Name: Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 8 s
Description: Poznaj protokół oceny działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na myszach z przewlekłym stresem CUMS. Metoda obejmuje testy behawioralne i pomiary fizjologiczne po 21 dniach modelowania.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Te badania były wspierane przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (nr 81630104; nr 81473597) oraz Fundusze Badań Podstawowych dla Uniwersytetów Centralnych (nr 2018-JYBZZ-XS005). Protokół i wyniki przedstawione w tym artykule pochodzą z artykułu Zaangażowanie znormalizowanej ekspresji kwaśnego białka glejowego fibrylarnego w hipokampach w przeciwdepresyjnych skutkach Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy autorstwa dr Xiu-Fang Dinga i wsp.

Ten protokół został zatwierdzony przez Komitet Etyki Zwierząt Uniwersytetu Chińskiego w Pekinie i był zgodny ze wszystkimi wytycznymi dotyczącymi opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych w Chinach. Nie było przypadkowej śmierci podczas procedury eksperymentalnej i żadne zwierzę nie musiało być poddawane eutanazji w tym badaniu.
1. Przygotowanie leków do eksperymentu
UWAGA: Chińskie zioła zostały zakupione, a następnie uwierzytelnione przez dr B. Liu z Pekińskiego Uniwersytetu Medycyny Chińskiej. Xiaoyaosan zawiera następujące osiem tradycyjnych chińskich leków w stosunku 6:6:6:6:3:6:2:2: Radix Angelicae Sinensis, Radix Paeoniae Alba, Poria, Radix Bupleuri, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Herba Menthae i Rhizoma Zingiberis Recens,.
<ol>
	<li>Przygotuj Xiaoyaosan zgodnie z wcześniejszym opisem16. 
	Uwaga: Wyekstrahowaliśmy te związki w pomieszczeniu przygotowawczym medycyny chińskiej Szpitala Przyjaźni Chińsko-Japońskiej, a wydajność ekstrakcji wyniosła 18,8%.</li>
	<li>Sprawdź jakość Xiaoyaosan za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej i analizy spektrometrii mas (LC-MS/MS)17.</li>
</ol>
2. Przygotowanie myszy do procedury eksperymentalnej
UWAGA: Do procedury eksperymentalnej wybrano 60 zdrowych samców myszy C57BL/6J w wieku 12 tygodni, z których każda ważyła od 18 do 22 g.
<ol>
	<li>Myszy należy trzymać pojedynczo w klatkach w typowym pomieszczeniu laboratoryjnym wolnym od specyficznych patogenów (SPF) (22 ± 1 °C, 12 godzin/12 godzin cykl ciemny/jasny, wilgotność względna: 30–40%) przez tydzień przed zabiegiem CUMS.</li>
	<li>Losowo podziel wszystkie myszy na grupę kontrolną, grupę modelową, grupę leczoną Xiaoyaosan lub grupę leczoną fluoksetyną w zależności od ich masy ciała. Każda grupa składa się z 15 myszy.</li>
	<li>Przed rozpoczęciem eksperymentu ponumeruj myszy w każdej grupie na ogonie za pomocą pisaka.</li>
	<li>Przetestuj wszystkie myszy za pomocą pięciodniowego testu preferencji sacharozy (patrz krok 5) i testu w terenie otwartym (patrz krok 6).</li>
</ol>
3. Indukcja depresji u myszy
UWAGA: Aby wywołać depresję, myszy w grupie modelowej i dwóch grupach terapeutycznych przeszły CUMS przez 21 dni18. Plan można zmieniać w zależności od sytuacji praktycznej, ale należy przestrzegać zasady, że ten sam stresor nie może być używany w sposób ciągły.
<ol>
	<li>Codziennie wystawiaj myszy na działanie dowolnych dwóch z następujących siedmiu czynników stresogennych przez 21 kolejnych dni19. Nasz plan modelowania jest zaprojektowany w następujący sposób:
	<ol>
		<li>W poniedziałek należy wystawić myszy na deprywację pokarmową (opróżnij karmę z każdej klatki na 24 godziny, od 8:00 do 8:00) i pozbawioną wody (wyjmij butelkę do picia z każdej klatki na 24 godziny, od 8:00 do 8:00</li>).
		<li>We wtorek wystaw myszy na stres związany z ograniczeniami (trzymaj myszy w małej plastikowej wannie przez 3 godziny, od 8:00 do 11:00) i puste klatki (usuń wyściółkę z każdej klatki na 11 godzin, od 8:00 do 19:00</li>).
		<li>W środę wystaw myszy na działanie mokrych i zabrudzonych klatek (wlej wodę do każdej klatki i trzymaj mokre przez 24 godziny, od 8:00 do 8:00) i zatłoczonych klatek (umieść pięć myszy w jednej klatce na 24 godziny, od 8:00 do 8:00</li>).
		<li>W czwartek wystaw myszy na stres związany z ograniczeniami i lodowate pływanie20,21 (zmuś każdą mysz do pływania w przezroczystym szklanym akwarium z lodowatą wodą przez 5 minut).</li>
		<li>W piątek wystawiaj myszy na mokre i zabrudzone klatki oraz pozbawienie jedzenia.</li>
		<li>W sobotę wystawiaj myszy na stres związany z ograniczeniami i zatłoczonymi klatkami.</li>
		<li>W niedzielę wystawiaj myszy na puste klatki i lodowate pływanie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rejestruj stan sierści i masę ciała co tydzień, aż do końca modelowania (dzień 21). Oblicz całkowity wynik stanu sierści jako sumę wyników z siedmiu różnych części ciała: głowy, szyi, sierści grzbietowej, sierści brzusznej, łap przednich, ogona i łap tylnych. Wynik jeden oznacza zadbaną sierść, a wynik zero oznacza zaniedbaną sierść22.</li>
	<li>Na koniec eksperymentu wykonaj pięciodniowy test preferencji sacharozy (patrz krok 5) i test w terenie otwartym (patrz krok 6).</li>
</ol>
4. Administracja Xiaoyaosan
UWAGA: Dawka Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dzień) została wybrana na podstawie jej zadowalającej skuteczności, jak opisano wcześniej9.
<ol>
	<li>Podczas eksperymentu użyj wody destylowanej do przygotowania zawiesin Xiaoyaosan i fluoksetyny i upewnij się, że użyjesz natychmiast.</li>
	<li>Podawaj 0,5 ml wody destylowanej myszom w grupie kontrolnej i grupie modelowej przez podawanie dożołądkowe codziennie przed modelowaniem. W międzyczasie podaj Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dzień) lub fluoksetynę (2,6 mg/kg/dzień) myszom w dwóch grupach leczenia.</li>
</ol>
5. Test preferencji sacharozy
UWAGA: Przed testem nie zastosowano żadnych środków do pozbawienia wody ani jedzenia. Protokół został wykonany zgodnie z wcześniejszymi raportami23.
<ol>
	<li>Przez pierwsze dwa dni trzymaj myszy pojedynczo w dwóch butelkach wypełnionych wodą z kranu.</li>
	<li>W ciągu następnych dwóch dni podawaj myszom dwie butelki wypełnione 1% roztworem sacharozy.</li>
	<li>Ostatniego dnia podawaj myszom dwie butelki przez 24 godziny, jedną z wodą z kranu, a drugą z 1% roztworem sacharozy. Aby wyeliminować uboczne preferencje myszy w zachowaniu związanym z piciem, po 12 godzinach zamień położenie dwóch butelek.</li>
	<li>Zapisz objętość (ml) zarówno spożytego roztworu sacharozy, jak i wody z kranu. Oblicz preferencję sacharozy w następujący sposób: preferencja sacharozy (%) = spożycie sacharozy/całkowite spożycie płynów × 100%.</li>
</ol>
6. Test w otwartym terenie
<ol>
	<li>Przeprowadź test w otwartym polu w słabo oświetlonym i cichym pomieszczeniu z czterostronnym drewnianym czarnym pudełkiem bez połysku. Podziel podłogę na 25 równych kwadratów niebieskimi liniami.</li>
	<li>Wyczyść pudełko na otwartym polu 5% alkoholem przed uzyskaniem dostępu do każdej myszy. Następnie delikatnie umieść mysz na środku otwartego pola.</li>
	<li>Zawieś kamerę cyfrową o wysokiej rozdzielczości około 200 cm tuż nad polem i nagrywaj zachowanie każdej myszy przez 5 minut.</li>
	<li>Oceń wideo behawioralne myszy za pomocą oprogramowania systemu śledzenia wideo i zarejestruj dane dotyczące całkowitego dystansu biegu i liczby wejść do strefy środkowej.</li>
	<li>Analizuj dane dotyczące całkowitej przebytej odległości i liczby wejść do strefy środkowej za pomocą oprogramowania statystycznego.</li>
</ol>

