badawcze, takie jak iniekcja, a także zostać wdrożona jako źródło wzbogacenia społecznego. Stwierdzono, że metoda ta może być stosowana do skutecznego i praktycznego zmniejszania lękliwości szczurów przed ludźmi i poprawy ich dobrostanu, a także niezawodnego modelowania pozytywnych stanów afektywnych.

Czynniki wpływające lub potencjalnie wpływające na reakcje na łaskotanie zestawiono w Tabeli 1. Pozytywne efekty łaskotania szczurów zostały wskazane za pomocą wielu miar dobrostanu szczurów i pozytywnego afektu. Do powszechnych wyników należą: zwiększona produkcja USV o częstotliwości 50 kHz, zwiększone zachowania dążenia oraz łatwiejsza obsługa zwierząt. Opisane efekty łaskotania szczurów na poziomie genetycznym i komórkowym obejmują zmienioną ekspresję genów w podwzgórzu37 oraz zwiększoną neurogenezę w zakręcie zębatym hipokampa38,39. Zgłoszono również wyniki wskazujące na zmniejszenie uogólnionego lęku i strachu przed ludźmi, takie jak skrócenie latencji podejścia w 9 różnych eksperymentach13, mniejsza tendencja do zamierania (freezing) po warunkowaniu lękowym40,41 oraz zwiększona liczba wejść do centrum areny w teście otwartego pola u szczurów utrzymywanych indywidualnie36. Dalsze informacje można znaleźć u LaFollette et al., którzy przedstawili systematyczny przegląd literatury dotyczącej łaskotania, identyfikujący 22 raporty badające skutki łaskotania szczurów w porównaniu z innymi technikami13.
Następnie przedstawiono konkretne przykłady wyników, jakie można uzyskać, gdy technika łaskotania jest łączona z procedurami unieruchamiania oraz iniekcjami doszpikowymi (IP).
Szczury Sprague-Dawley (samce; wiek 85–94 dni; n = 48) łaskotane przez 2 min bezpośrednio przed i po codziennym wstrzyknięciu soli fizjologicznej drogą IP przez 10 dni, szczególnie w połączeniu z doświadczeniem łaskotania w okresie młodzieńczym (2 min/dzień od 25. do 45. dnia życia), emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz tuż przed (GLM ANOVA, F3, 44 = 9,59, p &lt; 0,0001; Rycina 3A) i tuż po (F3, 44 = 8,74, p = 0,0001; Rycina 3B) zastrzyku (Tukey-Kramer, p &lt; 0,05) w porównaniu do szczurów poddanych pasywnemu dotykowi dłonią10. Podczas samego krótkotrwałego podawania zastrzyku emisja USV 50 kHz była ograniczona (średnia ± SE, 15 ± 1,4 USV/min), a sposób obchodzenia się ze zwierzętami nie miał wpływu na ich częstotliwość10. Wyciągnięto wniosek, że łaskotanie, stosowane zarówno przed, jak i po procedurze wstrzykiwania, wywołało pozytywny stan afektywny, który złagodził awersyjność procedury, szczególnie u osobników, które były łaskotane w okresie młodzieńczym.
Aby sprawdzić, czy łaskotanie byłoby skuteczne, gdyby ograniczyć je do czasu przed lub po iniekcji, zamiast obu tych momentów, a jeśli tak, który czas byłby lepszy, porównano reakcje szczurów na łaskotanie przed, po oraz przed i po iniekcji. Częstość występowania USV o częstotliwości 50 kHz oraz wołań słyszalnych mierzono odpowiednio jako wskaźniki afektu pozytywnego i negatywnego12. Szczury Sprague-Dawley (samce; wiek 32-41 dni; n = 96) były albo unieruchamiane i otrzymywały codzienną iniekcję soli fizjologicznej drogą IP (INJ), albo unieruchamiane bez otrzymywania iniekcji (kontrolne, CON), a następnie poddawane jednej z następujących procedur: brak łaskotania, gdzie szczury nie były dotykane przed i po procedurze unieruchomienia (TN); łaskotanie przez 2 min bezpośrednio przed (TB), po (TA) lub przed i po (TBA) unieruchomieniu12. W ciągu 2 min przed unieruchomieniem szczury z grup, w których łaskotanie odbywało się przed unieruchomieniem (TB, TBA), emitowały najwięcej USV o częstotliwości 50 kHz (GLMM ANOVA, F3,88 = 49,19, p &lt; 0,0001; Rysunek 3C). Szczury z grup TA i TN nie różniły się częstością emitowanych USV przed procedurą unieruchomienia. Podczas procedury każdy szczur, który został poddany łaskotaniu (TA, TB, TBA), emitował więcej USV o częstotliwości 50 kHz niż szczury niełaskotane (TN; F3,88 = 50,67, p &lt; 