Name: Wstrzyknięcie kwasu oleinowego u świń jako model zespołu ostrej niewydolności oddechowej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Dowiedz się, jak wywołać ostry uraz płuc u świń poprzez wstrzyknięcie kwasu oleinowego do żyły centralnej. Ta metoda pozwala badać patofizjologię zespołu ostrej niewydolności oddechowej i oceniać nowe terapie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy pragną podziękować Dagmar Dirvonskis za doskonałe wsparcie techniczne.

Wszystkie opisane tutaj eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez instytucjonalny i państwowy komitet opieki nad zwierzętami (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, Niemcy; numer zatwierdzenia G14-1-077) i zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Europejskiego i Niemieckiego Towarzystwa Laboratoryjnych Nauk o Zwierzętach. Doświadczenia przeprowadzono na znieczulonych samcach świń (sus scrofa domestica) w wieku 2-3 miesięcy, o masie 27-29 kg.
1. Znieczulenie, intubacja i wentylacja mechaniczna
<ol>
	<li>Wstrzymaj się z jedzeniem na 6 godzin przed znieczuleniem, aby zmniejszyć ryzyko zachłyśnięcia, ale pozwól na swobodny dostęp do wody, aby zmniejszyć stres.</li>
	<li>W celu uspokojenia należy wstrzyknąć kombinację ketaminy (4 mg kg-1) i azaperonu (8 mg kg-1) w szyję lub mięsień pośladkowy świni za pomocą igły do wstrzykiwań domięśniowych (20 G), gdy zwierzę znajduje się w pudełku dla zwierząt. 
	Uwaga: Podczas pracy ze zwierzęciem używaj rękawiczek.</li>
	<li>Wprowadzić cewnik do żył obwodowych (20 G) do żyły usznej po miejscowej dezynfekcji alkoholem.</li>
	<li>Wstrzyknąć dożylnie fentanyl (4 μg kg-1), propofol (3 mg kg-1) i atrakurium (0,5 mg kg-1) w celu indukcji znieczulenia.</li>
	<li>Kiedy świnia przestanie oddychać, połóż ją w pozycji leżącej na noszach i unieruchamij bandażami.</li>
	<li>Rozpocznij monitorowanie obwodowego nasycenia tlenem (SpO2), przypinając czujnik do jednego z uszu lub ogona zwierzęcia.</li>
	<li>Przewietrzyć świnię za pomocą maski do wentylacji psów, rozmiar 2, o szczytowym ciśnieniu wdechowym poniżej 20 cmH2O, dodatnim końcowym ciśnieniu wydechowym (PEEP) 5 cmH2O, częstości oddechów 14-16 /min i wdechowej frakcji tlenowej (FiO2) 1,0.</li>
	<li>Rozpocznij ciągły wlew ze zbilansowanym roztworem elektrolitów (5 mLkg-1 h-1), propofolu (8-12 mg kg-1 h-1) i fentanylu (0,1-0,2 mg kg-1 h-1) w celu utrzymania znieczulenia.</li>
	<li>Do intubacji należy przygotować wspólną rurkę dotchawiczą odpowiednią dla zwierzęcia (np. o wadze 25-30 kg, średnicy wewnętrznej rurki dotchawiczej (ID) 6-7 mm) uzbrojoną we wprowadzacz rurki dotchawiczej i wspólny laryngoskop z Macintosh Blade 4. 
	UWAGA: Do intubacji potrzebne są dwie osoby.</li>
	<li>Osoba 1: Jedną ręką wyciągnij język, a drugą dociśnij pysk grzbietowo.</li>
	<li>Osoba 2: Włóż laryngoskop i przesuwaj go jak zwykle, aż nagłośnia pojawi się w polu widzenia.</li>
	<li>Pociągnij laryngoskop brzusznie, aby uwidocznić struny głosowe. 
	UWAGA: Czasami nagłośnia "przykleja się" do miękkiego podniebienia. W takim przypadku zmobilizuj go końcówką rurki.</li>
	<li>Przełóż rurkę przez struny głosowe i wyciągnij wprowadzacz.</li>
	<li>Zatkać mankiet rurki strzykawką z 10 ml powietrza.</li>
	<li>Podłącz rurkę do wentylatora.</li>
	<li>Sprawdzić prawidłowe ułożenie rurki poprzez regularne wydychanie dwutlenku węgla (CO2 ) z kapnografią i równą wentylację obu płuc z osłuchiwaniem.</li>
	<li>Rozpocznij wentylację mechaniczną (objętość oddechowa 6-8 ml / kg, dodatni PEEP 5 cm H20, FiO2 w celu utrzymania obwodowego nasycenia tlenem (SpO2) między 94 – 98%17, częstość oddechów, aby utrzymać końcowe ciśnienie oddechowe dwutlenku węgla (etCO2) między 35 a 45 mmHG).</li>
</ol>
2. Oprzyrządowanie
<ol>
	<li>Cofnij tylne nogi za pomocą bandaży, aby rozciągnąć skórę nad obszarem kości udowej w celu cewnikowania niezbędnych naczyń.</li>
	<li>Przygotuj strzykawkę o pojemności 5 ml, strzykawkę o pojemności 10 ml, igłę Seldingera, 3 osłonki wprowadzające (5 Fr, 6 Fr, 8 Fr) z prowadnikami, cewnik do żyły centralnej z 3 portami (7 Fr, 30 cm) z prowadnikiem i cewnik do tętnicy płucnej (7,5 Fr, 110 cm).</li>
	<li>Obficie zdezynfekuj obszar kości udowej środkiem do dezynfekcji skóry, stosując technikę wycierania.</li>
	<li>Całkowicie napełnij cewniki solą fizjologiczną.</li>
	<li>Umieść sondę ultradźwiękową na prawym więzadle pachwinowym i zeskanuj w poszukiwaniu naczyń udowych.</li>
	<li>Obróć sondę o 90°, aby w pełni uwidocznić tętnicę udową w osi długiej.</li>
	<li>Kanniacja prawej tętnicy udowej pod wizualizacją ultrasonograficzną in-line za pomocą igły Seldingera. 
	UWAGA: Istnieją różne sposoby uzyskania dostępu naczyniowego z ultradźwiękami lub bez. Kaniulacja naczyniowa pod kontrolą USG nie jest konieczna w przypadku tego modelu.</li>
	<li>Gdy wypływa pulsująca jasna krew, wprowadź drut prowadzący i schuj igłę.</li>
	<li>Wizualizacja żyły udowej i kanulacja żyły pod kontrolą ultrasonograficzną in-line i ciągłym aspiracją igłą.</li>
	<li>Gdy krew żylna jest możliwa do pobrania, odłączyć strzykawkę i włożyć przewód prowadzący.</li>
	<li>Wycofać igłę.</li>
	<li>Sprawdź położenie przewodów za pomocą ultradźwięków.</li>
	<li>Wprowadzić osłonkę wprowadzającą tętnicę (5 Fr) i cewnik do żyły centralnej za pomocą techniki Seldingera (szczegółowe informacje na temat techniki Seldingera można znaleźć w opublikowanej metodzie18).</li>
	<li>Powtórzyć nakłucie tętnicze i żylne po drugiej stronie i wprowadzić osłonki wprowadzające techniką Seldingera, jak opisano powyżej (tętnica 6 Fr, żyła 8 Fr).</li>