<ol><li>Chrousos, G. P., Gold, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+concepts+of+stress+and+stress+system+disorders.+Overview+of+physical+and+behavioral+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis.</a> JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).</li>
<li>Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cinnamic+aldehyde+treatment+alleviates+chronic+unexpected+stress-induced+depressive-like+behaviors+via+targeting+cyclooxygenase-2+in+mid-aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Cinnamic aldehyde treatment alleviates chronic unexpected stress-induced depressive-like behaviors via targeting cyclooxygenase-2 in mid-aged rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 162, 97-103 (2015).</li>
<li>Murray, C. J., Lopez, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+health+statistics%3A+a+compendium+of+incidence+prevalence+and+mortality+estimates+for+over+200+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22World+Health+Organization+Harvard+School+of+Public+Health+World+Bank%22%5BJournal%5D)">Global health statistics: a compendium of incidence prevalence and mortality estimates for over 200 conditions.</a> World Health Organization Harvard School of Public Health World Bank. , ii(1996).</li>
<li>Sackeim, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+definition+and+meaning+of+treatment-resistant+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The definition and meaning of treatment-resistant depression.</a> Journal of Clinical Psychiatry. 62 (16), 10-17 (2001).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+compounds+of+soothing+liver%2C+invigorating+spleen%2C+tonifying+kidney+on+the+praxiology+and+immunological+function+of+chronic+immobilization+stressed+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Laboratorium+Animalis+Scientia+Sinica%22%5BJournal%5D)">The effect of compounds of soothing liver, invigorating spleen, tonifying kidney on the praxiology and immunological function of chronic immobilization stressed rats.</a> Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica. 11, 33-37 (2003).</li>
<li>Meng, Z. Z., Chen, J. X., Jiang, Y. M., Zhang, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Xiaoyaosan+Decoction+on+Learning+and+Memory+Deficit+in+Rats+Induced+by+Chronic+Immobilization+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative%22%5BJournal%5D)">Effect of Xiaoyaosan Decoction on Learning and Memory Deficit in Rats Induced by Chronic Immobilization Stress.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013 (17), 297154(2013).</li>
<li>Zhao, H., Wan, X., Chen, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mini+review+of+traditional+Chinese+medicine+for+the+treatment+of+depression+in+China%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">A mini review of traditional Chinese medicine for the treatment of depression in China.</a> American Journal of Chinese Medicine. 37 (02), 207-213 (2009).</li>
<li>Gao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabonomic+study+on+chronic+unpredictable+mild+stress+and+intervention+effects+of+Xiaoyaosan+in+rats+using+gas+chromatography+coupled+with+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Metabonomic study on chronic unpredictable mild stress and intervention effects of Xiaoyaosan in rats using gas chromatography coupled with mass spectrometry.</a> Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 690-699 (2011).</li>
<li>Li, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNP+signal+pathway+up-regulated+in+rectum+of+depressed+rats+and+the+interventional+effect+of+Xiaoyaosan%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">CNP signal pathway up-regulated in rectum of depressed rats and the interventional effect of Xiaoyaosan.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (5), 1518(2015).</li>
<li>Li, X. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiaoyaosan+exerts+anxiolytic-like+effects+by+down-regulating+the+TNF-%CE%B1%2FJAK2-STAT3+pathway+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Xiaoyaosan exerts anxiolytic-like effects by down-regulating the TNF-α/JAK2-STAT3 pathway in the rat hippocampus.</a> Scientific Reports. 7 (1), 353(2017).</li>
<li>Jun-Sheng, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+analysis+of+the+endogenous+metabolites+in+depressed+patients+treated+with+TCM+formula+Xiaoyaosan+using+urinary+%281%29H+NMR-based+metabolomics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Dynamic analysis of the endogenous metabolites in depressed patients treated with TCM formula Xiaoyaosan using urinary (1)H NMR-based metabolomics.</a> Journal of Ethnopharmacology. 158, 1-10 (2014).</li>
<li>Dai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolomics+study+on+the+anti-depression+effect+of+xiaoyaosan+on+rat+model+of+chronic+unpredictable+mild+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Metabolomics study on the anti-depression effect of xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress.</a> Journal of Ethnopharmacology. 128 (2), 482-489 (2010).</li>
<li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant-like+effects+of+the+fractions+of+Xiaoyaosan+on+rat+model+of+chronic+unpredictable+mild+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Antidepressant-like effects of the fractions of Xiaoyaosan on rat model of chronic unpredictable mild stress.</a> Journal of Ethnopharmacology. 137 (1), 236-244 (2011).</li>
<li>Wang, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Costs+and+Benefits+of+Enhanced+Depression+Care+to+Employers%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+General+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The Costs and Benefits of Enhanced Depression Care to Employers.</a> Archives of General Psychiatry. 63 (12), 1345-1353 (2006).</li>
<li>Pirraglia, P. A., Rosen, A. B., Hermann, R. C., Olchanski, N. V., Neumann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost-utility+analysis+studies+of+depression+management%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cost-utility analysis studies of depression management: a systematic review.</a> American Journal of Psychiatry. 161 (12), 2155-2162 (2004).</li>
<li>Wang, S. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiaoyaosan+Decoction+Regulates+Changes+in+Neuropeptide+Y+and+Leptin+Receptor+in+the+Rat+Arcuate+Nucleus+after+Chronic+Immobilization+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Xiaoyaosan Decoction Regulates Changes in Neuropeptide Y and Leptin Receptor in the Rat Arcuate Nucleus after Chronic Immobilization Stress.</a> Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2012 (4), 381278(2012).</li>
