Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu depresji, profilaktyki i leczenia za pomocą tradycyjnej medycyny chińskiej, takiej jak Xiaoyaosan, szeroko stosowana formuła w chorobach psychicznych od tysięcy lat w Chinach. Główną zaletą tej techniki jest zapewnienie eksperymentalnego wsparcia dla dostępności Xiaoyaosan w profilaktyce i leczeniu depresji. Implikacje tej techniki rozciągają się w kierunku badań przedklinicznych nad leczeniem depresji, ponieważ zapewnia ona ustandaryzowany protokół wykrywania efektu przeciwdepresyjnego przy użyciu tradycyjnej medycyny chińskiej.

Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały trudności, ponieważ proces modelowania jest bardzo skomplikowany, a ważne parametry pomiaru zachowań depresyjnych nie są łatwe do opanowania. Aby wywołać depresję, codziennie wystawiaj myszy na działanie dowolnych 2 z następujących 7 stresorów przez 21 kolejnych dni. Uwaga: podawaj lek myszom w dwóch grupach leczenia codziennie przed modelowaniem i podawaj 0,5 mililitra wody destylowanej myszom w grupie kontrolnej i modelowej.

Narażaj myszy na brak pożywienia, opróżniając paszę z każdej klatki. Lub pozbawienie wody poprzez wyjęcie butelki z wodą na 24 godziny. Wystaw myszy na stres związany z powściągliwością, gdzie mysz jest unieruchomiona w małej plastikowej wannie przez 3 godziny.

Lub pusta klatka z usuniętą wyściółką. Inną opcją jest wystawienie myszy na działanie mokrych i zabrudzonych klatek, wlewając wodę do każdej klatki i utrzymując je w stanie mokrym przez 24 godziny. Wystaw myszy na zatłoczone klatki, w których pięć myszy umieszcza się w jednej klatce na 25 godzin.

W przypadku ostatniej opcji wystawij myszy na lodowate pływanie, zmuszając każdą mysz do pływania w przezroczystym szklanym akwarium z lodowatą wodą przez pięć minut. Na koniec zapisuj stan sierści i masę ciała co tydzień do końca modelowania w 21 dniu i oblicz całkowity wynik stanu sierści. W ciągu pierwszych dwóch dni testu preferencji sacharozy trzymaj myszy pojedynczo w dwóch butelkach wypełnionych wodą z kranu.

Przez następne dwa dni podawaj myszom dwie butelki wypełnione 1% roztworem sacharozy. Ostatniego dnia podawaj myszom dwie butelki na 24 godziny, jedną z wodą z kranu, a drugą z 1% roztworem sacharozy. Aby wyeliminować uboczne preferencje myszy w zachowaniach związanych z piciem, zamień pozycję dwóch butelek po 12 godzinach.

Zapisz objętość zarówno spożytego roztworu sacharozy, jak i wody z kranu. Na koniec oblicz preferencję sacharozy. Zacznij od podzielenia podłogi czterostronnego drewnianego czarnego pudełka bez połysku na 25 równych kwadratów za pomocą niebieskich linii.

Wyczyść pudełko z otwartym polem 5% alkoholem przed dostępem każdej myszy. Następnie umieść mysz na środku otwartego pola. Zawieś kamerę cyfrową o wysokiej rozdzielczości około 200 centymetrów tuż nad polem i nagrywaj zachowanie każdej myszy przez 5 minut.

Na koniec oceń i przeanalizuj wideo behawioralne myszy za pomocą oprogramowania systemu śledzenia wideo i zarejestruj dane dotyczące całkowitego dystansu biegu i liczby wejść do strefy środkowej. Stan sierści myszy uległ znacznej poprawie po ciągłym leczeniu Xiaoyaosan lub Fluoksetyną w porównaniu z grupą modelową. Znaczna redukcja masy ciała objawiła się już w trzecim tygodniu.

Na początku badania myszy we wszystkich grupach miały podobne preferencje dotyczące sacharozy. Jednak znaczny spadek preferencji sacharozy zaobserwowano po 3 tygodniach procedury stresu w grupie modelowej. Co więcej, wszystkie myszy wykazywały podobny stan zachowania przed ekspozycją na stres na początku badania.

Jednak po ekspozycji na stres przez 3 tygodnie całkowity dystans przebyty w ciągu 5 minut był znacznie niższy w grupie modelowej niż w grupie kontrolnej. W porównaniu z grupą kontrolną istotnie zmniejszyła się również liczba wejść do strefy centralnej grupy modelowej. Próbując wykonać tę procedurę, ważne jest, aby pamiętać o przeprowadzeniu tego testu zachowania, a także o podaniu dwóch leków na 1 do 2 godzin przed codziennym modelowaniem w celu potwierdzenia efektów przez sam lek.

Zgodnie z tą procedurą można wykonać inne metody, takie jak test wymuszonego pływania, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania, takie jak czy Xiaoyaosan może poprawić desperackie zachowanie myszy z depresją w teście wymuszonego pływania? Po jej opracowaniu, technika ta utorowała drogę naukowcom w badaniu wpływu i mechanizmu leżącego u podstaw medycyny chińskiej w dziedzinie zapobiegania i leczenia depresji.