	<li>Podłączyć osłonkę wprowadzającą tętnicę i cewnik do żyły centralnej do systemu przetwornika odpowiedniego dla sprzętu monitorującego.</li>
	<li>Skalibruj monitorowanie inwazyjne w stosunku do atmosfery (zero), otwierając trójdrogowe zawory odcinające do atmosfery i naciskając Zero wszystko na monitorze.</li>
	<li>Przekręć trójdrożne kurki z powrotem, aby zmierzyć hemodynamikę.</li>
	<li>Rozpocznij monitorowanie hemodynamiki.</li>
	<li>Umieść wszystkie przetworniki ciśnienia na wysokości prawego przedsionka.</li>
	<li>Zamień wlew propofolu (8-12 mg kg-1 h-1) i fentanylu (0,1-0,2 mg kg-1 h-1) na jeden z portów centralnej linii żylnej w celu utrzymania znieczulenia.</li>
</ol>
3. Ultraszybki pomiar ciśnienia cząstkowego tlenu (pO2)
UWAGA: Pomiar pO2 za pomocą sondy do ultraszybkiego pomiaru pO2 nie jest obowiązkowy, ale pomaga w wizualizacji zmian pO2 w czasie rzeczywistym.
<ol>
	<li>Otwórz przeglądarkę NeoFox i kliknij Opcje.</li>
	<li>Wybierz kartę Kalibracja i kliknij przycisk Otwórz kalibrację.</li>
	<li>Wybierz plik kalibracyjny i kliknij Otwórz i pobierz.</li>
	<li>Potwierdź wyskakujące okienko, klikając przycisk Tak.</li>
	<li>Otwórz okno dialogowe Opcje.</li>
	<li>Wybierz kartę Kalibracja i kliknij opcję Kalibracja jednopunktowa.</li>
	<li>Wprowadź 21% w polu Tlen i temperaturę w polu Temperatura.</li>
	<li>Kliknij Użyj bieżącego Tau i Pobierz. Następnie potwierdź wyskakujące okienko, klikając Tak.</li>
	<li>Włóż sondę do ultraszybkich pomiarów pO2 przez lewą osłonę wprowadzającą tętnicę.</li>
</ol>
4. ZAKŁADANIE CEWNIKA DO TĘTNICY PŁUCNEJ
<ol>
	<li>Sprawdź balon cewnika tętnicy płucnej pod kątem uszkodzeń.</li>
	<li>Podłączyć do systemu przetworników odpowiedniego dla sprzętu monitorującego.</li>
	<li>Skalibruj monitorowanie ciśnienia tętniczego płuc w stosunku do atmosfery (zero), otwierając trójdrogowy zawór odcinający do atmosfery i naciskając Zero na monitorze.</li>
	<li>Przekręć zawór trójdrożny z powrotem, aby zmierzyć ciśnienie w tętnicy płucnej.</li>
	<li>Rozpocznij monitorowanie ciśnienia tętniczego w płucach.</li>
	<li>Wprowadzić cewnik do tętnicy płucnej przez lewą osłonkę wprowadzającą żyłę (balon opróżniony).</li>
	<li>Gdy cewnik do tętnicy płucnej przejdzie przez osłonkę wprowadzającą, napompuj balon 1 ml powietrza.</li>
	<li>Przesuń cewnik do tętnicy płucnej i monitoruj typowe przebiegi (naczynia żylne, prawy przedsionek, prawa komora, tętnica płucna i ciśnienie klinowe w naczyniach włosowatych płuc). Opróżnij balon i sprawdź, czy możliwe jest zassanie krwi przez wszystkie porty cewnika do tętnicy płucnej. 
	UWAGA: Szczegółowe instrukcje dotyczące zakładania cewnika do tętnicy płucnej można znaleźć w poprzedniej publikacji19.</li>
</ol>
5. Indukcja uszkodzenia płuc
<ol>
	<li>Przygotować roztwór kwasu oleinowego: 0,1 ml kg-1 kwasu oleinowego w strzykawce o pojemności 20 ml i podłączyć do 3-kierunkowego zaworu odcinającego.</li>
	<li>Pobrać 2 ml krwi do innej strzykawki o pojemności 20 ml i dodać sól fizjologiczną do całkowitej objętości 20 ml w obu strzykawkach.</li>
	<li>Podłączyć drugą strzykawkę również do 3-drogowego kranu odcinającego. 
	UWAGA: Podczas pracy z kwasem oleinowym należy używać rękawic i okularów ochronnych.</li>
	<li>Przygotować noradrenalinę (0,1 mg/ml) do infuzji ciągłej i do wstrzyknięcia w bolusie (10 μg/ml).</li>
	<li>Podłącz pompę strzykawkową z noradrenaliną do jednego z portów centralnego cewnika żylnego bez jego uruchamiania.</li>
	<li>Rozpocznij ultraszybki pomiar pO2.</li>
	<li>Przed indukcją uszkodzenia płuc należy zapisać wartości (wartość wyjściowa) wszystkich istotnych parametrów.</li>
	<li>Ustaw FiO2 na 1,0 i przeprowadź manewr rekrutacji płuc (ciśnienie plateau 40 cm H2O przez 10 s).</li>
	<li>Podłącz 3-kierunkowy kran do bliższego portu cewnika do tętnicy płucnej.</li>
	<li>Dokładnie wymieszaj kwas oleinowy i mieszaninę krwi i soli fizjologicznej, wstrzykując je powtarzalnie z jednej strzykawki do drugiej za pomocą 3-kierunkowego kurka i cały czas mieszaj.</li>
	<li>Gdy jest to jednorodna emulsja, wstrzyknąć 2 ml emulsji i kontynuować mieszanie. 
	UWAGA: Jeśli mieszanie zostanie przerwane, emulsja może rozdzielić się na część lipofilową i hydrofilową.</li>
	<li>Ściśle monitoruj hemodynamikę po wstrzyknięciu kwasu oleinowego i miej pod ręką noradrenalinę. W razie potrzeby podawać noradrenalinę w bolusie (10 – 100 μg) lub w ciągłym wlewie, aby utrzymać średnie ciśnienie tętnicze powyżej 60 mmHg.</li>
	<li>Powtarzać wstrzykiwanie 2 ml roztworu co 3 minuty, aż ciśnienie parcjalne tętniczego tlenu (PaO2) / FiO2 spadnie poniżej 200 mmHg.</li>
	<li>Jeśli strzykawka jest pusta, zanim stosunek PaO2/FiO2 wyniesie od 100 do 200 mmHg, należy przygotować 2 kolejne strzykawki zgodnie z opisem w kroku 5.1.</li>
	<li>Odczekaj 30 minut i ponownie oceń stosunek PaO2/FiO2. Jeśli nadal wynosi ponad 200 mmHg, powtarzaj kroki 5,5-5,8, aż stosunek PaO2 / FiO2 spadnie między 100 a 200 mmHg.</li>
	<li>Jeśli stosunek PaO2 / FiO2 wynosi od 100 do 200 mmHg, odczekaj 30 minut i sprawdź ponownie.</li>
	<li>Jeśli utrzymuje się poniżej 200 mmHg, rozpocznij eksperyment/leczenie, w przeciwnym razie przygotuj 2 dodatkowe strzykawki zgodnie z opisem w kroku 5.1 i powtórz kroki 5.5-5.9.</li>
	<li>Ustaw wentylację zgodnie z sugestiami z sieci ARDS20.</li>
</ol>
6. Koniec eksperymentu i eutanazja
<ol>
	<li>Wstrzyknąć 0,5 mg fentanylu dodatkowo do znieczulenia ciągłego i odczekać 5 minut. Wstrzyknąć 200 mg propofolu i 40 mmol chlorku potasu, aby poddać zwierzę eutanazji w znieczuleniu głębokim.</li>
</ol>