<li>Zhu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiao+Yao+San+Improves+Depressive-Like+Behavior+in+Rats+through+Modulation+of+%CE%B2-Arrestin+2-Mediated+Pathways+in+Hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-based+Complementary+and+Alternative%22%5BJournal%5D)">Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus.</a> Evidence-based Complementary and Alternative. 2014, (2014).</li>
<li>Ding, X. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+Normalized+Glial+Fibrillary+Acidic+Protein+Expression+in+the+Hippocampi+in+Antidepressant-Like+Effects+of+Xiaoyaosan+on+Chronically+Stressed+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Involvement of Normalized Glial Fibrillary Acidic Protein Expression in the Hippocampi in Antidepressant-Like Effects of Xiaoyaosan on Chronically Stressed Mice.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1960584(2017).</li>
<li>Ding, X. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+glutamate%2Fglutamine+cycle+and+glutamate+transporter+GLT-1+in+antidepressant-like+effects+of+Xiao+Yao+san+on+chronically+stressed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complementary+%26+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice.</a> BMC Complementary & Alternative Medicine. 17 (1), 326(2017).</li>
<li>Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shuttle-box+deficits+induced+by+chronic+variable+stress%3A+reversal+by+imipramine+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration.</a> Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125(1991).</li>
<li>Duan, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+5-fluorouracil+and+cyclophosphamide+in+depression+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Review+for+Medical+%26+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of 5-fluorouracil and cyclophosphamide in depression rats.</a> European Review for Medical & Pharmacological Sciences. 16 (4), 427-436 (2012).</li>
<li>Cao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+ATP+modulates+depressive-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Foundation+in+China%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived ATP modulates depressive-like behaviors.</a> Science Foundation in China. 19 (1), 56(2013).</li>
<li>Kirshenbaum, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+neuronal+Na%2B%2C+K%2B+-ATPase+activity+in+Atp1a3+heterozygous+mice+increases+susceptibility+to+depression-like+endophenotypes+by+chronic+variable+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Decreased neuronal Na+, K+ -ATPase activity in Atp1a3 heterozygous mice increases susceptibility to depression-like endophenotypes by chronic variable stress.</a> Genes Brain & Behavior. 10 (5), 542-550 (2011).</li>
<li>Liu, X. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+metabonomic+study+using+a+CUMS+rat+model+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Magnetic+Resonance+in+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Urinary metabonomic study using a CUMS rat model of depression.</a> Magnetic Resonance in Chemistry. 50 (3), 187-192 (2012).</li>
<li>Zhu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unpredictable+chronic+mild+stress+induces+anxiety+and+depression-like+behaviors+and+inactivates+AMP-activated+protein+kinase+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Unpredictable chronic mild stress induces anxiety and depression-like behaviors and inactivates AMP-activated protein kinase in mice.</a> Brain Research. 1576, (2014).</li>
<li>Yang, C., Wang, G., Wang, H., Liu, Z., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+alterations+in+rat+hippocampus+following+chronic+unpredictable+mild+stress+and+re-exposure+to+acute+and+chronic+unpredictable+mild+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal alterations in rat hippocampus following chronic unpredictable mild stress and re-exposure to acute and chronic unpredictable mild stress.</a> Behavioural Brain Research. 205 (2), 518-524 (2009).</li>
<li>Ding, X. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiao+Yao+San+Improves+Depressive-Like+Behaviors+in+Rats+with+Chronic+Immobilization+Stress+through+Modulation+of+Locus+Coeruleus-Norepinephrine+System%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative%22%5BJournal%5D)">Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914(2014).</li>
<li>Wu, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant-Like+Effects+of+Fractions+Prepared+from+Danzhi-Xiaoyao-San+Decoction+in+Rats+with+Chronic+Unpredictable+Mild+Stress%3A+Effects+on+Hypothalamic-Pituitary-Adrenal+Axis%2C+Arginine+Vasopressin%2C+and+Neurotransmitters%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Antidepressant-Like Effects of Fractions Prepared from Danzhi-Xiaoyao-San Decoction in Rats with Chronic Unpredictable Mild Stress: Effects on Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis, Arginine Vasopressin, and Neurotransmitters.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016 (3), 1-11 (2016).</li>
<li>Stanford, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Open+Field+Test%3A+reinventing+the+wheel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The Open Field Test: reinventing the wheel.</a> Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134(2007).</li>
<li>Zeldetz, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+Method+for+Inducing+a+Depression-Like+Behavior+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (132), e57137(2018).</li>
<li>Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+mild+stress+%28CMS%29+revisited%3A+consistency+and+behavioural-neurobiological+concordance+in+the+effects+of+CMS%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychobiology%22%5BJournal%5D)">Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS.</a> Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).</li>
<li>Wood, G. E., Norris, E. H., Waters, E., Stoldt, J. T., Mcewen, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+immobilization+stress+alters+aspects+of+emotionality+and+associative+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Chronic immobilization stress alters aspects of emotionality and associative learning in the rat.</a> Behavioral Neuroscience. 122 (2), 282-292 (2008).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Model CUMS zastosowany w tym badaniu jest powszechną metodą ustalania modelu skazy stresowej depresji24. Większość objawów CUMS można przywrócić za pomocą leków przeciwdepresyjnych, co wskazuje, że ta metoda modelowa ma silną trafność predykcyjną25. Dzięki tej metodzie zwierzęta otrzymują przewlekłe, nieprzewidywalne, stresujące bodźce i rozwijają podstawowe objawy poważnej depresji, w tym zmniejszone warunkowanie preferencji miejsca, anhedonię i upośledzone zachowania podo...