0,0001; Rysunek 3D). Wśród łaskotanych szczurów te, które były łaskotane przed procedurą (TB, TBA), emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz podczas unieruchomienia w porównaniu do tych łaskotanych po procedurze (TA; p &lt; 0,05). W 2-minutowym okresie po procedurze szczury we wszystkich grupach łaskotanych (TA, TB, TBA) emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz niż szczury niełaskotane (TN; F3,88 = 53,64, p &lt; 0,0001; Rysunek 3E). Ponadto, podczas procedury szczury łaskotane przed unieruchomieniem (TB, TBA) emitowały mniej wołań słyszalnych w porównaniu do szczurów, które nie były łaskotane (TN), natomiast szczury łaskotane po procedurze (TA) nie różniły się od szczurów z pozostałych grup (F3,88 = 3,67, p= 0,02; Rysunek 3F). Wyniki wykazują, że łaskotanie szczurów przed ich unieruchomieniem w celu wykonania iniekcji IP wywołało oznaki większego afektu pozytywnego w okresach przed, w trakcie i po procedurze niż łaskotanie wyłącznie po unieruchomieniu12.
Opiekunowie zastosowali jeden z następujących zabiegów manipulacyjnych u szczurów (samce Sprague-Dawley; n = 32) w wieku od 57 do 74 dni: (1) minimalna manipulacja raz w tygodniu podczas wymiany klatki; (2) ekspozycja na pasywną dłoń przez 2 min dziennie; (3) 2 min łaskotania każdego dnia, aby naśladować zabawę społeczną; (4) 2 min dziennego unieruchomienia szczura na grzbiecie, symulującego nieodwzajemnione przyciśnięcie przez osobnika dominantniego11. W minucie następującej po iniekcji IP, szczury z grup łaskotanych i pasywnych spędzały więcej czasu na staniu na tylnych łapach w przedniej połowie klatki, blisko miejsca, w którym stał badacz, w porównaniu do szczurów z grup minimalnej manipulacji i unieruchomienia (GLM ANOVA, F3, 27 = 5.70, p = 0.004; Rycina 3G). Dodatkowo, szczury łaskotane emitowały więcej 50-kHz USV niż szczury w grupie pasywnej podczas 3-minutowej ekspozycji na znaną lub nieznaną dłoń w teście podejścia człowieka (logarytmiczna średnia ± SE liczba sygnałów/min, Minimal: 0.7 ± 0.26, Passive: 0.6 ± 0.18, Tickled: 1.8 ± 0.30, Restraint: 1.4 ± 0.28; F3,28 = 4.04, p = 0.02). Zatem sama obecność pasywnej dłoni pomogła w habituacji szczurów do ludzi w porównaniu do minimalnej manipulacji, jednak łaskotanie było najskuteczniejszą metodą wywołania pozytywnej reakcji wobec ludzi11.
<img alt="Schemat zachowania myszy pokazujący kontakty grzbietowe i przyciśnięcia w badaniu interakcji społecznych zwierząt." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57190/57190fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1: Zachowania zabaw typu rough-and-tumble u szczurów. (A) Kontakt grzbietowy; (B) Przyciśnięcie (pin)18. <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57190/57190fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Spektrogram przedstawiający częstotliwość (kHz) w funkcji czasu (s); analiza sygnału akustycznego, wizualizacja danych badawczych." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57190/57190fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rysunek 2: 50-kHz ultrasoniczne wokalizacje typu „trele” z modulacją częstotliwości. Szczur podczas łaskotania wyemitował pięć wokalizacji typu trel w czasie 1 s. Poziome linie przy 17-, 25- i 70-kHz zostały wygenerowane przez sprzęt elektroniczny znajdujący się w pomieszczeniu (np. komputer, mikrofon, kamera).
<img alt="Wykresy porównujące USV o częstotliwości 50 kHz u szczurów poddanych różnym zabiegom; analizy dotyczące obsługi i łaskotania." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57190/57190fig3.