<ol><li>Ashbaugh, D. G., Bigelow, D. B., Petty, T. L., Levine, B. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/4143721">Acute respiratory distress in adults.</a> The Lancet. 2 (7511), 319-323 (1967).</li>
<li>Brower, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventilation+with+lower+tidal+volumes+as+compared+with+traditional+tidal+volumes+for+acute+lung+injury+and+the+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Ventilation with lower tidal volumes as compared with traditional tidal volumes for acute lung injury and the acute respiratory distress syndrome.</a> The New England Journal of Medicine. 342 (18), 1301-1308 (2000).</li>
<li>Briel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+vs+lower+positive+end-expiratory+pressure+in+patients+with+acute+lung+injury+and+acute+respiratory+distress+syndrome%3A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Higher vs lower positive end-expiratory pressure in patients with acute lung injury and acute respiratory distress syndrome: systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 303 (9), 865-873 (2010).</li>
<li>Bellani, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology%2C+Patterns+of+Care%2C+and+Mortality+for+Patients+With+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+in+Intensive+Care+Units+in+50+Countries%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Epidemiology, Patterns of Care, and Mortality for Patients With Acute Respiratory Distress Syndrome in Intensive Care Units in 50 Countries.</a> JAMA. 315 (8), 788-800 (2016).</li>
<li>Chiumello, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+support+in+patients+with+acute+respiratory+distress+syndrome%3A+an+expert+opinion%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Respiratory support in patients with acute respiratory distress syndrome: an expert opinion.</a> Critical Care. 21 (1), 240(2017).</li>
<li>Barnes, T., Zochios, V., Parhar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Re-examining+Permissive+Hypercapnia+in+ARDS%3A+A+Narrative+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Re-examining Permissive Hypercapnia in ARDS: A Narrative Review.</a> Chest. , (2017).</li>
<li>Matute-Bello, G., Frevert, C. W., Martin, T. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18621912">Animal models of acute lung injury.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 295 (3), 379-399 (2008).</li>
<li>Kobayashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thromboxane+A2+exacerbates+acute+lung+injury+via+promoting+edema+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Thromboxane A2 exacerbates acute lung injury via promoting edema formation.</a> Scientific Reports. 6, 32109(2016).</li>
<li>Tian, X., Liu, Z., Yu, T., Yang, H., Feng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ghrelin+ameliorates+acute+lung+injury+induced+by+oleic+acid+via+inhibition+of+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Ghrelin ameliorates acute lung injury induced by oleic acid via inhibition of endoplasmic reticulum stress.</a> Life Sciences. , (2017).</li>
<li>Kamuf, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endexpiratory+lung+volume+measurement+correlates+with+the+ventilation%2Fperfusion+mismatch+in+lung+injured+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Respiratory+Research%22%5BJournal%5D)">Endexpiratory lung volume measurement correlates with the ventilation/perfusion mismatch in lung injured pigs.</a> Respiratory Research. 18 (1), 101(2017).</li>
<li>Du, G., Wang, S., Li, Z., Liu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sevoflurane+Posttreatment+Attenuates+Lung+Injury+Induced+by+Oleic+Acid+in+Dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">Sevoflurane Posttreatment Attenuates Lung Injury Induced by Oleic Acid in Dogs.</a> Anesthesia & Analgesia. 124 (5), 1555-1563 (2017).</li>
<li>Prat, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-Dose+Heparin+Anticoagulation+During+Extracorporeal+Life+Support+for+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+in+Conscious+Sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Low-Dose Heparin Anticoagulation During Extracorporeal Life Support for Acute Respiratory Distress Syndrome in Conscious Sheep.</a> Shock. 44 (6), 560-568 (2015).</li>
<li>Goncalves-de-Albuquerque, C. F., Silva, A. R., Burth, P., Castro-Faria, M. V., Castro-Faria-Neto, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Respiratory+Distress+Syndrome%3A+Role+of+Oleic+Acid-Triggered+Lung+Injury+and+Inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Mediators+of+Inflammation%22%5BJournal%5D)">Acute Respiratory Distress Syndrome: Role of Oleic Acid-Triggered Lung Injury and Inflammation.</a> Mediators of Inflammation. 2015, (2015).</li>
<li>Schuster, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ARDS%3A+clinical+lessons+from+the+oleic+acid+model+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">ARDS: clinical lessons from the oleic acid model of acute lung injury.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 149 (1), 245-260 (1994).</li>
<li>Goncalves-de-Albuquerque, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oleic+acid+induces+lung+injury+in+mice+through+activation+of+the+ERK+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Mediators+of+Inflammation%22%5BJournal%5D)">Oleic acid induces lung injury in mice through activation of the ERK pathway.</a> Mediators of Inflammation. 2012, 956509(2012).</li>