MDD jest przewlekłą, bardzo nawracającą chorobą psychiczną, która objawia się uporczywym obniżonym nastrojem, depresją, niską samooceną, upośledzeniem umysłowym, utratą zainteresowań, zaburzeniami snu, głęboko pesymistycznymi lub samobójczymi tendencjami; wyrządziła wielką szkodę ludzkiemu zdrowiu i stabilizacji społecznej1. Stała się jedną z głównych przyczyn niepełnosprawności na świecie i może być jedną z głównych przyczyn obciążenia chorobami do 2030 roku według Światowej Organizacji Zdrowia2,3. Obecnie leki przeciwdepresyjne i psychoterapia są uważane za leki pierwszego wyboru w leczeniu MDD. Niemniej jednak, ogromna liczba pacjentów, u których zdiagnozowano MDD, nie reaguje na ciągłe leki lub terapię i są wymienieni jako cierpiący na depresję oporną na leczenie4.
Xiaoyaosan to klasyczny chiński złożony class<sup="xref">5, który jest powszechnie stosowany w leczeniu chorób psychicznych od tysięcy lat od czasów dynastii Song w Chinach6. Składa się z 8 chińskich ziół: Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Radix Angelicae Sinensis, Poria, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens i Herba Menthae. Xiaoyaosan zawiera wiele składników, ma wiele celów i wykorzystuje wiele ścieżek7. Powszechnie wykazano, że Xiaoyaosan jest bezpieczną i skuteczną formułą leczenia różnych chorób związanych z zaburzeniami psychicznymi, a nowoczesne badania koncentrowały się również na mechanizmie przeciwdepresyjnym tego związku8,9,10. Patogeneza MDD jest jeszcze niejasna, mimo że istnieje wiele hipotez, w tym hipoteza monoaminowa, hipoteza receptora neuroprzekaźnika, hipoteza zmiany funkcji neuroendokrynnej, hipoteza nieprawidłowości układu odpornościowego itp. Kilka badań wykazało, że przeciwdepresyjne działanie Xiaoyaosan ma związek z materialnymi podstawami powyższych hipotez11,12, a jego działanie terapeutyczne przejawia się jako poprawa zachowań depresyjnych13.
Ponadto, wraz z rozpowszechnieniem depresji, nowoczesne społeczeństwo cierpi z powodu redukcji siły roboczej, wcześniejszych emerytur i kosztownych metod leczenia14. Kosztowne leczenie wymaga ścisłej opieki medycznej, co oznacza szereg zwiększonych kosztów medycznych i precyzyjne przewidywanie precyzyjnych działań niepożądanych, a także skutków ubocznych15. Chińskie zioło Xiaoyaosan ma dostępne składniki, unikalne działanie i niewielkie skutki uboczne. Jego zastosowanie może odegrać rolę w zmniejszeniu obciążenia związanego z nowoczesnym leczeniem. Dlatego, aby zapewnić bardziej teoretyczne podstawy do stosowania Xiaoyaosan, należy zaproponować alternatywną terapię kliniczną w leczeniu depresji, której częstość występowania wzrasta z roku na rok, a jednocześnie powinna poprawić zdrowie ludzi. W artykule opisano protokół obejmujący stosowanie Xiaoyaosan w celu zapobiegania zachowaniom podobnym do depresji poprzez ustanowienie depresyjnego modelu myszy. Test otwartego pola i test preferencji sacharozy zostały wykorzystane do zweryfikowania działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan.