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: Reakcje szczurów poddanych łaskotaniu przed lub w połączeniu z procedurami eksperymentalnymi, takimi jak iniekcje dosytrynialne (IP). Częstość (średnia ± SE wołań/min) emitowania USV o częstotliwości 50 kHz (A) przed i (B) po procedurze iniekcji u dorosłych samców szczurów poddanych minimalnej obsłudze (M) lub łaskotaniu (T) w wieku młodzieńczym oraz pasywnej obecności dłoni (P) lub łaskotaniu (T) bezpośrednio przed i po iniekcji (co daje cztery kombinacje zabiegów: M-P, T-P, M-T, T-T); z Cloutier et al.10. Częstość USV o częstotliwości 50 kHz (średnia ± SE wołań/min) emitowana (C) przed, (D) w trakcie i (E) po unieruchomieniu (z lub bez iniekcji IP) raz dziennie przez 10 kolejnych dni u młodzieńczych samców szczurów, które nie otrzymywały łaskotania (TN) lub otrzymywały łaskotanie przed (TB), po (TA) bądź zarówno przed, jak i po (TBA) procedurze; oraz (F) częstość wołań słyszalnych emitowanych podczas unieruchomienia; z Cloutier et al.12. (G) Czas trwania (średnia ± SE s) stania na tylnych łapach w pobliżu badacza podczas 1 min następującej po iniekcji IP u samców szczurów poddanych minimalnej obsłudze, obsłudze pasywnej, łaskotaniu lub unieruchomieniu przez opiekunów; z Cloutier et al.11. Słupki z różnymi literami (a, b, c) wskazują różnice w porównaniach parzystych (Tukey-Kramer, p &lt; 0.05). <a href="https://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57190/57190fig3large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Czynnik</td>
			<td colspan="4">Efekt</td>
			<td>Bibliografia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wewnątrzpochodny</td>
			<td colspan="4"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wiek</td>
			<td colspan="4">Brak różnic w wokalizacjach ultradźwiękowych (USVs) o częstotliwości 50 kHz u szczurów w wieku 24–44 oraz 89–92 dni</td>
			<td>18, 29, 42</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Spadek liczby USV o częstotliwości 50 kHz u szczurów od 71. do 148. dnia życia</td>
			<td>29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Siedemnastodniowe samce emitowały znacznie więcej USV o częstotliwości 50 kHz niż samce w wieku od 7 do 9 miesięcy.</td>
			<td>43</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Szczury łaskotane zarówno w okresie młodzieńczym, jak i dorosłym, wykazały najbardziej pozytywne wyniki w porównaniu ze szczurami łaskotanymi wyłącznie jako młode lub wyłącznie jako dorosłe.</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Płeć</td>
			<td colspan="4">Samce szczurów emitowały więcej 50-kHz USV w wieku 44 i 71 dni, natomiast samice emitowały więcej 50-kHz USV w wieku 148 dni</td>
			<td>29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Samce szczurów emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz niż samice w 44. i 58. dniu.</td>
			<td>43</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Brak różnic ze względu na płeć w zakresie USV o częstotliwości 50 kHz u 96 młodniczych szczurów Long-Evans lub 52 młodniczych szczurów Wistar</td>
			<td>42, 44</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Samice młodych szczurów linii Wistar emitowały więcej 22-kHz USV niż samce</td>
			<td>44</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Różnice międzyosobnicze</td>
			<td colspan="4">Szczury, które emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz, wykazywały skrócenie czasu dotarcia do samopodawanego łaskotania, zwiększoną pozytywną tendencję do interpretacji niejednoznacznych bodźców (positive judgement bias) po łaskotaniu oraz zwiększoną proliferację komórek w hipokampie po łaskotaniu.</td>
			<td>27, 37, 45</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="4">Szczury wykazujące większą skłonność do zabaw emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz</td>
			<td>43</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Szczep</td>
			<td colspan="4">Nie zgłoszono tego w oficjalnych raportach, lecz dowody anegdotyczne sugerują, że szczury różnych szczepów i z różnych hodowli różnią się reakcją na łaskotanie. Linie szczurów rozeszły się w wyniku selekcji pod kątem wysokiej lub niskiej częstości emitowania ultradźwiękowych wokalizacji (USV) o częstotliwości 50 kHz w odpowiedzi na łaskotanie.</td>
			<td>22, 26, 42, 46</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poprzednie doświadczenia z łaskotaniem</td>