<li>Ballard-Croft, C., Wang, D., Sumpter, L. R., Zhou, X., Zwischenberger, J. B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22244649">Large-animal models of acute respiratory distress syndrome.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 93 (4), 1331-1339 (2012).</li>
<li>O'Driscoll, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BTS+guideline+for+oxygen+use+in+adults+in+healthcare+and+emergency+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">BTS guideline for oxygen use in adults in healthcare and emergency settings.</a> Thorax. 72, Suppl 1 90(2017).</li>
<li>Ettrup, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basic+surgical+techniques+in+the+Gottingen+minipig%3A+intubation%2C+bladder+catheterization%2C+femoral+vessel+catheterization%2C+and+transcardial+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Basic surgical techniques in the Gottingen minipig: intubation, bladder catheterization, femoral vessel catheterization, and transcardial perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments. (52), 2652(2011).</li>
<li>Russ, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lavage-induced+Surfactant+Depletion+in+Pigs+As+a+Model+of+the+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+%28ARDS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS).</a> Journal of Visualized Experiments. (115), 53610(2016).</li>
<li>Brower, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+versus+lower+positive+end-expiratory+pressures+in+patients+with+the+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Higher versus lower positive end-expiratory pressures in patients with the acute respiratory distress syndrome.</a> The New England Journal of Medicine. 351 (4), 327-336 (2004).</li>
<li>Hartmann, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+respiratory+rate+and+end-expiratory+pressure+variation+on+cyclic+alveolar+recruitment+in+an+experimental+lung+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Influence of respiratory rate and end-expiratory pressure variation on cyclic alveolar recruitment in an experimental lung injury model.</a> Critical Care. 16 (1), (2012).</li>
<li>Hartmann, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalation+therapy+with+the+synthetic+TIP-like+peptide+AP318+attenuates+pulmonary+inflammation+in+a+porcine+sepsis+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pulmonary+Medicine%22%5BJournal%5D)">Inhalation therapy with the synthetic TIP-like peptide AP318 attenuates pulmonary inflammation in a porcine sepsis model.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 7(2015).</li>
<li>Julien, M., Hoeffel, J. M., Flick, M. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3949648">Oleic acid lung injury in sheep.</a> Journal of Applied Physiology. 60 (2), 433-440 (1986).</li>
<li>Wiener-Kronish, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+of+pleural+effusions+to+increased+permeability+pulmonary+edema+in+anesthetized+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Relationship of pleural effusions to increased permeability pulmonary edema in anesthetized sheep.</a> Journal of Clinical Investigation. 82 (4), 1422-1429 (1988).</li>
<li>Yahagi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+molecular+weight+dextran+attenuates+increase+in+extravascular+lung+water+caused+by+ARDS%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Low molecular weight dextran attenuates increase in extravascular lung water caused by ARDS.</a> American Journal of Emergency Medicine. 18 (2), 180-183 (2000).</li>
<li>Eiermann, G. J., Dickey, B. F., Thrall, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymorphonuclear+leukocyte+participation+in+acute+oleic-acid-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Review+of+Respiratory+Disease%22%5BJournal%5D)">Polymorphonuclear leukocyte participation in acute oleic-acid-induced lung injury.</a> The American Review of Respiratory Disease. 128 (5), 845-850 (1983).</li>
<li>Townsley, M. I., Lim, E. H., Sahawneh, T. M., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+chemical+and+high+vascular+pressure+injury+in+isolated+canine+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Interaction of chemical and high vascular pressure injury in isolated canine lung.</a> Journal of Applied Physiology. 69 (5), 1657-1664 (1990).</li>
<li>Young, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+nitroprusside+mitigates+oleic+acid-induced+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22The+Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Sodium nitroprusside mitigates oleic acid-induced acute lung injury.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 69 (1), 224-227 (2000).</li>
<li>Katz, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catalase+pretreatment+attenuates+oleic+acid-induced+edema+in+isolated+rabbit+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Catalase pretreatment attenuates oleic acid-induced edema in isolated rabbit lung.</a> Journal of Applied Physiology. 65 (3), 1301-1306 (1988).</li>
<li>El-Haddad, H., Jang, H., Chen, W., Soubani, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ARDS+Severity+and+Etiology+on+Short-Term+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Respiratory+Care%22%5BJournal%5D)">Effect of ARDS Severity and Etiology on Short-Term Outcomes.</a> Respiratory Care. 62 (9), 1178-1185 (2017).</li>
<li>Wang, H. M., Bodenstein, M., Markstaller, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+the+pathology+of+three+widely+used+animal+models+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Overview of the pathology of three widely used animal models of acute lung injury.</a> European Surgical Research. 40 (4), 305-316 (2008).</li>
</ol>