<table><tbody><tr><td>Chinese Herbs</td><td>Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company</td> <td>-</td> <td>Leki zostały wyekstrahowane przez pomieszczenie przygotowania medycyny chińskiej w Szpitalu Przyjaźni Chińsko-Japońskiej, do przygotowania zawiesiny Xiaoyaosan użyto wody destylowanej, a dawka wynosiła 0,25 g / kg / d.</td></tr><tr><td>Fluoksetyna</td><td>PATHEON FRANCJA</td><td>5545A</td><td>Do przygotowania zawiesiny fluoksetyny użyto wody destylowanej, a dawka 2,6 mg/kg/d.</td></tr><tr><td>Myszy C57BL/6j</td><td>Beijing Vital River firmy Charles River</td><td>Company SCXK 2011-0004</td><td>60 zdrowych samców myszy C57BL/6J w wieku 12 tygodni zakupiono w Beijing Vital River należącej do Charles River Company.</td></tr><tr><td>Klatka dla myszy</td><td>Stylizacja Biotechnologia</td><td>34853016</td><td>318 razy; 202 razy; Woda destylowana 135 mm</td></tr> <tr><td></td><td>-</td><td></td> <td>Woda była używana w całym eksperymencie.</td></tr><tr><td>Sacharoza</td><td></td> <td>Sigma-Sacharoza została użyta w teście preferencji sacharozy w celu przygotowania 1% roztworu sacharozy.</td><td></td></tr><tr><td>Waga elektroniczna ACS-2EAS</td><td>Pekin Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd.</td><td>-</td><td>Używano go do ważenia avoirdupois myszy na różnych etapach.</td></tr><tr><td>Drewniane czarne pudełko bez połysku</td> <td>-</td><td></td> <td>(40 cm x 40 cm x 15 cm), podzielone na 25 równych kwadratów niebieskimi liniami.</td></tr><tr><td>WV-CP470 Kamera</td><td>Panasonic, Japonia-Kamera</td><td></td> <td>cyfrowa HD, która została użyta do nagrania całego procesu testu w terenie otwartym.</td></tr><tr><td>Oprogramowanie Etho Vision 3.0</td><td>Noldus, Wageningen, Holandia</td> <td>-</td> <td>System śledzenia wideo, który został wykorzystany do oceny funkcji lokomotorycznych i emocjonalności myszy.</td></tr><tr><td>Oprogramowanie SPSS Statistics 21.0 Do</td> <td>analizy danych wykorzystano oprogramowanie IBM-SPSS 21.0, do danych ogólnych w oparciu o test normalności i test jednorodności dla wariancji zastosowano jednoczynnikową ANOVA lub test nieparametryczny, a do porównań między grupami zastosowano metodę LSD.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oprogramowanie Graphpad Prism 6.0</td><td>Oprogramowanie Graphpad Software,Inc.USA-Graphpad</td><td></td> <td>Prism 6.0 zostało użyte do rysowania wykresów statystycznych.</td></tr></tbody></table>