			<td colspan="4">Zwiększona produkcja 50-kHz ultradźwiękowych USV</td>
			<td>12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zewnętrzny</td>
			<td colspan="4"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ściółka</td>
			<td colspan="4">Szczury wydawały więcej ultradźwiękowych wokalizacji (USV) o częstotliwości 50 kHz podczas łaskotania na znanej ściółce w porównaniu do braku ściółki</td>
			<td>33</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stres</td>
			<td colspan="4">Łaskotanie szczurów 1 godzinę, ale nie 23 godziny, po stresie związanym z unieruchomieniem zmniejszyło produkcję USV o częstotliwości 50 kHz</td>
			<td>47, 48</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harmonogram</td>
			<td colspan="4">Łaskotanie szczurów przed iniekcją było bardziej skuteczne w zwiększaniu liczby USV o częstotliwości 50 kHz niż łaskotanie po iniekcji</td>
			<td>12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Płeć osoby prowadzącej</td>
			<td colspan="4">Nie stwierdzono efektu</td>
			<td>Panksepp, J. 2014, niepublikowane dane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oswajanie szczura z operatorem</td>
			<td colspan="4">Szczury emitowały więcej USV o częstotliwości 50 kHz i spędzały więcej czasu w pobliżu znanego niż nieznanego stymulatora dotykowego.</td>
			<td>11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doświadczenie łaskotania przez opiekuna / intensywność łaskotania przez opiekuna</td>
			<td colspan="4">Wpływ na produkcję 50-kHz USV, lecz nie na preferencje i zachowanie zbliżania się</td>
			<td>Cloutier, S. 2011, dane niepublikowane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czas trwania kontaktu pinów z uchwytem / częstotliwość przełączania między kontaktami grzbietowymi a pinami</td>
			<td colspan="4">Rzadsze występowanie podgryzań (interpretowanych jako zachęcanie do zabawy) odnotowano w stosunku do dłoni stosującej 15-sekundowe unieruchomienia (pins) niż w przypadku dłoni wykonującej łaskotki z wielokrotnymi kontaktami grzbietowymi i unieruchomieniami w ciągu 15 s</td>
			<td>11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Substancje zapachowe (np. perfumy, szampon, pianka do golenia) używane przez osobę prowadzącą</td>
			<td colspan="4">Nie zgłoszono</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wielkość grupy społecznej</td>
			<td colspan="4">W większości eksperymentów utrzymywanie zwierząt w indywidualnych klatkach zwiększyło liczbę pozytywnych reakcji na łaskotki w porównaniu do utrzymywania ich w grupach. Łaskotanie szczurów utrzymywanych grupowo w obecności współlokatorów w ich klatce domowej zmniejszyło tę różnicę.</td>
			<td>7, 22, 27, 36</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intensywność światła</td>
			<td colspan="4">Łaskotanie przy natężeniu oświetlenia 1000 luksów zredukowało liczbę USV o częstotliwości 50 kHz w porównaniu do natężenia 25 luksów.</td>
			<td>43</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Szum</td>
			<td colspan="4">Nie zgłoszono</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Czyszczenie klatki przed stymulacją łaskotkową</td>
			<td colspan="4">Indukowana produkcja 22-kHz USV u niektórych szczurów</td>
			<td>12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pora dnia</td>
			<td colspan="4">Brak wpływu na produkcję USV o częstotliwości 50 kHz w przypadku przeprowadzenia procedury na początku lub na końcu okresu jasnego. Nie przeprowadzono jeszcze porównania łaskotania szczurów na początku/końcu okresu jasnego względem środka okresu jasnego lub okresu ciemnego.</td>
			<td>Cloutier, S. 2011, niepublikowane dane</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Lista czynników wpływających lub potencjalnie wpływających na reakcje szczurów na łaskotanie, zabawową technikę manipulacji mającą na celu naśladowanie szczurzych zabaw typu rough-and-tumble.