Wszyscy autorzy nie ujawniają żadnego finansowego ani żadnego innego konfliktu interesów.

W artykule opisano jedną z metod uszkodzenia płuc wywołanego kwasem oleinowym jako model do badania różnych aspektów ciężkiego ARDS. Istnieją również inne protokoły z różnymi emulsjami, różnymi miejscami wstrzyknięcia i różnymi temperaturami emulsji 23,24,25,26,27,28,29. Nasza metoda zapewni...

Zespół ostrej niewydolności oddechowej (ARDS) to zespół intensywnej terapii, który był intensywnie badany od czasu jego pierwszego opisu około 50 lat temu1. Te badania doprowadziły do lepszego zrozumienia patofizjologii i spowodowały rozwój ARDS, co skutkowało poprawą opieki nad pacjentem i wynikami2,3. Niemniej jednak śmiertelność u pacjentów cierpiących na ARDS pozostaje bardzo wysoka i wynosi około 35-40%4,5,6. Fakt, że około 10% przyjęć na OIOM i 23% pacjentów OIOM, którzy wymagają wentylacji mechanicznej, jest spowodowanych ARDS, podkreśla znaczenie dalszych badań w tej dziedzinie.
Modele zwierzęce są szeroko stosowane w badaniach do badania zmian patofizjologicznych i potencjalnych metod leczenia różnych rodzajów chorób. Ze względu na złożoność ARDS, nie ma jednego modelu zwierzęcego, który naśladowałby tę chorobę, ale różne modele reprezentujące różne aspekty7. Jednym z dobrze ugruntowanych modeli jest uszkodzenie płuc wywołane wstrzyknięciem kwasu oleinowego (OAI). Model ten został wykorzystany w wielu zwierzętach, w tym myszy8, rats9, pigs10, dogs11 i sheep12. Kwas oleinowy jest nienasyconym kwasem tłuszczowym i najpowszechniejszym kwasem tłuszczowym w organizmie zdrowych ludzi13. Jest obecny w ludzkim osoczu, błonach komórkowych i tkance tłuszczowej13. Fizjologicznie jest związany z albuminą, gdy jest przenoszony przez krwioobieg13. Zwiększony poziom kwasów tłuszczowych we krwi jest związany z różnymi patologiami, a nasilenie niektórych chorób koreluje z poziomem kwasów tłuszczowych w surowicy13. Model ARDS kwasu oleinowego został opracowany w celu odtworzenia ARDS spowodowanego zatorowością lipidową, obserwowanej u pacjentów po urazach14. Kwas oleinowy ma bezpośredni wpływ na wrodzone receptory immunologiczne w płucach13 i wyzwala akumulację neutrofili15, produkcję mediatorów stanu zapalnego16 i śmierć komórki13. Fizjologicznie kwas oleinowy wywołuje szybko postępującą hipoksemię, wzrost ciśnienia tętniczego w płucach i gromadzenie się pozanaczyniowej wody w płucach. Ponadto wywołuje niedociśnienie tętnicze i depresję mięśnia sercowego7. Wadami tego modelu są konieczność centralnego dostępu żylnego, wątpliwe znaczenie mechanistyczne oraz potencjalny śmiertelny postęp spowodowany szybką hipoksemią i depresją serca. Zaletą tego modelu w porównaniu z innymi modelami jest użyteczność u małych i dużych zwierząt, prawidłowa odtwarzalność mechanizmów patofizjologicznych w ARDS, ostry początek ARDS po wstrzyknięciu kwasu oleinowego oraz możliwość badania izolowanego ARDS bez ogólnoustrojowego stanu zapalnego, jak w wielu innych modelach sepsy7. W poniższym artykule podajemy szczegółowy opis uszkodzenia płuc wywołanego kwasem oleinowym u świń i podajemy reprezentatywne dane w celu scharakteryzowania stabilności zaburzeń czynności płuc. Istnieją różne protokoły postępowania w przypadku uszkodzenia płuc wywołanego przez OAI. Przedstawiony tutaj protokół jest w stanie niezawodnie wywołać ostre uszkodzenie płuc.