ocena działania przeciwdepresyjnego xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy

Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice

Oprócz standardowego stosowania leków przeciwdepresyjnych i psychoterapii, stosowanie tradycyjnej medycyny chińskiej doprowadziło do ogólnej poprawy stanu pacjentów z dużymi zaburzeniami depresyjnymi (MDD). Dlatego celem tego badania było ustalenie mysiego modelu depresyjnego, obserwacja zmian w zachowaniu związanych z przewlekłym nieprzewidywalnym łagodnym stresem (CUMS), a następnie ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan. Myszy zostały losowo podzielone na cztery grupy: grupę kontrolną, grupę modelową, grupę leczoną Xiaoyaosan i grupę leczoną fluoksetyną. Wszystkie myszy były indywidualnie trzymane w klatkach, a depresję wywołano u myszy poprzez wystawienie ich na kilka zaprojektowanych manipulacji CUMS przez 21 dni, jak opisano w protokole. Myszy w grupie kontrolnej i grupie modelowej otrzymały 0,5 ml wody destylowanej, podczas gdy myszy w grupach leczonych otrzymywały Xiaoyaosan (0,25 g / kg / dzień) lub fluoksetynę (2,6 mg / kg / dzień). Leki stosowane w badaniu podawano dożołądkowo codziennie przez całe trzy tygodnie. Aby oszacować zachowania podobne do depresyjnych, zarejestrowano szereg parametrów, w tym stan sierści, masę ciała, wynik testu w otwartym polu i wynik testu preferencji sacharozy. Analiza danych wykazała, że zachowania myszy modelowych uległy znacznej zmianie w porównaniu z zachowaniami myszy w grupie kontrolnej, które uległy poprawie dzięki leczeniu Xiaoyaosan i fluoksetyną. Obecne odkrycia wykazały przeciwdepresyjne działanie Xiaoyaosan na zachowania myszy wywołanych CUMS i ujawniły, że związki z recepty Xiaoyaosan mogą być warte zachodu w leczeniu depresji, biorąc pod uwagę ich korzystny wpływ na zachowania podobne do depresji.

Należy zauważyć, że wyniki zostały wcześniej opublikowane przez dr Xiu-Fang Ding, i wsp.18
Dane przedstawiono jako średnia ± błąd standardowy średniej (SEM). W zależności od wyników testu normalności i testu jednorodności wariancji, do analizy danych ogólnych zastosowano jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA) lub test nieparametryczny. Do porównań między grupami wykorzystano test LSD. Ponadto...

Tutaj prezentujemy protokół do stworzenia modelu depresyjnego myszy, obserwacji zmian w zachowaniu związanych z przewlekłym nieprzewidywalnym łagodnym stresem (CUMS) i oceny działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan.

Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy

In addition to the standardized use of antidepressant medications and psychotherapy, the usage of traditional Chinese medicine has lead to an overall ...