Ten artykuł demonstruje ustandaryzowane zastosowanie zabawnego obchodzenia się, techniki łaskotania zaprojektowanej tak, aby naśladować brutalną zabawę szczura. Technika ta jest skuteczna w zmniejszaniu lękliwych reakcji na ludzi i generowaniu pozytywnego wpływu, gdy szczury są traktowane w celu wykonywania wspólnych czynności hodowlanych oraz procedur medycznych i badawczych, takich jak wstrzykiwanie.

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Ogólnym celem tej procedury jest wywołanie pozytywnego wpływu i zmniejszenie strachu przed ludźmi u szczurów. Ta metoda może pomóc w poprawie dobrostanu szczurów w naukach o zwierzętach. Dostarcza również narzędzia do badania stanów afektywnych na poziomie behawioralnym i neurobiologicznym.Główną zaletą łaskotania szczurów jest to, że jest to skuteczny i praktyczny sposób na wywołanie pozytywnego wpływu, zmniejszenie strachu i poprawę dobrostanu. Ludzie, którzy są nowicjuszami w tej metodzie, mogą nie łaskotać wystarczająco energicznie, próbując naśladować aspekty szorstkiej i przewracanej zabawy szczurów. Wizualna demonstracja tej metody pomaga naukowcom zastosować ją w ustandaryzowany sposób, który jest porównywalny we wszystkich badaniach.Wyjmij klatkę ze stojaka i umieść ją na blacie na wysokości, która umożliwia obsłudze łatwy dostęp do całej powierzchni podłogi. Na początek załóż wszelkie wymagane środki ochrony osobistej. Usuń wszelkie przeszkody z klatki domowej.Następnie umieść timer w pobliżu skrzynki manipulacyjnej, gdzie osoba obsługująca może go łatwo zobaczyć. Aby nagrać wokalizacje, zawieś mikrofon z boku pudełka obsługi na tyle nisko, aby wyraźnie uchwycić wokalizacje szczurów w pudełku. Rozpocznij sesję łaskotania od 15-sekundowego zwolnienia, kładąc nieruchomo rękę po jednej stronie pudełka do przenoszenia.Jeśli szczur prosi o interakcję, liżąc lub skubiąc rękę, odsuń rękę, aby zainicjować zabawną pogoń szczura za ręką. Po uwolnieniu wykonaj 15 sekund łaskotania, które składa się z serii szybko zmieniających się styków grzbietowych i szpilek. Szczury zazwyczaj wydają pozytywne 50-kilohercowe ultradźwiękowe wokalizacje, gdy są łaskotane.Łaskotanie jest inicjowane przez grzbietowy kontakt opuszkami palców poruszającymi się energicznie po karku szczura, jak to zwykle ma miejsce w łaskotaniu ludzi. Podczas kontaktu grzbietowego palce jednej ręki powinny wykonywać lekkie, energiczne i energiczne ruchy łaskotania na karku szczura. Następnie odwróć szczura jedną ręką, umieszczając kciuk i środkowy palec pod przednimi łapami szczura, podnosząc szczura i ruchem nadgarstka, aby obrócić szczura na plecy.Na koniec przytrzymaj szczura w tej przypiętej pozycji z umiarkowanym naciskiem przez dwie do czterech sekund, używając opuszków palców do łaskotania brzucha szczura. Podczas szpilki szczur powinien być delikatnie przytrzymywany i ponownie palce jednej ręki powinny wykonywać lekkie, energiczne i energiczne ruchy łaskotania w brzuch szczura. Kontynuuj łaskotanie, wykonując dodatkowe kontakty grzbietowe i szpilki.Powinno być około czterech do pięciu styków grzbietowych i szpilek na 15 sekund łaskotania. Następnie wykonaj trzy dodatkowe cykle 15-sekundowych uwalniań, na przemian z 15-sekundowymi łaskotkami tego samego szczura, w sumie przez dwie minuty. W przypadku szczurów w parach okres uwalniania dla jednego szczura zapewnia czas na łaskotanie drugiego szczura.Zastąp poprzednio usunięte obiekty wzbogacające w klatce domowej. Na koniec przywróć klatkę domową zawierającą szczury do stojaka na mieszkania. W reprezentatywnym eksperymencie szczurom podaje się zastrzyki z soli fizjologicznej IP codziennie przez 10 dni.Szczury, które są łaskotane przez dwie minuty bezpośrednio przed i po wstrzyknięciu soli fizjologicznej, wytwarzały ponad 50-kilohercowe wokalizacje ultradźwiękowe niż szczury wystawione na bierną rękę. Porównano reakcje szczurów na łaskotanie przed, po lub przed i po powściągliwości. Szczury z zabiegów, które otrzymały łaskotanie przed unieruchomieniem, wytwarzały najwięcej 50-kilohercowych wokalizacji przed i w trakcie zabiegu.W ciągu dwóch minut po zabiegu krępowania wszystkie łaskotane szczury wydały więcej wokalizacji niż te, które nie były łaskotane. Próbując tej procedury, należy pamiętać, że naśladuje ona aspekty ostrej zabawy szczura i przewracania się. Łaskotki powinny być hałaśliwe, zabawne i nieco nieprzewidywalne.Ultradźwiękowe wokalizacje szczurów mogą być rejestrowane w celu udzielenia odpowiedzi na pytania dotyczące wpływu szczurów i oceny skuteczności techniki łaskotania.