<table><tbody><tr><td>Kran 3-drożny niebieski</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Szwecja</td><td>394602</td><td></td></tr><tr><td>3-drożny kran czerwony</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Szwecja</td><td>394605</td><td></td></tr><tr><td>Atracurium</td><td>Hikma Pharma GmbH , Martinsried</td><td>4262659</td><td></td></tr><tr><td>Canula 20 G</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Hiszpania</td><td>301300</td><td></td></tr><tr><td>Datex Ohmeda S5</td><td>GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finlandia</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dezynfekcja</td><td>Sch&uuml; lke & Mayr GmbH, Niemcy</td><td>104802</td><td></td></tr><tr><td>Rurka dotchawicza</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malezja</td><td>112482</td><td></td></tr><tr><td>Wprowadzenie rurki dotchawiczej</td><td>R&uuml; sch</td><td>5033062</td><td></td></tr><tr><td>Engstr&ouml; m Carestation</td><td>GE Heathcare, Madison USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Janssen-Cilag GmbH, Neuss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gloves</td><td>Paul Hartmann, Niemcy</td><td>9422131</td><td></td></tr><tr><td>Incetomat-line 150 cm</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>9004112</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Hameln Pharmaceuticals GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laryngoskop</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malezja</td><td>671067-000020</td><td></td></tr><tr><td>Logiczny system monitorowania ciśnienia</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MX9606</td><td></td></tr><tr><td>Logicath 7 Fr 3-lumen 30cm</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MXA233x30x70-E</td><td></td></tr><tr><td>Masimo Radical 7</td><td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Maska do wentylacji psów</td><td>Henry Schein, Niemcy</td><td>730-246</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw Neofox Optyka</td><td>oceaniczna Largo, FL USA</td><td>NEOFOX-KIT-PROBE</td><td></td></tr><tr><td>Noradrenalina</td><td>Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH</td><td>73016</td><td></td></tr><tr><td>Kwas oleinowy</td><td>Applichem GmbH Darmstadt, Niemcy</td><td>1,426,591,611</td><td></td></tr><tr><td>Oryginalna strzykawka Perfusor 50ml Luer Lock</td><td>B.Braun Melsungen AG, Niemcy</td><td>8728810F</td><td></td></tr><tr><td>PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm</td><td>Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA</td><td>744F75</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw wprowadzający osłonki przezskórnej 8,5 i 9 Fr, 10 cm ze zintegrowanym zaworem hemmostazy/bocznym</td><td>portem Arrow international inc. Reading, PA, USA</td><td>AK-07903</td><td></td></tr><tr><td>Perfusor FM Braun</td><td>B.Braun Melsungen AG, Niemcy</td><td>8713820</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek potasu</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>6178549</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 2%</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>B.Braun Melsungen AG, Niemcy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem</td><td>Sonosite Bothell, WA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nierdzewny Macintosh Rozmiar 4</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malezja</td><td>670000</td><td></td></tr><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Melsungen AG, Niemcy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stresnil 40mg/ml</td><td>Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Strzykawka dla zdrowia</td><td></td><td></td>zwierząt</tr><tr><td>10 ml</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Hiszpania</td><td>309110</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka 2 ml</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Hiszpania</td><td>300928</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka 20 ml</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Hiszpania</td><td>300296</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka 5 ml</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Hiszpania</td><td>309050</td><td></td></tr><tr><td>cewnik żylny 22G</td><td>B.Braun Melsungen AG, Niemcy</td><td>4269110S-01</td><td></td></tr></tbody></table>

wstrzyknięcie kwasu oleinowego u świń jako model zespołu ostrej niewydolności oddechowej

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

Zespół ostrej niewydolności oddechowej jest istotną chorobą intensywnej terapii, której częstość występowania waha się od 2,2% do 19% pacjentów oddziału intensywnej terapii. Pomimo postępów w leczeniu w ciągu ostatnich dziesięcioleci, pacjenci z ARDS nadal cierpią na śmiertelność od 35 do 40%. Nadal istnieje potrzeba dalszych badań w celu poprawy wyników leczenia pacjentów cierpiących na ARDS. Jednym z problemów jest to, że żaden pojedynczy model zwierzęcy nie jest w stanie naśladować złożonego patomechanizmu zespołu ostrej niewydolności oddechowej, ale istnieje kilka modeli do badania różnych jego części. Uszkodzenie płuc wywołane wstrzyknięciem kwasu oleinowego (OAI) jest dobrze ugruntowanym modelem do badania strategii wentylacji, mechaniki płuc i dystrybucji wentylacji/perfuzji u zwierząt. OAI prowadzi do poważnego upośledzenia wymiany gazowej, pogorszenia mechaniki płuc i przerwania bariery pęcherzykowo-kapilarnej. Wadą tego modelu jest kontrowersyjne mechanistyczne znaczenie tego modelu i konieczność centralnego dostępu żylnego, co jest wyzwaniem zwłaszcza w przypadku mniejszych modeli zwierzęcych. Podsumowując, uszkodzenie płuc wywołane przez OAI prowadzi do powtarzalnych wyników u małych i dużych zwierząt, a zatem stanowi dobrze dopasowany model do badania ARDS. Niemniej jednak konieczne są dalsze badania, aby znaleźć model, który naśladuje wszystkie części ARDS i nie ma problemów związanych z różnymi istniejącymi obecnie modelami.

Stosunek PaO2/FiO2 spada po frakcjonowanym podaniu kwasu oleinowego (Rysunek 1). W przedstawionym badaniu do indukcji uszkodzenia płuc konieczne było podanie 0,185 ± 0,01 ml kg-1 kwasu oleinowego. Wszystkie zwierzęta wykazały upośledzenie oksygenacji po indukcji uszkodzenia płuc, przy czym przebieg czasowy różnił się w zależności od osobnika. U zwierzęcia 1 i 3 wskaźnik utrzymywał się na jednym poziomie z niewielkimi wahaniami...

W tym artykule przedstawiamy protokół wywoływania ostrego uszkodzenia płuc u świń poprzez centralne wstrzyknięcie kwasu oleinowego. Jest to uznany model zwierzęcy do badania zespołu ostrej niewydolności oddechowej (ARDS).