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu depresji, profilaktyki i leczenia za pomocą tradycyjnej medycyny chińskiej, takiej jak Xiaoyaosan, szeroko stosowana formuła w chorobach psychicznych od tysięcy lat w Chinach. Główną zaletą tej techniki jest zapewnienie eksperymentalnego wsparcia dla dostępności Xiaoyaosan w profilaktyce i leczeniu depresji. Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku badań przedklinicznych nad leczeniem depresji, ponieważ zapewnia ona ustandaryzowany protokół wykrywania efektu przeciwdepresyjnego przy użyciu tradycyjnej medycyny chińskiej.Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały trudności, ponieważ proces modelowania jest bardzo skomplikowany, a ważne parametry pomiaru zachowań depresyjnych nie są łatwe do opanowania. Aby wywołać depresję, codziennie wystawiaj myszy na działanie dowolnych 2 z następujących 7 stresorów przez 21 kolejnych dni. Uwaga: podawaj lek myszom w dwóch grupach leczenia codziennie przed modelowaniem i podawaj 0,5 mililitra wody destylowanej myszom w grupie kontrolnej i modelowej.Narażaj myszy na brak pożywienia, opróżniając paszę z każdej klatki. Lub pozbawienie wody poprzez wyjęcie butelki z wodą na 24 godziny. Wystaw myszy na stres związany z powściągliwością, gdzie mysz jest unieruchomiona w małej plastikowej wannie przez 3 godziny.Lub pusta klatka z usuniętą wyściółką. Inną opcją jest wystawienie myszy na działanie mokrych i zabrudzonych klatek, wlewając wodę do każdej klatki i utrzymując je w stanie mokrym przez 24 godziny. Wystaw myszy na zatłoczone klatki, w których pięć myszy umieszcza się w jednej klatce na 25 godzin.W przypadku ostatniej opcji wystawij myszy na lodowate pływanie, zmuszając każdą mysz do pływania w przezroczystym szklanym akwarium z lodowatą wodą przez pięć minut. Na koniec zapisuj stan sierści i masę ciała co tydzień do końca modelowania w 21 dniu i oblicz całkowity wynik stanu sierści. W ciągu pierwszych dwóch dni testu preferencji sacharozy trzymaj myszy pojedynczo w dwóch butelkach wypełnionych wodą z kranu.Przez następne dwa dni podawaj myszom dwie butelki wypełnione 1% roztworem sacharozy. Ostatniego dnia podawaj myszom dwie butelki na 24 godziny, jedną z wodą z kranu, a drugą z 1% roztworem sacharozy. Aby wyeliminować uboczne preferencje myszy w zachowaniach związanych z piciem, zamień pozycję dwóch butelek po 12 godzinach.Zapisz objętość zarówno spożytego roztworu sacharozy, jak i wody z kranu. Na koniec oblicz preferencję sacharozy. Zacznij od podzielenia podłogi czterostronnego drewnianego czarnego pudełka bez połysku na 25 równych kwadratów za pomocą niebieskich linii.Wyczyść pudełko z otwartym polem 5% alkoholem przed dostępem każdej myszy. Następnie umieść mysz na środku otwartego pola. Zawieś kamerę cyfrową o wysokiej rozdzielczości około 200 centymetrów tuż nad polem i nagrywaj zachowanie każdej myszy przez 5 minut.Na koniec oceń i przeanalizuj wideo behawioralne myszy za pomocą oprogramowania systemu śledzenia wideo i zarejestruj dane dotyczące całkowitego dystansu biegu i liczby wejść do strefy środkowej. Stan sierści myszy uległ znacznej poprawie po ciągłym leczeniu Xiaoyaosan lub Fluoksetyną w porównaniu z grupą modelową. Znaczna redukcja masy ciała objawiła się już w trzecim tygodniu.Na początku badania myszy we wszystkich grupach miały podobne preferencje dotyczące sacharozy. Jednak znaczny spadek preferencji sacharozy zaobserwowano po 3 tygodniach procedury stresu w grupie modelowej. Co więcej, wszystkie myszy wykazywały podobny stan zachowania przed ekspozycją na stres na początku badania.Jednak po ekspozycji na stres przez 3 tygodnie całkowity dystans przebyty w ciągu 5 minut był znacznie niższy w grupie modelowej niż w grupie kontrolnej. W porównaniu z grupą kontrolną istotnie zmniejszyła się również liczba wejść do strefy centralnej grupy modelowej. Próbując wykonać tę procedurę, ważne jest, aby pamiętać o przeprowadzeniu tego testu zachowania, a także o podaniu dwóch leków na 1 do 2 godzin przed codziennym modelowaniem w celu potwierdzenia efektów przez sam lek.Zgodnie z tą procedurą można wykonać inne metody, takie jak test wymuszonego pływania, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania, takie jak czy Xiaoyaosan może poprawić desperackie zachowanie myszy z depresją w teście wymuszonego pływania? Po jej opracowaniu, technika ta utorowała drogę naukowcom w badaniu wpływu i mechanizmu leżącego u podstaw medycyny chińskiej w dziedzinie zapobiegania i leczenia depresji.

evaluating-anti-depression-effect-xiaoyaosan-on-chronically-stressed

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Ten film pokazuje metodę wywoływania przewlekłego stresu u myszy poprzez wielokrotne unieruchomienie, prowadzące do uwalniania kortykosteronu i zmniejszonej aktywności receptora glutaminianu w neuronach, co skutkuje zachowaniem podobnym do depresji.