tickling-a-technique-for-inducing-positive-affect-when-handling-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Ten artykuł opisuje procedury stymulacji dotykowej szczeniąt szczurów i późniejszego barwienia morfologii neuronów metodą Golgiego-Coxa. Stymulacja dotykowa to pozytywne doświadczenie, które podaje się w okresie okołoporodowym poprzez głaskanie szczeniąt domowym miotełkiem do kurzu. Barwienie metodą Golgiego-Coxa jest niezawodną procedurą pozwalającą na wizualizację całych neuronów.

Wizualizacja wpływu pozytywnego wczesnego doświadczenia, stymulacji dotykowej, na morfologię dendrytyczną i łączność synaptyczną za pomocą barwienia Golgiego-Coxa

Opracowanie nowych strategii udoskonalania dla myszy laboratoryjnych jest trudnym zadaniem, które przyczynia się do spełnienia zasady 3R. Protokół ten wprowadza trening klikerowy jako program wzbogacający funkcje poznawcze dla myszy laboratoryjnych.

Wprowadzenie treningu klikerowego jako wzbogacenia poznawczego dla myszy laboratoryjnych

Ten protokół opisuje nowy model, dzięki któremu zdrowe szczury mogą nabawić się depresji w danym okresie czasu poprzez zarażenie przez kontakt z chronicznymi nieprzewidywalnymi szczurami zestresowanymi (CUS).