Wstrzyknięcie kwasu oleinowego u świń jako model zespołu ostrej niewydolności oddechowej

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania dotyczące zmian patofizjologicznych, które zachodzą podczas ARDS, w celu opracowania i oceny nowych opcji leczenia tej choroby. Główną zaletą tej techniki jest to, że odtwarza ona podstawowe zmiany patologiczne obserwowane w ludzkich ARDS. W przypadku oprzyrządowania pod kontrolą ultrasonograficzną umieść sondę ultradźwiękową na prawym więzadle pachwinowym świni doświadczalnej i zeskanuj naczynia udowe.Obróć sondę o 90 stopni, aby w pełni uwidocznić tętnicę udową w osi długiej i użyj igły Seldingera, aby kaniulować prawą tętnicę udową pod wizualizacją ultrasonograficzną na linii. Gdy wypływa pulsująca jasna krew, wprowadź drut prowadzący i schuj igłę. Sprawdź, czy ułożenie drutu Seldingera jest prawidłowe, wizualizując go za pomocą ultradźwięków.Uwidocznij żyłę udową i kaniuluj żyłę pod ultrasonografią in-line w ciągłym zasysaniu igłą. Gdy krew żylna może zostać pobrana, włóż drut Seldingera i wycofaj igłę. Użyj techniki Seldingera, aby wprowadzić 5-francuską osłonkę wprowadzającą tętnicę i niezbędny cewnik żylny, a następnie obrócić odpowiednie trójdrożne krany z powrotem.Przed wprowadzeniem cewnika do tętnicy płucnej należy sprawdzić, czy działa on prawidłowo i wprowadzić go przez lewą osłonkę wprowadzającą żylną. Gdy cewnik do tętnicy płucnej przejdzie przez osłonę wprowadzającą, napompuj balon jednym mililitrem powietrza i przesuń cewnik do tętnicy płucnej, monitorując typowe przebiegi. Następnie opróżnij balon i sprawdź, czy można odessać krew przez wszystkie porty cewnika do tętnicy płucnej.Następnie włóż sondę do ultraszybkiego pomiaru ciśnienia parcjalnego tlenu przez prawą osłonę wprowadzacza tętniczego. Aby wywołać uszkodzenie płuc, należy załadować jedną strzykawkę o pojemności 20 mililitrów z 0,1 mililitra na kilogram kwasu oleinowego, a drugą strzykawkę o pojemności 20 mililitrów z dwoma mililitrami świeżo pobranej krwi. Dodać sól fizjologiczną do strzykawki z krwią, do całkowitej objętości 20 mililitrów w obu strzykawkach i podłączyć obie strzykawki do trójdrożnego kranu.Podłącz pompę strzykawkową z noradrenaliną do jednego portu centralnego cewnika żylnego i rozpocznij ultraszybki pomiar ciśnienia parcjalnego tlenu. Zapisz wartości podstawowe wszystkich odpowiednich parametrów i ustaw frakcję wdychanego tlenu na 1,0. Przeprowadź manewr rekrutacji płuc i podłącz trójdrożny kran do bliższego portu cewnika tętnicy płucnej.Następnie wstrzyknąć mieszaniny kwasu oleinowego i soli fizjologicznej, wielokrotnie z jednej strzykawki do drugiej, przez trójdrożny kran odcinający, aby dokładnie wymieszać roztwory. Po uzyskaniu jednorodnej emulsji wstrzyknąć dwa mililitry emulsji do centralnego cewnika żylnego i kontynuować mieszanie. Ściśle monitoruj hemodynamikę po wstrzyknięciu, podając noradrenalinę w postaci wstrzyknięcia bolusa o dawce od 10 do 100 mikrogramów, jeśli jest to konieczne, aby utrzymać średnie ciśnienie tętnicze powyżej 60 milimetrów słupa rtęci.Powtarzać wstrzykiwanie dwóch mililitrów roztworu kwasu oleinowego co trzy minuty, aż ciśnienie parcjalne tętniczej frakcji tlenu w stosunku wdechu spadnie poniżej 200 milimetrów słupa rtęci. Odczekaj 30 minut i ponownie oceń ciśnienie parcjalne frakcji tlenu w stosunku wdechu. Jeśli stosunek nadal przekracza 200 milimetrów słupa rtęci, powtarzaj wstrzyknięcia, aż ciśnienie parcjalne frakcji tlenowej wdychanego współczynnika spadnie poniżej 200 milimetrów słupa rtęci.Następnie ustaw wentylację zgodnie z sugestiami sieci Zespołu Ostrej Niewydolności Oddechowej. Frakcja ciśnienia cząstkowego tlenu we wdychanym stosunku tlenu zmniejszyła się po frakcjonowanym zastosowaniu kwasu oleinowego. Pomimo typowego upośledzenia natlenienia po indukcji uszkodzenia płuc, obserwuje się częste zmiany w upośledzeniu tlenowym między zwierzętami w całym przebiegu upośledzenia.Konieczność ścisłego monitorowania frakcji ciśnienia cząstkowego tlenu we wdychanym stosunku tlenu podczas dostarczania kwasu oleinowego. Spadkowi frakcji ciśnienia cząstkowego tlenu we wdychanym stosunku tlenu towarzyszy wzrost ciśnienia tętniczego w płucach, które zwykle pozostaje podwyższone do końca eksperymentu, przy czym pewne wahania obserwuje się również między zwierzętami. Uszkodzenie płuc jest wizualnie wykrywalne w płucach pobranych sześć godzin po indukcji uszkodzenia płuc, a analiza histologiczna ujawnia obrzęk pęcherzyków płucnych i krwotok.Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak wywołać ostre uszkodzenie płuc u świń poprzez niezbędne wstrzyknięcie dożylne kwasu oleinowego. Nie zapominaj, że praca z kwasem oleinowym może być bardzo niebezpieczna i należy zachować środki ostrożności, takie jak noszenie rękawiczek, a podczas wykonywania tej procedury należy zawsze przestrzegać zasad bezpieczeństwa.

oleic-acid-injection-pigs-as-model-for-acute-respiratory-distress

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Powtarzające się płukanie płuc u znieczulonych świń powoduje uszkodzenie płuc przypominające główne aspekty zespołu ostrej niewydolności oddechowej u ludzi (ARDS). W tym celu płuca są wielokrotnie przepłukiwane 0,9% solą fizjologiczną w temperaturze 37 °C. Celem protokołu jest powtarzalne łagodzenie wymiany gazowej i hemodynamiki do badań w ARDS.