Wywoływanie zachowań podobnych do depresji u myszy poprzez stres związany z unieruchomieniem

Źródło: Yan, Z.,  i wsp. Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy. J. Vis. Exp. (2019). Film przedstawia proces tworzenia mysiego modelu przewlekłej depresji wywołanej stresem i oceny zachowań depresyjnych. Przewlekłe stosowanie różnych stresorów wyzwala uwalnianie kortykosteronu, co prowadzi do nadmiernego pobudzenia neuronów i ostatecznie śmierci neuronów, co skutkuje objawami podobnymi do depresji u myszy.

Indukcja i ocena depresji u myszy poprzez przewlekłą ekspozycję na stres

Tutaj opisano metody rozwoju mysiego modelu podchronicznego i łagodnego stresu związanego z porażką społeczną i wykorzystano je do zbadania patogennych cech depresji, w tym objawów podobnych do hiperfagii i polidypsji po wzroście masy ciała.

Mysi model podchronicznego i łagodnego stresu porażki społecznej w celu zrozumienia deficytów behawioralnych i fizjologicznych wywołanych stresem

Protokół nieprzewidywalnego chronicznego łagodnego stresu (UCMS) jest sprawdzoną metodą badania zmian behawioralnych i fizjologicznych związanych z przewlekłym stresem i objawami depresyjnymi. Osiem tygodni od nałożenia protokołu UCMS wywołuje zmiany w zachowaniu i złe wyniki zdrowotne u gryzoni obu płci.

Nieprzewidywalny protokół przewlekłego łagodnego stresu w celu wywołania objawów depresyjnych, zmian w zachowaniu i negatywnych skutków zdrowotnych u gryzoni

Tutaj prezentujemy nieprzewidywalny protokół chronicznego łagodnego stresu u myszy. Protokół ten indukuje długoterminowy fenotyp podobny do depresji i umożliwia ocenę skuteczności przypuszczalnych leków przeciwdepresyjnych w odwracaniu behawioralnych i neuromolekularnych deficytów depresyjnych.

Nieprzewidywalny protokół przewlekłego łagodnego stresu do wywoływania anhedonii u myszy

Ten artykuł dostarcza uproszczony i ustandaryzowany protokół indukcji zachowań depresyjnych u myszy chronicznie unieruchomionych za pomocą ogranicznika. Ponadto wyjaśniono zachowanie i techniki fizjologiczne w celu weryfikacji indukcji depresji.

Protokół przewlekłego stresu unieruchamiającego w celu wywołania zachowań podobnych do depresji u myszy

Zadanie bariery labiryntu Y to test zachowania, który bada motywację do wydatkowania wysiłku na nagrodę. W tym miejscu omawiamy testowanie wielu dobrze zweryfikowanych przewlekłych stresorów, w tym przewlekłego kortykosteronu i stresu porażki społecznej z tym zachowaniem, a także nowego przewlekłego niedyskryminującego stresu porażki społecznej (CNSDS), który jest skuteczny u kobiet.

Przewlekły stres zmienia zachowania związane z wysiłkiem w zadaniu bariery Y-Maze u myszy

Mysi model chronicznej rozpaczy (CDM) depresji składa się z powtarzających się wymuszonych sesji pływania i kolejnej opóźnionej fazy pływania jako odczytu. Stanowi odpowiedni model do indukcji przewlekłego stanu podobnego do depresji stabilnego przez co najmniej 4 tygodnie, z możliwością zmiany w celu oceny podprzewlekłych i ostrych interwencji terapeutycznych.

Zwierzęce modele depresji - model chronicznej rozpaczy (CDM)

Ten protokół przedstawia model chronicznego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) dla depresji oparty na mongolskiej teorii medycznej, wraz z metodami walidacji testów behawioralnych.

Przewlekły nieprzewidywalny łagodny stres u szczurów na podstawie medycyny mongolskiej

Poprzez integrację czterech codziennych stresorów społecznych, niniejsze badanie opisuje model wielokrotnego zintegrowanego stresu społecznego (MISS) dla zaburzeń psychicznych u samic myszy C57BL/6J. Po dziesięciu dniach powtarzającej się ekspozycji na MISS myszy rozwinęły fenotypy podobne do depresji i lęku, zapewniając w ten sposób naturalny, oparty na etiologii model zwierzęcy do badania zaburzeń psychicznych u kobiet.

Wieloraki zintegrowany model stresu społecznego dla zaburzeń psychicznych u samic myszy C57BL/6J

Poznaj protokół oceny działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na myszach z przewlekłym stresem CUMS. Metoda obejmuje testy behawioralne i pomiary fizjologiczne po 21 dniach modelowania.

Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy

Przeglądaj więcej filmów