Nowa metoda wywoływania zachowań podobnych do depresji u szczurów

Ten protokół wprowadza metodę zmiany klatki dla szczurów poprzez trening klikerowy. Szczury uczą się pożądanego zachowania nie tylko poprzez bezpośrednie szkolenie, ale także poprzez uczenie się przez obserwację. Wdrożenie tego szybkiego i łatwego protokołu może przyczynić się do poprawy samopoczucia i higieny w obiektach dla gryzoni.

Wykorzystanie treningu klikerowego i obserwacji społecznej do nauczenia szczurów dobrowolnej zmiany klatek

Ten artykuł opisuje technikę obsługi u myszy, technikę obsługi 3D, która ułatwia rutynowe obchodzenie się poprzez redukcję zachowań podobnych do lęku i przedstawia szczegóły dotyczące dwóch istniejących powiązanych technik (obsługa tunelu i ogona).

Techniki obchodzenia się w celu zmniejszenia stresu u myszy

Protokoły treningowe obejmujące pozytywne wzmocnienie rutynowych procedur hodowlanych u królików zostały opracowane i okazały się skuteczne, ponieważ króliki niezawodnie wykazały wyuczone zachowania podczas cotygodniowego egzaminu ogólnego. Podnoszenie królików za pomocą skrzyni transportowej było mniej awersyjne niż konwencjonalna technika obsługi.

Szkolenie królików laboratoryjnych w celu udoskonalenia rutynowych procedur hodowlanych

Ultradźwiękowe wołania szczurów i myszy laboratoryjnych (USV) są przydatne do badania funkcji głosowych i nerwowych. Ten protokół opisuje paradygmat nagrody pokarmowej, który niezawodnie wywołuje wołania USV dotyczące pożądania bez zamieszań związanych z rozmnażaniem. Zawiera szczegóły dotyczące kondycjonowania zwierząt, prezentacji bodźców, nagrywania i analizy akustycznej, dostarczając metodę odtwarzalną do badania funkcji afektywno-motywacyjnych i czopowych czuciowo-ruchowych.

Elicytacja pokarmu przedwidziała wzmożenie apetytowych ultradźwiękowych wokalizacji u szczurów laboratoryjnych i myszy

Opisano trzy nowe testy behawioralne (zmiana kroku kończyny przedniej, test niestabilności postawy, test obchodzenia się z makaronem) do oceny funkcji kończyn przednich po urazie rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym u gryzoni.

Ocena funkcji kończyn przednich po jednostronnym SCI szyjki macicy za pomocą nowych zadań: zmiana kroku kończyny, niestabilność postawy i obchodzenie się z makaronem

Obecne badanie ocenia nowatorską procedurę oceny wzmacniających efektów smacznych roztworów u szczurów laboratoryjnych: samodzielne podawanie wewnątrzustne. W tym celu mierzono reakcję instrumentalną (tj. naciskanie dźwignią) na wewnątrzustne wlewy słodkich roztworów o różnych stężeniach na podstawie ciągłych i progresywnych harmonogramów współczynników wzmocnienia.

Nowatorska procedura oceny wzmacniających właściwości degustatorów u szczurów laboratoryjnych: instrumentalne samodzielne podawanie wewnątrzustne

Zawartość tłuszczu w diecie wpływa zarówno na spożycie energii, jak i skład tkanki tłuszczowej u ssaków. Badając preferencje szczurów do pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu w serii eksperymentów z wyboru, możliwe jest przetestowanie różnic genetycznych i interwencji farmakologicznych dotyczących ich preferencji dla pokarmów o wysokiej zawartości tłuszczu.

Preferencja tłuszczowa: nowy model zachowań żywieniowych u szczurów

Poznaj technikę łaskotania szczurów w celu wywołania pozytywnego afektu i zmniejszenia lęku podczas obchodzenia się ze zwierzętami. Ta metoda poprawia dobrostan laboratoryjnych szczurów i ułatwia badania behawioralne oraz neurobiologiczne.

Łaskotanie, technika wywoływania pozytywnego afektu podczas obchodzenia się ze szczurami

Przeglądaj więcej filmów