Niedobór środków powierzchniowo czynnych wywołany płukaniem u świń jako model zespołu ostrej niewydolności oddechowej (ARDS)

Opisujemy model zespołu ostrej niewydolności oddechowej wywołanej kwasem solnym (ARDS) u prosiąt otrzymujących sedację środkami chlorowcowanymi, izofluranem i sewofluranem, za pomocą urządzenia używanego do wziewnej sedacji intensywnej terapii. Model ten może być wykorzystany do badania biologicznych mechanizmów działania czynników halogenowych na uszkodzenie i naprawę płuc.

Podawanie środka chlorowcowanego w świńskim modelu zespołu ostrej niewydolności oddechowej za pomocą urządzenia typu oddział intensywnej terapii

Obecny protokół opisuje model uszkodzenia płuc u myszy używających kwasu oleinowego do naśladowania zespołu ostrej niewydolności oddechowej (ARDS). Model ten zwiększa mediatory stanu zapalnego w obrzęku i zmniejsza podatność płuc. Kwas oleinowy jest stosowany w postaci soli (oleinianu), ponieważ ta fizjologiczna forma pozwala uniknąć ryzyka zatoru.

Mysi model zespołu ostrej niewydolności oddechowej wywołanej kwasem oleinowym

Ciągłe wprowadzanie kwasu oleinowego do tętnicy płucnej znieczulonej dorosłej świni wywołuje ostrą niewydolność oddechową, umożliwiając kontrolowane eksperymenty podczas ostrej dekompensacji oddechowej.

Świński model ostrej niewydolności oddechowej z ciągłym wlewem kwasu oleinowego

Opisujemy technikę badawczą bronchoskopii światłowodowej i płukania oskrzelowo-pęcherzykowego za pomocą odsysania niskociśnieniowego. Technika ta służy do pobierania komórek odpornościowych z powierzchni oskrzelowo-pęcherzykowych płuc. Stosuje się znieczulenie miejscowe i łagodną świadomą sedację (midazolam). Badani dobrze tolerują zabieg i odczuwają minimalne skutki uboczne.

płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe (BAL) do badań; Uzyskanie odpowiedniej wydajności próbki

Ciągłe monitorowanie elektrokardiograficzne (EKG) z 12 odprowadzeniami może zidentyfikować przejściowe niedokrwienie mięśnia sercowego, nawet gdy przebiega bezobjawowo, wśród pacjentów z podejrzeniem ostrego zespołu wieńcowego (OZW). W tym artykule opisujemy naszą metodę inicjowania monitorowania pacjenta za pomocą urządzenia holterowskiego, pobierania danych EKG do analizy off-line oraz sposobu wykorzystania oprogramowania EKG do identyfikacji przejściowego niedokrwienia.

Metoda badawcza wykrywania przemijającego niedokrwienia mięśnia sercowego u pacjentów z podejrzeniem ostrego zespołu wieńcowego za pomocą ciągłej analizy odcinka ST

Obecna praca ilustruje wygodę stosowania immunoterapii podjęzykowej w celu wzmocnienia wrodzonej odpowiedzi immunologicznej w płucach i zapewnienia ochrony przed ostrym pneumokokowym zapaleniem płuc u myszy.

Immunoterapia podjęzykowa jako alternatywa dla indukowania ochrony przed ostrymi infekcjami dróg oddechowych

Ten protokół wywołuje ostre uszkodzenie płuc u myszy, która jest bardzo zbliżona do patogenezy kwaśnego zapalenia płuc obserwowanej u ludzi. Generujemy maksymalne ostre, nieśmiertelne uszkodzenie płuc o niskim pH i uwzględniamy różnice w anatomicznej budowie układu oddechowego gryzoń i człowieka za pomocą otwartej tracheostomii w połączeniu ze zwolnieniem ciśnienia obwodowego.

Mysi model ostrego uszkodzenia płuc z otwartą tracheostomią do aspiracji kwasu żołądkowego skutkuje maksymalnym ostrym nieśmiertelnym uszkodzeniem płuc

Ta praca opisuje protokół, który wykorzystuje podejście komponentowe do badania wrażliwości na alergeny pyłków traw w kohorcie pacjentów z południowych Chin z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą.

Podejście diagnostyczne z rozdzielczością komponentową w badaniu alergenów pyłków traw u mieszkańców Chin z południa z alergicznym nieżytem nosa i/lub astmą

Ten protokół opisuje metodę polegającą na otarciu powierzchni oka myszy i śledzeniu procesu gojenia się ran. Protokół wykorzystuje zadzior oczny do częściowego usunięcia nabłonka powierzchniowego oka u znieczulonych myszy.

Otarcie nabłonka rogówki z zadziorem ocznym jako model gojenia się ran rogówki

Dowiedz się, jak wywołać ostry uraz płuc u świń poprzez wstrzyknięcie kwasu oleinowego do żyły centralnej. Ta metoda pozwala badać patofizjologię zespołu ostrej niewydolności oddechowej i oceniać nowe terapie.

Wstrzyknięcie kwasu oleinowego u świń jako model zespołu ostrej niewydolności oddechowej

Przeglądaj więcej filmów